目的 在锂-毛果芸香碱(Lithium-Pilocarpine)致痫大鼠模型中,检测炎症小体的激活,观察小胶质细胞的活化和异常新生神经元的形成,探索炎症小体激活小胶质细胞促进异常新生神经元形成在癫痫发生发展中的作用机制.方法 通过腹腔注射氯化锂和毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型,将大鼠分为Sham组(生理盐水对照组,n=12)、Pilo组(锂-毛果芸香碱致痫组,n=20)和Pilo+MCC950组[锂-毛果芸香碱致痫后给予核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)抑制剂组,n=20],在急性期观察记录大鼠癫痫的行为学表现,通过病理切片确认脑组织损伤情况和细胞激活情况,借助分子检测确认炎症小体和其他分子的表达情况.采用体外细胞模型挽救实验验证炎症小体的作用.结果 Pilo组大鼠有6只出现V级,5只出现Ⅳ级,2只出现Ⅲ级的癫痫发作情况.相较之下,Pilo+MCC950组大鼠则没有出现Ⅴ级,6只出现Ⅳ级,8只出现Ⅲ级,2只出现Ⅱ级的癫痫发作情况.Pilo组强直痉挛发作的潜伏期短于Pilo+MCC950组,Ⅲ级以上癫痫发作的次数和持续时间大于Pilo+MCC950组.Pilo组NLRP3和pro-caspase-1的含量、4种促炎细胞因子的含量以及脑源性神经营养因子(BNDF)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)均高于Pilo+MCC950组.免疫荧光检测显示,Pilo组小胶质细胞大量活化,出现大量异常新生神经元.体外细胞实验后,ELISA结果验证了炎症小体的作用.结论 在锂-毛果芸香碱致痫大鼠模型中,炎症小体NLRP3接受外界炎症刺激而活化聚集,进而大量产生多种促炎细胞因子,使得小胶质细胞活化,分泌BDNF并激活ERK信号通路,调控异常新生神经元的形成和聚集等生物学行为,参与癫痫的发生发展.

目的 采用网络药理学、分子对接、代谢组学及实验验证探讨葛根汤对缺氧状态下癫痫发作的影响.方法 运用网络药理学筛选葛根汤、癫痫、脑缺氧的核心靶点,分子对接验证配体与受体之间的关联度,再采用动物实验验证.用氯化锂-毛果芸香碱法建立癫痫模型,结扎单侧颈总动脉并放置在氧气含量为 10%～15%的密闭箱中复制缺氧模型.60 只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药苯妥英钠(26 g·kg-1)组及葛根汤高、中、低(10.62、5.31、2.655 g·kg-1)剂量组.治疗结束统计各组大鼠癫痫发作次数,评估大鼠神经功能恢复及癫痫发作情况;HE染色观测各组大鼠海马CA1 区形态学改变;免疫组化法检测白细胞介素 6(IL-6)和白细胞介素 17(IL-17)的表达;靶向代谢组学检测分析大脑神经递质的改变.结果 网络药理学共获得葛根汤有效成分128 个,靶点 228 个;使用STRING构建药物-疾病蛋白互作(PPI)网络图,结果显示IL-6、STAT3、AKT1 为核心靶标;GO富集在生物过程(Biological Process,BP)涉及对外来刺激的反应、氧水平、缺氧和活性氧的代谢过程的反应等.细胞组分(Cell Component,CC)方面主要对细胞膜、蛋白激酶复合物等有影响;分子功能方面(Molecular Function,MF)对泛素蛋白和泛素样蛋白连接酶结合等影响较大.KEGG分析显示葛根汤治疗脑部缺氧诱发癫痫的关键通路主要涉及脂质与动脉粥样信号通路、IL-17 信号通路、Th-17 信号通路等.实验验证结果发现,葛根汤治疗组大鼠的癫痫发作次数较模型组明显下降(P＜0.01),大鼠海马区细胞形态结构均有不同程度改善,细胞空泡现象减少.各治疗组IL-17A、IL-6 表达较模型组降低,其中葛根汤中剂量组的差异具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).脑部代谢组学检测,与模型组比较,葛根汤高剂量组单胺类神经递质 5-羟基色氨酸(5-HTP)、去甲肾上腺素(NE)升高,色氨酸代谢产物犬尿氨酸(Kyn)降低.结论 葛根汤可以降低癫痫大鼠缺氧状态下炎症因子IL-6、IL-17A水平,通过改善缺氧诱导的炎性反应,减少癫痫发作;升高单胺类神经递质 5-HTP、NE含量,抑制癫痫发作;降低色氨酸代谢产物Kyn含量,减轻色氨酸代谢通路毒素,减少癫痫发作.

目的：:利用扫频光源眼前节光学相干断层扫描（SS-ASOCT）研究硝酸毛果芸香碱滴眼液刺激睫状肌收缩前后小梁网和Schlemm管的形态变化。方法：:横断面研究。连续性纳入2022年4月至2023年6月在温州医科大学附属眼视光医院招募的54名健康受检者，以等效球镜度数（SE）为-0.75~+0.50 D和SE≤-6.00 D为界分为正视组与高度近视组。在应用硝酸毛果芸香碱滴眼液刺激调节前后，利用SS-ASOCT拍摄受检者右眼颞侧小梁网、睫状肌及Schlemm管的图像，通过自行编写的软件分析获取睫状肌最大厚度及睫状肌前部长度、小梁网长度和厚度、Schlemm管面积及直径等参数。采用配对 t检验、卡方检验、独立 t检验、Pearson相关分析对相关数据进行分析。 结果：:在调节前后，2组受检者均发生睫状肌最大厚度增加、睫状肌前部长度减小、小梁网长度和宽度增加及Schlemm管面积和直径增大的改变（均 P<0.05）。正视组和高度近视组的睫状肌最大厚度变化量（ t=4.85， P<0.001）、小梁网长度变化量（ t=5.08， P<0.001）、小梁网宽度变化量（ t=2.72， P=0.009）、Schlemm管面积变化量（ t=3.86， P<0.001）及Schlemm管直径变化量（ t=2.02， P=0.049）比较差异均有统计学意义。小梁网长度和Schlemm管面积与睫状肌最大厚度在正视组中均存在相关性（ r=0.48， P=0.011； r=0.54， P=0.004），但在高度近视眼中均无相关性。 结论：:硝酸毛果芸香碱滴眼液诱导的调节过程中，正视眼和高度近视眼均发生睫状肌收缩、小梁网和Schlemm管扩张的形态改变。睫状肌的收缩与小梁网和Schlemm管形态改变的相关性仅在正视眼中存在差异有统计学意义。

目的:研究不同剂量甘草酸苷对幼年癫痫持续状态(SE)大鼠模型海马组织的保护作用。方法:出生18~21 d雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠采用腹腔注射氯化锂和毛果芸香碱制作SE大鼠模型，按照随机数字表法分为5组：对照组、SE组、SE+低剂量甘草酸苷组、SE+中剂量甘草酸苷组和SE+高剂量甘草酸苷组，腹腔内注入不同剂量的甘草酸苷(20 mg/kg、40 mg/kg和60 mg/kg)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SE大鼠模型血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平；定量实时PCR(qRT-PCR)检测SE大鼠模型海马组织中TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平；蛋白印迹法检测海马组织中Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达水平；苏木精-伊红(HE)染色和尼氏染色观察神经元损伤情况；末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法检测神经元的凋亡情况；透射电子显微镜观察线粒体的损伤情况。采用单因素 ANOVA法进行各组之间均数检验，然后采用 Tukey法进行两两比较。 结果:与对照组比较，SE大鼠模型血清中TNF-α[(369.69±58.07) ng/L比(75.46±14.64) ng/L]、IL-1β[(242.27±25.23) ng/L比(45.29±5.90) ng/L]和IL-6[(288.15±24.60) ng/L比(46.59±8.80) ng/L均显著上调，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与SE组比较，低、中、高剂量甘草酸苷均可有效减少SE发作后血清中TNF-α[(216.67±8.31) ng/L、(158.81±5.03)ng/L、(113.69±12.54) ng/L比(369.69±58.07) ng/L]、IL-1β[(131.21±5.50) ng/L、(86.60±7.79) ng/L、(65.06±4.39) ng/L比(242.27±25.23) ng/L]和IL-6[(150.24±9.48) ng/L、(101.70±5.85) ng/L、(91.60±2.81) ng/L比(288.15±24.60) ng/L]的释放水平(均 P<0.05)。SE造成大鼠模型海马组织神经元损伤、丢失、凋亡和线粒体损伤，甘草酸苷可以改善海马组织中神经元损伤、凋亡和线粒体的损伤。与对照组比较，SE组海马组织中Bax(0.57±0.01比0.14±0.01)和Caspase-3(0.54±0.00比0.11±0.01)水平均显著升高，Bcl-2表达水平(0.27±0.01比0.57±0.02)下降，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与SE组比较，低、中、高剂量甘草酸苷均可下调Bax(0.51±0.02、0.45±0.03、0.40±0.02比0.57±0.01)和Caspase-3(0.47±0.02、0.42±0.02、0.37±0.01比0.54±0.00)的表达水平，上调Bcl-2(0.41±0.02、0.45±0.02、0.51±0.01比0.27±0.01)的表达水平(均 P<0.05)。 结论:甘草酸苷可以有效保护幼年SE大鼠模型的海马组织。

目的:探讨来氟米特对干燥综合征模型NOD鼠唾液腺分泌功能减退的治疗作用。方法:将NOD鼠随机分配为4组：预防用药组、预防对照组、治疗用药组、治疗对照组；检测毛果芸香碱刺激后唾液流率变化；苏木精和伊红染色后比较平均浸润灶数目及面积的变化；流式细胞术检测颌下腺、脾脏组织中CD3 ＋T、CD4 ＋T、CD8 ＋T、CD44 ＋CD62L －CD4 ＋T、CD19 ＋B、CD138 ＋B细胞水平的变化；CBA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-17A、IL-6水平变化。 结果:预防用药及治疗用药组唾液流率( t＝－5.81， P<0.001； t＝－3.61， P<0.05)、浸润灶平均数目( t＝3.95， P<0.01； t＝4.94， P<0.001)、浸润灶平均面积( t＝3.18， P<0.05； t＝2.35， P<0.05)均具有明显改善。颌下腺组织中CD3 ＋CD4 ＋T( t＝2.39， P<0.05； t＝3.82， P<0.01)、CD44 ＋CD62L －CD4 ＋T( t＝3.53， P<0.05； t＝3.36， P<0.05)细胞明显下调。脾组织中CD3 ＋T( t＝6.08， P<0.001； t＝2.76， P<0.05)、CD3 ＋CD4 ＋T( t＝3.73， P<0.05； t＝2.39， P<0.05)、CD19 ＋B( t＝5.88， P<0.001； t＝4.23， P<0.01) 、CD138 ＋B( t＝4.30， P<0.001； t＝4.46， P<0.01)细胞也均明显下降。此外，用药组小鼠血清IL-17A水平均降低( t＝4.15， P<0.01； t＝3.36， P<0.01)，预防用药组TNF-α水平下降( t＝4.56， P<0.001)，但IL-6水平变化无统计学意义。 结论:本研究提示来氟米特可预防、改善NOD鼠唾液腺功能减退及抑制体内免疫活化，为评估来氟米特对干燥综合征的治疗作用提供了理论依据。

目的 探究胞磷胆碱钠对大鼠发育期惊厥性脑损伤的保护作用及其机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,每组10只,用腹腔注射氯化锂+氢溴酸东莨菪碱+毛果芸香碱的方法建立大鼠发育期惊厥模型.造模成功后实验组大鼠腹腔注射胞磷胆碱钠(500 mg·kg-1),每日1次,连续给药1周.对照组和模型组在相同时间点腹腔注射等量0.9％NaCl.用Griess法检测血清中一氧化氮(NO)浓度,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脑组织中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量,用生化法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测脑组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测大鼠脑组织中G蛋白偶联受体39抗体(GPR39)、蛋白激酶B(AKT)和细胞外信号调节激酶(ERK)的蛋白水平.结果 对照组、模型组和实验组大鼠脑组织IL-6含量分别为(37.16±6.34)、(119.31±19.26)和(74.52±12.37)pg·mL-1,IL-1β 含量分别为(7.46±1.25)、(42.73±8.41)和(24.18±4.62)pg·mL-1,SOD 活性分别为(384.51±34.72)、(229.16±27.42)和(218.47±33.59)U·gp-1,MDA 含量分别为(1.06±0.15)、(1.82±0.21)和(1.24±0.17)U·gp-1,血清 NO 含量分别为(13.62±2.06)、(29.34±5.37)和(16.55±3.15)μmol·L-1,iNOS mRNA相对表达水平分别为1.00±0.15、2.19±0.24和1.62±0.18,GPR39蛋白相对表达水平分别为 0.41±0.05、1.03±0.19 和 0.74±0.08,p-AKT/AKT 分别为0.46±0.07、0.13±0.04 和 0.36±0.05,p-ERK/ERK 分别为 0.37±0.11、0.11±0.03和0.42±0.05.对照组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.001);模型组的上述指标与实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 胞磷胆碱钠能够有效缓解发育期惊厥大鼠脑组织的损伤程度,抑制炎症反应,改善氧化应激,其作用机制可能与GPR39/AKT/ERK信号通路的激活有关.

目的 探讨小胶质细胞及星形胶质细胞中的瞬时受体电位M2 型(TRPM2)离子通道在颞叶癫痫(TLE)相关神经炎症中的作用.方法 将大鼠随机分为对照组和癫痫组,癫痫组采用氯化锂-毛果芸香碱(匹罗卡品)制作癫痫模型,对照组给予等剂量的生理盐水代替,根据造模后观察的时间将TLE大鼠随机分为 7 个亚组(n = 5):急性期(3 h组、6 h组、1 d组、2 d组)、潜伏期(14 d组)、慢性期(30 d组、90 d组).检测TRPM2 在不同亚组TLE大鼠海马中的表达及TRPM2 在大鼠海马中的细胞定位情况.采用过氧化氢(H2O2)诱导小胶质细胞BV2 及星形胶质细胞C8 细胞系,检测细胞释放IL-1β、IL-6 和TNF-α的水平,检测H2O2 诱导的BV2 及C8 细胞中TRPM2、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、糖原合成酶激酶 3β(GSK-3β)、磷酸化核因子κB p65 蛋白(p-NF-κB p65)的表达变化,同时检测H2O2 诱导BV2 细胞中钙调神经磷酸酶(CaN)的活性变化.结果 急性期TLE大鼠海马中的TRPM2 表达升高(P<0.05).H2O2 诱导的BV2 及C8 细胞中TRPM2 的表达升高、炎症因子释放增加(P均<0.05),H2O2 可促进BV2 细胞中PARP-1、p-NF-κB p65 的表达并提高CaN、GSK-3β的活性(P均<0.05).结论 氧化应激可促进小胶质细胞及星形胶质细胞TRPM2 及促炎细胞因子的表达,癫痫反复发作引起的氧化应激可能在小胶质细胞中通过TRPM2/CaN/p-NF-κB p65 通路介导TLE相关神经炎症的发生.

目的 研究毛果芸香碱减轻对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)所致肝损伤的作用及机制.方法 采用小鼠腹腔注射APAP建立急性肝损伤模型,将18只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、APAP模型组、毛果芸香碱组,每组6只.毛果芸香碱组小鼠腹腔给药毛果芸香碱(2.5 mg/kg体重)7 d,末次给药1 h后,APAP模型组和毛果芸香碱组腹腔注射APAP(400 mg/kg体重),空白对照组腹腔注射等量生理盐水,APAP注射后12 h处死所有小鼠,采集血液和肝脏等组织样本.血清生化检测仪检测血清肝功指标天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotrans-ferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT),采用HE染色方法检测肝脏病理评估毛果芸香碱对APAP诱导肝损伤的药效作用;Western blot方法检测肝脏增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated pro-tein kinases1/2,ERK1/2)蛋白表达,探索肝细胞增殖作用及其可能的机制.结果 与空白对照组比较,APAP模型组小鼠的ALT和AST含量均显著升高(P<0.001),表明APAP模型建立成功;与APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠血清AST含量显著降低(P<0.01),ALT含量无统计学差异(P>0.05).HE染色病理学结果显示,与空白对照组比较,APAP模型组小鼠肝脏出现肝小叶中心坏死、肝内出血和细胞核消失或固缩;与APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠改善了肝小叶中心坏死、肝内出血和细胞核固缩.Western blot结果显示,与空白对照组和APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠肝脏PCNA蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01);与空白对照组和APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠p-ERK/ERK蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 毛果芸香碱能减轻APAP所致肝损伤,其分子机制可能是毛果芸香碱通过激活肝细胞中m3AchR-ERK1/2信号通路进而促进肝细胞增殖来发挥作用.

老视是指因年龄增长所致的不可逆性生理性调节减弱，并严重影响患者视觉质量的现象。未经恰当矫正的老视是全球人口视力受损的首要因素。近年来，框架眼镜、手术及角膜接触镜等传统矫正方案已不能满足老视人群日益增长的需求，药物治疗老视可能是其新方案。本文中笔者对老视药物的应用现状和发展策略进行综述，旨在比较现有药物的有效性与安全性，并提出未来新药开发的潜在方向。

目的 研究左乙拉西坦对癫痫仔鼠海马神经元的保护作用,并探讨可能机制.方法 50只仔鼠腹腔注射氯化锂联合皮下注射毛果芸香碱建立癫痫模型,随机分为模型组、低、中、高剂量实验组、联合组,各10只.另取10只仔鼠设为对照组.联合组灌胃左乙拉西坦40 mg·kg-1,尾静脉注射茴香霉素(anisomycin)2 mg·kg-1;低、中、高剂量实验组分别灌胃左乙拉西坦10、20、40 mg·kg-1,尾静脉注射等体积二甲基亚砜(DMSO)溶液;对照组、模型组灌胃等体积0.9％NaCl,尾静脉注射等体积DMSO溶液,均每天1次,干预7 d.用全自动生化分析仪检测脑组织氧化应激指标,用Tunel染色法检测海马区神经元凋亡率,用蛋白质印迹法检测脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(caspase-3)蛋白表达水平.结果 对照组、模型组和低、中、高剂量实验组及联合组的脑组织丙二醛(MDA)水平分别为(6.24±0.75)、(11.52±1.32)、(10.26±1.19)、(8.95±1.20)、(7.54±1.16)和(9.62±1.14)nmol·mg-1,超氧化物歧化酶分别为(235.47±32.69)、(152.31±19.67)、(186.57±25.30)、(204.87±31.05)、(219.45±32.29)和(203.86±23.65)U·mg-1,海马区神经元凋亡率分别为(2.96±0.63)％、(18.56±2.71)％、(14.21±2.68)％、(9.21±1.53)％、(5.05±0.75)％和(8.29±2.41)％,脑组织caspase-3蛋白相对表达水平分别为 0.12±0.02、0.78±0.08、0.62±0.07、0.50±0.05、0.32±0.04 和0.49±0.05.模型组与对照组比较,低、中、高剂量实验组与模型组比较,联合组与高剂量实验组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 左乙拉西坦可减轻癫痫仔鼠氧化应激,保护海马神经元,其作用机制可能与抑制c-Jun氨基末端激酶/c-Jun通路有关.