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基于UPLC-MS/MS和网络药理学研究复方板蓝根颗粒治疗流行性乙型脑炎、肝炎及腮腺炎的作用机制
编辑人员丨1周前
目的:阐明复方板蓝根颗粒中的血中移行成分,探究其治疗流行性乙型脑炎、肝炎、腮腺炎的作用机制。方法:采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)技术对复方板蓝根颗粒中的血中移行成分进行分析,并结合网络药理学分析复方板蓝根颗粒治疗流行性乙型脑炎、肝炎、腮腺炎中起调控作用的靶点及通路。结果:共鉴定出9个入血成分,其中8个是原型成分,分别为蔗糖、邻氨基苯甲酸、尿苷、腺苷、鸟苷、表告依春、吲哚-3-乙腈-2-S-β-D-吡喃葡萄糖苷、水杨酸。通过网络药理学分析得到复方板蓝根颗粒成分可能通过调控脂质与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗、IL-17等信号通路治疗乙型脑炎、肝炎、腮腺炎。结论:复方板蓝根颗粒的9个入血成分可能通过调控脂质与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗、IL-17等信号通路治疗乙型脑炎、肝炎、腮腺炎。
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编辑人员丨1周前
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北京基因型结核分枝杆菌的流行及与二线抗结核药物耐药性的相关性
编辑人员丨1周前
目的:探讨北京市北京基因型MTB的流行风险因素及其与二线抗结核药物耐药性的相关性。方法:收集北京各区县MTB菌阳临床株1 140例,采用比例法进行药敏试验;采用间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)方法鉴定北京基因型与非北京基因型MTB;使用SPSS 22.0统计学软件,采用χ 2检验或Fisher精确概率检验方法对实验数据进行统计学分析。 结果:在1 140株MTB临床分离株中,北京基因型941株(82.5%),非北京基因型199株;北京基因型菌株来源的患者中男性663例(70.5%),非北京基因型菌株来源的患者中男性124例(62.3%),两者比较差异有统计学意义[ P=0.021, OR(95 %CI):1.442(1.048~1.985)];北京基因型菌株来源的患者中流动人口441例(46.9%),非北京基因型菌株来源的患者中流动人口78例(39.2%),两者比较差异有统计学意义[ P=0.048, OR (95 %CI):1.368(1.001~1.869)];北京基因型菌株来源的患者中年龄≥65岁的患者129例(13.7%),非北京基因型菌株来源的患者中40例(20.1%),二者比较差异有统计学意义[ P=0.021, OR(95 %CI):0.631(0.426~0.936)];北京基因型菌株中对左氧氟沙星(Levofloxacin, Lfx)、阿米卡星(Amikacin, Am)、卷曲霉素(Capreomycin, Cm)、对氨基水杨酸(Para-aminosalicylic, PAS)的耐药率分别为5.5%(52/941)、1.3%(12/941)、3.2%(30/941)和3.0%(28/941),非北京基因型菌株对以上4种药物的耐药率分别为10.6%(21/199)、8.5%(17/199)、12.6%(25/199)和11.6%(23/199),二者对4种药物的耐药率比较差异均有统计学意义(均 P<0.05);北京基因型菌株中耐多药(MDR)菌株58株(6.2%),非北京基因型菌株中MDR菌株19株(9.5%),两者比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:北京基因型MTB在北京广泛流行且在男性人群和流动人口中的比例较高;与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株对Lfx、Am、Cm及PAS的耐药率低,但MDR-TB患者的比例无显著差异。
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编辑人员丨1周前
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初治和复治肺结核病例中北京基因型结核分枝杆菌与抗结核药物耐药性的关联研究
编辑人员丨1周前
目的:探讨北京地区初治和复治肺结核病病例中北京基因型结核分枝杆菌( M. tb)流行与抗结核药物耐药性出现的相关性。 方法:收集北京各区县菌阳 M. tb临床分离株1 140例,采用比例法进行药物敏感性检测;应用间隔区寡核苷酸分型方法鉴定北京基因型和非北京基因型;分析基因型流行和耐药性产生间的相关性。 结果:在初治病例中,北京基因型 M. tb中异烟肼(INH)、阿米卡星(AK)、卷曲霉素(CPM)和对氨基水杨酸(PAS)的耐药率均低于非北京基因型( χ2值分别为2.670、15.282、16.219、22.676, P值均<0.05)。在复治病例中,北京基因型 M. tb中AK、PAS的耐药率均低于非北京基因型( χ2值分别为15.167、4.574, P值均<0.05);北京基因型 M. tb中耐多药结核病菌株的比例低于非北京基因型( χ2值为7.046, P<0.05)。 结论:在初治和复治病例中北京基因型 M. tb的流行和抗结核药物耐药性的出现有不同的相关性,在初治病例中和INH、AK、CPM和PAS耐药性的出现有关联,而在复治病例中只在AK和PAS耐药性的产生上有关联,同时在复治病例中北京基因型菌株中出现耐多药结核病的概率更低。
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编辑人员丨1周前
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基于代谢组学研究针刺腰痛点治疗泌尿系结石肾绞痛的作用机制
编辑人员丨3周前
目的 观察针刺腰痛点治疗泌尿系结石急性肾绞痛的有效性,并基于代谢组学探讨其作用机制.方法 本研究为探索性随机对照试验,将20例泌尿系结石肾绞痛患者随机分为试验组与对照组,每组各10例.试验组采用针刺双侧腰痛点,对照组采用非穴点浅刺治疗.观察比较2组患者针刺操作后10 min的疼痛缓解率;治疗前后采用色谱-质谱联用技术的非靶向代谢组学方法对2组血清进行检测.对检测出的代谢物根据P值、差异倍数变化以及计算变量投影重要度值进行差异筛选,利用Spearman相关系数,与临床指标相结合,进行差异代谢物的进一步筛选,基于KEGG数据库进行功能通路富集分析.结果 针刺操作后10 min,试验组较对照组获得更高的疼痛缓解率80.0%(95%CI 38.4%~94.3%,P<0.01).代谢组学:试验组治疗前后对比,筛选出差异代谢物199个;对照组治疗前后对比,筛选出差异代谢物54个;试验组对比对照组,筛选出差异代谢物325个.对试验组治疗前后代谢物变化与NRS疼痛评分Spearman等级相关分析发现,鸟苷等4个差异代谢物与NRS疼痛评分呈负相关,阿尔巴黄酮等9个差异代谢物与NRS疼痛评分呈正相关;试验组较对照组代谢物变化与NRS疼痛评分Spearman等级相关分析发现,3-醛基水杨酸等3个差异代谢物与NRS疼痛评分呈负相关,皮质醇等8个差异代谢物与NRS疼痛评分呈正相关.试验组对比对照组,富集到通路9条,其中与疼痛调节相关的通路为色氨酸代谢途径和不饱和脂肪酸的生物合成代谢途径.结论 针刺腰痛点可快速缓解泌尿系结石肾绞痛,调节鸟苷、鸟嘌呤、皮质醇等代谢产物表达,影响色氨酸代谢途径与不饱和脂肪酸的生物合成代谢途径,可能是针刺治疗肾绞痛的潜在作用机制.
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编辑人员丨3周前
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安石榴苷对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群和炎性因子的影响
编辑人员丨3周前
目的 探究安石榴苷对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道菌群和炎性因子的影响.方法 实验小鼠分为对照组(Con组)、UC模型组(UC组)、5-氨基水杨酸治疗组(5-ASA组)和安石榴苷干预组(Pun组),每组各5只小鼠.观察小鼠体重、便血和粪便形状,并进行疾病活动指数(DAI)评分;通过HE染色观察小鼠结肠组织切片形态,并进行病理评分与统计;ELISA法检测小鼠血清IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-8和IL-10水平;16SrRNA高通量测序检测小鼠肠道菌群.结果 与UC组相比,Pun组小鼠DAI评分显著降低;HE结果提示安石榴苷可改善UC小鼠结肠损伤、恢复肠道腺体和隐窝结构、减少炎性细胞浸润;Pun组小鼠血清促炎因子IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.01),而抑炎因子IL-10水平显著增加(P<0.001).测序结果显示,安石榴苷可提高小鼠肠道菌群多样性,增加Prevotellaceae_UCG-001和乳酸杆菌属(Lacto-bacillus)相对丰度,降低阿克曼菌属(Akkermansia)和联合乳酸杆菌属(Ligilactobacillus)相对丰度.结论 安石榴苷可有效缓解小鼠UC结肠炎症状,通过降低血清炎症因子水平和调节肠道菌群平衡达到治疗效果,这为UC的临床治疗提供新思路.
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编辑人员丨3周前
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藜麦FLS基因家族的鉴定、表达及DNA变异分析
编辑人员丨1个月前
[目的]黄酮醇合成酶(FLS)是石竹目植物中多酚类次生代谢的关键酶,为探究FLS基因在藜麦生长发育中的功能,对FLS基因家族进行鉴定和表达分析.[方法]利用生物信息学分析网站,鉴定出CqFLS家族成员,分析其基因结构、蛋白的理化性质、二级结构、三级结构、启动子顺式元件以及系统进化关系等,并通过基因克隆、构建表达载体的方法分析其蛋白表达情况.[结果]共鉴定出 3 个CqFLSs基因,不均匀分布在 2 条染色体上,CqFLSs启动子区域包含水杨酸、脱落酸、茉莉酸甲酯和干旱诱导等元件;CqFLS2.1g发现多处InDel和SNP变异,在ch01 28871893、28871125、28872881 处编码核苷酸删除,且均注释为上游效应,未检测到移码突变;FLS家族系统进化树分析可知,与其他两个基因相比,CqFLS2.1g与CqFLS1.1g、CqFLS3.10g处于不同分支,表达水平也存在差异,CqFLS2.1g可能发生分化;同时,基因表达分析表明,3 个CqFLSs基因在青白 1 号籽粒中整体表达量高于青黑 1 号和贡扎 4 号.对克隆出的CqFLS1.1g用 0.3 mmol/L的IPTG诱导,在 20℃和 37℃的条件下均可成功表达.[结论]CqFLS1.1g 在花的形成以及籽粒发育过程中发挥作用,而CqFLS2.1g则主要参与藜麦籽粒的形成,CqFLS的表达具有组织特异性,在藜麦生长发育过程中发挥重要的作用.
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编辑人员丨1个月前
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滋阴明目方调控GRP78/IRE1/ATF6通路改善视网膜色素变性的体外研究
编辑人员丨2024/7/20
目的 探讨滋阴明目方改善视网膜色素变性的作用机制.方法 将 20 只SD大鼠按随机数字表法分为空白血清组和滋阴明目方含药血清组,每组10 只.滋阴明目方含药血清组大鼠灌胃滋阴明目方(46.875 g/kg),空白血清组大鼠灌胃蒸馏水.制备滋阴明目方含药血清及空白血清,采用液质联用技术分析滋阴明目方含药血清的化学成分.采用衣霉素干预人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞构建内质网应激损伤模型.CCK-8 法筛选滋阴明目方含药血清最优体积分数.将ARPE-19 细胞分为空白组、模型组、空白血清组、滋阴明目方含药血清组、牛磺熊去氧胆酸组,分别进行干预.干预24 h后,采用多时间动态细胞功能分析系统对细胞进行形态观察,CCK-8 法检测各组细胞存活率,Annexin V-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率,蛋白质印迹法和微滴式数字PCR法检测各组细胞葡萄糖调节蛋白 78(GRP78)、1 型内质网转膜蛋白激酶(IRE1)、活化转录因子 6(ATF6)的蛋白及mRNA表达.结果 液质联用分析得到滋阴明目方含药血清中包含熊果苷、水杨酸、木犀草素、丹酚酸A、刺桐碱、牛磺酸、檞皮素、麦芽酚、黄芩苷、丹参素等主要化学成分.与模型组比较,滋阴明目方含药血清组细胞数量增多,生长较均匀,漂浮的死亡ARPE-19 细胞及碎片减少;滋阴明目方含药血清组和牛磺熊去氧胆酸组的细胞存活率均升高,细胞凋亡率均下降(均P<0.05);滋阴明目方含药血清组GRP78、IRE1、ATF6 蛋白表达降低,牛磺熊去氧胆酸组IRE1、ATF6蛋白表达降低(均 P<0.05);滋阴明目方含药血清组和牛磺熊去氧胆酸组 GRP78、IRE1、ATF6 mRNA表达降低(均P<0.05).结论 滋阴明目方可以减少ARPE-19 细胞内质网应激损伤模型的细胞凋亡,其分子机制可能与下调GRP78、IRE1、ATF6 的表达,抑制细胞内质网应激反应有关.
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编辑人员丨2024/7/20
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大白菜BrCYP83B1基因的克隆及表达分析
编辑人员丨2024/7/13
[目的]细胞色素P450 家族是十字花科植物硫苷合成重要的酶系,其中CYP83 亚家族主要参与核心结构的合成,旨在探究大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)CYP83B1 基因的功能.[方法]利用RT-PCR技术克隆BrCYP83B1 基因,通过生物信息学软件分析其编码蛋白理化性质、同源性及启动子顺式作用元件,利用RT-qPCR技术分析BrCYP83B1 的表达模式,并构建其植物超表达载体.[结果]BrCYP83B1 cDNA序列全长为 1 500 bp,编码 499 个氨基酸,编码蛋白属于细胞色素P450 超家族,主要定位于细胞质,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,与甘蓝型油菜、青花菜的CYP83B1 蛋白具有较高的同源性.启动子分析表明,该基因启动子区域包含水杨酸、脱落酸及茉莉酸甲酯等激素响应的顺式作用元件,说明BrCYP83B1 基因表达可能受激素调控.RT-qPCR分析结果表明,BrCYP83B1 基因在大白菜的根、茎、叶、花和果中均有表达,且以叶中的表达量最高;茉莉酸甲酯够显著促进该基因的表达,而水杨酸处理对其表达具有一定的抑制作用,脱落酸处理下基因先上调后又下调.[结论]BrCYP83B1可能参与大白菜对激素的响应调控.
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编辑人员丨2024/7/13
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外施多效唑诱导水稻对稻飞虱的抗性
编辑人员丨2024/7/6
[目的]利用化学激发子提高植物抗虫性从而抑制害虫,是目前正在开发的一种新型的害虫绿色防治技术.本研究旨在解析一种化学激发子——多效唑(paclobutrazol,PBZ)提高水稻Oryza savita对稻飞虱抗性的机理,以期为其在害虫防控中的应用打下基础.[方法]用不同浓度PBZ以根吸的方法处理秀水110品种水稻24 h后接入褐飞虱Nilaparvata lugens和白背飞虱Sogatella furcifera初孵若虫,测定接虫后不同时间若虫存活率;用含有5和10 mg/L PBZ或者防御化合物[咖啡酰腐胺、刺苞菊苷和樱桃苷(1和10 mg/L)及芥子酰胍丁胺(0.1和1 mg/L)]的稻飞虱人工饲料饲喂以及用5和20 mg/L PBZ溶液喷施褐飞虱若虫后,测定褐飞虱若虫存活率;5 mg/L PBZ根吸处理水稻、褐飞虱若虫为害和5 mg/L PBZ根吸处理水稻再接褐飞虱若虫后,测定水稻体内水杨酸(salicylic acid,SA)、过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)和乙烯(ethylene,ET)以及防御化合物芥子酰胍丁胺、咖啡酰腐胺、刺苞菊苷和樱桃苷的含量.[结果]与对照(根吸不含PBZ的营养液的水稻)相比,5 mg/L PBZ根吸处理水稻,接虫后3 d时褐飞虱若虫存活率降低33.3%;当 PBZ浓度达到20 mg/L时,接虫后4 d时褐飞虱若虫全部死亡,但PBZ本身对褐飞虱若虫没有直接的毒杀作用.与对照组相比,5 mg/L PBZ根吸处理24 h后不接褐飞虱为害放置24 h时水稻植株体内SA含量显著上升,5 mg/L PBZ根吸处理水稻24 h再接褐飞虱若虫为害72 h时H2O2含量显著上升,5 mg/L PBZ根吸处理24 h后不接褐飞虱为害放置48-96 h、褐飞虱为害24-72 h及5 mg/L PBZ根吸处理水稻24 h再接褐飞虱若虫为害48-96 hET释放量均显著下降,5 mg/L PBZ根吸处理诱导了水稻植株中咖啡酰腐胺和芥子酰胍丁胺2种酚胺类化合物以及刺苞菊苷和樱桃苷2种黄酮类化合物含量的显著上升.在褐飞虱人工饲料中添加1或10 mg/L的咖啡酰腐胺、芥子酰胍丁胺、刺苞菊苷或樱桃苷,可有效降低褐飞虱若虫存活率.[结论]PBZ是一种有效的化学激发子,可以通过激活水稻的SA和H2O2通路、抑制ET通路,诱导水稻相关防御化合物的合成,提高水稻对褐飞虱的抗性.
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编辑人员丨2024/7/6
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人参皂苷Rg1通过IRE1-JNK-CHOP通路抑制自噬改善OGD/R诱导的PC12细胞损伤
编辑人员丨2024/6/15
探讨人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,GRg1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤大鼠嗜铬细胞瘤(rat adrenal pheochromocytoma,PC12)细胞的保护作用及其作用机制是否与调控肌醇需求酶 1(inositol-re-quiring enzyme 1,IRE1)-c-Jun 氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)-C/EBP 同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)信号通路有关.在PC12 细胞中建立OGD/R模型,将PC12 细胞随机分组为对照组、模型组、OGD/R+GRg1(0.1、1、10 μmol·L-1)组,OGD/R+GRg1+雷帕霉素(rapamycin,自噬激动剂)组、OGD/R+GRg1+3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA,自噬抑制剂)组、OGD/R+GRg1+衣霉素(tunicamycin,内质网应激激动剂)组、OGD/R+GRg1+4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA,内质网应激抑制剂)组、OGD/R+GRg1+3,5-二溴水杨醛(3,5-dibromosalicylaldehyde,DBSA,IRE1 抑制剂)组.除对照组外,其他组都进行OGD/R处理,即氧糖剥夺 6 h再复氧 6 h.MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡情况,MDC法检测细胞自噬体的荧光强度.Western blot检测自噬相关蛋白 Beclin1、LC3-Ⅱ、p62 和通路相关蛋白 IRE1、p-IRE1、JNK、p-JNK、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、CHOP 的表达情况.结果显示,与模型组相比,0.1、1、10 μmol·L-1 GRg1 剂量依赖性地提高了 PC12 细胞的活力,降低了自噬蛋白 Beclin1、LC3-Ⅱ和通路相关蛋白 p-IRE1、p-JNK、GRP78、CHOP表达,降低了细胞凋亡率和MDC荧光强度,同时也增加了p62 蛋白表达.而分别干预自噬和内质网应激后,与OGD/R+GRg1(10 μmol·L-1)组相比,OGD/R+GRg1+rapamycin组和OGD/R+GRg1+tunicamycin组细胞凋亡率和MDC荧光强度增加,自噬蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ和通路相关蛋白p-IRE1、p-JNK、GRP78、CHOP 表达增加,细胞相对存活率和p62 蛋白表达降低.3-MA、4-PBA和DBSA则发挥了相反作用.综上所述,GRg1 可能通过IRE1-JNK-CHOP通路抑制自噬而改善OGD/R诱导PC12 细胞的损伤.
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编辑人员丨2024/6/15
