目的 探讨补肾活血方(巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等)对肾虚血瘀型子宫内膜增生症(Endometrial hyperplasia,EH)大鼠的作用及机制.方法 将 90 只SD大鼠随机分为正常组、模型组、米非司酮组(12 mg·kg-1)及补肾活血方低、中、高剂量组(1.2、2.4、4.8 g·kg-1),每组 15 只.采用灌胃羟基脲及戊酸雌二醇,联合尾静脉注射高分子右旋糖苷法复制肾虚血瘀型EH大鼠模型.造模成功后,各组按照设定剂量灌胃给药,每日 1 次,连续 21 d.实验结束后,采用生化法检测各组大鼠血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)的水平以及全血黏度、血液流变学、凝血功能等指标;ELISA法检测血清雌激素(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、一氧化氮(NO)、内皮素 1(ET-1)的水平;HE染色法观察子宫内膜组织病理形态变化,并测量子宫内膜厚度;免疫组化法检测子宫内膜组织中基质金属蛋白酶 9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物 1(TIMP-1)蛋白表达水平;Western Blot法检测子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1、B细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、第 10 号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)蛋白表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO比值均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),cGMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显升高(P＜0.05,P＜0.01);血液流变学各项指标及纤维蛋白原(FIB)含量均明显升高(P＜0.05),凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)均明显延长(P＜0.05);子宫指数及子宫内膜厚度显著升高(P＜0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著上调(P＜0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著下调(P＜0.01).与模型组比较,补肾活血方组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO比值均明显升高(P＜0.05,P＜0.01);cGMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);血液流变学各项指标及FIB含量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),TT、PT、APTT均明显缩短(P＜0.05);子宫指数及子宫内膜厚度均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2 蛋白表达显著下调(P＜0.05,P＜0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著上调(P＜0.05,P＜0.01).结论 补肾活血方能够改善肾虚血瘀型EH大鼠的症状和体征,保护子宫内膜血管内皮功能,以缓解子宫内膜增生,其作用机制与恢复MMP-9/TIMP-1 平衡,上调Bax、PTEN表达,抑制Bcl-2 表达有关.

目的 探究沙苑子苷A调控核因子-κB(NF-κB)信号通路对人卵巢癌细胞克隆、黏附及侵袭的影响.方法 体外培养人卵巢癌Caov3 细胞,分为对照组(不做干预)及 25、50、100、200 μg/mL沙苑子苷A组.采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞活力筛选实验浓度,而后将Caov3 细胞分为对照组、实验组(100 μg/mL沙苑子苷A)、阳性药物组(100 nmol/L紫杉醇)、激活剂组(100 μg/mL沙苑子苷A+1 μmol/L NF-κB通路激活剂PMA)和抑制剂组(100 μg/mL沙苑子苷A+5 μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082),干预24 h.采用平板克隆形成、细胞黏附、Transwell小室、蛋白免疫印迹(WB)法对细胞克隆形成率、黏附数、侵袭数、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)和NF-κB信号通路相关蛋白进行分析.结果 与对照组相比,50、100、200 μg/mL 沙苑子苷 A 组细胞活力降低(P＜0.05),选择细胞活力接近50%的 100 μg/mL沙苑子苷进行后续实验.与对照组相比,实验组和阳性药物组细胞克隆形成率、黏附数、侵袭数及Cyclin D1、PCNA、p-IκBα、p-NF-κB p65 蛋白表达量显著降低(P＜0.05).与实验组相比,BAY 11-7082 可增强沙苑子苷A对细胞上述指标的作用,PMA可削弱沙苑子苷A对细胞上述指标的作用(P＜0.05).结论 沙苑子苷A可通过阻断NF-κB通路抑制人卵巢癌Caov3 细胞的克隆、黏附、侵袭.

目的 建立一测多评(quantitative analysis of multicomponents by single-marker,QAMS)法同时检测盐沙苑子饮片中杨梅素、扁蓄苷、杨梅素-3-0-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、西伯利亚落叶松黄酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊异黄酮、芒柄花素、鼠李柠檬素、豆甾醇、胡萝卜苷、β-谷甾醇含量的方法,并采用主成分分析法(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)法及熵权逼近理想解排序(entropy weight-technique for order preference by similarity to ideal solution,EW-TOPSIS)法对其质量进行评价.方法 采用Lichrospher C18色谱柱;乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相梯度洗脱.以沙苑子苷A为内参物,建立内参物与其他12个待测成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),进行RCF耐用性考察及色谱峰定位,并与外标法实测结果进行对比.运用OPLS-DA及EW-TOPSIS法建立盐沙苑子饮片综合质量优劣评价方法.结果 方法学验证均符合《中国药典》2020年版要求;QAMS和外标法含量测定结果无显著性差异(P＞0.05);沙苑子苷A、β-谷甾醇、沙苑子苷B、杨梅素、胡萝卜苷和毛蕊异黄酮是影响盐沙苑子饮片产品质量的主要潜在标志物;加权TOPSIS法结果显示陕西地区所得盐沙苑子饮片质量最优,其次为山西、河北和山东产盐沙苑子饮片,辽宁和内蒙古产盐沙苑子饮片位于排名后4位.结论 所建立的方法操作便捷、结果准确;OPLS-DA联合EW-TOPSIS法全面客观,可用于盐沙苑子饮片综合品质的评价.

目的 建立沙苑子中沙苑子苷A的含量测定方法,考察沙苑子不同规格炮制品中沙苑子苷A的含量及其变化情况.方法 用盐水、黄酒、米醋三种辅料,按照烘、炒、蒸三种不同工艺,炮制出9种不同规格沙苑子炮制品,采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同规格沙苑子中沙苑子苷A的含量.结果 沙苑子苷A在0.0209 μg ～0.4180 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5);平均加样回收率为97.91％,RSD为1.48％,准确度符合要求.沙苑子生品、盐水闷润炒干品、盐水闷润烘干品、盐水闷润蒸后烘干品、黄酒闷润炒干品、黄酒闷润烘干品、黄酒闷润蒸后烘干品、米醋闷润炒干品、米醋闷润烘干品、米醋闷润蒸后烘干品中沙苑子苷A含量分别为0.98、0.89、0.85、1.16、0.88、0.90、1.09、0.85、0.87、1.18 mg/g.结论 建立的HPLC检测方法快速准确、重复性好、专属性强;盐水、黄酒或米醋三种辅料闷润炒干和闷润烘干可导致沙苑子中沙苑子苷A含量下降,而辅料闷润蒸后烘干则使得沙苑子苷A含量增加,尤以米醋闷润蒸后烘干品中沙苑子苷A含量最高.

目的:研究补肺壮精方对精子形态、精浆生化及精液参数的影响.方法:将120例男性不育患者随机分为2组,每组60例.方法:治疗组服用补肺壮精方(黄芪、桑白皮、天冬、麦冬、知母、桑叶、桑螵蛸、枳壳、菟丝子、制何首乌、沙苑子、茯苓)治疗,对照组服用五子衍宗方(菟丝子、覆盆子、枸杞子、车前子、五味子)治疗.2个月为1疗程.主要观察治疗前后精子活力、α-中性糖苷酶、精浆果糖及精子形态的变化.结果:治疗组总有效率为86.67%、显效15例、无效8例,对照组总有效率为68.33%、显效9例、无效19例,2组总有效率比较,差异有显著性(P <0.05);治疗后2组患者精浆果糖、糖苷酶及精子形态正常率较治疗前均有显著性升高(P <0.05),但各指标改善情况治疗组均优于对照组,差异有显著性(P <0.05);治疗后2组患者精液参数均高于治疗前(P <0.05),但各指标改善情况治疗组均优于对照组,差异有显著性(P <0.05).结论:补肺壮精方可以明显提高精子活力并改善精子形态.

目的:建立高效液相色谱法测定决明退障口服液中沙苑子苷、芍药苷的含量.方法:(1)测定沙苑子苷的含量.色谱柱为Aglient ZORBAX Eclipse Plus C18柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(V:V=21:79);检测波长为266 nm.(2)测定芍药苷的含量.色谱柱为Diamonsil C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(V:V=14:86);检测波长为230 nm.结果:沙苑子苷标准曲线回归方程为Y=21338 X-29.63,r=0.9996(n=6),进样量在1～32μg范围内线性关系良好,沙苑子苷的转移率为80.31％;芍药苷标准曲线回归方程Y=12467 X-41.99,r=0.9999(n=6),进样量在1～48μg范围内线性关系良好,芍药苷的转移率为64.69％.结论:本方法能够准确测定决明退障口服液中沙苑子苷、芍药苷的含量,为决明退障口服液的质量控制提供依据.

采用色谱方法对沙苑子的95％乙醇提取物正丁醇萃取部位进行分离纯化,并通过质谱、核磁共振谱和文献比对等方法对分离得到的单体化合物进行结构鉴定.从中分离并鉴定了20个化合物,包括15个黄酮类和5个其他类化合物.化合物1为1个新的黄酮苷,命名为沙苑子苷C.19个已知化合物分别鉴定为:山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(2),山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷(3),山柰酚-3-O-β-D-吡喃木糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),鼠李柠檬素-3-O-β-D-葡萄糖苷(5),鼠李柠檬素-3-O-[5-O-阿魏酰-β-D-呋喃芹菜糖-(1→2″)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),鼠李柠檬素-3-O-[5-O-对香豆酰-β-D-呋喃芹菜糖-(1→2″)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),沙苑子苷B(8),鼠李柠檬素-3-O-[β-D-呋喃芹菜糖-(1→2)]-β-D-葡糖糖苷(9),沙苑子A(10),槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷(11),沙苑子杨梅苷(12),杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(13),杨梅素-3-O-[β-D-吡喃木糖-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(14),毛蕊异黄酮(15),对氨基肉桂酸(16),邻苯二酚(17),赤式-愈创木基甘油-β-阿魏酸醚(18),D-3-O-甲基肌醇(19),去氧土大黄苷(20).其中化合物1为新化合物,化合物16～19为首次从该植物中分离得到.该研究为沙苑子化学成分研究提供一定的参考.

目的 验证沙苑子总黄酮成分是否具有促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化的作用.方法 培养获得SD大鼠的BMSCs并鉴定.选择沙苑子总黄酮并同单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)比较,观察其刺激体外培养SD大鼠的BMSCs后,细胞形态学变化,免疫细胞化学检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,及Western blotting检测巢蛋白(Nestin)的表达.结果 沙苑子总黄酮刺激后BMSCs的细胞形态出现有类似神经元细胞样改变;免疫细胞化学检测到沙苑子总黄酮刺激后的部分细胞有NSE的表达;Western blotting检测到沙苑子总黄酮刺激后的细胞样本有Nestin的表达.结论 沙苑子总黄酮能促进体外培养BMSCs向神经细胞分化的作用.

目的 研究沙苑子苷A潜在的抗肿瘤作用.方法 利用计算机模拟方法,采用Discovery StudioTM 4.0(DS)软件反向寻靶,初步探讨沙苑子苷A潜在的抗肿瘤靶点,并通过CDOCKER进行分子对接初步验证结果;建立体外鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型实验,血管计数法观察沙苑子苷A(0.2、0.4、0.8 mg/mL)对CAM新生血管生成的影响.结果 反向寻靶结果表明,沙苑子苷A可调控原癌基因酪氨酸蛋白激酶(ABL1)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶(SRC)、靶点蛋白纤维生长因子受体1 (FGFR1)、纤维生长因子受体(FGFR2)和转化生长因子-β(TGF-β);分子对接结果证明,沙苑子苷A能够调控血管生长相关靶点;体外CAM实验结果发现,与对照组比较,沙苑子苷A能显著抑制新生中、小血管的生成(P＜0.05、0.01).结论 沙苑子苷A可能是沙苑子发挥抗肿瘤作用的主要活性成分,可能通过调控肿瘤基因的表达和抑制新生血管的生成发挥作用.

目的:探究炮制对沙苑子黄酮类化学成分含量的影响.方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),检测黄酮苷类成分流动相:乙腈-1％冰乙酸水梯度洗脱,检测黄酮苷元类成分流动相:甲醇-1％冰乙酸水等度洗脱,进样量:10μL,流速:1mL/min,柱温:30℃,检测波长:266nm.对炮制前后沙苑子中杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、沙苑子苷B和沙苑子苷A以及毛蕊异黄酮、芒柄花素和鼠李柠檬素进行含量测定并进行比较.结果:炮制后,沙苑子中4个黄酮苷含量均有下降,分别下降了23.29％、35.71％、15.17％、8.81％.黄酮苷元含量均呈上升趋势,毛蕊异黄酮、芒柄花素和鼠李柠檬素分别升高了5.05％,7.89％,22.93％.结论:盐炙能使沙苑子中部分黄酮苷含量降低,同时升高部分黄酮苷元含量.