通过古籍文献调研、中医药现代研究成果的梳理,结合中医临床及中药学等学科领域内知名专家学者的认识及应用经验,归纳出沙苑子功效主要为:补肾助阳,固精缩尿,养肝明目;症靶为遗精、视物模糊;标靶为蛋白尿;现代药理研究发现沙苑子及其有效成分具有补肾固精、明目、调脂保肝、抗炎、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤、调节免疫等作用;本品无毒,但相火炽盛,阳强易举者忌服;临床常用剂量为9～15g,内服时当根据不同疾病,或同一疾病的不同阶段进行辨证使用,并积极探索沙苑子用量与症靶、标靶的量效关系构建.

目的 探讨补肾活血方(巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等)对肾虚血瘀型子宫内膜增生症(Endometrial hyperplasia,EH)大鼠的作用及机制.方法 将 90 只SD大鼠随机分为正常组、模型组、米非司酮组(12 mg·kg-1)及补肾活血方低、中、高剂量组(1.2、2.4、4.8 g·kg-1),每组 15 只.采用灌胃羟基脲及戊酸雌二醇,联合尾静脉注射高分子右旋糖苷法复制肾虚血瘀型EH大鼠模型.造模成功后,各组按照设定剂量灌胃给药,每日 1 次,连续 21 d.实验结束后,采用生化法检测各组大鼠血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)的水平以及全血黏度、血液流变学、凝血功能等指标;ELISA法检测血清雌激素(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、一氧化氮(NO)、内皮素 1(ET-1)的水平;HE染色法观察子宫内膜组织病理形态变化,并测量子宫内膜厚度;免疫组化法检测子宫内膜组织中基质金属蛋白酶 9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物 1(TIMP-1)蛋白表达水平;Western Blot法检测子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1、B细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、第 10 号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)蛋白表达水平.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO比值均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),cGMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显升高(P＜0.05,P＜0.01);血液流变学各项指标及纤维蛋白原(FIB)含量均明显升高(P＜0.05),凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)均明显延长(P＜0.05);子宫指数及子宫内膜厚度显著升高(P＜0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著上调(P＜0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著下调(P＜0.01).与模型组比较,补肾活血方组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO比值均明显升高(P＜0.05,P＜0.01);cGMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);血液流变学各项指标及FIB含量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),TT、PT、APTT均明显缩短(P＜0.05);子宫指数及子宫内膜厚度均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2 蛋白表达显著下调(P＜0.05,P＜0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著上调(P＜0.05,P＜0.01).结论 补肾活血方能够改善肾虚血瘀型EH大鼠的症状和体征,保护子宫内膜血管内皮功能,以缓解子宫内膜增生,其作用机制与恢复MMP-9/TIMP-1 平衡,上调Bax、PTEN表达,抑制Bcl-2 表达有关.

目的 探究沙苑子苷A调控核因子-κB(NF-κB)信号通路对人卵巢癌细胞克隆、黏附及侵袭的影响.方法 体外培养人卵巢癌Caov3 细胞,分为对照组(不做干预)及 25、50、100、200 μg/mL沙苑子苷A组.采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞活力筛选实验浓度,而后将Caov3 细胞分为对照组、实验组(100 μg/mL沙苑子苷A)、阳性药物组(100 nmol/L紫杉醇)、激活剂组(100 μg/mL沙苑子苷A+1 μmol/L NF-κB通路激活剂PMA)和抑制剂组(100 μg/mL沙苑子苷A+5 μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082),干预24 h.采用平板克隆形成、细胞黏附、Transwell小室、蛋白免疫印迹(WB)法对细胞克隆形成率、黏附数、侵袭数、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)和NF-κB信号通路相关蛋白进行分析.结果 与对照组相比,50、100、200 μg/mL 沙苑子苷 A 组细胞活力降低(P＜0.05),选择细胞活力接近50%的 100 μg/mL沙苑子苷进行后续实验.与对照组相比,实验组和阳性药物组细胞克隆形成率、黏附数、侵袭数及Cyclin D1、PCNA、p-IκBα、p-NF-κB p65 蛋白表达量显著降低(P＜0.05).与实验组相比,BAY 11-7082 可增强沙苑子苷A对细胞上述指标的作用,PMA可削弱沙苑子苷A对细胞上述指标的作用(P＜0.05).结论 沙苑子苷A可通过阻断NF-κB通路抑制人卵巢癌Caov3 细胞的克隆、黏附、侵袭.

[目的]探讨补肾健脾方(主要由黄芪、淫羊藿、山药、丹参、鹿角胶、沙苑子、制何首乌、黄精、葛根、大黄等中药组成)对脾肾两虚型2型糖尿病(T2DM)合并血脂异常患者临床疗效及脂联素(adiponectin,ADP)的影响.[方法]将90例脾肾两虚型T2DM合并血脂异常患者随机分为西药治疗组(简称西药组)、中药治疗组(简称中药组)、中西医结合治疗组(简称联合组),每组各30例.3组患者均给予常规降糖治疗,在此基础上,西药组给予阿托伐他汀钙片口服治疗,中药组给予补肾健脾方治疗,联合组给予阿托伐他汀钙片联合补肾健脾方治疗,疗程为8周.观察3组患者治疗前后中医证候积分、糖脂代谢指标、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血清ADP水平的变化情况,并评价3组患者的中医证候疗效.[结果](1)疗效方面,治疗8周后,西药组、中药组、联合组患者的总有效率分别为66.67%(20/30)、90.00%(27/30)、93.33%(28/30),组间比较,中药组和联合组的中医证候疗效均明显优于西药组(P＜0.05).(2)中医证候积分方面,治疗后,3组患者的中医证候积分均较治疗前下降(P＜0.01),且中药组和联合组对中医证候积分的下降幅度均优于西药组(P＜0.05或P＜0.01).(3)脂代谢方面,治疗后,3组患者的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均较治疗前有不同程度的改善,其中TC、TG、LDL-C水平均较治疗前显著下降,HDL-C水平均较治疗前显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);组间比较,中药组对TC、LDL-C的下降幅度和对HDL-C的升高幅度均不及西药组和联合组(P＜0.05或P＜0.01).(4)糖代谢方面,治疗后,中药组和联合组患者的空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、FINS、HOMA-IR水平均较治疗前显著下降(P＜0.05或P＜0.01),西药组患者仅FPG、2hPG、HOMA-IR水平较治疗前下降(P＜0.05或P＜0.01);组间比较,中药组和联合组患者对FPG、2hPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR水平的下降幅度均明显优于西药组(P＜0.05或P＜0.01).(5)脂肪激素方面,治疗后,3组患者的血清ADP水平均较治疗前显著升高(P＜0.05或P＜0.01),且中药组和联合组患者血清ADP水平的升高幅度均显著优于西药组(P＜0.05).[结论]补肾健脾方具有一定的调节脂质代谢作用,在改善脾肾两虚型T2DM合并血脂异常患者的临床症状、胰岛素抵抗,降低血糖,升高ADP水平等方面具有明显优势.

目的 建立一测多评(quantitative analysis of multicomponents by single-marker,QAMS)法同时检测盐沙苑子饮片中杨梅素、扁蓄苷、杨梅素-3-0-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、西伯利亚落叶松黄酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊异黄酮、芒柄花素、鼠李柠檬素、豆甾醇、胡萝卜苷、β-谷甾醇含量的方法,并采用主成分分析法(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)法及熵权逼近理想解排序(entropy weight-technique for order preference by similarity to ideal solution,EW-TOPSIS)法对其质量进行评价.方法 采用Lichrospher C18色谱柱;乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相梯度洗脱.以沙苑子苷A为内参物,建立内参物与其他12个待测成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),进行RCF耐用性考察及色谱峰定位,并与外标法实测结果进行对比.运用OPLS-DA及EW-TOPSIS法建立盐沙苑子饮片综合质量优劣评价方法.结果 方法学验证均符合《中国药典》2020年版要求;QAMS和外标法含量测定结果无显著性差异(P＞0.05);沙苑子苷A、β-谷甾醇、沙苑子苷B、杨梅素、胡萝卜苷和毛蕊异黄酮是影响盐沙苑子饮片产品质量的主要潜在标志物;加权TOPSIS法结果显示陕西地区所得盐沙苑子饮片质量最优,其次为山西、河北和山东产盐沙苑子饮片,辽宁和内蒙古产盐沙苑子饮片位于排名后4位.结论 所建立的方法操作便捷、结果准确;OPLS-DA联合EW-TOPSIS法全面客观,可用于盐沙苑子饮片综合品质的评价.

目的 建立沙苑子中沙苑子苷A的含量测定方法,考察沙苑子不同规格炮制品中沙苑子苷A的含量及其变化情况.方法 用盐水、黄酒、米醋三种辅料,按照烘、炒、蒸三种不同工艺,炮制出9种不同规格沙苑子炮制品,采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同规格沙苑子中沙苑子苷A的含量.结果 沙苑子苷A在0.0209 μg ～0.4180 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5);平均加样回收率为97.91％,RSD为1.48％,准确度符合要求.沙苑子生品、盐水闷润炒干品、盐水闷润烘干品、盐水闷润蒸后烘干品、黄酒闷润炒干品、黄酒闷润烘干品、黄酒闷润蒸后烘干品、米醋闷润炒干品、米醋闷润烘干品、米醋闷润蒸后烘干品中沙苑子苷A含量分别为0.98、0.89、0.85、1.16、0.88、0.90、1.09、0.85、0.87、1.18 mg/g.结论 建立的HPLC检测方法快速准确、重复性好、专属性强;盐水、黄酒或米醋三种辅料闷润炒干和闷润烘干可导致沙苑子中沙苑子苷A含量下降,而辅料闷润蒸后烘干则使得沙苑子苷A含量增加,尤以米醋闷润蒸后烘干品中沙苑子苷A含量最高.

目的 探讨沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症的治疗作用及其对肝脏甘油三酯(TG)合成途径的影响.方法 10周龄雌性SD大鼠,按体重随机区组法分为6组,即假手术组,模型组,雌激素组和TFS高、中、低剂量组,每组10只.双侧卵巢切除手术并连续给予6周高脂饲料复制肾阳虚高脂血症大鼠模型.假手术组和模型组灌胃生理盐水(10 mL/kg),雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg/kg),其余分别灌胃TFS 28.5、57、114 mg/kg,持续给药8周.检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),酶免法检测肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和甘油三磷酸酰基转移酶(GPAT)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1α(CPT-1α)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)水平,免疫组化法检测肝脏固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达.结果 与模型组相比, TFS高剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),血清HDL-C水平显著升高(P<0.05);肝脏ACC活性和GPAT水平显著降低(P<0.01,P<0.01),ACO、CPT-1α水平显著升高(P<0.01,P<0.05);肝细胞膜SREBP-1c蛋白表达量显著降低,肝细胞核PPARα蛋白表达量显著增加.结论 实验结果表明TFS具有良好的调节血脂代谢的作用,其作用机制可能是通过抑制肝脏SREBP-1c表达,降低TG合成途径中限速酶FAS、ACC、GPAT的活性及水平;上调PPARα蛋白表达,提高脂肪酸β氧化途径中ACO、CPT-1α的表达水平,两者共同发挥作用抑制肝脏中TG的合成,达到调脂作用.

目的:研究补肺壮精方对精子形态、精浆生化及精液参数的影响.方法:将120例男性不育患者随机分为2组,每组60例.方法:治疗组服用补肺壮精方(黄芪、桑白皮、天冬、麦冬、知母、桑叶、桑螵蛸、枳壳、菟丝子、制何首乌、沙苑子、茯苓)治疗,对照组服用五子衍宗方(菟丝子、覆盆子、枸杞子、车前子、五味子)治疗.2个月为1疗程.主要观察治疗前后精子活力、α-中性糖苷酶、精浆果糖及精子形态的变化.结果:治疗组总有效率为86.67%、显效15例、无效8例,对照组总有效率为68.33%、显效9例、无效19例,2组总有效率比较,差异有显著性(P <0.05);治疗后2组患者精浆果糖、糖苷酶及精子形态正常率较治疗前均有显著性升高(P <0.05),但各指标改善情况治疗组均优于对照组,差异有显著性(P <0.05);治疗后2组患者精液参数均高于治疗前(P <0.05),但各指标改善情况治疗组均优于对照组,差异有显著性(P <0.05).结论:补肺壮精方可以明显提高精子活力并改善精子形态.

目的:建立高效液相色谱法测定决明退障口服液中沙苑子苷、芍药苷的含量.方法:(1)测定沙苑子苷的含量.色谱柱为Aglient ZORBAX Eclipse Plus C18柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(V:V=21:79);检测波长为266 nm.(2)测定芍药苷的含量.色谱柱为Diamonsil C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(V:V=14:86);检测波长为230 nm.结果:沙苑子苷标准曲线回归方程为Y=21338 X-29.63,r=0.9996(n=6),进样量在1～32μg范围内线性关系良好,沙苑子苷的转移率为80.31％;芍药苷标准曲线回归方程Y=12467 X-41.99,r=0.9999(n=6),进样量在1～48μg范围内线性关系良好,芍药苷的转移率为64.69％.结论:本方法能够准确测定决明退障口服液中沙苑子苷、芍药苷的含量,为决明退障口服液的质量控制提供依据.

绝经期妇女随着卵巢功能衰退,体内雌激素水平下降明显,出现脂代谢紊乱.现代临床上多采用雌激素替代疗法,长期使用该疗法,易出现多种严重并发症,中医常采用温补肾阳,化浊降脂的治法.课题组前期研究亦表明中药传统温阳药物沙苑子具有良好的调节血脂的作用,而肝脏是体内调节脂肪代谢最主要的器官,在脂代谢紊乱中发挥重要作用.故该实验以观察沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症模型大鼠肝脂以及对肝脏雌激素受体的影响为切入点,探讨沙苑子调脂作用的物质基础及机制,阐明中药调脂的优势和特色.该实验采用双侧卵巢切除术联合6周喂养高脂饲料制备肾阳虚高脂血症大鼠模型,假手术组和模型组灌胃浓度0.9％生理盐水;雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg·kg-1);沙苑子低、中、高剂量组灌胃剂量分别为28.5,57,114 mg·kg-1(相当于正常成人沙苑子生药量的7.5,15,30 g),用药体积按每100 g体质量灌胃1 mL计算,持续给药8周后取材.检测肝脏TG,TC,LDL-C,HDL-C水平、肝脏质量、肝脏指数、子宫质量、子宫指数、血清雌激素水平、FSH水平以及肝脏病理切片、肝脏雌激素受体表达水平.与模型组相比,沙苑子总黄酮高剂量组大鼠肝脏TG,TC,LDL-C水平显著降低(P＜0.001,P＜0.05),肝脏HDL-C水平显著升高(P＜0.05).与模型组相比,雌激素组大鼠血清激素水平显著升高(P＜0.001),血清FSH水平显著降低(P＜0.001).与假手术组相比,PCR结果显示模型组大鼠ERα mRNA表达量显著减少(P＜0.01);与模型组相比,雌激素组大鼠ERα mRNA表达量显著增加(P＜0.001),沙苑子总黄酮中、高剂量组大鼠ERα mRNA表达量均增加(P ＜0.01,P＜0.001).该实验研究结果表明,沙苑子总黄酮是沙苑子发挥调脂作用的主要有效成分,其调脂作用机制可能是通过增强雌激素受体的敏感性或增加雌激素受体的数量,放大雌激素受体后传导的信号,产生调脂作用.