目的 制备经典名方沙参麦冬汤颗粒,并建立沙参麦冬汤颗粒的质量标准.方法 以熵权法及正交实验优选沙参麦冬汤回流提取工艺,与古法煎煮工艺进行对比,并进一步筛选颗粒的成型工艺.采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatogra-phy,HPLC)建立沙参麦冬汤颗粒的指纹图谱和甘草苷、甘草酸的含量测定方法,并考察基准样品(煎液、冻干粉)、颗粒剂生产各环节(提取液、中间体、成品)指纹图谱的相似度和甘草苷的转移率.采用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)对方中麦冬、桑叶、天花粉、白扁豆、甘草 5味药材进行鉴别.结果 优化的回流提取工艺为浸泡 0h,提取两次,加水量分别为 10、8 倍,提取时间分别为 2.0、1.5 h;成型工艺为以 90%乙醇为润湿剂,加入 20%的糊精制软材,经 16 目筛挤压制粒,60℃下干燥,过 80 筛整粒制备沙参麦冬汤颗粒.10批沙参麦冬汤颗粒、基准样品与颗粒生产各环节的指纹谱图相似度均大于 0.90;基准煎液、冻干粉、提取液、中间体、成品的甘草苷转移率分别为75.60%、75.24%、91.67%、90.22%、73.57%.5味中药的TLC特征斑点清晰,且阴性无干扰.结论 指纹图谱相似度结果表明,各批次、各生产环节沙参麦冬汤颗粒的质量相对稳定,且与基准样品保持一致.经回流提取、浓缩、干燥、制粒后,甘草苷的转移率有所下降,颗粒的甘草苷转移率与原方汤剂的较为接近.本研究所建立的沙参麦冬汤颗粒制备工艺稳定可靠,质量标准检测方法简便可行,重复性好,以期为沙参麦冬汤颗粒的规模生产及其质量控制提供参考.

目的:对草莓中甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)检测的两种检测方法进行优化比较，以选出最佳的检测方法，用于草莓中甲肝病毒的检测。方法:向已知阴性冷冻草莓标本表面接种不同浓度的HAV，优化碱性洗脱-PEG浓缩法中的牛肉浸出粉的浓度以及选择最适核酸提取试剂盒，优化直接裂解法中的最适裂解缓冲液体积，对草莓标本进行处理，采用实时荧光定量RT-PCR检测回收的病毒量，应用SPSS26.0对数据进行统计分析，并将优化后的两种方法用于实际标本的检测。结果:优化后的碱性洗脱-PEG浓缩法的牛肉浸出粉浓度选择3%，病毒核酸提取试剂盒选择试剂盒B。优化后的直接裂解法的裂解缓冲液体积选择6 ml。对碱性洗脱-PEG浓缩法、直接裂解法在添加HAV不同浓度水平进行比较，两种方法的HAV病毒回收率分别为21.50±1.06%、5.82±0.01%，结果表明差异具有统计学意义。同时对四个地区共60份草莓标本进行检测，结果均为阴性。结论:优化后的碱性洗脱-PEG浓缩法灵敏度更高，更适用于草莓标本中HAV的检测。

目的:优选消癌平胶囊的最佳水提醇沉工艺。方法:采用正交试验法，以通关藤苷G含量和干浸膏率为指标，考察煎煮次数、煎煮时间、加水量对消癌平胶囊水提取工艺的影响；考察醇沉浓度、相对密度、静置时间对其醇沉工艺的影响。结果:优选的水提工艺为加6倍量的水煎煮3次，每次1.5 h；优选的醇沉工艺为水提液浓缩至相对密度为1.15(60 ℃)，冷却后加入乙醇，使含醇量为70%，静置12 h，除去沉淀。结论:优选的水提醇沉工艺稳定可行、重现性好，可为消癌平胶囊的提取纯化提供参考。

目的 探讨普通电刀钳夹凝闭技术在兔甲状腺切除术中的应用效果及安全性.方法 按照随机数字表法将12只新西兰兔分为钳夹凝闭组和超声刀组,每组6只.钳夹凝闭组兔行普通电刀钳夹凝闭技术离断甲状腺中部,超声刀组兔行超声刀电凝离断甲状腺中部.观察2组兔术后一般情况.取切除后甲状腺组织行苏木精-伊红(HE)染色,光学显微镜下观察热损伤后甲状腺组织病理学,并测定热损伤范围;分别于术后第1、3、7天,抽取2组兔的耳缘静脉血,应用酶联免疫吸附测定法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平;术后第7天,处死2组兔,取残余甲状腺,行HE染色,光学显微镜下观察病理学变化及炎症细胞浸润情况.结果 2组兔术后均存活良好,术区愈合良好,残腔未见明显积液、凝血块,无术后出血、切口感染等并发症.光学显微镜下,甲状腺切缘表面可见明显损伤区域;损伤区域部分细胞结构受损,出现凝固性坏死,部分滤泡破裂,内容物呈固体浓缩和深染;滤泡旁细胞的胞质嗜酸性增加,核固缩、碎裂,甚至核溶解.超声刀组和钳夹凝闭组兔甲状腺组织的热损伤范围分别为(0.72± 0.10)、(0.88±0.11)mm;钳夹凝闭组兔甲状腺组织的热损伤范围显著大于超声刀组(t=-2.740,P＜0.05).术后第1、3、7天,钳夹凝闭组与超声刀组兔血清中CRP、IL-6水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);2组兔术后第1、3、7天血清中CRP水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);2组兔术后第3、7天血清中IL-6水平显著高于术后第1天(P＜0.05);术后第3天与第7天血清中IL-6水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).2组兔的残余甲状腺断面均可见部分甲状腺腺体滤泡萎缩,胶质减少,滤泡上皮增生,间质纤维胶原化、增生,未见明显的炎症细胞浸润.结论 在兔甲状腺切除术中应用普通电刀钳夹凝闭技术离断甲状腺较为安全;在预防热损伤方面,超声刀优于普通电刀钳夹凝闭技术,但普通电刀钳夹凝闭技术导致的甲状腺组织热损伤范围在安全操作范围内.

[目的]观察麻杏石甘汤对铜绿假单胞菌(PA)肺炎大鼠细菌清除效应及炎症因子和中性粒细胞(PMNs)浸润的影响.[方法]选取雄性SD大鼠 120 只,随机分为 5 组(空白组、模型组、西药组、中药组、中西医结合组),每组24 只,采用气管滴注法,建立肺炎模型,空白组和模型组予生理盐水灌胃,西药组肌注头孢他啶,中药组予麻杏石甘汤浓缩煎剂灌胃,中西医结合组采用肌注头孢他啶联合麻杏石甘汤浓缩煎剂灌胃,分 4 个时点(造模后 0、12、24、72 h)处死大鼠,每组每个时点处死6 只,取肺组织及腹主动脉血,观察肺组织病理改变、检测肺组织匀浆细菌计数、髓过氧化物酶(MPO)表达、外周血PMNs、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)水平.[结果]1)造模后各组组内前后时点比较,模型组和药物干预组(西药组、中药组和中西医结合组)肺部炎症均逐渐改善,肺组织细菌计数均逐渐下降,差异具有统计学意义(P<0.05);72 h时点,药物干预组与模型组比较,肺部炎症均明显改善,肺组织细菌计数均降低,差异具有统计学意义(P<0.05).2)外周血PMNs计数,模型组和西药组呈持续上升趋势,中药组和中西医结合组呈先上升后下降趋势,不同时点组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).3)肺组织MPO表达量,模型组呈先上升后下降趋势,药物干预组均呈下降趋势;72 h时点,药物干预组MPO表达量低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).4)炎症因子比较,造模后 72h内,模型组和药物干预组血清IL-10水平均呈上升趋势,72 h时点,中药组和中西医结合组IL-10 水平均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);造模后0、12、24 h,模型组和药物干预组血清TNF-α、IL-8水平均呈上升趋势,24 h后,中药组和中西医结合组TNF-α呈下降趋势,药物干预组IL-8 均呈下降趋势,72 h时点,药物干预组TNF-α水平较模型组均降低,差异具有统计学意义(P<0.05).[结论]麻杏石甘汤可促进机体清除PA,减少肺组织PMNs浸润,调节血清炎症因子TNF-α、IL-8、IL-10水平,减轻肺部炎症损伤.

目的 建立新清毒饮颗粒(蒲公英、金银花、野菊花等组成)的高效液相色谱(HPLC)特征图谱及菊苣酸、甘草酸的含量测定方法,优选新清毒饮颗粒的制备工艺.方法 以新清毒饮特征图谱及菊苣酸、甘草酸保留率为评价指标,通过正交试验优选新清毒饮的提取工艺,开展浓缩工艺研究;通过筛选辅料的种类和用量,开展新清毒饮颗粒的成型工艺研究,并开展 3 批中试研究.结果 建立新清毒饮颗粒的特征图谱及菊苣酸、甘草酸含量测定方法,优选的制备工艺为加水 8 倍量,煎煮 3 次,每次 1 h;80℃下减压浓缩,浸膏加入乳糖和甜菊糖苷适量,一步制粒,分装.中试规模制备的 3 批新清毒饮颗粒中菊苣酸、甘草酸保留率分别为(54.56±1.63)%、(54.96±1.08)%,成品率为(87.47±0.49)%,质量均一,与同批饮片制得汤剂特征图谱相似度高.结论 所优选的制备工艺合理可行、重现性好,可获得与新清毒饮汤剂物质基础相似的颗粒剂.

目的:优选咽痒咳合剂中细辛、厚朴、生姜、紫苏叶挥发油提取工艺和咽痒咳合剂水提工艺.方法:采用Box-Behnken响应面法优化咽痒咳合剂中挥发油的提取工艺.采用HPLC法同时测定咽痒咳合剂中甘草苷、射干苷、迷迭香酸、次野鸢尾黄素、和厚朴酚、厚朴酚的含量,并对6种成分的提取效果进行综合评分,采用层次分析法结合Box-Behnken响应面法优化咽痒咳合剂的水提工艺.结果:咽痒咳合剂最优提取工艺为:按处方比例称取含挥发油药材细辛、厚朴、生姜、紫苏叶,加10倍量水,浸泡lh,提取7 h,提取完挥发油后,水提液另器保存;滤渣与桑叶、制半夏、射干、麻黄、茯苓、桔梗、甘草、蝉蜕8味药材共水提取,加14倍量水,提取2.5 h,提取3次,趁热过滤,滤液与上述水提液、挥发油蒸馏液合并,弃滤渣,滤液浓缩定容至500 mL,即得.结论:采用响应面法建立的模型相对准确,优选的咽痒咳合剂提取工艺方法可行,为咽痒咳合剂的质量控制提供参考.

目的 分别萃取鸡血藤的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂 4 个萃取部位来研究鸡血藤的抗肿瘤活性.方法 对鸡血藤进行提取,得到鸡血藤乙醇提取物后分别经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂进行萃取、浓缩后得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂 4 个部位浸膏,用CCK-8法检测这 4 个不同极性萃取部位对 3 种肿瘤细胞株人胃癌(SGC-7901)、人乳腺癌(MCF-7)、人肝癌(BEL-7404)体外生长的抑制作用,然后计算其半数抑制浓度(IC50)值.结果 4 个萃取物(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂)对 3 种肿瘤细胞株的体外生长均有抑制作用,其中正丁醇萃取部位对 3 种肿瘤细胞的抗肿瘤活性最好,得到正丁醇萃取部位对人胃癌(SGC-7901)、人乳腺癌(MCF-7)、人肝癌(BEL-7404)细胞株的IC50 值分别为 0.08、0.29、0.21 mg/ml.结论 鸡血藤乙醇提取物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂萃取部位均具有一定的抗肿瘤作用,其中正丁醇萃取部位抗肿瘤活性最好,抗肿瘤效果要远远大于石油醚、乙酸乙酯和水溶剂 3 个部位.

目的 探讨ACSL4抑制剂调控铁死亡在草酸钙结石所致小鼠肾损伤及间质纤维化中的肾保护作用及可能机制.方法 15只雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组、ACSL4抑制剂组、对照组各5只,其中模型组腹腔注射乙醛酸水溶液(100 mg/kg)构建草酸钙肾结石小鼠模型,ACSL4抑制剂组腹腔注射乙醛酸水溶液(100 mg/kg)并饮用含Abemaciclib(30 mg/kg)无菌水,对照组腹腔注射等量生理盐水,3组小鼠均连续处理12 d.12 d后检测3组小鼠血清肌酐、尿素水平.取3组小鼠左侧肾脏组织,行组织病理检查Von-Kossa染色、HE染色、Masson染色,观察肾脏晶体沉积、组织损伤及间质纤维化情况;行免疫组织化学检查,观察肾组织ACSL4、α-SMA表达情况;采用Western blot法检测肾组织ACSL4、collagen Ⅰ、vimentin、α-SMA、SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量.结果 (1)模型组血清肌酐[(68.91± 14.18)μmol/L]、尿素[(7.49±1.92)mmol/L]水平均高于对照组[(30.22±6.80)μmol/L、(3.76±0.38)mmol/L]、ACSL4 抑制剂组[(44.10±4.42)μmol/L、(4.61±0.76)mmol/L](P＜0.05),ACSL4 抑制剂组均高于对照组(P＜0.05).(2)对照组肾组织未见草酸钙晶体沉积,肾组织结构基本正常,未见明显炎症细胞浸润及胶原纤维沉积;模型组肾组织大量黑色草酸钙晶体沉积,肾小管上皮细胞肿胀、脱落,细胞核染色质浓缩,管腔扩张、变形,周围炎症细胞浸润,肾间质胶原纤维大量沉积;与模型组相比,ACSL4抑制剂组肾组织草酸钙晶体沉积减少,肾小管上皮细胞肿胀减轻,周围炎症细胞浸润减少,肾间质胶原沉积减少,纤维化程度减轻.(3)对照组肾组织ACSL4和α-SMA呈弱阳性表达;模型组肾组织ACSL4和α-SMA阳性表达较对照组明显增多;ACSL4抑制剂组肾组织ACSL4和α-SMA阳性表达较模型组明显减少.(4)模型组肾组织 ACSL4、collagen Ⅰ、vimentin、α-SMA 蛋白相对表达量(0.93±0.01、1.19±0.06、1.19± 0.08、1.20±0.08)均高于对照组(0.33±0.01、0.53±0.06、0.38±0.04、0.29±0.03)、ACSL4 抑制剂组(0.62±0.04、0.78±0.04、0.70±0.06、0.68±0.02)(P＜0.05),ACSL4抑制剂组均高于对照组(P＜0.05);模型组肾组织 SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量(0.56±0.01、0.39±0.01)均低于对照组(0.92±0.02、0.91±0.01)、ACSL4 抑制剂组(0.77± 0.05、0.74±0.02)(P＜0.05),ACSL4抑制剂组均低于对照组(P＜0.05).结论 ACSL4抑制剂通过下调ACSL4表达,抑制铁死亡,从而减轻草酸钙结石导致的小鼠肾损伤和间质纤维化.

目的 优化舒肝利胆浓缩丸提取工艺.方法 在单因素试验基础上,以浸泡时间、提取时间、提取次数、加液量为影响因素,甘草苷、迷迭香酸、橙皮苷、槲皮素、柴胡皂苷a含量及干浸膏得率的综合评分为评价指标,CRITIC-AHP复合加权法计算权重系数,Box-Behnken响应面法优化提取工艺.结果 最佳条件为药材浸泡45 min后加10倍量水提取3次,每次90 min,综合评分为98.94分.结论 该方法稳定可行,可用于提取舒肝利胆浓缩丸.