目的:对海南地区引种的温郁金进行离体培养,建立离体快繁体系,为工厂化育苗奠定基础.方法:对海南地区温郁金根茎进行预处理,以萌芽为外植体,进行温郁金的初代培养、继代增殖、组培苗的生根和移栽,并对各培养阶段的培养基进行优化.结果:已贮藏半年的温郁金根茎以10 mg/L的GA3浸泡30 min,芽萌发速度明显加快、萌芽率提高;根茎萌芽初代培养污染率低于5％,芽诱导率为100％;以MS+4 mg/L ZT+0.4 mg/L IAA配比的培养基进行继代增殖,增殖系数为2.4;组培生根苗以轻基质网袋容器育苗,移栽成活率为93％以上.结论:以海南引种温郁金根茎萌芽为外植体,建立离体快繁体系,可应用于温郁金组培苗工厂化繁育,保证优质种苗的供应,促进海南温郁金产业的可持续发展.

片姜黄、莪术、醋莪术均来自于姜科植物温郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling的干燥根茎,经不同加工炮制过程形成系列饮片,其中片姜黄为温郁金根茎生品,莪术为蒸煮品,醋莪术为醋制品,3味均为温性、辛味药材,具行气、破血之功效,主治癥瘕.本文通过对片姜黄、莪术、醋莪术主治癥瘕的方剂及成方制剂调研,再结合现有文献发现,随着加工炮制过程的进行,三者活血化瘀功效呈现依次增强的趋势.由此可知,同一基源的饮片经过不同加工炮制过程后,其归经、功能主治、临床功效均出现了规律性的变化,意味着加工炮制可增强温莪术活血化瘀功效.

建立UPLC同时测定温郁金根茎3种炮制品中5种倍半萜类化合物含量的方法,分别构建3种炮制品的UPLC指纹图谱,用于3种温郁金根茎炮制品的质量分析;采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),乙腈-水梯度洗脱,体积流量0.3 mL· min-1;柱温30℃;检测波长214 nm;进样量1μL进行含量测定;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)进行相似度评价,并使用simca-p14.1软件进行HCA,PCA与OPLS-DA分析,寻找3种饮片的差异成分.莪术二酮、莪术醇、吉马酮、呋喃二烯、β-榄香烯分别在10.8 ～ 320 mg·L-1(r =0.999 9),10.36 ～ 259 mg·L-1(r=0.998 1),10.54 ～263.5 mg·L-1(r=0.999 3),30.2 ～755 mg·L-1(r =0.999 6),34.38 ～862 mg·L-1(r =0.999 9)时与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.75％,98.69％,98.63％,99.76％,99.57％,RSD分别为2.7％,1.5％,1.3％,2.5％,0.87％.30批样品相似度＞0.9,表明样品一致性良好,进一步对样品进行模式识别,可以明显归为3类,并分别找出了3种饮片之间的差异色谱峰.结果表明,温郁金根茎经炮制加工后物质基础发生明显变化,为3种饮片临床合理用药及质量标准的制定提供研究依据.

常用传统中药莪术和郁金是中药中多基源现象的典型代表,其基源植物关系错综复杂.本研究以中药姜黄、郁金、莪术的基源植物姜黄(Curcuma longa)、广西莪术(Curcuma kwangsuensis)、温郁金(Curcuma wenyujing)和蓬莪术(Curcuma phaeocaulis)为研究材料,通过多元数据分析方法对比4种药用植物根茎和块根的挥发性代谢物.结果表明,来源于同一物种的根茎和块根的挥发性代谢物种类相似但含量存在差异;植物姜黄根茎(药材姜黄的基源)与其他3种植物根茎的挥发性代谢物差异大;除植物姜黄根茎外的其他3种植物根茎(药材莪术的基源)含有多种共有成分,但3种根茎挥发性代谢物差异均达到了显著水平;4种植物块根(药材郁金的基源)含有多种共有单萜类化合物,但总体挥发性代谢物差异也达到了显著水平.本研究从挥发性代谢物角度揭示了中药姜黄、郁金、莪术基源植物的共有代谢物及代谢差异,能够为这3种中药的临床用药提供参考,具有重要理论意义.

姜黄素为中药材姜黄的主要活性成分,具有利胆、抗炎、抗病毒、降血脂、抗氧化、抗肿瘤和延年益寿等多方面的药理作用,且毒性很低,被广泛应用于食品添加剂、食品色素和医药领域中[1,2],姜黄素及其类化合物[3]的研究巨具价值.1 姜黄的古籍方药研究中药中有姜黄和片姜黄两种药材,两种均为姜科植物,前者为植物姜黄Curcuma longa L.的干燥根茎冬季茎叶枯萎时采挖,洗净,煮或蒸至透心,晒干,除去须根.后者为植物温郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C.Ling的干燥根茎.冬季茎叶枯萎后采挖,洗净,除去须根,趁鲜纵切厚片,晒干.其性味相同,均具有辛、苦,温的特点.归经相同,均归肝、脾经.

[背景]植物内生菌广泛分布在自然界中,具有巨大的潜在开发与应用价值.[目的]对温郁金内生细菌进行分离鉴定,并从中筛选出具有生防潜能的菌株.[方法]采用常规组织分离法对温郁金根茎内生细菌进行分离并利用16S rRNA基因序列分析进行初步鉴定;采用平板对峙法以铁皮石斛炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)为供试菌株对温郁金内生细菌进行拮抗菌的筛选;通过形态学鉴定、生理生化鉴定以及16S rRNA基因序列分析,确定拮抗菌株B-11的分类地位;以6个不同属的植物病原真菌为供试菌株对拮抗菌株B-11的抑菌谱进行测定,并研究其对病原菌菌丝的影响;利用特异性平板和MALDI-TOF-MS检测技术对拮抗菌株B-11产生的抑菌物质进行检测;采用离体叶片接种法研究拮抗菌株B-11对铁皮石斛炭疽病菌的防治效果.[结果]从温郁金根茎中分离得到25株内生细菌菌株,这些细菌菌株分属于12个属,其中芽孢杆菌属为优势菌属,占分离菌株的28％;通过初筛获得8株对C.gloeosporioides有抑菌活性的菌株,其中菌株B-11的抑菌活性最强,经鉴定该菌为贝莱斯芽孢杆菌(Bacllius velezensis);抑菌谱测定发现菌株B-11能够对供试的属于不同属的6种植物病原真菌的菌丝生长具有抑制作用,显微观察发现经对峙培养6d后这6种病原菌的菌丝体出现畸形膨大、分枝增多等现象;特异性平板检测结果表明拮抗菌株B-11能够产生蛋白酶、β-葡聚糖酶和嗜铁素,但不产生几丁质酶;MALDI-TOF-MS检测结果表明拮抗菌株B-11能够产生伊枯草素、丰源素和表面活性素3种脂肽类抗生素,其中伊枯草素的产量最高;离体叶片接种实验表明,拮抗菌B-11的离心去菌发酵液对铁皮石斛炭疽病的防治效率可达64％.[结论]温郁金根茎含有丰富的内生细菌资源,其内生细菌菌株B-11有潜力作为开发抗真菌代谢物和新药物的重要微生物资源.

为了解不同程度的氮沉降对温郁金养分吸收及生长的影响,通过向道地中药材温郁金(Curcuma wenyujin Y.H.Chen et.C.Ling)施加N 0 kg hm2 a1 (CK)、50 kg hm2 a-1 (T50)、100 kg hm-2 a-1 (T100)、150 kg hm2 a-1 (T150)4个浓度梯度的NH4NO3模拟氮沉降,取样测定温郁金的养分含量、生长指标、光合指标等.结果表明:(1)模拟氮沉降对温郁金总氮含量、各部位氮磷钾含量和分配以及N/K值无影响,8、9、12月氮沉降处理的磷含量显著(P＜0.05)低于CK,7、8月T100和T150处理的钾含量显著(P＜0.05)高于CK,T100和T150处理能够增大N/P比值降低P/K值;(2)8、9、10月氮沉降对温郁金地上部分生长和毛根数量具有显著(P＜ 0.05)促进作用,对主根茎无影响,7、8、9月氮沉降使叶绿素a和胡萝卜素含量显著(P＜ 0.05)降低;氮沉降对温郁金的叶绿素b含量和气孔导度(Gs)无影响,但能够显著(P＜0.05)增大光合面积和净光合速率(Pn);氮沉降能够显著(P＜0.05)促进温郁金地上生物量的增长,在9、10月能够显著(P＜0.05)促进温郁金地下和全株生物量的增长,对地上与地下生物量的比值、药材产量以及药用成分无影响.综合看来氮沉降对温郁金营养元素吸收有一定的影响,能够促进植株生长;结果可为亚热带氮沉降加重环境下温郁金田间施肥管理和扩大温郁金在轻度酸雨区的栽培面积提供数据参考.

姜黄为姜科植物姜黄的干燥根茎,片姜黄为姜科植物温郁金的干燥根茎,两者可破血行气、通经止痛,用于胸胁刺痛、胸搏心痛、痛经经闭等症[1].莪术为姜科植物蓬莪术、广西莪术或温郁金(温莪术)的干燥根茎,可行气破血、消积止痛,用于癥瘕痞块、瘀血经闭、胸痹心痛、食积胀痛[1].

采用系统选育方法,选育高产优质的姜黄新品种“川姜黄1号”.2014-2015年在双流、崇州、温江开展连续2年多点试验,对其生物学性状、物候期、农艺性状、产量和品质等指标进行综合考评.结果 表明,“川姜黄1号”与当地对照比较,姜黄(根茎)平均增产20.61％,挥发油平均高出24.17％,姜黄素含量平均提高26.62％;郁金(块根)平均增产54.59％,挥发油平均高出36.28％,总姜黄素含量平均提高25.31％.“川姜黄1号”与“黄丝郁金1号”相比,姜黄(根茎)平均增产123.68％,挥发油平均提高7.69％,姜黄素含量平均高出58.23％;郁金(块根)挥发油平均提高52.82％,总姜黄素含量平均高出38.34％.新品种“川姜黄1号”与当地对照相比具有较好的丰产性,且所产姜黄、郁金的内在品质均较优;与“黄丝郁金1号”相比其所产姜黄的产量明显增加,并且姜黄、郁金的内在品质优,尤其是姜黄的姜黄素及郁金的总姜黄素含量显著高于“黄丝郁金1号”.“川姜黄1号”产量高、内在品质优,稳定性好、适应性强,适宜在成都金马河流域的双流、崇州、温江等地栽培推广.

莪术、郁金、姜黄、片姜黄4种药材功效相近,基原有交叉,药材名与植物名又有所重叠,因此关系比较混乱.现从释名、基原、产地、药用部位、采收加工及炮制等方面对以上4味药材进行本草考证,为含这类药材的不同历史时期经典名方开发提供参考.经考证可知姜黄、郁金、莪术均从唐代开始入药,唐宋时期同时以原植物性状和药材颜色两种标准划分姜黄属药材,以致明末以前一直以Curcuma longa的根茎为郁金,C.wenyujin或C.aromatica的根茎夹杂老姜Zingiber officinale为药材姜黄,药材莪术主流基原则为蓬莪术Curcuma phaeocaulis、广西莪术C.kwangsiensis、温郁金C.wenyujin的根茎.明清两代转用药材产地及性状来鉴别药材,又因战乱等因素导致交通不便,姜黄和郁金的基原及药用部位发生改变.药材郁金自清起基原转为蓬莪术C.phaeocaulis、广西莪术C.kwangsiensis、温郁金C.wenyujin和姜黄C.longa的块根.药材姜黄清代以后基原转为姜黄C.longa根茎.片姜黄或称片子姜黄,始载于《本草纲目》,基原为温郁金C.wenyujin等的根茎纵切片.药材郁金历代以川产为道地,清代扩大药源更改后逐步发展成川、广(桂)、温三大道地产区;姜黄主生江南,广南诸州及西番亦有,清代基原改变后,也以川产为佳;莪术在两广、江南、蜀川均有分布,历代温州为主流,后发展成著名的道地药材温莪术.经考证得知,民国以前本草郁金、姜黄两味药材未提及过需要蒸煮至透心,仅药材莪术需蒸熟使呈色黑而入血分.但解放后的著作及文献却明确指出3种姜黄属药材均需蒸煮,可能是为了便于干燥,以及经过高温蒸煮后不易蛀虫出发,然与古代有所出入.四味药材多生用,郁金、莪术可醋制以增强疗效.