目的:制备 131I、 99Tc m和 177Lu标记的表面修饰了声敏剂原卟啉(PpⅨ)的聚多巴胺(PDA),探讨这些新型化纳米探针在乳腺癌诊断与联合治疗中的价值。 方法:采用水相氧化法合成PDA颗粒，并在其表面分别修饰1层聚乙二醇(PEG)和PpⅨ，合成PDA-PEG-PpⅨ。然后分别进行 131I、 99Tc m和 177Lu标记，检测标记产率与稳定性。进行细胞毒性实验，比较 131I-PDA-PEG-PpⅨ组和游离 131I组小鼠乳腺癌细胞4T1的存活率差异；设PDA-PEG-PpⅨ、PDA-PEG-PpⅨ+光热治疗(PTT)或声动力治疗(SDT)、 131I-PDA-PEG-PpⅨ+PTT或SDT、 131I-PDA-PEG-PpⅨ+PTT+SDT(100 μg/ml PDA-PEG-PpⅨ，925 kBq/ml 131I)组和对照组(DMEM培养基)，比较各组4T1细胞的存活率。经荷4T1乳腺癌BALB/c小鼠尾静脉(29.6 MBq)或瘤内(14.8 MBq)注射 99Tc m-PDA-PEG-PpⅨ后，用γ相机观察肿瘤的显像剂摄取情况。采用两独立样本 t检验和单因素方差分析进行数据分析。 结果:PDA颗粒大小均一，粒径为(160.0±1.5) nm，具有良好的光热转换效果。PDA-PEG-PpⅨ紫外-可见吸收光谱中出现了与PpⅨ (400 nm)相一致的特征峰。在放射性浓度为1.850、3.700和7.400 MBq/ml时， 131I-PDA-PEG-PpⅨ组较游离 131I组细胞存活率降低[(72.18±6.57)%与(86.07±5.17)%、(59.31±9.06)%与(80.85±4.21)%、(42.90±1.30)%与(72.99±5.73)%； t值：3.71、4.82、11.46, P值：0.006、0.001、<0.001]。 131I-PDA-PEG-PpⅨ+PTT+SDT的三模态联合治疗对4T1肿瘤细胞的杀伤效果优于 131I-PDA-PEG-PpⅨ+PTT或SDT治疗[细胞存活率：(10.09±2.50)%、(16.04±2.63)%和(28.65±4.72)%； F＝351.66， P<0.001]。γ显像示， 99Tc m-PDA-PEG-PpⅨ在小鼠体内稳定且能够在肿瘤内有效富集。 结论:成功制备了以PDA为载体的多功能纳米探针。核素标记方法简单有效，稳定性好。 131I-PDA-PEG-PpⅨ对4T1细胞杀伤能力强。 99Tc m-PDA-PEG-PpⅨ在荷4T1乳腺癌小鼠模型内有明显的肿瘤浓聚效果。

目的:了解瘢痕疙瘩与正常皮肤组织中铁含量及转铁蛋白受体1(TfR1)表达水平，在体外构建Erastin诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)铁死亡模型，检测Erastin和铁抑制素-1(Fer-1)对细胞活力、亚铁离子(Fe 2＋)含量及脂质过氧化物、铁死亡和纤维化相关调节因子的影响。 方法:收集2022年3至6月新疆医科大学第一附属医院6例瘢痕疙瘩组织与6例包皮组织，采用组织铁含量试剂盒测定2种组织真皮层中铁含量，Western blotting法检测2种组织中TfR1蛋白表达情况。采用组织块培养法获取原代KFB和正常皮肤成纤维细胞(NFB)，使用Erastin诱导KFB铁死亡模型并用CCK-8法检测不同浓度的Erastin和Fer-1对细胞活性的影响，筛选合适的药物浓度。后续实验分为5组：NFB组、control组、Erastin(0.6 μmol/L)组、Fer-1(1 μmol/L)组、Erastin(0.6 μmol/L)＋Fer-1(1 μmol/L)组，其中后4组采用KFB作为实验对象；采用划痕实验检测细胞迁移能力，荧光探针法和试剂盒检测各组细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和Fe 2＋含量；Western blotting法检测各组细胞中TfR1、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-1)表达水平，免疫荧光检测KFB中TfR1、Gpx4蛋白表达及定位情况。采用GraphPad Prism 9.0统计软件，计量资料以 ± s表示，2组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 P<0.05表示差异具有统计学意义。 结果:与正常皮肤组织比较，瘢痕疙瘩中的铁含量及TfR1蛋白表达均明显较高( P<0.01)。不同浓度Erastin处理的KFB增殖率逐渐下降，IC 50为0.61 μmol/L，Fer-1在0.1～20 μmol/L对KFB无明显毒性。划痕实验显示，control组迁移率显著高于NFB组( P<0.01)；与control组相比，Erastin干预后KFB迁移率明显下降( P<0.01)；与Erastin组相比，Erastin＋Fer-1组KFB迁移明显加快( P<0.01)。control组ROS、MDA水平显著高于NFB组( P<0.01)；与control组相比，Erastin组ROS、MDA水平及Fe 2＋含量显著升高( P<0.01)，而Fer-1组ROS、MDA水平和Fe 2＋含量显著降低( P<0.05)；与Erastin组相比，Erastin＋Fer-1组MDA、ROS水平及Fe 2＋含量均显著降低( P<0.01)。Western blotting显示，与NFB组相比，control组铁死亡指标SLC7A11、GPx4蛋白表达明显减少( P<0.01)，TfR1蛋白表达增加( P<0.01)，纤维化指标α-SMA、COL-1蛋白表达显著增加( P<0.01)；与control组相比，Erastin组SLC7A11表达减少( P<0.01)，TfR1、COL-1表达增加( P<0.01)，而Fer-1组SLC7A11、GPx4表达增加( P<0.01)，TfR1、α-SMA、COL-1表达显著减少( P<0.01)；与Erastin组相比，Erastin＋Fer-1组GPx4、SLC7A11表达增加( P<0.01)，TfR1、α-SMA、COL-1表达显著减少( P<0.01)，提示Fer-1能够逆转Erastin诱导的KFB铁死亡和促纤维化作用。免疫荧光显示，GPx4在细胞核及细胞质中均有表达，与control组相比，Fer-1增加了KFB中GPx4的荧光强度( P<0.01)；与Erastin组相比，Erastin＋Fer-1组中GPx4的荧光强度显著增加( P<0.01)；TfR1主要在细胞质中表达，与control组相比，Erastin增加了KFB中TfR1的荧光强度( P<0.05)，而Fer-1组中TfR1荧光强度显著降低( P<0.01)；与Erastin组相比，Erastin＋Fer-1组TfR1荧光强度显著降低( P<0.01)。 结论:瘢痕疙瘩中铁过载且游离铁增多，Erastin可诱导KFB铁死亡并加重瘢痕疙瘩纤维化，Fer-1可逆转Erastin诱导形成的氧化损伤及铁蓄积，有效抑制KFB发生铁死亡和瘢痕疙瘩纤维化。

目的 建立双光子显微镜下可视化胶质瘤、壁细胞和血管的活体自发荧光的基因小鼠模型并进行评价.方法 以PDGFRβ-Cre+/-:Rosa26-tdTomato+/-基因工程小鼠为观察壁细胞和血管结构的载体,接种GL261-CFP小鼠胶质瘤细胞并对颅骨进行透明化,通过双光子显微镜动态跟踪观察胶质瘤增殖侵袭过程中血管与壁细胞的动态变化.结果 通过基因鉴定证实 PDGFRβ-Cre+/-:Rosa26-tdTomato+/-基因工程小鼠成功繁育.对比C57BL/6 小鼠,基因工程小鼠的形态外观和繁殖等无显著性差异,组织苏木素-伊红(HE)染色切片分析显示脏器发育无异常.Tamoxifen诱导下基因工程小鼠的Cre重组酶活性至第 7 天作用完全.接种GL261-CFP后观察到胶质瘤增殖侵袭的动态过程及肿瘤内血管形态结构紊乱、游离壁细胞增多.结论 成功构建了荧光可视化壁细胞的基因工程小鼠,分别利用异硫氰酸荧光素-葡聚糖标记血管和青色荧光标记肿瘤细胞,使用玻璃圆片与固定环替代小鼠颅骨,实现了活体状态下长期稳定地动态跟踪小鼠接种脑肿瘤后血管及血管支持细胞的形态结构变化,为研究脑胶质瘤提供了病理可视化的动物模型.

目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)7在非酒精性病脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病中的作用.方法 通过喂食高脂饮食(high-fat diet,HFD)建立NAFLD小鼠模型,并通过向肝脏注射腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的短发夹(sh)-IGFBP7敲除IGFBP7.C57BL/6小鼠随机分为4组(每组n=6):正常饮食组(ND)、高脂饮食组(HFD)、HFD空载体注射液组(HFD/AAV-null)、HFD AAV-sh-IGFBP7注射液组(HFD/AAV-sh-IGFBP7).ND组给与正常饲料12周,HFD组、HFD/AAV-null组、HFD/AAV-sh-IGFBP7组给与高脂饲料4周,之后HFD/AAV-sh-IGFBP7组、HFD/AAV-null组小鼠分别注射2 × 1011 AAV-sh-IGFBP7或AAV-null的基因组拷贝,继续喂食8周.测定各组小鼠体重、肝湿重、肝指数,通过生化分析仪检测各组小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、游离脂肪酸(FFA)、甘油及肝脏TG.采用实时定量PCR、Western blot检测IGFBP7在各组中mRNA,蛋白表达水平及脂肪生成相关的固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding protein,SREBP)1c、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)、乙醜辅酶 a 羧化酶(acetyl-coa carboxylase,ACC)1 和硬脂醜辅酶 a 去饱和酶(stearoyl coA desaturase,SCD)1的mRNA表达水平.结果 与ND组相比,HFD组体重、肝湿重、肝指数及血清中ALT,AST,FFA,TG,TC,甘油、肝TG水平水平显著增加,差异均具有统计学意义(P＜0.05),而HFD/AAV-sh-IGFBP7组体重、肝湿重、肝指数及血清中ALT,AST,FFA,TG,TC,甘油、肝TG水平增加均少于HFD/AAV-null组的小鼠,差异均具有统计学意义(P＜0.05).与ND组对比,HFD组小鼠肝脏中IGFBP7mRNA及蛋白的表达水平升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).与 HFD/AAV-null组相比,HFD/AAV-sh-IGFBP7组小鼠肝脏中IGFBP7蛋白表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.01).与ND组相比,HFD组小鼠肝脏组织中SREBP-1c,FASN,ACC1和SCD1的mRNA表达水平均明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).而与HFD/AAV-null组相比,HFD/AAV-sh-IGFBP7组SREBP-1c,FASN,ACC1和SCD1的mRNA表达水平均降低,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 IGFBP7在NAFLD的发展过程中参与了肝脏脂肪变性,下调IGFBP7可减轻肝脏脂质积累,对NAFLD的发病机制具有保护作用,这可能是一种新的治疗NAFLD的药物.

目的:了解瘢痕疙瘩与正常皮肤组织中铁含量及转铁蛋白受体1(TfR1)表达水平,在体外构建Erastin诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFB)铁死亡模型，检测Erastin和铁抑制素-1(Fer-1)对细胞活力、亚铁离子（Fe 2+）含量及脂质过氧化物、铁死亡和纤维化相关调节因子的影响。 方法:收集2022年3至6月新疆医科大学第一附属医院6例瘢痕疙瘩组织与6例包皮组织，采用组织铁含量试剂盒测定2种组织真皮层中铁含量，Western blot法检测2种组织中TfR1蛋白表达情况。采用组织块培养法获取原代KFB和正常皮肤成纤维细胞（NFB)，使用Erastin诱导KFB铁死亡模型并用CCK-8法检测不同浓度的Erastin和Fer-1对细胞活性的影响，筛选合适的药物浓度。后续实验分为5组：NFB组、control组、Erastin(0.6 μmol/L）组、Fer-1 (1 μmol/L）组、Erastin(0.6 μmol/L) +Fer-1(1 μmol/L)组，其中后4组采用KFB作为实验对象；采用划痕实验检测细胞迁移能力，荧光探针法和试剂盒检测各组细胞中丙二醛（MDA)、活性氧（ROS)和Fe 2+含量；Western Blot法检测各组细胞中TfR1、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白（COL-1)表达水平，免疫荧光检测KFB中TfR1、Gpx4蛋白表达及定位情况。采用GraphPad Prism 9.0统计软件，计量资料以 ± s表示，2组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 P< 0.05表示差异具有统计学意义。 结果:与正常皮肤组织比较,瘢痕疙瘩中的铁含量及TfR1蛋白表达均明显较高( P< 0.01)。不同浓度Erastin处理的KFB增殖率逐渐下降，IC 50为0.61 μmol/L,Fer-1在0.1~20 μmol/L对KFB无明显毒性。划痕实验显示，control组迁移率显著高于NFB组( P < 0.01)；与control组相比，Erastin干预后KFB迁移率明显下降( P<0.01)；与Erastin组相比，Erastin+Fer-1组KFB迁移明显加快( P<0.01)。与NFB组相比，control组ROS、MDA水平显著升高( P < 0.01)；与control组相比，Erastin组ROS、MDA水平及Fe 2+含量显著升高( P<0.01)，而Fer-1组ROS、MDA水平和Fe 2+含量显著降低( P< 0.01)；与Erastin组相比, Erastin + Fer-1组MDA、ROS水平及Fe 2+含量均显著降低( P<0.01)。Western Blot显示，与NFB组相比，control组铁死亡指标SLC7A11、GPx4蛋白表达明显减少( P<0.01或 P<0.05) ,TfR1蛋白表达增加( P<0.01)，纤维化指标α-SMA、COL-1蛋白表达显著增加( P< 0.01)；与control组相比，Erastin组SLC7A11表达减少( P<0.01) ,TfR1、COL-1表达增加( P<0.01) ,而Fer-1组SLC7A11、GPx4表达增加( P < 0.01),TfR1、α-SMA、COL-1表达显著减少( P < 0.01)；与Erastin组相比，Erastin+Fer-1组GPx4、SLC7A11表达增加( P<0.01) ,TfR1、α-SMA、COL-1表达显著减少( P<0.01)，提示Fer-1能够逆转Erastin诱导的KFB铁死亡和促纤维化作用。免疫荧光显示, GPx4在细胞核及细胞质中均有表达，与control组相比，Fer-1增加了KFB中GPx4的荧光强度( P< 0.01)；与Erastin组相比，Erastin+Fer-1组中GPx4的荧光强度显著增加( P<0.01) ;TfR1主要在细胞质中表达，与control组相比，Erastin增加了KFB中TfR1的荧光强度( P< 0.05)，而Fer-1组中TfR1荧光强度显著降低( P<0.01)；与Erastin组相比, Erastin + Fer-1组TfR1荧光强度显著降低( P< 0.01)。 结论:瘢痕疙瘩中铁过载且游离铁增多，Erastin可诱导KFB铁死亡并加重瘢痕疙瘩纤维化，Fer-1可逆转Erastin诱导形成的氧化损伤及铁蓄积，有效抑制KFB发生铁死亡和瘢痕疙瘩纤维化。

背景:骨肉瘤肿瘤干细胞激活最显著的转录因子是EZH2,据报道沉默EZH2可以抑制骨肉瘤细胞生长.研究证实,牛血清白蛋白-壳聚糖纳米粒是一种具有优异生物相容性和生物降解性的药物传递载体,且白蛋白载体可提供靶向肿瘤的药物递送功能.目的:探讨负载EPZ6438(EZH2抑制剂)血清白蛋白-壳聚糖纳米粒抑制骨肉瘤的效应及机制.方法:①制备未负载与负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒,检测载EPZ6438血清白蛋白-壳聚糖纳米粒的药物包载率及药物释放率.②将MG-63细胞分4组培养,分别加入PBS(对照组)、血清白蛋白-壳聚糖纳米粒浸提液(空白纳米粒组)、EPZ6438溶液(游离药物组)及负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒浸提液(载药纳米粒组),培养3 d后,利用流式细胞仪检测细胞凋亡、RT-PCR法检测细胞caspase3 mRNA的表达.③取12只裸鼠,通过腋下注射MG-63细胞悬液建立皮下荷瘤小鼠模型,造模成功后随机分4组干预,分别向肿瘤组织内注射生理盐水(对照组)、血清白蛋白-壳聚糖纳米粒溶液(空白纳米粒组)、EPZ6438溶液(游离药物组)及负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒溶液(载药纳米粒组),每组3只.注射7 d后,观察肿瘤体积及肿瘤组织冰冻切片TUNEL染色.结果与结论:①载药纳米粒的药物包载率约为8.8%,该纳米粒在纯水中具有良好的药物释放效果,24 h药物释放量为(34.72±1.93)μg,72 h为(48.58±1.10)μg,120 h为(49.18±1.24)μg,168 h(50.25±1.13)μg,药物释放在120 h到达平台期,释放率约为97.9%;②与MG-63细胞培养3 d后,对照组、空白纳米粒组细胞凋亡率低于游离药物组、载药纳米粒组(P<0.001),caspase3 mRNA的表达低于游离药物组、载药纳米粒组(P<0.000 1);③注射7 d后,载药纳米粒组裸鼠肿瘤体积小其他3组(P<0.05),肿瘤组织TUNEL染色阳性细胞比率高于其他3组(P<0.000 1);④结果显示,负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒可通过诱导肿瘤细胞的凋亡来抑制骨肉瘤生长.

目的 探索黄芪建中汤含药血清对异丙肾上腺素(ISO)诱导的3T3-L1脂肪细胞脂解及棕色化模型的抑制作用及与脑和肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白-1(BMAL1)调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷反应成分结合蛋白(CREB)信号通路的关系.方法 制备空白及黄芪建中汤含药血清.体外培养3T3-L1脂肪细胞,诱导其分化成熟后分为对照组、空白组、2.5％含药血清组、5％含药血清组、10％含药血清组.除对照组外,其余各组加入10 mmol/L ISO以构建脂肪细胞过度脂解及棕色化模型.采用油红O染色法和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测各组脂肪细胞内脂滴阳性面积比及其水解后产物的含量,采用实时荧光PCR法和蛋白质印迹法检测各组脂肪细胞脂解及棕色化相关基因及蛋白的表达,以筛选出最优体积分数的含药血清进行下一步慢病毒转染实验.取分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,分别加入BMAL1小干扰RNA、空载体小干扰RNA,构建沉默BMAL1的3T3-L1脂肪细胞.将细胞分为空载体组、含药血清空载体组、BMAL1沉默组和含药血清BMAL1沉默组.各组加入ISO孵育后,油红O染色法检测各组脂肪细胞内脂滴阳性面积比;ELISA法检测各组脂肪细胞内甘油三酯(TG)、cAMP及培养基中游离脂肪酸(FFA)的含量;蛋白质印迹法检测PKA、CREB的蛋白表达;实时荧光PCR法检测激素敏感性脂肪酶(HSL)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)、线粒体解偶联蛋白1(UCP1)和T-box转录因子1(TBX1)的mRNA表达.结果 与2.5％及5％含药血清组比较,10％含药血清组细胞内cAMP含量及培养基中FFA含量降低(均P<0.05)、TG含量升高(P<0.05)、P KA蛋白表达降低(P<0.05)、HSL及ATGL mRNA表达降低(均P<0.05).慢病毒转染3T3-L1脂肪细胞后,与空载体组比较,BMAL1沉默组中BMAL1蛋白表达降低(P<0.05),表明BMAL1沉默的脂肪细胞成功构建.与空载体组比较,BMAL1沉默组细胞内脂滴阳性面积比及TG含量降低(均P<0.05),培养基中FFA含量、细胞内cAMP含量和PKA、CREB蛋白表达升高(均P<0.05),HSL、ATGL、UCP1和TBX1 mRNA表达量升高(均P<0.05).与BMAL1沉默组比较,含药血清BMAL1沉默组细胞内脂滴阳性面积比及TG含量升高(均P<0.05),培养基中FFA含量、细胞内cAMP含量、PKA和CREB蛋白表达降低(均P<0.05),HSL、ATGL、UCP1及TBX1的mRNA表达降低(均P<0.05).结论 黄芪建中汤含药血清可以抑制ISO诱导的3T3-L1脂肪细胞脂解及棕色化,其机制可能通过介导BMAL1调控cAMP/PKA/CREB信号通路有关.

目的 研究无载体CTC-Met纳米药物对于急性缺血性脑卒中(AIS)的保护作用.方法 通过酯化反应合成并表征ROS响应性CTC分子,然后利用反溶剂沉淀法制备CTC-Met纳米药物,并对其脑靶向、安全性和抗氧化性进行检测;以雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,构建小鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,灌注同时ip给予10 mg·kg-1姜黄素、二甲双胍和CTC-Met纳米药物,分别评价各组小鼠TTC脑梗死体积、神经功能障碍及皮层神经元尼氏体形态完整性;采用N2a细胞系构建OGD/R体外脑缺血模型后给予1 μmol·L-1 姜黄素、二甲双胍和CTC-Met纳米药物,检测GPX4、FTH1和脂质过氧化活动改变.结果 1757 cm-1红外光谱和12.2 ppm核磁信号变化及质谱结果提示CTC的成功合成,引入二甲双胍构建CTC-Met无载体纳米药物,电镜下为100 nm球形,带有+(35±5)mV;相较游离姜黄素,CTC-Met纳米药物无溶血风险(P＜0.01),且能高效地以浓度依赖方式清除ABTS和DPPH自由基(P＜0.01),二甲双胍的引入使CTC-Met无载体纳米药物有更高的血脑屏障(BBB)穿透效率(P＜0.01)和神经元靶向性.在MCAO小鼠实验中,相比姜黄素和二甲双胍单体药物,CTC-Met纳米药物显著降低脑梗死体积(P＜0.01)、减轻小鼠神经功能障碍(P＜0.01),且改善皮质神经元形态(P＜0.01);在OGD/R细胞实验中,我们发现CTC-Met纳米药物能够逆转AIS诱导的神经元铁死亡(P＜0.01)、增强脂质过氧化功能(P＜0.01).结论 构建的无载体CTC-Met纳米药物能安全、高效地清除自由基,有效靶向神经元,按需释放药物以逆转AIS诱导的神经元铁死亡.二甲双胍的引入对姜黄素的神经保护作用起到"减压增效"的效果.

目的:建立6B型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合物(PS6 B-TT)中游离多糖的测定方法,并对方法进行验证.方法:采用脱氧胆酸钠-盐酸沉淀法(NaDC/HCl),取不同浓度的载体蛋白破伤风类毒素(TT),加入1％ NaDC溶液混匀,离心后用Lowrry法检测上清中蛋白含量,以确定载体蛋白沉淀范围;用不同离子强度的氯化钠溶液稀释游离多糖对照品与TT的混合物,NaDC沉淀并离心后以蒽酮-硫酸法测定上清中多糖含量、计算回收率,确定游离多糖的最佳分离条件;以NaDC/HCl沉淀6B型多糖测定标准品并绘制标准曲线,与未经NaDC/HCl沉淀的标准品相比较,确定NaDC对蒽酮硫酸法测定结果的影响;由此建立NaDC/HCl沉淀法结合蒽酮硫酸法测定6B型结合物中游离多糖含量的方法,并对方法的专属性、准确度及精密度进行验证.结果:此方法沉淀载体蛋白浓度应控制在500μg· mL-以下;选择终浓度0.3 mol·L-1氯化钠溶液作为6B型肺炎球菌结合物中游离多糖测定的稀释液;NaDC/HCl沉淀法对蒽酮硫酸法测定多糖含量基本无影响;游离多糖对照品与载体蛋白TT混合物经建立的NaDC/HCl法沉淀后多糖及蛋白回收率分别为98.25％及0;游离糖添加试验回收率均在90％ ～100％;3批结合物游离糖含量测定值其试验内及试验间CV值均在10％以下.结论:本试验建立的NaDC/HCl沉淀法结合蒽酮硫酸法可有效分离6B型游离多糖与多糖蛋白结合物,并能够准确、稳定地测定结合物中的游离多糖含量.

铁是维持细胞生长繁殖及代谢活动所必需的元素之一,机体内绝大多数游离铁是由转铁蛋白运输传递.转铁蛋白(Tf)是血浆中主要的结合并转运铁的β球蛋白,主要负责运载由胃肠道吸收的铁和由红细胞降解释放的铁.Tf的金属离子结合位点由2个酪氨酸、1个天冬氨酸和1个组氨酸残基构成.Tf除了转运铁外同时还具有许多生理生化功能,如抗菌活性、促细胞生长分化及细胞保护等,是一类多功能蛋白.此外,研究发现Tf还被发现可作为一种新型的药物主动靶向载体,在肿瘤靶向治疗领域中具有广阔的应用前景.该文从Tf的结构特性、多样性、生物学功能及临床应用等方面对Tf进行系统性综述.