目的:探讨胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT）中滋养外胚层细胞活检对冻融胚胎移植后妊娠早期血清β-人绒毛膜促性腺激素（β-human chorionic gonadotropin，β-hCG）水平及围产期结局的影响。方法:回顾性队列研究分析2017年1月至2021年12月期间于郑州大学第三附属医院生殖中心行冻融胚胎移植患者的临床资料，根据患者助孕方式分为两组：PGT组308例和卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）组802例。经1∶2倾向评分匹配后，得到PGT组300例和ICSI组571例。比较匹配前后两组患者一般资料、胚胎移植后第14天血清β-hCG水平及围产期结局，采用多因素线性回归校正混杂因素后，分析滋养外胚层细胞活检对冻胚移植后妊娠早期血清β-hCG水平及围产期结局的影响。结果:匹配前PGT组女方年龄［（31.2±4.1）岁］明显高于ICSI组［（30.4±4.3）岁， P=0.007］，PGT组抗苗勒管激素水平［（4.38±3.62）μg/L］及移植日内膜厚度［（9.1±1.6）mm］明显小于ICSI组［（4.87±3.78）μg/L， P=0.049；（9.6±1.6）mm， P<0.001］；匹配后两组患者一般资料差异均无统计学意义（均 P>0.05）。匹配前后两组患者临床妊娠患者、早期流产患者及活产患者的胚胎移植后第14天血清β-hCG水平差异均无统计学意义（均 P>0.05）；匹配前后两组生化妊娠率、临床妊娠率、早期流产率及活产率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。经多因素线性回归分析显示，是否行PGT对血清β-hCG水平没有影响（ P=0.494），女方体质量指数及移植囊胚类型对β-hCG水平有影响（均 P<0.001）。两组妊娠期高血压疾病发生率、妊娠期糖尿病发生率、妊娠期甲状腺功能减退发生率、胎膜早破发生率、前置胎盘发生率、剖宫产率、早产率、低出生体质量儿率、巨大儿率、性别比、新生儿出生体质量、新生儿身长与新生儿出生缺陷率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:冻融胚胎移植前行滋养外胚层细胞活检不影响妊娠早期血清β-hCG水平，PGT不增加母婴不良并发症发生风险。

目的:探讨基于二代测序(next generation sequencing，NGS)的植入前遗传学检测(preimplantation genetic test，PGT)对于染色体易位携带者实现正常生育的意义。方法:对71对染色体易位携带夫妇(60例为平衡易位，11例为罗氏易位)行PGT周期的超促排卵和卵母细胞浆内单精子注射，培养至囊胚阶段，活检囊胚滋养外胚层细胞行全基因组扩增(whole genome amplification，WGA)，用NGS技术对扩增产物进行基因组序列分析，选择正常或平衡胎胚植入，并对检测结果和胚胎着床、妊娠情况进行分析。结果:71对夫妇共进行92个周期，活检胚胎303枚，301枚囊胚活检成功，成功诊断胚胎287个，诊断成功率为95.3%(287/301)，获得可供移植的整倍体胚胎共85个，其中18个周期无可用胚胎，周期取消率19.5%。平衡易位组获得整倍体胚胎67个，罗氏易位组获得整倍体胚胎18个，PGT后胚胎着床率分别为89.3%(42/47)和88.8%(8/9)，早期流产率分别为25.5%(12/47)和22.2%(2/9)，继续妊娠率＋活产率分别为63.8%(30/47)和66.6%(6/9)，产前诊断结果与PGT结果一致。结论:基于NGS的PGT可准确的对胚胎进行染色体病诊断，避免反复流产和非意愿性终止妊娠，并获得理想的临床妊娠率。

利用滋养外胚层（TE）细胞活检对植入前胚胎进行遗传学筛查已经有20多年的历史，但其在选择整倍体胚胎方面的优势仍然存在争议。近年来，胚胎废弃培养液中游离脱氧核糖核酸（cfDNA）的发现，为获得胚胎的细胞遗传学信息提供了一种潜在的无创替代方法。有研究报道胚胎cfDNA分析与TE、内细胞团（ICM）和整个囊胚（WB）的活检结果高度一致。然而，在cfDNA成为可靠的胚胎基因组信息来源应用于临床之前，仍然面临很多挑战。本文综述了基于培养液中的cfDNA的无创胚胎植入前遗传学检测（niPGT）的产生和现状，并对其局限性和未来前景进行了探讨，为niPGT应用于临床提供参考。

目的:初步探讨体外受精（ in vitro fertilization，IVF）治疗中影响嵌合体胚胎发生的相关因素。 方法:采用病例对照研究回顾性分析了郑州大学第三附属医院生殖医学中心2017年1月至2020年12月期间的579个胚胎植入前遗传学检测（preimplantation genetic testing，PGT）周期的2252个囊胚移植患者的临床资料。使用二代测序（next generation sequencing，NGS）技术进行活检细胞的分析，根据分析结果将所有的胚胎分为嵌合体组及非嵌合体组。嵌合类型包括整倍体-非整倍体嵌合，非整倍体-非整倍体嵌合和复杂嵌合。比较两组胚胎来源的人群特征及实验室相关参数，对嵌合体发生率做单因素及多因素分析以评价影响嵌合体胚胎发生的相关因素。结果:905个胚胎为整倍体（40.2%），923个为非整倍体（41.0%），424个为嵌合体（18.8%）。共有228个胚胎为整倍体-非整倍体嵌合（10.1%），59个（2.6%）为非整倍体-非整倍体嵌合，137个（6.1%）为复杂嵌合。共有4个遗传检测机构进行NGS技术的测序，嵌合体率波动在7.6%~26.2%。调整男女方年龄、男方精子质量、促排卵方案、试剂类型、PGT的适应证、不同的活检操作者及囊胚发育时期后显示，囊胚滋养外胚层细胞评分（C级比A级， P=0.014）及遗传检测机构（机构2比机构1前期， P<0.001；机构1后期比机构1前期， P<0.001）对嵌合体的发生有显著影响。与滋养层细胞（trophectoderm，TE）评分为A级相比，C级发生嵌合体的概率升高66%（a OR=1.66，95% CI=1.11~2.50， P=0.014），与机构1前期相比，机构2的嵌合体发生率是前者的2.28倍（a OR=2.28，95% CI=1.71~3.04， P<0.001），机构1后期是机构1前期的2.17倍（a OR=2.17，95% CI=1.41~3.34， P<0.001）。 结论:IVF技术中的嵌合体胚胎的发生率与NGS检测机构及滋养外胚层细胞质量相关。

目的:探讨单精子测序技术在脊髓性肌肉萎缩症(SMA)家系胚胎植入前单基因遗传病检测(PGT-M)中的应用价值。方法:选取2020年6月于江西省妇幼保健院就诊的一个生育过2例SMA患儿(均已夭折)的家系作为研究对象，利用机械制动法分离11份单精子样本并进行全基因组扩增，采用荧光定量PCR与Sanger测序法对扩增产物进行 SMN1基因变异检测。选取女方、女方父母和男方的基因组DNA，以及1份携带和2份未携带 SMN1基因变异的单精子扩增产物，在变异位点上下游2 Mb区域内选取100个单核苷酸多态性位点，设计引物进行靶向捕获高通量测序，通过连锁分析确定男女双方与 SMN1基因致病变异连锁的染色体单体型。经卵胞浆内单精子显微注射技术受精获取囊胚，活检滋养外胚层细胞，经全基因组扩增后行高通量测序检测胚胎的单体型，判断胚胎的致病性。对野生型胚胎进行染色体非整倍体检测，选择 SMN1基因型为正常的整倍体胚胎进行移植。于孕18周行羊水穿刺产前诊断，确认胎儿的基因型。新生儿出生后进行跟踪随访。 结果:基因检测发现夫妇双方均携带 SMN1基因第7、8外显子缺失杂合变异，其中女方携带的变异遗传自其父亲，男方为新发变异。利用单精子测序技术成功构建出男方单体型。PGT检测发现5枚胚胎携带 SMN1基因杂合变异，4枚为野生型，其中3枚为整倍体。移植1枚野生型整倍体胚胎，妊娠中期羊水检测证实胎儿未携带 SMN1基因第7、8外显子缺失变异。新生儿足月出生，随访9个月未见异常。 结论:应用单精子测序技术为1对夫妻双方均携带 SMN1基因第7、8外显子杂合缺失变异且男方为新发变异的夫妇构建出男方致病变异的连锁单体型，并为该夫妇提供PGT检测，成功避免了SMA患儿的出生。

目的:分析基于二代测序（NGS）技术的胚胎植入前非整倍体遗传学检测（PGT-A）中嵌合体胚胎检出率的相关因素，以及嵌合体胚胎移植的妊娠结局。方法:通过回顾性观察研究收集重庆市妇幼保健院生殖医学中心2019年1月至2023年5月期间的745个PGT-A周期2 850个囊胚患者的临床资料。使用NGS技术对活检细胞进行检测，根据检测结果将胚胎分为整倍体胚胎、非整倍体胚胎及嵌合体胚胎，比较患者的临床特征及实验室相关参数对嵌合体胚胎检出率的影响。分析比较同期98个嵌合体胚胎移植周期和486个整倍体胚胎移植周期的妊娠结局，包括临床妊娠率和活产率。结果:在2 850个囊胚中，1 489个囊胚为整倍体（52.2%，1 489/2 850），917个（32.2%，917/2 850）为非整倍体，444个（15.6%，444/2 850）为嵌合体；嵌合体中，有245个（55.2%，245/444）胚胎为染色体片段嵌合，118个（26.6%，118/444）为整条染色体嵌合，81个（18.2%，81/444）为复杂嵌合。不同遗传检测机构的嵌合体检出率波动范围为13.5%~27.0%。女方年龄、抗苗勒管激素水平、PGT-A指征、促排卵方案、促性腺激素（Gn）用量、Gn天数、内细胞团分级、滋养外胚层细胞分级、遗传检测机构和胚胎活检时间在整倍体、非整倍体和嵌合体胚胎间分布均有显著差异（ P均 <0.05）。多因素分析显示，滋养外胚层细胞分级和遗传检测机构与嵌合体检出率明显相关，与滋养外胚层细胞分级为A级相比，分级为B-级者（ OR=1.59，95% CI为1.04~2.44， P=0.033）嵌合体检出率明显升高；与检测机构a相比，c机构的嵌合体检出率明显升高（ OR=2.89，95% CI为2.10~3.98， P<0.001）。嵌合体胚胎移植的临床妊娠率（分别为51.0%、65.2%， P=0.008）和活产率（分别为39.4%、53.2%， P=0.017）明显低于整倍体胚胎移植者；在校正了女方年龄、PGT-A指征、滋养外胚层细胞分级和胚胎体外培养天数后，嵌合体胚胎移植者的临床妊娠率（ OR=0.52，95% CI为0.32~0.83， P=0.007）和活产率（ OR=0.50，95% CI为0.31~0.83， P=0.007）均明显低于整倍体胚胎移植者。 结论:滋养外胚层细胞分级和遗传检测机构与嵌合体胚胎检出率有关。与整倍体胚胎移植相比，嵌合体胚胎移植的临床妊娠率和活产率均明显降低。对于无整倍体胚胎可移植的夫妇，在遗传咨询中可根据嵌合比例和嵌合类型等适当推荐移植嵌合体胚胎，以期获得最优妊娠结局。

目的:探讨极体测序技术在Van der Woude综合征患者胚胎植入前单基因遗传病检测中的应用价值。方法:对1例因 IRF6基因新发变异导致的Van der Woude综合征女性患者，应用极体测序技术进行胚胎植入前遗传学检测。6枚卵经卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）受精后，分别顺序活检第一极体、第二极体和囊胚滋养外胚层细胞。活检细胞经全基因组扩增后，利用PCR联合Sanger测序的方法检测极体和胚胎的致病变异携带状态，推断对应胚胎的致病性。为预防因囊胚培养失败造成无可移植胚胎的情况，在囊胚形成前对1枚致病性低的优质胚胎进行玻璃化冷冻。此外，通过在夫妇双方以及特定基因型的极体和胚胎样本中对变异位点及其上下游1M区域内的175个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）位点进行靶向捕获高通量测序，连锁分析构建单体型。选择致病性低的胚胎移植，成功妊娠后进行产前诊断以及跟踪随访。 结果:成功获得第一极体和第二极体各6枚，其中11枚极体的变异位点检测成功。6枚胚胎中，1枚预测致病性低的胚胎在患者知情同意后于第4日（day 4，D4）玻璃化冷冻；1枚胚胎成功发育至囊胚，但致病性高；4枚胚胎囊胚培养失败。连锁分析成功构建出与致病变异紧密连锁的SNP单体型，胚胎单体型分析与Sanger测序结果吻合。移植致病性低的D4期冷冻胚胎，成功妊娠后，患者夫妇拒绝有创产前诊断。出生后新生儿随访未发现唇腭裂，脐血基因检测不携带致病变异。结论:本研究利用卵母细胞极体测序的检测方法，为1例因 IRF6基因新发变异导致的Van der Woude综合征女性患者进行胚胎植入前单基因遗传病检测，成功阻断了该病向子代传递。

目的:探讨胚胎植入前遗传学检测(PGT)中滋养外胚层细胞活检对新生儿出生体质量及围产期结局的影响.方法:回顾分析2017 年1 月至2021 年12 月在郑州大学第三附属医院生殖医学中心行冻胚移植(FET)并获得单胎活产患者的临床资料.纳入行胚胎植入前行遗传学检测的患者 221 例(PGT组)和同期行卵胞质内单精子注射(IC-SI)的患者756 例(ICSI组),利用倾向性评分匹配(PSM)进行1:2 匹配后得到PGT组191例和ICSI组363 例,比较匹配前后两组患者基线数据及新生儿出生体质量等围产期及新生儿结局的差异,采用多因素线性回归分析单胎活产新生儿出生体质量的影响因素.结果:匹配前两组患者的孕产次、不孕年限及移植日内膜厚度比较,差异有统计学意义(P<0.05),匹配后两组患者基线数据差异均无统计学意义(P均>0.05).匹配前后,两组的妊娠期高血压疾病、妊娠期糖尿病、胎膜早破、前置胎盘、剖宫产率、分娩孕周、新生儿出生体质量及新生儿身长比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).多因素线性回归分析结果显示,滋养外胚层细胞活检与新生儿出生体质量无关,女方BMI、移植日子宫内膜厚度、分娩孕周和新生儿性别显著影响新生儿出生体质量(P均<0.05).结论:PGT中滋养外胚层活检可能不会影响新生儿出生体质量,也不增加母婴不良并发症发生风险.

人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology, ART)发展至今已经成为治疗不孕不育症的重要方式,体外受精(in vitro fertilization,IVF)∕卵母细胞胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)-胚胎移植(embryo transfer,ET)是目前最有效的治疗手段.植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)是在IVF的基础上,对植入前胚胎进行遗传学分析,选择一定遗传学特征的胚胎植入母体的技术.

目的 应用全基因组扩增结合二代测序技术对废弃胚胎进行植入前遗传学筛查.方法 收集476个废弃胚胎,经继续培养后获得23个优质囊胚.根据Gardner囊胚分级法,对4BC级及以上的囊胚进行活检,在有部分滋养外胚层细胞孵出时用活检针吸取5～10个细胞,于全基因组扩增后进行二代测序,检测胚胎中有无染色体片段的缺失/重复以及染色体数目变异.结果 23个囊胚共吸取滋养外胚层细胞148个.进行单细胞全基因组扩增后,选取其中60个扩增产物进行高通量测序,结果显示有39个细胞染色体存在异常,来源于14个囊胚,即囊胚异常比率为60.87％(14/23).结论 应用全基因组扩增结合二代测序技术对废弃胚胎进行植入前遗传学筛查分析,可筛除染色体非整倍体及染色体结构异常的胚胎,对于改善高危人群试管助孕的效果和减少出生缺陷具有重要的意义.