目的:探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-20a对前列腺癌细胞间通讯连接(GJIC)、侵袭和转移能力的影响及其机制。方法:构建CAFs来源近红外荧光蛋白(IRFPs)标记外泌体，以不同浓度(0、10、100、200 mg/L)与PC-3细胞共培养。蛋白质印迹法检测PC-3细胞中CX43蛋白的相对表达水平；荧光漂白恢复技术测定PC-3细胞间缝隙连接功能；Transwell小室侵袭和迁移实验检测PC-3侵袭能力。构建高表达和低表达miR-20a的CAFs，分别与PC-3细胞共培养，检测缝隙链接蛋白43(Connexin 43, CX43)表达、细胞缝隙连接功能、细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证PC-3细胞中miR-20a与CX43基因是否直接结合。用Student’ t检验分析组间差异。 结果:PC-3细胞的CX43表达水平及细胞缝隙连接功能均随外泌体浓度增加而降低(0.715±0.058、0.544±0.039、0.313±0.028和0.196±0.020， F＝19.031， P<0.05)，差异有统计学意义。Transwell小室检测结果表明，CAFs来源外泌体促进PC-3细胞迁移[各组每视野穿膜细胞数分别为(176.0±9.2)、(485.0±12.8)、(159.5±9.7)和(198.0±10.5)个， F＝11.475， P<0.01]和侵袭[各组每视野穿膜细胞数分别为(150.0±8.4)、(443.0±21.7)、(182.0±11.2)和(153.5.0±10.1)个， F＝16.306， P<0.01]，差异有统计学意义；增强细胞缝隙连接能抑制此效应( F＝14.052， P<0.01； F＝14.804， P<0.01)。高表达miR-20a组的PC-3细胞的CX43表达水平(0.126±0.062比0.834±0.103， t＝9.430， P<0.05)、荧光恢复率[(25.02±7.85)%比(46.65±6.98)%， t＝5.782， P<0.05]均显著低于低表达miR-20a组，但细胞的迁移[(502.5±18.6)个比(128.5.0±9.4)个， t＝9.120， P<0.05]和侵袭能力(458.0±16.8比194.5±9.2， t＝6.286， P<0.05)均显著高于表达miR-20a组，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告实验结果显示，野生型CX43的PC-3细胞中，转染miR-20a的细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.46±0.08比0.99±0.14， t＝10.208， P<0.05)，差异有统计学意义；而突变型CX43的PC-3细胞中，miR-20a组与miR-NC组细胞荧光活性差异无统计学意义(0.94±0.06比0.97±0.08， t＝0.142， P>0.05)。 结论:CAFs来源外泌体miR-20a通过直接作用CX43基因，下调PC-3细胞CX43的表达，从而显著降低细胞间通讯连接功能，增强前列腺癌细胞的增殖、侵袭和转移能力。

目的:观察单个视网膜血管内皮细胞膜上血管内皮生长因子受体2 （VEGFR2）的聚集状态。方法:将猴视网膜血管内皮细胞（RF/6A）分为空白对照组（正常培养）、质粒转染组[转染VEGFR2-绿色荧光蛋白（GFP）重组质粒]。采用共聚焦显微镜观察质粒转染组GFP的表达；实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中VEGFR2的mRNA和蛋白表达情况；单分子成像技术记录细胞膜上表达的单个VEGFR2-GFP分子的荧光强度分布和漂白步数，判断受体的寡聚或多聚状态。结果:共聚焦显微镜观察发现，转染12 h后，质粒转染组细胞可见GFP绿色荧光。qPCR检测结果显示，质粒转染组细胞中VEGFR2、GFP mRNA表达较空白对照组显著升高，差异均有统计学意义（ t=11.240、12.330， P<0.001、0.001）。Western blot检测结果显示，质粒转染组细胞VEGFR2蛋白表达较空白对照组增强，差异有统计学意义（ t=8.346， P<0.01 ）。单分子成像结果显示，无配体刺激时RF/6A细胞膜表面上VEGFR2- GFP的荧光强度分布为双峰，其中单体、二聚体比例分别为86.0%、14.0%；通过计数GFP荧光漂白步数，静息状态下受体单体、二聚体、三聚体和四聚体比例分别为81.4%、12.9%、5.5%、0.3%。 结论:无配体状态下，VEGFR2在RF/6A细胞膜表面以单体和包括二聚体在内的多聚体形式共存，以单体为主。

目的:观察前列腺癌微环境中癌相关成纤维细胞(CAFs)对细胞缝隙连接通讯(GJIC)的影响。方法:取前列腺癌组织分离培养及鉴定CAFs，分别将(0、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)浓度的CAFs培养液与处于对数生长期的前列腺癌PC-3细胞(购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心)共同培养，采用荧光漂白恢复技术检测各组前列腺癌PC-3细胞缝隙连接(GJ)功能，蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞间隙连接蛋白43(Cx43)蛋白的表达。组间比较采用方差分析。结果:成功分离培养CAFs，前列腺癌PC-3细胞与不同浓度CAFs(0.00、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)共培养后，细胞内荧光恢复程度逐渐减弱[(49.40±5.42)%、(45.36±3.23)%、(36.57±3.95)%、(29.18±5.51)%、(21.81±4.58)%， F＝18.067， P<0.05]，细胞GJIC水平逐渐减弱，呈明显的剂量-效应依赖关系，差异有统计学意义( t＝1.109、3.313、4.531、6.734， P<0.05)。同时，各组CAFs中的Cx43蛋白的表达水平分别为0.723±0.065、0.641±0.084、0.425±0.078、0.314±0.067、0.267±0.059。随着共培养CAFs浓度的增加，细胞内Cx43蛋白表达水平反而逐渐降低，差异有统计学意义( t＝1.337、5.084、7.589、8.997， P<0.05)。 结论:CAFs可下调前列腺癌PC-3细胞Cx43蛋白的表达水平，抑制前列腺癌PC3细胞的细胞间缝隙连接功能。

目的:建立不同程度SD大鼠氟牙症模型，扫描电镜观察牙釉质的微观结构，明确不同程度氟牙症的牙釉质结构变化，为中、重度氟牙症的治疗提供临床参考。方法:选取30只雄性SD大鼠（6周龄），采用随机数字表法分为3组，每组10只，对照组使用不含氟去离子水喂养，低氟组和高氟组分别用质量浓度为50和100 mg/L的NaF去离子水喂养，建立大鼠氟牙症模型。饲养6周后取大鼠下颌切牙，记录各组大鼠牙齿情况，扫描电镜观察其表面及矢状面并进行牙釉质厚度测量。结果:对照组所有大鼠下颌切牙釉质均为棕黄色；低氟组多数呈黄白相间的条纹状；高氟组多数呈白垩色。电镜下正常组大鼠下颌切牙釉柱结构清晰饱满，呈编织状交错排列；中度氟牙症釉柱失去正常编织状结构，似笋尖样单向排列；重度氟牙症釉柱变细，大部分尖端折断；矢状面正常釉质外层结构致密，中间层呈网状，与内、外层界限清晰，内层釉柱结构清晰呈纵向和水平向排列；中度氟牙症外层变薄，中间层结构消失，与内、外层界限仍清晰，内层纵向釉柱清晰，水平向釉柱形态消失；重度氟牙症外层缺失，中间层暴露，内层两种釉柱均萎缩。内层釉质厚度在正常组［（180.71 ±7.01）μm］、中度氟牙症组［（157.10 ±11.04）μm］及重度氟牙症组［（121.10 ±12.56）μm］依次变薄。全层氟牙症釉质厚度在正常组［（241.54 ±7.76）μm］、中度氟牙症组［（207.42 ±14.36）μm］及重度氟牙症组［（143.79 ±14.60）μm］亦逐渐变薄。 结论:SD大鼠下颌切牙随氟牙症程度加重外层釉质变薄，甚至消失；内层釉质结构紊乱，釉质厚度变薄。建议中、重度氟牙症的临床治疗慎用强力漂白及微研磨，可采用无创性渗透树脂治疗。

中华口腔医学会口腔修复学专业委员会在广泛征求意见，以实验研究为基础，以临床和循证医学结果为依据，经过多次讨论和修订后，形成推荐性应用指南。本指南制订牙齿漂白治疗技术的操作规范，以指导和规范牙齿漂白治疗技术的临床诊疗行为，提高牙齿漂白的临床诊疗水平和疗效，有效降低漂白剂的临床不良反应，促进牙齿漂白治疗技术的临床推广。

目的:探讨渗透树脂对漂白后牙釉质表面结构、显微硬度及颜色的影响，为渗透树脂的临床应用提供参考。方法:选择因正畸需要而拔除的前磨牙（郑州大学第一附属医院口腔颌面外科提供），通过随机排列表法随机分为A、B、C三部分，每部分再通过随机排列表法随机均分为对照组、树脂组、漂白组和联合组；对照组不做任何处理；漂白组和联合组行冷光美白处理；树脂组和联合组行渗透树脂处理。A部分在处理后即刻及处理后2周进行扫描电镜观察（每组每个时间点样本量为3）；B部分在处理前、处理后即刻及处理后2周进行显微硬度测量（每组每个时间点样本量为8）；C部分在处理前、处理后即刻及处理后1、2周进行色度测量，并计算各组处理后各时间点与处理前的色差（ΔE值）（每组每个时间点样本量为10）。结果:扫描电镜显示，处理后即刻树脂组、联合组牙釉质表面平整光滑，除可见树脂覆盖外，其余与对照组基本一致；漂白组表面可见微孔状缺损和矿物质沉积；处理后2周各组牙釉质表面平整光滑无明显差别。处理后即刻对照组、树脂组、漂白组、联合组显微硬度分别为（354±33）、（364±21）、（411±30）、（350±17）HV（ F=9.39， P<0.05），漂白组显著大于其他组（ P<0.05），其余组间差异均无统计学意义（ P>0.05）；处理前和处理后2周4组显微硬度的总体差异均无统计学意义（ F=0.34、2.75， P>0.05）。处理后即刻对照组、树脂组、漂白组、联合组ΔE值分别为0.00±0.00、2.29±1.86、7.20±1.94、8.00±0.88（ F=74.21， P<0.05），除漂白组与联合组间差异无统计学意义（ P>0.05）外，其余组间差异均有统计学意义（ P<0.05）。对照组、树脂组、漂白组同组处理后各时间点ΔE值差异均无统计学意义（ F=1.66、0.30、0.96， P>0.05）。联合组处理后即刻ΔE值显著大于处理后1、2周（ t=4.73、4.23， P<0.05），处理后1和2周间ΔE值差异无统计学意义（ t=0.75， P>0.05）。 结论:对健康牙釉质进行美白时，单纯的冷光美白或冷光美白联合渗透树脂均能达到美白效果。

目的:探讨BITT的聚集诱导发光(AIE)性质，骨肉瘤细胞靶向性、荧光成像以及光热治疗效果。方法:采用MG63、143B细胞作为模型细胞，探讨其生物相容性，以商业细胞核染料Hoechst 33342为比较对象，探讨其细胞内定位区域及抗光漂白性，应用激光照射，探讨其对肿瘤细胞的暗毒性和光热治疗效果，激光照射和黑暗组两组间比较采用 t检验。 结果:随着激光功率的提高、浓度的升高，BITT溶液的温度迅速升高。浓度40 μmol/L的BITT溶液在激光照射153 s后可达45 ℃，相同条件下60 μmol/L可达49.5 ℃。随着激光功率的提高，浓度60 μmol/L的BITT溶液的温度迅速升高，1 W/cm 2的660 nm激光照射300 s可达58.8 ℃。BITT即使在低浓度(20 μmol/L)下也能显示出优异的光热性能。激光共聚焦显示BITT主要定位在骨肉瘤细胞质中，具有优异的光稳定性。采用低能量(0.3 W/cm 2)的660 nm激光照射，其光热治疗杀伤效果显示，在较低的浓度下(16 μmol/L)，肿瘤细胞可被大比例杀伤(杀伤率>90%)。 结论:BITT在水溶液中具有良好的光热转换能力，其良好的光热转化能力、生物相容性、光稳定性能为后续光热治疗协同放疗增敏研究提供良好的增敏剂及基础技术支持，为骨肉瘤外科手术的协同治疗带来新的协同治疗方式选择。

目的:探讨甲基绿对比染色法在含黑色素肿瘤免疫组织化学染色中的应用。方法:含黑色素肿瘤30例，其中蓝痣10例，黑色素瘤20例，构建组织芯片。采用高锰酸钾氧化草酸漂白法脱黑色素后行免疫组织化学检测和免疫组织化学染色后用1%甲基绿对比染色进行比较，应用EliVision免疫组织化学法检测HMB45、Melan A、S-100蛋白、SOX10的表达，分析两种方法对含黑色素肿瘤不同免疫组织化学指标判读的影响。结果:经过高锰酸钾氧化草酸漂白法脱黑色素处理后，部分病例出现破片、脱片现象；HMB45的染色效果与1%甲基绿对比染色后HMB45染色效果基本一致；SOX10出现假阴性；Melan A大部分病例出现表达减弱或阴性表达；S-100蛋白表达良好。经1%甲基绿对比染色后黑色素被染成绿色，与免疫组织化学染色结果的棕黄色形成对比，免疫组织化学染色结果定位准确，易于判读。2例含重度黑色素的病例组织由于色素覆盖厚重，影响不同指标的显色结果判读。结论:含黑色素的肿瘤组织免疫组织化学染色后采用1%甲基绿对比染色法，在解决轻-中度含黑色素肿瘤免疫组织化学判读上相对比传统的高锰酸钾氧化草酸漂白法脱黑色素方法好。

目的:探讨三氯异氰尿酸脱黑色素对免疫组织化学检测的影响。方法:对40例含黑色素的病例，分别采用3种不同氧化剂（三氯异氰尿酸、高锰酸钾和过氧化氢溶液）对Ki-67、S-100蛋白、HMB45、Melan A、SOX10、β-catenin免疫组织化学染色后漂白，比较3种方法的染色合格率和漂白时间。通过无色素的对照组织验证各抗体DAB信号在三氯异氰尿酸漂白的耐受时间。结果:8%三氯异氰尿酸溶液为最佳反应浓度。8%三氯异氰尿酸漂白在Ki-67、S-100蛋白、SOX10、HMB45、Melan A、β-catenin免疫组织化学染色后（尤其是在中、高色素含量的标本）漂白合格率明显高于0.5%高锰酸钾和10%过氧化氢，差异有统计学意义（ P<0.01）。8%三氯异氰尿酸的漂白时间（<20 min）短于0.5%高锰酸钾（约40 min）和10%过氧化氢（24 h）。8%三氯异氰尿酸对各种定位的免疫组织化学抗体的DAB信号均无影响且耐受时间长（20~78 h）。 结论:8%三氯异氰尿酸的DAB后漂白可以作为富含黑色素组织免疫组织化学检测的漂白方法。

目的 探讨在诊疗室应用YAG激光配合渗透性树脂漂白对氟斑牙的疗效.方法 选取2020-2022年石家庄市第二医院口腔科诊治的氟斑牙患者90例,按照随机数字表法分为A、B组,每组45例.A组采用低能量(YAG)激光处理,同时加以诊室漂白,B组采用低能量(YAG)激光处理,并与渗透树脂辅助诊室漂白相联合,用VITA比色板作脱色前后对比,以分光比色仪记录美白后釉质表面的色阶和色度.使用分光光度计和Vita指南记录每个时间节点的牙齿颜色变化,2年的随访中,评估牙齿美白前后的颜色反色效应.比较2组患者治疗后的牙齿敏感发生率.结果 治疗后2组患者牙齿颜色均变白,但B组患者牙齿颜色等级显著低于A组,差异有统计学意义(P＜0.001).1周美白治疗后,A、B组患者的漂白总有效率分别为75.56％、73.33％,差异无统计学意义(P＞0.05);6个月后,B组和A组的漂白总有效率分别为80.00％和75.56％,差异无统计学意义(P＞0.05);1年后,B组和A组的漂白总有效率分别为100％和80.00％,差异有统计学意义(P＜0.05);2年后,B组总有效率为100％,A组为82.22％,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后立即牙敏感率B组为40.00％明显小于A组的93.33％(P＜0.05);2组在用药24 h内均未出现过敏反应.结论 YAG激光联合渗透树脂辅助诊室漂白治疗中度氟斑牙在临床上具有相对更好的疗效和舒适度.