目的 建立评价半夏及其炮制品硫熏前后品质的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法.方法 色谱柱为Waters HSS T3柱(100 mm × 2.1 mm,1.7 μm),流动相为甲醇-乙腈(1∶1,V/V)-0.1％甲酸溶液(梯度洗脱),在正、负离子监测模式下采集半夏及其炮制品硫熏前后的化合物数据,与在Chemspider,mzCloud,Metaboanalyst数据库及相关文献中检索到的化合物进行比对.应用Sciex OS软件对采集到的硫熏样品数据进行分析,找到含硫化合物的特征性中性丢失或特征性碎片离子,判定半夏及其炮制品硫熏后的含硫产物.结合偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法对半夏及其炮制品进行分类.结果 半夏及其炮制品中共检出254种化合物,主要为氨基酸、核苷及其衍生物、有机酸等小分子化合物,以及皂苷、生物碱、木质素衍生物等天然产物.半夏炮制品(姜半夏、法半夏、清半夏)硫熏后均可检出31种含硫化合物,其中6-姜辣素仅在姜半夏中检出,大豆苷和甘草酸仅在法半夏中检出.在不同程度硫熏半夏中,含硫量变化趋势基本符合严重硫熏、超限度＞稍熏、略超限度＞未熏的变化趋势.结论 建立的UPLC-Q-TOF-MS法可快速、全面地分析对半夏及其炮制品中的化学成分.硫熏会影响半夏及其炮制品的品质,在半夏加工过程中应合理、规范使用硫熏技术,避免过度硫熏对半夏药材质量的影响.

[目的]探讨萝卜硫素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症反应与气道重塑的改善作用.[方法]将75只SD大鼠随机分为正常组,模型组,萝卜硫素低、中、高剂量组,每组15只.除正常组外,剩余组采用香烟熏吸结合气管内滴入脂多糖(LPS)法制备COPD模型.建模成功后,连续灌胃给药28 d.给药结束后,观察各组大鼠一般情况,检测肺功能[用力肺活量(FVC)、呼气峰流速(PEF)、1秒用力呼气容积(FEV1)],苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理变化,并测量气道重塑指标(支气管壁厚度、平滑肌厚度),酶联免疫吸附分析(ELISA)检测肺组织中炎症因子水平[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)],蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达变化.[结果](1)模型组大鼠毛色干枯且光泽,有明显咳嗽和挠鼻现象,呼吸急促,行动迟缓,喜拱背蜷卧;萝卜硫素低、中、高剂量组大鼠呼吸急促、咳嗽等异常表现明显改善.(2)HE染色显示:模型组大鼠气道壁和平滑肌增厚,气道上皮受损,可见肺泡破坏、融合,炎性细胞大量浸润;萝卜硫素低、中、高剂量组大鼠肺组织病理变化有不同程度的改善,气道壁变薄,肺泡破坏程度减轻,炎性细胞浸润减少.(3)与正常组比较,模型组大鼠FVC、PEF、FEV1显著降低(P＜0.05),TNF-α、IL-1β水平,支气管壁厚度、平滑肌厚度,TLR4、MyD88、NF-κB表达水平显著升高(P＜0.05);与模型组比较,萝卜硫素低、中、高剂量组大鼠FVC、PEF、FEV1显著升高(P＜0.05),TNF-α、IL-1β水平,支气管壁厚度、平滑肌厚度,TLR4、MyD88、NF-κB表达水平显著降低(P＜0.05).[结论]萝卜硫素有助于抑制COPD大鼠炎症反应,减轻大鼠气道重塑,改善大鼠肺组织病理损伤及肺功能,其机制可能与抑制TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达有关.

目的 建立白芷UPLC指纹图谱,结合化学计量学方法寻找不同熏硫程度白芷质量差异的标志物.方法 该药物的分析采用月旭XtimeUPLCC18色谱柱(4.6mm×150mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1％乙酸,梯度洗脱;体积流量0.35 mL/min;柱温35℃;检测波长305 nm.采用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价,结合聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析对白芷样品进行全面的质量评价.结果 共得到11个共有峰,并通过对照品比对出其中7个(白当归素、氧化前胡素、异欧前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、佛手柑内酯、水合氧化前胡素);33批样品指纹图谱的相似度为0.735～0.997.聚类分析仅将白芷样品聚为3类;主成分分析将样品分为3类,与4种熏硫程度分类一致.正交偏最小二乘法-判别分析筛选出5种差异性成分,经对照品比对,确定了其中2种差异性成分,分别为氧化前胡素、水合氧化前胡素.3种主成分含量测定结果为欧前胡素0.444～3.725 mg/g,珊瑚菜素0.241～0.631mg/g,异欧前胡素0.179～0.508 mg/g.结论 该方法稳定可靠可用于不同熏硫程度白芷的质量控制.

随着成像技术和人工智能技术的发展,高光谱成像技术为中药材分析提供一种快速、无损、智能、精准的新方法.该文总结了近年高光谱成像技术结合智能分析技术在中药材领域中的方法和应用,重点介绍了中药材高光谱数据采集与获取、高光谱数据预处理、高光谱数据智能分析方法和以上技术在中药材领域应用的实际案例.中药材高光谱数据可同时提供纳米级分辨率的光谱信息和丰富的空间纹理信息,该文归纳了高光谱数据采集、黑白板校正、感兴趣区域提取等获取流程;总结了包含平滑法、导数法、尺度缩放法、散射矫正法等光谱预处理方法;从光谱、空间、颜色、纹理等方面简述了特征提取方法并归纳常见建模方法;最后,回顾了将以上方法应用到中药材的真伪鉴别、产地溯源、品种识别、年份鉴别、硫熏程度判定、定量测定等领域已有的研究实例.

目的:比较臭氧处理及硫熏处理后当归品质的变化情况,为臭氧处理作为硫熏处理替代技术的可行性分析提供参考.方法:采用间歇臭氧处理及硫磺熏蒸的方法分别处理当归药材,通过RP-HPLC测定当归中阿魏酸含量,流动相乙腈-0.085％磷酸水溶液(17∶83),检测波长316 nm;采用水蒸气蒸馏法提取当归挥发油,通过GC-MS检测当归挥发油中化学成分;以微生物含量为指标,评价不同处理方式对当归储藏周期的影响.结果:臭氧处理及硫熏处理都会影响当归中阿魏酸的含量,较未处理当归样品中的质量分数分别降低了23.72％和34.43％;臭氧处理及硫熏处理当归后会导致挥发油颜色发生变化,且挥发油体积较未处理的样品分别降低了53.85％和76.92％,挥发油化学成分数量和种类均发生了较大的变化,主成分蒿本内酯分别降低了10.65％和9.32％;经储藏周期试验发现,臭氧处理后当归中的微生物含量较硫熏处理后的样品少.结论:当归经臭氧处理后化学成分变化程度较硫熏处理小,有望成为当归硫熏处理的替代技术.

研究不同贮藏时间对硫熏天麻化学成分和二氧化硫残留量的影响,为解决硫磺熏蒸天麻药材质量和安全问题提供科学依据.将天麻与硫磺熏蒸天麻及其饮片在相同条件下贮藏,分别测定天麻8种有效成分和二氧化硫残留量.结果发现,硫熏后天麻及其饮片中天麻素类含量相比未硫熏天麻显著降低,且硫熏天麻中的二氧化硫残留量显著高于硫熏天麻饮片中的,即在相同条件下,硫熏对天麻质量的影响程度显著大于天麻饮片.在8个月的贮藏时间内,天麻药材中8种化学成分含量整体变化不大.但贮藏4个月后,天麻、硫熏天麻及其饮片中的化学成分和二氧化硫残留量均出现显著变化,并且天麻药材中二氧化硫残留量降幅较大,可达50％以上.

以模式植物拟南芥为材料,研究SO2对植物干旱适应性的影响.采用分光光度法检测植物干旱生理指标的变化,并用半定量RT-PCR技术分析了拟南芥热激基因和干旱响应基因的转录水平.研究发现:4周龄拟南芥植株暴露于30mg/m3的SO2后,6-72h间叶面气孔开度显著低于对照并逐渐减小,在暴露48h和72h时,热激转录因子HsfA2和热激基因Hspl7.7、Hspl7.6B、Hspl7.6C转录上调,干旱响应基因DREB2A、DREB2B和RD29A表达增强;在SO2熏气72h后进行干旱胁迫,干旱期间SO2预暴露植株的叶片相对含水量高于非熏气干旱处理组,植株萎蔫程度比后者明显减轻,且SO2预暴露植株的地上组织中可溶性糖和脯氨酸含量升高,超氧化物歧化酶活性提高,丙二醛含量降低.结果表明:SO2能降低气孔开度、提高抗氧化能力、上调热激基因和干旱响应基因转录,并能促进干旱期间植物细胞内渗透调节物质的合成和积累,促使抗氧化酶活性提高,从而降低干旱胁迫对植株造成的氧化损伤,增强拟南芥对干旱的适应性.植物通过基因转录应答、酶活性改变、渗透调节物质积累等,在适应环境高浓度SO2的同时,提高了对干旱的适应性.

目的 采用近红外光谱技术(NIRS)建立山药是否硫熏的定性分析模型.方法 采集不同硫熏程度山药的NIRS图,采用Discriminant analysis进行相似性判别.通过Constant预处理后建立模型,并进行模型内验证和模型外验证.结果 4 000 ～10 000 cm-1山药硫熏情况能够较好地区分,内部验证的准确率达100％,外部验证准确率达到93.33％.结论 采用近红外光谱技术对山药硫熏情况的鉴定是可行的.

目的:研究硫熏及不同硫熏程度对白术化学成分的影响.方法:采用薄层色谱法对硫熏前后白术化学成分进行定性筛选,并通过硅胶柱色谱以及波谱数据进行提取分离和结构确证;采用离子色谱法和高效液相色谱法分别对白术中二氧化硫残留量和东莨菪内酯的含量进行测定,并考察二者的相关性.结果:白术经过硫磺熏蒸后,会对其香豆素类成分东莨菪内酯和伞形花内酯产生影响,硫磺熏蒸白术中东莨菪内酯含量随二氧化硫残留量的升高而降低,直至为零.结论:随着白术硫磺熏蒸程度的增加,东莨菪内酯的含量降低.硫磺熏蒸严重影响白术的品质,故在对白术进行硫熏时应严格控制使用.

目的:通过测定热处理前后硫熏党参中二氧化硫残留和含硫衍生物量的变化规律,评估硫熏党参热处理脱硫技术的可行性.方法:采用酸碱滴定法测定硫熏党参中二氧化硫残留量;采用UPLC-Q-TOF-MS/MS定性和半定量表征硫熏党参中含硫衍生物;对不同硫磺熏蒸时间和不同热处理时间的硫熏党参中二氧化硫残留量与含硫衍生物含量的变化进行相关性分析.结果:白术内酯Ⅱ含硫衍生物和白术内酯Ⅲ含硫衍生物为硫熏党参主要特征含硫衍生物.随硫熏程度的增加,党参中二氧化硫残留量显著增加,含硫衍生物的含量先增加后维持稳定,二氧化硫残留量与含硫衍生物的量之间并不一定呈正相关;随热处理程度增加,硫熏党参中二氧化硫残留量持续明显下降,但含硫衍生物的量先下降后维持稳定并保持在较高的含量水平,相关性分析结果表明热处理脱硫所致的党参药材二氧化硫残留与含硫衍生物量的变化并不一定呈正相关.结论:热处理虽然可显著降低硫熏党参中二氧化硫残留量,但药材中仍存在含量较高的含硫衍生物,不能使硫熏党参内在质量恢复到与非硫熏品质一致.因此,热处理脱硫技术不是保证硫熏党参质量的可行技术.