目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q/TOF-MS）的高分辨多反应监测扫描模式，建立虎杖中10种酚类物质［虎杖苷、白藜芦醇、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、氧化白藜芦醇、2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、儿茶素和表儿茶素］的同时定量分析方法。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸为二元梯度洗脱系统，梯度洗脱，流速0.2 ml/min，高分辨多反应监测扫描模式用于定量分析。结果:虎杖中10种酚类物质在考察浓度范围内线性关系良好（ r2>0.999），批内和批间精密度及重复性 RSD均小于5%，回收率在96.28%～103.23%范围内。10批样本中虎杖苷含量最高，其次是白藜芦醇和大黄素，大黄酚和氧化白藜芦醇含量较低，在个别批次中未实现定量测定。不同批次间待测成分含量差异较大。 结论:本研究建立的同时定量虎杖中10种酚类物质的UPLC-Q/TOF-MS方法简便、准确，可为虎杖的质量评价提供参考。

目的 建立评价半夏及其炮制品硫熏前后品质的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法.方法 色谱柱为Waters HSS T3柱(100 mm × 2.1 mm,1.7 μm),流动相为甲醇-乙腈(1∶1,V/V)-0.1％甲酸溶液(梯度洗脱),在正、负离子监测模式下采集半夏及其炮制品硫熏前后的化合物数据,与在Chemspider,mzCloud,Metaboanalyst数据库及相关文献中检索到的化合物进行比对.应用Sciex OS软件对采集到的硫熏样品数据进行分析,找到含硫化合物的特征性中性丢失或特征性碎片离子,判定半夏及其炮制品硫熏后的含硫产物.结合偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法对半夏及其炮制品进行分类.结果 半夏及其炮制品中共检出254种化合物,主要为氨基酸、核苷及其衍生物、有机酸等小分子化合物,以及皂苷、生物碱、木质素衍生物等天然产物.半夏炮制品(姜半夏、法半夏、清半夏)硫熏后均可检出31种含硫化合物,其中6-姜辣素仅在姜半夏中检出,大豆苷和甘草酸仅在法半夏中检出.在不同程度硫熏半夏中,含硫量变化趋势基本符合严重硫熏、超限度＞稍熏、略超限度＞未熏的变化趋势.结论 建立的UPLC-Q-TOF-MS法可快速、全面地分析对半夏及其炮制品中的化学成分.硫熏会影响半夏及其炮制品的品质,在半夏加工过程中应合理、规范使用硫熏技术,避免过度硫熏对半夏药材质量的影响.

目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography qua-drupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术分析匙羹藤的化学成分.方法:采用 Wa-ters CORTECS UPLC T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.6 μm)以0.1％甲酸-乙腈的流动相梯度洗脱,电喷雾负离子模式下对色谱流出物进行检测,检测范围m/z50～2000.结果:通过高分辨质谱数据(一级质谱及二级质谱碎片)分析,结合数据库、文献以及对照品比对,共鉴别出101种成分,包括53种三萜类、37种黄酮类、5种有机酸类、3种单萜类、1种二萜类、1种菲类、1种甾体类化合物.结论:本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术快速鉴别了匙羹藤的化学成分,该方法快速、准确、简便,能够用于匙羹藤化学成分的定性鉴定,为该草药的质量标准以及物质基础研究奠定基础.

目的:建立当归补血汤超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的特征图谱,综合评价其质量.方法:采用 Waters Acquity UPLC BEH C18 柱(100 mm × 2.1 mm,1.7 μm),以 0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量2 μL;使用电离子喷雾源(ESI),负离子模式扫描.并以指纹图谱相似度评价软件结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对11批当归补血汤进行评价.结果:通过对照品比对及软件预测,从当归补血汤中鉴别出24种成分.图谱标定出41个共有峰,指认出6个色谱峰,分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、芒柄花素.HCA、PCA和PLS-DA3种方法均将11批样品分为3类,对黄芪统货、选货和精品饮片进行了明显区分,说明当归补血汤的特征图谱与原药材的质量和等级具有强相关性.结论:构建的高分辨质谱的特征图谱结合化学模式识别方法快速高效全面,适用于当归补血汤整体质量的评价,同时也为中药复方质量标准建立与全程质量控制提供了重要支撑.

目的 应用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术和网络药理学方法,鉴定参芪扶正注射液的主要成分,探究其治疗三阴性乳腺癌(TNBC)的作用机制,为其药效物质基础研究提供依据.方法 ①参芪扶正注射液主要成分鉴定:采用UPLC-Q-TOF-MS技术,结合天然产物高分辨质谱数据库及相关文献,明确参芪扶正注射液的主要成分.②网络药理学研究:基于中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中草药化合物蛋白质靶标数据库(HIT)、有机小分子生物活性数据库(PubChem)、化合物靶点预测平台(Swiss Target Prediction)、本草组鉴数据库(HERB)获取参芪扶正注射液主要成分的潜在靶点,利用人类基因综合数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、治疗靶点数据库(TTD)获得TNBC疾病潜在靶点,二者相结合得到参芪扶正注射液治疗TNBC的潜在靶点;运用蛋白互作关系数据库(STRING)平台、Cytoscape 3.9.1软件构建蛋白互作网络图并进行网络拓扑分析,获得参芪扶正注射液治疗TNBC的关键靶点;运用R语言进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.③动物实验验证:制备异种移植瘤乳腺癌小鼠模型,分为模型组与参芪扶正注射液低、中、高剂量(20、40、60 mL/kg)组,干预4周后取肿瘤组织,运用Western blot方法检测肿瘤组织中磷酸化磷脂肌醇3激酶(p-PI3K)、磷脂肌醇3激酶(PI3K)、P-糖蛋白(P-gp)、乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)表达情况,并对预测潜在靶点进行实验验证.结果 ①参芪扶正注射液的主要成分为党参炔苷、鸟苷、毛蕊异黄酮苷、壬二酸、黄芪甲苷、美迪紫檀苷等.②网络药理学研究结果显示,参芪扶正注射液的主要成分主要作用于肿瘤蛋白p53(TP53)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、己糖激酶2(HK2)、缺氧诱导因子1亚基α(HIF1A)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(CASP9)、ABCG2、ATP结合盒转运体B1(ABCB1)、原癌基因(MYC)等关键靶点,调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、T细胞受体等信号通路.③动物实验验证结果显示,参芪扶正注射液降低了实验动物肿瘤组织中p-PI3K水平,抑制了P-gp和ABCG2的表达.结论 参芪扶正注射液中的主要成分为党参炔苷、鸟苷、毛蕊异黄酮苷、壬二酸、黄芪甲苷、美迪紫檀苷等,其抗TNBC的作用机制与其通过调控PI3K信号通路和调节耐药相关蛋白表达有关.

目的:通过超高效液相色谱-三重四极杆飞行时间串联质谱技术对厚朴花中的化学成分进行分析鉴定.方法:采用反相C18色谱柱(250mm×4.6mn,5μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱.质谱使用ESI离子源,负离子模式下采集数据.依据高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子的精确分子质量信息,结合标准品对照与参考相关文献数据,对厚朴花进行成分鉴定.结果:初步鉴定出酚酸类、黄酮类和苯乙醇苷类共16种化学成分.结论:本研究为进一步探究厚朴花的药效物质基础和质量调控机制提供基础资料.

目的 基于超快速高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱技术(UFLC-Triple Q-TOF-MS/MS),对同批次的枳实传统饮片和破壁饮片的整体化学成分进行鉴定分析,探讨破壁粉碎技术对饮片化学成分的影响.方法 采用PhenomenexC18色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.6 μm),以乙腈和0.1％甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1;采用ESI电喷雾源的高分辨三重四极杆飞行时间质谱,分别在正、负离子模式下进行检测.结果 根据正负离子模式下获得的一级和二级质谱数据,通过准确分子量、裂解碎片及文献,共确证和指证出54个化合物,其中32个黄酮类成分,14个香豆素类成分,3个生物碱类成分,2个挥发油类成分,2个柠檬苦素类成分和1个有机酸类成分.结论 枳实传统饮片经破壁工艺加工后,化学成分种类无差异.本研究可为枳实传统饮片与破壁饮片的进一步研究及质量控制提供科学依据.

目的 应用超高效液相色谱-行波离子淌度串联四极杆飞行时间质谱仪(UPLC-VION)高分辨质谱联用技术对不同表达体系重组人血白蛋白和不同生产工艺下人血白蛋白在完整蛋白水平进行分析,探讨质谱分析技术在白蛋白产品鉴别实验上的实际应用.方法 采用ACQUITY UPLC超高效液相色谱系统,ACQUITY UPLC BEH C4色谱柱脱盐处理,电喷雾离子化(ESI) VION IMS QTof高分辨率质谱和UNIFI软件,对重组和血浆来源人血白蛋白进行分析.质谱信号经MaxEnt1去卷积化软件处理后,获得样品平均相对分子质量以及相对强度图谱.样品包括血浆来源人血白蛋白(2个厂家)、酵母表达系统(毕赤及酿酒酵母)生产的重组人血白蛋白(3个厂家)、转基因水稻表达的重组人血白蛋白(1个厂家)共6批,分别进行了测定和数据分析.结果 UPLC-VION高分辨质谱联用分析结果显示,不同厂家和不同表达载体纯化得到的重组人血白蛋白均能检测到66 437的信号,误差低于1,与人血白蛋白理论序列平均相对分子质量一致;不同厂家和不同工艺的样品具有特征性的质谱图,即不同来源人血白蛋白具有不均一性.结论 UPLC/VION超高效液相色谱-质谱联用方法专属性好,灵敏度高,能够区分出不同厂家及不同工艺得到的重组或血浆来源人血白蛋白,可作为白蛋白类药品质量控制的鉴别实验方法.

目的:采用超高效液相色谱一四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术,对1、2、3年生防风样本进行分析,确定不同生长年限防风中香豆素类成分的含量变化.方法:使用超高效液相BEHC18色谱柱(2.1 mm ×100 mm,1.71μm),以0.1％甲酸水(A)-0.1％甲酸乙腈(B)为流动相梯度进行洗脱;使用高分辨飞行质谱仪,配置ESI离子源,在正、负离子模式下采集质谱数据,使用Markerview数据处理软件对高维质谱数据进行PCA处理,初步筛选目标化合物为香豆素类成分,根据高分辨质谱采集到的精准质量数及同位素等信息进一步确定质谱碎片的分子式,利用精确分子质量等信息与对照品及高分辨质谱自备数据库谱图进行比对从而得到鉴定结果,利用此结果进一步分析其含量变化规律.结果:鉴定或推断出不同生长年限防风中含量差异较大的13种香豆素类成分,其中补骨脂素等5个成分的含量逐年增加,而8-羟基补骨脂素等7个化合物含量以2年生最高,3年生略有下降,仅2-[(8-Methoxy-4-methyl-6-oxo-6H-benzo[c]chromen-3-yl)oxy] propanoic acid的含量以1年生最高.结论:该方法快速、准确,为不同生长年限防风中香豆素成分分析提供一种新的研究方法.

目的:通过代谢组学的研究方法观察补气剂四君子汤、补血剂四物汤对自然衰老模型小鼠内源性代谢物的影响,分析补气剂、补血剂干预衰老的机制,比较气、血作用于模型小鼠的生物学靶点和代谢途径.方法:选取雌性自然哀老模型小鼠(20月龄)作为研究对象.经超高效液相色谱串联四极杆飞行时间高分辨率质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对小鼠血浆进行分析,流动相含有0.1％甲酸的乙腈溶液(A)-0.1％甲酸水溶液(B);梯度洗脱(0～15min,2％～100％A);选择主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)分析代谢标志物,同时归纳其代谢途径.结果:发现四君子汤、四物汤分别影响了小鼠体内10种不同的衰老相关代谢标志物,使其表达水平向3月龄小鼠靠拢.这其中有棕榈酸、花生四烯酸、N-乙酰、D-赤藓糖-4-磷酸、硬脂酸、脱氧羟丁赖氨酸、甘草次酸、可可碱,8种代谢物完全相同,且差异有统计学意义(P＜0.05).代谢标志物主要参与了氨基糖和核苷酸糖代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、磷酸戊糖途径、脂肪酸的生物合成、咖啡因代谢、线粒体中的脂肪酸延长、脂肪酸代谢等代谢途径.结论:补气剂四君子汤、补血剂四物汤可以通过调节小鼠的氨基糖和核苷酸糖代谢、磷酸戊糖途径、脂肪酸代谢等途径起到延缓衰老的作用,同时发现气、血存在相同的干预靶点和代谢途径,为研究传统中医理论“气血同源”提供了生物学依据.