目的:制备燕窝酶解液并初步了解其抗流感病毒的方式和效果。方法:以唾液酸提取率为评价标准，选择最佳酶解时长和液料比，获取燕窝酶解液。通过实时荧光定量PCR和血凝试验分析并明确燕窝酶解液对流感病毒的抑制方式和单个复制周期中的作用环节。试验同时设立病毒对照组。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测燕窝干预下NF-κB的表达情况和炎症细胞因子转录水平的变化。结果:在液料比45∶1、酶解时长不低于3 h的条件下获得燕窝酶解液，唾液酸的提取率为（66.87±0.05）%。相比病毒对照组，燕窝酶解液通过直接抑制流感病毒的方式降低病毒基因NP和M的转录水平（ t=2.81和3.34， P=0.023和0.010）。在病毒复制过程中燕窝酶解液在病毒感染初期和复制初期（0 h和2 h）发挥抑制效果，NP基因转录相比病毒对照组显著降低（ t=13.79和21.84， P=0.005和0.002）。与燕窝液组相比，在燕窝酶解液干预下，炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、NF-κB、NF-κBp65的表达也降低（ t=15.12、21.31、4.85、7.40、13.77和29.39， P均<0.05）。 结论:通过酶解的方式可以提高燕窝的抗流感病毒效果，燕窝酶解液能够抑制流感病毒引起的炎症因子表达。

目的:测定从香港市场上随机采购的来自18个产地的48批燕窝(含白燕、黄燕和血燕)中亚硝酸盐的含量,并探讨浸泡和炖煮等处理方法对燕窝中亚硝酸盐含量的影响.方法:亚硝酸盐的含量按照国家标准(GB 5009.33—2016),采用柱后还原和衍生化+离子色谱法进行测定,检测波长为532 nm.测定的样本包括燕窝原材料、经过浸泡后及炖煮后的燕窝等.结果:48批燕窝原材料样本中亚硝酸盐的含量范围为0～6429.58 mg/kg;仅6个样品亚硝酸盐的含量<30 mg/kg,符合《卫生部关于通报食用燕窝亚硝酸盐临时管理限量值的函》的要求.由于亚硝酸盐易溶解于水,经浸泡及清洗后,可有效去除燕窝中的亚硝酸盐,去除率平均>90％,最高可达97％;经过炖煮后的样品检测不到亚硝酸盐.结论:48批燕窝样本中均含有亚硝酸盐,各类燕窝中亚硝酸盐的平均含量由高至低依次为血燕>黄燕>白燕;经过浸泡及清洗能有效清除燕窝上的亚硝酸盐,经过炖煮后的燕窝中亚硝酸盐含量均低于检测水平.

目的:采用超声辅助酶法对燕窝中唾液酸的提取工艺进行研究,考察不同pH值下不同酶种类对燕窝中唾液酸和蛋白质提取率的影响.方法:在单因素试验、最陡爬坡试验的基础上,以唾液酸的提取率为响应值,采用响应面法对影响燕窝唾液酸提取率的主要因素工艺参数进行优化和分析.结果:影响燕窝唾液酸提取率的3个工艺因素按大小顺序为pH＞加酶量＞液料比,最佳优化工艺参数为:液料比40:1、碱性蛋白酶加酶量4％、pH值为11、酶解时间1h、酶解温度55℃,在此条件下,测得燕窝唾液酸的提取率为84.76％.结论:响应面法优化燕窝唾液酸的提取工艺,方法稳定可行.

应用Cytb6序列对燕窝进行DNA条形码(DNA barcodes)研究,为燕窝的溯源研究及全面评价燕窝质量提供理论依据.以马来西亚、印度尼西亚、越南、泰国等地的燕窝,共计39个样本为研究对象,提取基因组DNA,扩增Cytb6序列并双向测序.采用MEGA 7.0软件,对39条样本序列及36条从Gcn Bank中下载5种金丝燕的Cytb序列进行序列特征分析,基于Kimura双参数法计算序列种内、种间遗传距离,构建NJ和UPGMA系统聚类树进行分析.研究结果表明,39个样本共来源于3个不同的金丝燕物种.Cytb序列种间变异显著大于其种内变异,可以准确地区分不同种类的燕窝.所构建的NJ和UPGMA系统发育树,也能将全部物种区分开.表明基于Cytb序列的DNA条形码技术可用于准确快速地鉴别燕窝的生物基原.

目的:研究燕窝桑桔饮颗粒的抗炎效果.方法:采用经典的急慢性炎症模型(小鼠耳肿胀法、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加法、棉球肉芽肿法、大鼠足拓肿胀法)来观察燕窝桑桔饮颗粒的抗炎效果.结果:与模型组相比,燕窝桑桔饮颗粒高、中剂量均可显著减小二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度,抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加,抑制棉球诱导小鼠肉芽组织增生,减轻角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀度.结论:燕窝桑桔饮颗粒具有一定的抗炎效果.

目的:研究燕窝酸(SA)对小鼠急性脑缺血及活血化瘀的作用.方法:将昆明种小鼠随机分为对照组、尼莫地平或阿司匹林(18 mg· kg-1)组及SA低、中、高剂量(28 mg· kg-1、55 mg· kg-1、110 mg· kg-1)组.采用迅速断头法、结扎双侧颈总动脉及迷走神经法观察SA对小鼠急性脑缺血的作用;采用载玻片法和玻璃毛细血管法观察SA对小鼠凝血时间的影响;采用断尾出血法观察SA对小鼠出血时间影响.结果:与对照组比较,SA低、中、高剂量组小鼠断头后张口次数和喘息时间显著增加(均P＜0.01),结扎双侧颈总动脉和迷走神经后存活时间显著延长(均P＜0.01),小鼠断尾出血时间明显延长(均P＜0.05),载玻片法和玻璃毛细管法显示小鼠凝血时间显著延长(均P＜0.05).结论:SA具有明显的抗小鼠急性脑缺血和活血化瘀作用.

采用生物酶解技术研究了燕窝低聚肽的制备工艺.研究了4种不同类型的酶对燕窝的降解行为,比较了燕窝酶解前后分子量范围、氨基酸组以及唾液酸含量变化,采用动物实验研究了燕窝低聚肽对小鼠免疫细胞活性的影响.结果表明,燕窝经60℃ 热变性处理后可通过胰蛋白酶和胃蛋白酶有效降解,酶解处理4.0 h燕窝降解率分别达到96％ 和91％,碱性蛋白酶和中性蛋白酶可部分降解燕窝,4.0 h后残留量分别为40％ 和36％.酶解后的燕窝低聚肽的分子量主要集中在1～3 ku,低聚肽中总蛋白含量高于燕窝,酶解后唾液酸含量为14.3％.动物实验结果表明燕窝低聚肽增强刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)诱导胸腺依赖性淋巴细胞(Thymus-dependent lymphocyte,T cell)增殖效果高于燕窝(P>0.05);燕窝与低聚肽在增强抑制自然杀伤细胞(Nature killer cell,NK cell)活性方面较为相近(P<0.05).

目的:应用环介导等温扩增技术(LAMP)联合核酸层析试纸(LFD),基于燕窝中残留的线粒体DNA(mtDNA)建立燕窝基原的鉴定方法.方法:以不同生物基原的燕窝样品及伪品为研究对象,提取mtDNA,设计LAMP引物,建立LAMP扩增方法,并评价LAMP扩增浊度法检测与恒温水浴LAMP扩增联合LFD检测方法的特异性及灵敏度.结果:当反应温度为63℃时,燕窝线粒体中的细胞色素基因(mtDNA-cytb)的扩增效果最佳,而且LAMP扩增浊度检测与恒温水浴LAMP扩增联合LFD检测表现出一致的结果,均能有效区分燕窝样品的基原及伪品;在4.32× 108 ～4.32× 103 copies/μL的质粒标准品中具有良好的扩增检测效果.结论:LAMP扩增联合LFD的检测方法可以检测出燕窝核酸成分,对燕窝的基原鉴定具有良好的特异性和灵敏度,用于燕窝的检测快速准确,灵敏简便.

燕窝已传入中国千年余,人们对其认识逐渐从一种食物成为一种药食同源的珍品.燕窝的药用认识在元朝已形成雏形,明朝燕窝的功效被逐步发现.在清朝,燕窝被广泛运用于疾病的治疗.然而,中医对于燕窝的药用价值尚未形成统一的认识,限制了其在治病防病方面的运用.本文通过整理、归纳有关燕窝的古籍与近现代文献,针对燕窝的性、味、归经、功效与主治进行探讨,并提出个人的见解,认为:燕窝性平,味甘、淡、咸,归肺、脾、胃、肾经,主要功效为益气化痰,滋肾养肺,补脾和胃以及调补虚劳,主要运用于病机为肺气虚兼痰湿,或肾阴虚为本,肺阴虚为标,或脾气虚,胃气不和,或体虚年老者未病先防、既病防变等相关疾病的治疗.

目的 评价健康教育对鲁北地区布鲁菌病高危人群干预的效果.方法 选择鲁北地区疫情上升明显的鲁北地区利国乡、下河乡、滨海乡、燕窝乡的高危人群作为干预对象,通过现场集中培训、宣传栏培训和微信平台培训等方式进行干预,干预前后采用统一自制问卷进行调查,调查结果采用SPSS17.0统计软件统计分析.结果 干预前高危人群布鲁菌病防治知识总知晓率为(54.70％)和健康行为总养成率为(54.89％),干预后分别为(74.22％)和(69.82％),差异均有统计学意义(X2=447.413,P＜0.001;X2=255.328,P＜0.001).结论 健康教育和行为干预能提高高危人群布鲁菌病防治知识知晓率,但离预期目标还较远,尤其健康行为养成需要长期、系统多途径规范干预.