目的:研究白细胞介素-22（IL-22）在牙周炎症环境下对牙龈上皮屏障的调控作用及其可能机制。方法:构建IL-22敲除小鼠，采用混合菌液口腔灌洗法构建牙周炎模型。收集同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠（每组7只）口腔菌斑并提取DNA，建立牙周炎相关风险微生物数据库“PD-RiskMicroDB”并结合16S rRNA测序结果，测定两组小鼠口腔菌群变化和微生物功能的关系。通过改良胰酶消化法培养牙龈上皮细胞（GEC），以100 μg/L IL-22、感染复数为100的牙龈卟啉单胞菌（Pg）分别或联合刺激GEC，实验分组为：对照组（细胞未加刺激）、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组，处理时间为3和12 h；采用细胞免疫荧光、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）及蛋白质印迹法检测各组细胞3 h后上皮屏障蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达；通过异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITC-D）介导的上皮细胞通透性实验明确各组GEC 3和12 h细胞通透性的变化。RT-qPCR检测同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin表达水平。将15只C57BL/6野生型小鼠按随机数字表法随机分为对照组、牙周炎组和牙周炎+IL-22处理组，每组5只。RT-qPCR及免疫组织化学（IHC）染色法检测各组小鼠牙龈上皮E-cadherin的表达水平。结果:16S rRNA测序结果显示，与同窝生野生型牙周炎组小鼠相比，IL-22敲除牙周炎组小鼠口腔菌群组成发生改变，其中与牙周组织侵袭相关的菌属丰度显著增高（线性判别分析得分为2.22， P=0.009）。体外细胞实验显示，Pg感染GEC 3 h后，Pg组GEC的细胞连接中断，Pg组E-cadherin荧光强度较对照组减弱，E-cadherin的mRNA（0.69±0.12）和蛋白（0.60±0.12）表达水平均显著低于对照组（分别为1.00±0.00、1.04±0.08）（ P=0.043， P=0.003）；而Pg+IL-22组的E-cadherin荧光强度较Pg组稍增强，Pg+IL-22组E-cadherin的mRNA（1.16±0.10）和蛋白（0.98±0.07）表达水平均显著高于Pg组（分别为0.69±0.12、0.60±0.12）（ P=0.005， P=0.007）；上皮通透性实验结果显示，Pg处理GEC 3 h后，对照组、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组各组间总体比较上皮屏障通透性差异无统计学意义（ F=0.20， P=0.893）；处理12 h后，相较于对照组（1.00±0.00），Pg组GEC上皮屏障通透性（1.39±0.15）显著增加（ P=0.027），而Pg+IL-22组上皮屏障通透性（1.02±0.18）显著低于Pg组（ P=0.034）；体内RT-qPCR结果显示，IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin的mRNA表达水平（0.32±0.21）显著低于同窝生野生型牙周炎组（1.01±0.01）（ t=5.70， P=0.005）。RT-qPCR及IHC染色结果显示，牙周炎组小鼠牙龈上皮组织E-cadherin的mRNA表达水平（0.40±0.07）和E-cadherin阳性表达吸光度值（0.02±0.00）均显著低于对照组（分别为1.00±0.00、0.04±0.01）（ P=0.005， P=0.006）；牙周炎+ IL-22处理组E-cadherin的mRNA表达水平（1.06±0.24）和E-cadherin阳性表达吸光度值（0.03±0.01）均显著高于牙周炎组（ P=0.003， P=0.039）。 结论:IL-22可能通过调节口腔菌群的侵袭性以及宿主屏障蛋白表达，发挥其对炎症环境下牙龈上皮屏障的保护作用。

目的:观察S100A8、S100A9蛋白在比格犬健康及实验性牙周炎组织中的表达分布特点。方法:将6只比格犬的一侧下颌第二磨牙通过拴线法诱导实验性牙周炎模型（结扎组），另一侧下颌第二磨牙保持口腔卫生（健康对照组），应用免疫组化法检测S100A8、S100A9在6只比格犬健康及实验性牙周炎组织中的表达；免疫细胞化学法检测两种蛋白亚基在人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts，hGF）（来自3例牙冠延长术切除的牙龈组织）、人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells，hPDLC）（来自3例因正畸拔除的前磨牙或第三磨牙的牙周膜细胞）中的表达。结果:实验性牙周炎诱导第12周，结扎组探诊深度[（3.86±0.14）mm]显著高于健康对照组[（2.11±0.28）mm， P<0.01]；比格犬健康牙周组织中S100A8、S100A9主要表达于牙龈上皮细胞、中性粒细胞，且在结合上皮处呈强阳性表达；实验性牙周炎组织中除牙龈上皮、中性粒细胞外，两种蛋白还诱导表达于牙龈成纤维细胞、牙周膜细胞、微血管内皮细胞及骨髓成纤维细胞；hGF及hPDLC中均可检测到S100A8、S100A9的表达。 结论:实验性牙周炎使S100A8、S100A9的表达范围更大，表达S100A8、S100A9的细胞类型更多。

目的:探讨牙龈间充质干细胞(GMSCs)移植能否抑制辐射诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)衰老，及其在预防放射性肺纤维化(RIPF)中的作用。方法:采用6 Gy照射小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(MLE12)诱导细胞衰老，照后即刻与GMSCs共培养，通过细胞形态、β半乳糖苷酶(β-Gal)染色、衰老分泌相关表型(SASP)检测以评估细胞衰老程度；C57BL/6小鼠单侧右肺17 Gy照射构建RIPF模型，照后1 d移植GMSCs，照后180 d取材，期间记录小鼠生存率，采用肺脏器比、HE染色、Masson染色评估肺内结构及肺间质胶原沉积状况，应用β-Gal免疫组织化学法与AECⅡ免疫荧光共定位评估肺内细胞衰老程度，qRT-PCR检测肺组织SASP表达变化；采用Western blot检测P53-P21、P16通路关键蛋白表达水平，免疫荧光共定位检测AECⅡ中P21表达情况。结果:GMSCs共培养能够有效抑制辐射诱导的MLE12细胞衰老，使照射后升高的β-Gal阳染率降低11.8%( t＝6.72， P<0.05)，并使SASP(IL-6、IL-8、IL-1β)的表达有效降低( t＝28.43、28.43、4.82， P<0.05)；GMSCs移植提高了受照小鼠的生存率，改善了照射诱导的肺泡结构塌陷增厚及胶原蛋白沉积情况，照射后肺组织中衰老细胞数目降低23.9%( t＝21.83， P<0.05)，SASP的表达水平下降( t＝8.86、20.63， P<0.05)；抑制照射后MLE12及RIPF小鼠肺组织中P53-P21、P16相关蛋白的上调。 结论:GMSCs通过下调衰老相关的P53-P21及P16通路蛋白，从而抑制辐射诱导的AECⅡ衰老，达到预防放射性肺纤维化发生发展的目的。

目的:探讨聚醚醚酮、氧化锆、纯钛基台材料对人牙龈上皮细胞半桥粒黏附相关基因及蛋白表达的影响，以期筛选出更适合上皮附着的基台材料。方法:制备聚醚醚酮、氧化锆、纯钛试件各48枚，用扫描电镜观察各组表面形貌，用白光干涉仪测量表面粗糙度，光学接触角测量仪测量接触角。采用扫描电镜观察人牙龈上皮细胞在各组试件表面的早期黏附状态，并使用细胞计数试剂盒评估各组人牙龈上皮细胞的增殖能力，实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测各组人牙龈上皮细胞半桥粒黏附相关基因及蛋白的表达水平。结果:3组试件均呈平坦、光滑的表面形貌；聚醚醚酮组、氧化锆组和纯钛组平均粗糙度（Ra值）分别为（95.63±2.06）、（37.93±3.56）、（134.2±4.62）nm（ F=368.16， P<0.001），平均最大高度（Rz值）分别为（2.42±0.22）、（0.87±0.10）、（3.77±0.28）nm（ F=91.95， P<0.001），组间差异均有统计学意义（ P<0.05）；接触角总体差异无统计学意义（ F=0.45， P=0.658）。人牙龈上皮细胞在3组试件表面均呈扁平伸展的多边形、多角形等不规则形状，表现出典型的铺路石样。培养1和3 d时3组细胞增殖能力（ A值）差异均无统计学意义（ P>0.05）；培养5和7 d时聚醚醚酮组细胞增殖能力（ A值）均显著大于氧化锆组和纯钛组（ P<0.05）。培养3和7 d时聚醚醚酮组层粘连蛋白α3、整合素β4和胶原蛋白17的mRNA和蛋白表达水平均显著大于同时间点氧化锆组和纯钛组（ P<0.05）。 结论:聚醚醚酮相较氧化锆、纯钛基台材料更有利于人牙龈上皮细胞半桥粒的黏附。

药物性牙龈增生在临床上比较常见，是由某些药物引起的牙龈增生和体积增大，牙龈边缘和牙龈乳头增生为主要临床表现，不仅对患者的发音功能、咀嚼功能以及吞咽功能产生严重影响，同时给患者的生活也带来极大的痛苦，使患者产生心理障碍。目前对于药物性牙龈增生的发病机制尚无定论，仍需进行进一步的研究。该文就胶原合成与降解失衡机制、炎症机制、上皮细胞的增值和凋亡机制等方面作一综述。

目的 探讨绿原酸(CGA)对牙龈卟啉单胞菌(P.g)诱导人牙龈上皮细胞(HGE)自噬的影响及作用机制.方法 将 HGE细胞分为对照组(Control组,做任何处理)、P.g组(使用P.g诱导 HGE细胞建立细胞模型)、CGA组(同P.g组处理细胞,再分别用 10.0、20.0、40.0 mg/L CGA)、CGA+AMPK 激活剂(AICAR)组(同 P.g 组处理细胞,再用40.0 mg/L CGA+1.0 nmol/L AICAR).MTT法检测细胞增殖.分别检测 HGE 细胞凋亡及 LC3Ⅱ、LC3 I、Beclin-1、P62、p-ULK1、ULK1、p-AMPK、AMPK蛋白表达.结果 10～60 mg/L 的 CGA 均可显著抑制 P.g 诱导的 HGE 细胞增殖,选择浓度为 10.0、20.0、40.0 mg/L 的 CGA 进行后续实验.与 Control 组比较,P.g 组 LC3Ⅱ/I、Beclin-1、p-ULK1、p-AMPK蛋白表达水平显著升高,P62 表达水平显著降低(P<0.05);与 P.g 组比较,浓度为 10.0、20.0、40.0 mg/L的CGA处理的 HGE细胞凋亡率显著升高(P<0.05),LC3Ⅱ/I、Beclin-1、p-ULK1、p-AMPK蛋白表达水平显著降低,P62 表达水平显著升高(P<0.05),且呈药物浓度依赖性;AICAR可部分逆转CGA对P.g诱导的 HGE细胞自噬的抑制作用(P<0.05).结论 CGA通过抑制AMPK/ULK1 通路,抑制P.g诱导的人牙龈上皮细胞自噬,促进细胞凋亡.

目的 探究微小RNA(microRNA,miR)-758-3p在口腔鳞状细胞癌(OSCC)的表达及对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测正常牙龈上皮细胞(human gingival epithelial cells,HGE)及OSCC细胞系(CAL27、SCC9 和SCC25)中miR-758-3p的表达水平.将miR-758-3p模拟物转染至CAL27细胞中,构建过表达miR-758-3p细胞模型.采用WST-1 检测细胞增殖能力;Transwell法检测迁移和侵袭的影响;Western blot检测过表达miR-758-3p对CAL27 细胞中MMP2 及MMP9 蛋白水平的影响.结果 与HGE细胞比较,OSCC细胞系CAL27、SCC9 和SCC15 中miR-758-3p表达下调(P＜0.05),其中CAL27 细胞miR-758-3p表达量最低.miR-758-3p模拟物转染后,CAL27 细胞中miR-758-3p的表达水平显著增高(P＜0.05).miR-758-3p的过表达能显著抑制CAL27 的细胞增殖、迁移和侵袭能力(P＜0.05),明显抑制MMP2 和MMP9 蛋白的表达(P＜0.05).结论 miR-758-3p在OSCC细胞CAL27 中呈较低表达,过表达miR-758-3p可以显著抑制CAL27 细胞的增殖、迁移和侵袭.

伴放线聚集杆菌是一种革兰氏阴性兼性厌氧菌,是牙周炎的主要致病菌之一,具有多种毒力因子,不仅能损害牙龈上皮细胞(HGECs)屏障结构,逃避宿主的免疫防御,还能向深层组织入侵,破坏牙周膜和牙槽骨.而伴放线聚集杆菌与HGECs的相互作用是细菌入侵牙周组织的第一步,也是菌体引起机体免疫反应的关键.本文就伴放线聚集杆菌在HGECs上的黏附与定植,与HGECs的相互作用两方面的研究作一综述.

目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用.方法 内毒素耐受(endotoxin tolerance,ET)现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等,并可能影响组织的炎症和免疫反应.产生内毒素/脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的G-菌如大肠埃希菌是影响前列腺炎的主要病原体.因此,本研究拟通过分析LPS反复刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中细胞炎性因子IL-6和IL-8表达,探讨是否内毒素耐受现象存在于人前列腺上皮细胞中.结果 采用1μg/mL大肠杆菌(Escherichia coli) LPS刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1 24 h,洗涤细胞后,给予1μg/mL浓度LPS再次刺激24 h,构建内毒素耐受模型.采用液相芯片技术检测细胞培养液中细胞因子IL-6和IL-8分泌水平的变化.结果LPS刺激后6h和24 h,IL-6和IL-8分泌水平均呈现上升趋势(P＜0.05),较空白对照组有明显增高(P＜0.05),LPS反复刺激后,诱导细胞耐受后,IL-6和IL-8分泌水平较第1次刺激后明显降低(P＜0.05).结论 内毒素耐受现象存在于RWPE-1中,能抑制RWPE-1细胞因子IL-6和IL-8的表达,进而可能影响前列腺组织的炎症和免疫反应.

目的:探讨氢气对牙龈炎孕鼠牙龈局部损伤的保护作用及其可能的机制.方法:取SD雌鼠,采用结扎法诱导牙龈炎后,与雄鼠合笼交配.将孕鼠随机分为对照组、造模组和氢水组.对照组和造模组孕鼠饮用纯水,氢水组给予饱和氢水,1天2次.于妊娠第16天处死孕鼠,ELISA法检测各实验组孕鼠牙龈中Prog、SOD、TNF-α的水平,免疫组织化学和Western免疫印迹法检测牙龈中PR、NFκB和TNF-α的表达.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:丝线结扎可诱导SD大鼠妊娠期牙龈炎,PR主要分布于各实验组牙龈上皮细胞的胞质中,孕激素(Piog)及其受体(PR)的水平在各实验组孕鼠牙龈局部无显著差异(P＞0.05).造模组大鼠牙龈内SOD含量显著降低,NFκB和TNF-α表达显著升高.与造模组相比,氢水组孕鼠牙龈炎症反应明显减轻,牙龈内NFκB和TNF-α的表达下调.结论:孕激素及其受体可能在实验大鼠妊娠牙龈炎的发生与发展过程中发挥间接作用,氢气可能通过抑制氧化应激相关炎症反应,减轻实验大鼠的妊娠牙龈炎.