目的:探讨双唾液酸乳糖-N-四糖(DSLNT)对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠道内容物低分子量代谢谱的影响，探索其对新生儿肠道的保护作用方式。方法:新生SD大鼠按随机数表法随机分为对照组、NEC组和NEC+DSLNT组，大鼠均采用特殊配方奶人工喂养，NEC组和NEC+DSLNT组以3次/d的频率进行缺氧(950 mL/L氮气，10 min)/冷刺激(4 ℃，10 min)、连续3 d诱导新生大鼠NEC模型，NEC+DSLNT组在特殊配方奶中添加300 μmol/L DSLNT。造模72 h时处死所有存活大鼠，采集回结肠部位肠内容物进行基于超高效液相色谱-组合型四级杆Orbitrap质谱仪(UHPLC-QE-MS)的非靶向代谢组检测，末端回肠行苏木精-伊红染色。代谢组数据用SIMCA 14.1软件进行多元变量统计分析。以正交偏最小二乘分析(OPLS-DA)模型的变量投影重要度(VIP)值>1和 t检验中 P<0.05筛选两两比较的组间差异代谢物。 结果:DSLNT降低NEC发生率和NEC大鼠回肠组织病理学评分[3.0(2.0，3.0)分比1.0(1.0，2.0)分， P<0.01]，并可有效抑制炎症浸润。基于UHPLC-QE-MS代谢组检测结果建立的OPLS-DA模型能较好地对NEC组和对照组、NEC+DSLNT组和NEC组实现分离。NEC组和对照组之间有64个差异代谢物(OPLS-DA模型的VIP值>1且 P<0.05)，包括二十二碳六烯酸(+288.0%， P＝0.028)、黄嘌呤(+372.1%， P＝0.007)、L-精氨酸(+233.1%， P＝0.027)、L-亮氨酸(+232.7%， P＝0.015)、N-乙酰神经氨酸(-41.6%， P＝0.014)等，这些代谢物可映射到34条不同的代谢通路，其中精氨酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢等6条代谢通路为NEC主要扰动的代谢通路。NEC+DSLNT组与NEC组之间存在15种差异代谢物，包括D-甘露糖(-73.5%， P＝0.032)、黄嘌呤(-63.4%， P＝0.008)、亚油酸(+137.9%， P＝0.047)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(+278.2%， P＝0.005)等，这些差异代谢物可映射到7条代谢通路，其中亚油酸代谢为DSLNT主要影响的差异代谢通路。两种比对策略中重合的差异代谢物数量为8个，其在NEC中的变化趋势在DSLNT给药组中均出现显著逆转。 结论:DSLNT能显著缓解缺氧/冷刺激造成的新生大鼠NEC病理损伤，该保护作用与其改善NEC造成的肠内容物代谢谱偏移、调节亚油酸代谢通路有关。DSLNT的早期预防性补充对维护新生儿肠道稳态、预防NEC病理进程具有重要意义。

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中转录因子二聚化配体2（transcription factor dimerization partner 2，TFDP2）的表达及其对滋养细胞凋亡的影响。方法:回顾性选取2018年1月至2022年12月期间在南京大学医学院附属鼓楼医院剖宫产分娩的子痫前期产妇30例（子痫前期组），及同期在本院剖宫产分娩的健康正常产妇30例（对照组）的胎盘组织。利用免疫组织化学染色检测TFDP2在胎盘组织中的定位，实时荧光定量-聚合酶链反应和蛋白质印迹技术检测2组胎盘组织中TFDP2 mRNA和蛋白水平的差异。取合体滋养细胞BeWo细胞，转染小干扰RNA敲降TFDP2，利用蛋白质印迹和实时荧光定量-聚合酶链反应技术检测凋亡相关指标——B细胞淋巴瘤2蛋白（B cell lymphoma 2，Bcl2）和Bcl2相关X蛋白（Bcl2 associated X，Bax）及其mRNA的改变，利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记染色和流式细胞技术观察凋亡细胞数量的改变，并探索相关下游信号通路的变化。采用两独立样本 t检验、秩和检验和 χ2检验进行统计学分析。 结果:TFDP2主要表达于对照组胎盘合体滋养细胞和绒毛外滋养细胞中。子痫前期胎盘组织合体滋养细胞中TFDP2的表达量在mRNA水平（0.722±0.239与1.000±0.348， t=3.61， P=0.001）和蛋白水平（0.728±0.185与1.000±0.206， t=2.41， P=0.037）均低于对照组。与未敲降TFDP2比较，在BeWo细胞中敲降TFDP2，凋亡指标Bax/Bcl2比值升高（mRNA：1.755±0.452与1.000±0.279， t=3.48， P=0.006；蛋白：3.206±0.922与1.000±0.290， t=3.95， P=0.017），每个视野中凋亡细胞数量升高［（4.556±1.740）与（2.444±1.130）个， t=3.05， P=0.008］，总凋亡细胞比例升高［（21.37±1.66）%与（12.61±0.38）%， t=8.92， P=0.001］，BeWo细胞质中蛋白激酶A催化亚基的Thr197位点磷酸化活性降低（0.466±0.035与1.000±0.075， t=11.19， P<0.001），细胞核中β-连环蛋白的表达降低（0.250±0.093与1.000±0.269， t=4.57， P=0.010）。 结论:子痫前期患者胎盘组织合体滋养细胞中TFDP2的表达降低，可能通过抑制蛋白激酶A催化亚基/β-连环蛋白信号通路，促进合体滋养细胞的凋亡。

目的:探索葡萄糖对滋养层细胞系HTR8/SVneo细胞Akt2基因甲基化和mRNA水平的影响及早孕期外周血Akt2 mRNA水平与孕前体质指数（BMI）和妊娠期糖尿病（GDM）的关系。方法:（1）构建GDM孕妇子宫内高血糖环境细胞模型，按培养液的葡萄糖浓度分为2.5、5.0、10.0、25.0、40.0 mmol/L 5组；使用实时荧光定量PCR技术检测Akt2 mRNA水平，质谱检测Akt2基因启动子区域的甲基化水平。（2）收集2014年12月至2016年7月在北京大学第一医院分娩的60例孕妇的早孕期外周血，根据其孕前BMI及有无GDM分为4组：超重非GDM组、超重GDM组、肥胖非GDM组和肥胖GDM组。实时荧光定量PCR技术检测4组孕妇早孕期外周血中Akt2 mRNA水平。结果:（1）随培养液中葡萄糖浓度的升高，Akt2 mRNA水平显著升高，呈浓度依赖性（ P均<0.05）。与25.0 mmol/L组相比，5.0 mmol/L组Akt2基因启动子区域的甲基化位点胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤二核苷酸（CpG）10、CpG23、CpG24.5，2.5 mmol/L组Akt2基因启动子区域CpG23、CpG24.5位点，10.0 mmol/L组Akt2基因启动子区域CpG10位点，均出现显著的甲基化水平的改变（ P均<0.05）；与5.0 mmol/L组相比，40.0 mmol/L组Akt2基因启动子区域CpG10位点出现显著的甲基化水平的改变（ P<0.05）。（2）与超重非GDM组［1.04（0.90~1.26）］比较，超重GDM组［2.10（1.85~2.28）］和肥胖GDM组［1.68（0.82~2.43）］Akt2 mRNA水平均升高，差异均有统计学意义（ P均<0.05）。与肥胖GDM组［1.68（0.82~2.43）］比较，超重GDM组［2.10（1.85~2.28）］Akt2 mRNA水平较高，肥胖非GDM组［1.00（0.71~2.17）］Akt2 mRNA水平较低，但差异均无统计学意义（ P均>0.05）。 结论:葡萄糖可能通过改变Akt2基因启动子区域的甲基化状态，从而影响Akt2 mRNA水平，且这种变化可能在GDM孕妇的早孕期已经出现，特别是在孕前BMI较低的孕妇中。

环状GMP-AMP合成酶（cyclic GMP-AMP synthase，cGAS）是近几年发现的一种新的DNA模式识别受体，通过将信号2’-3’环化二核苷酸（cyclic GMP-AMP，cGAMP）传递至接头蛋白干扰素刺激蛋白（stimulator of interferon genes，STING）激活固有免疫系统，从而发挥抵抗病毒感染的作用。近年来，研究发现cGAS-cGAMP-STING信号通路可通过识别自身DNA诱导无菌性炎性反应从而参与急性肾损伤、免疫性肾病及肾脏肿瘤的发生，可为该类疾病的药物研发提供新的靶点。本文系统综述了cGAS-cGAMP-STING信号通路的发现、蛋白结构与功能及其在肾脏疾病中的作用，探讨了cGAS-cGAMP-STING信号通路在肾脏疾病治疗方面的意义。

目的:基于孟德尔随机化（MR）方法探究三甲胺N-氧化物（TMAO）及其前体（甜菜碱、肉碱和胆碱）与胰腺疾病之间的因果关系。方法:收集TMAO、甜菜碱、肉碱、胆碱、急性胰腺炎（AP）、慢性胰腺炎（CP）、胰腺癌（PC）和循环免疫细胞（白细胞、淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞）特征的全基因组关联研究数据。根据加强流行病学观察研究报告（STROBE）-MR指南，严格筛选可用的遗传变异〔单核苷酸多态性（SNP）〕，使用逆方差加权（IVW）、MR-Egger回归法和加权中位数法评估暴露（TMAO及其前体）与结局（胰腺疾病及循环免疫细胞特征）之间的因果关系。用基于MR-Egger回归法、MR-PRESSO、Cochrane's Q检验和留一法的敏感性分析评估结果的可靠性。 结果:共纳入36个与TMAO及其前体相关的SNP，其中5个与TMAO相关，13个与甜菜碱相关，12个与肉碱相关，6个与胆碱相关。① MR分析显示，TMAO可能增加AP发病风险〔优势比（ OR）＝1.100，95%可信区间（95% CI）为1.008～1.200， P＝0.032〕，胆碱可能降低酒精性急性胰腺炎（AAP）发病风险（ OR＝0.743，95% CI为0.585～0.944， P＝0.015）。MR-Egger回归法和加权中位数分析得到因果效应与IVW结果一致。没有证据支持TMAO及其前体与CP和PC风险之间的因果关系。敏感性分析显示，MR分析的SNP不存在异质性，存在多效性的可能性较低。留一法分析确定剔除任一SNP后，其余SNP对结果的影响效应区间与整体效应区间相似，提示MR结果的鲁棒性。②血浆TMAO水平与循环单核细胞计数升高存在正向因果关系（ OR＝1.017，95% CI为1.000*～1.034， P＝0.048，*代表数据由1.000 1保留3位小数所得）。MR-Egger回归法和加权中位数分析得到因果效应与IVW结果一致。敏感性分析显示，MR分析的SNP不存在异质性和多效性。留一法分析确定剔除任一SNP后，其余SNP对结果的影响效应区间与整体效应区间相似，提示MR结果的鲁棒性。 结论:TMAO、胆碱可能改变AP发病风险，TMAO可能有助于AP时循环单核细胞计数的升高。

目的:探究环氧二十碳三烯酸（EETs）与急性缺血性小卒中（MIS）后早期神经功能恶化（END）发生的相关性及其是否受EPHX2基因的调控。方法:本研究为前瞻性观察性研究。连续纳入2013年3月至2015年6月德阳市人民医院、温州医科大学第二附属医院和温州医科大学第三附属医院收治的首次发病且发病在24 h内的急性MIS患者。入院时对所有患者的血浆EETs水平进行检测，并检测其EPHX2基因rs751141单核苷酸多态性。主要终点为患者在入院10 d内出现END（END定义为美国国立卫生研究院卒中量表评分与入院时基线水平相比增加2分及以上者）。结果:共纳入322例患者，其中85例（26.4%）发生了END。与未发生END患者［（68.4±8.1） nmol/L］相比，发生END患者入院时EETs水平［（60.3±7.3） nmol/L］显著降低（ t=8.464， P<0.001），EPHX2基因rs751141 GG频率分布明显增高［发生END者66/85（77.6%），未发生END者123/237（51.9%），χ2=17.130， P<0.001］。EPHX2基因 rs751141 GG携带者EETs水平较低［GG型：（59.6±7.8） nmol/L；AG型：（67.9±8.2） nmol/L；AA型：（68.8±3.2） nmol/L， F=9.285， P<0.001］。多因素分析结果表明血浆低水平的EETs（≤64.3 nmol/L）为END发生的独立预测因素之一（31.5~51.3 nmol/L组： OR=2.96，95% CI 1.18~8.77， P=0.02；51.4~64.3 nmol/L组： OR=2.46，95% CI 1.06~6.89， P=0.03）。END的发生与患者3个月时预后不良密切相关（ OR=1.82，95% CI 1.46~2.35， P=0.02）。 结论:END在急性MIS后常见，且与预后不良相关。急性MIS后END与EETs水平降低和EPHX2基因rs751141 GG频率分布明显增高有关。

氧化磷酸化（oxidative phosphorylation，OXPHOS）是指糖、脂肪、蛋白质等营养物质在细胞内通过多步反应进入三羧酸循环后将产生的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinarnide adenine dinucleotide, NADH）和还原型黄素腺嘌呤二核苷酸（reduced flavin adenosine dinucleotide, FADH 2）通过电子传递链（electron transport chain, ETC）逐级传递，传递过程中释放的能量将二磷酸腺苷（adenosine diphosphate, ADP）磷酸化生成三磷酸腺苷（adenosine triphosphate, ATP）的过程。

目的:观察二甲双胍（Met）对糖尿病（DM）微环境下人视网膜微血管内皮细胞（hRMEC）中核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体及细胞焦亡的影响。方法:实验研究，分为体内动物实验和体外细胞实验进行。体内动物实验：健康C57BL/6J雄性小鼠9只，随机分为DM组、正常对照组、DM+Met处理组（DM+Met组），每组各3只小鼠。DM组、DM+Met组小鼠经链脲佐菌素诱导建立DM模型；DM+Met组给予Met 400 mg/（kg·d）干预。建模后8周，免疫组织化学染色观察正常对照组、DM组、DM+Met组小鼠视网膜NLRP3、cleaved-膜穿孔蛋白D（GSDMD）、cleaved-半胱天冬酶1（Caspase-1）的表达。体外细胞实验：hRMEC分为常规培养细胞组（N组）、晚期糖基化终末产物（AGE）组、AGE+Met组。AGE组、AGE+Met组加入150 μg/ml AGE诱导细胞，AGE+Met组另加入2.0 mmol/L Met处理细胞。流式细胞仪检测各组细胞焦亡情况；2', 7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测各组细胞中活性氧（ROS）表达；实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测各组细胞中NLRP3、cleaved-GSDMD、cleaved-Caspase-1 mRNA、蛋白相对表达量。三组间比较采用单因素方差分析。结果:体内动物实验：与DM组比较，正常对照组、DM+Met组小鼠视网膜中NLRP3、cleaved-GSDMD、cleaved-Caspase-1表达显著降低；三组间比较，差异有统计学意义（ F=43.478、36.643、24.464， P<0.01）。体外细胞实验：流式细胞仪检测结果显示，AGE组细胞焦亡率显著高于N组、AGE+Met组，差异有统计学意义（ F=32.598， P<0.01）。DCFH-DA检测结果显示，N组、AGE+Met组细胞内ROS水平较AGE组明显降低，差异有统计学意义（ F=47.267， P<0.01）。AGE+Met组细胞中NLRP3、cleaved-GSDMD、cleaved-Caspase-1的mRNA（ F=51.563、32.192、44.473， P<0.01）和蛋白（ F=63.372、54.463、48.412， P<0.01）相对表达量较N组显著下降。 结论:Met可下调hRMEC内NLRP3炎性小体相关因子表达并抑制细胞焦亡。

目的:探讨心理应激诱导酸敏感受体在小鼠食管中的表达及氧化应激在食管炎症发生中的作用。方法:选取雄性无特定病原体(SPF)级20只昆明小鼠随机分2组(每组10只)，即慢性束缚应激(Stress)组和正常对照(Control)组。应激组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h，其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食，实验持续14 d。光镜下观察苏木精-伊红(HE)染色后食管黏膜组织病理学改变，采用免疫组化、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附测定方法检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶-4(Nox-4)在小鼠食管及血清中的表达。进一步通过qRT-PCR方法检测食管组织中酸敏感受体的表达水平。结果:光镜下观察发现，HE染色后应激组小鼠食管黏膜组织中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及浆细胞浸润反应和炎症性改变，而对照组小鼠食管全层未发现明显异常。两组小鼠炎症评分结果显示，应激组小鼠食管黏膜损伤评分均明显高于对照组，差异有统计学意义( P<0.001)。免疫组化结果显示，Nox-4主要表达于食管固有层、黏膜及黏膜下层，应激组Nox-4阳性表达显著高于对照组。应激组小鼠食管黏膜组织中Nox-4 mRNA表达水平是对照组的(2.67±0.62)倍，差异有统计学意义( P<0.001)；Nox-4在应激组小鼠血清中的表达水平显著高于对照组[(0.42±0.01)ng/ml vs (2.13±0.35)ng/ml]，差异具有统计学意义( P<0.001)。应激组酸敏感受体如瞬时感受器电位通道-1(TRPV-1)、TRPV-4、酸敏感离子通道-1(ASIC-1)、ASIC-2和ASIC-3的mRNA表达明显高于对照组，差异有统计学意义( P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示，应激组Nox-4 mRNA表达与TRPV-1、TRPV-4、ASIC-1、ASIC-2、ASIC-3 mRNA表达之间呈正相关( r＝0.97、0.94、0.98、0.95、0.99， P<0.01)。 结论:心理应激引起酸敏感受体的异常表达，并诱导炎症和氧化应激产生，从而导致食管高敏感性的产生。

目的:探讨微小核糖核酸-133a(miR-133a)和沉默交配型信息调节2同源基因1(SIRT1)在电针促进废用性肌萎缩恢复中的作用。方法:将C57BL/6小鼠30只按随机数字表法随机分为正常组、实验对照组、实验组，每组10只小鼠，将实验对照组和实验组小鼠进行尾悬吊构建废用性肌萎缩模型，实验组在尾悬吊的同时进行电针刺激，刺激穴位为阳陵泉和足三里，每日刺激1次，每次15 min，连续治疗14 d。正常组和实验对照组则常规饲养，不进行任何干预。3组大鼠均于实验组干预14 d后统一取材，测定比目鱼肌、腓肠肌的湿重比和横截面积，采用透射电镜观察其骨骼肌和线粒体结构，Western Blot检测沉默交配型信息调节2同源基因1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体C辅激活因子1a(PGC-1a)、尼克酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPK-a)以及磷酸化-AMPK-a(P-AMPK-a)蛋白的表达，实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肌肉萎缩F盒蛋白(Atrogin-1)、肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)、微小核糖核酸-133a(miR-133a)、SIRT1、配对盒基因(Pax7)、生肌调节因子(MyoD)和肌细胞生成素(MyoG)基因的表达，试剂盒检测尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的浓度和NAD+/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。结果:干预14 d后，与实验对照组比较，实验组比目鱼肌的湿重和横截面积分别增加了21.03%、30.25%( P<0.05)，腓肠肌的湿重和横截面积与实验对照组比较，分别增加了5.24%、16.96%( P<0.05)。实验组Atrogin-1、MuRF1、SIRT1、PGC-1a、NAMPT、P-AMPK-a/AMPK-a的表达和NAD+浓度、NAD+/NADH均显著低于实验对照组( P<0.05)，而实验组miR-133a的表达则较实验对照组干预14 d后增加了163.3%( P<0.05)。干预14 d后，与细胞增殖相关的Pax7、MyoD基因在实验对照组中表达的显著上调，与正常组和实验组比较，差异均有统计学意义( P<0.05)；实验组与细胞分化相关的MyoG基因则呈高表达状态，与正常组和实验对照组比较，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:SIRT1相关通路属于机体反射性保护机制之一，参与介导骨骼肌的自然恢复；电针刺激经miR-133a/SIRT1增强成肌细胞分化，改善线粒体能量代谢，从而促进废用性肌萎缩的恢复。