为探析黄芪四妙汤(Huangqi Simiao Decoction,HSD)治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的作用机制.通过网络药理学筛选HSD的成分靶点及T2DM相关疾病靶点,构建交集靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络、药物-成分-交集靶点网络,并筛选出潜在活性成分及靶点;使用AutoDock Vina软件进行分子对接验证潜在成分与核心靶点的相互作用;通过超高效液相色谱-串联质谱代谢组学技术检测血清,采用主成分分析(PCA)及偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等多元统计分析,结合MetaboAnalyst数据库寻找各组差异代谢物与相关代谢通路,并将筛选的差异代谢物结合网络药理学筛选的交集靶点联合分析相同代谢通路.网络药理学显示,HSD治疗T2DM的9个核心成分为槲皮素、山柰酚、豆甾醇、汉黄芩素、β-谷甾醇、黄藤素、黄连素、黄连碱、小檗红碱;5个核心靶点为AKT1、TP53、TNF、IL6、VEGFA.分子对接显示,核心成分和靶点基因结合较好.代谢组学显示,共鉴定出112个共同差异代谢物,经HSD治疗后,其中88个代谢物浓度上升,24个代谢物下降.富集分析表明,HSD调节T2DM患者机体代谢主要与氨基酸代谢、三羧酸循环等7条代谢通路有关.代谢组学与网络药理学联合分析显示,二者均涉及组氨酸代谢通路、精氨酸和脯氨酸代谢通路.结果表明,HSD对T2DM具有较好的治疗作用,基于代谢组学和网络药理学分析发现其作用机制可能是HSD中槲皮素、山柰酚、豆甾醇等药效基础通过调控多种代谢物,加强对组氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢通路的影响,为进一步防治T2DM提供了依据.

目的 基于PPARγ/NF-κB信号通路探究防己黄芪消肿方对代谢综合征表型骨关节炎(MS-OA)大鼠的治疗作用及机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组、骨关节炎(OA)组、MS-OA组、西药组和中药高、低剂量组,采用改良Hulth法建立OA模型,改良Hulth法+高碳水高脂肪饮食建立MS-OA模型.中药高、低剂量组分别予防己黄芪消肿方药液15.12、7.56 g/kg灌胃,西药组给予洛索洛芬钠16.2 mg/kg灌胃,其余组予生理盐水灌胃,每日1次,连续6周.测量大鼠体质量,生化检测血脂及血糖,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10及瘦素含量,番红O-固绿及HE染色观察软骨组织形态,免疫组化染色检测软骨组织蛋白聚糖(Acan)、Ⅹ型胶原(ColⅩ)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、TNF-α、IL-1β、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达,Western blot检测软骨组织PPARγ、核因子(NF)-κBp65、p-NF-κBp65蛋白表达.结果 与假手术组比较,MS-OA组大鼠体质量及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TNF-α、IL-1β、瘦素含量均升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、IL-10含量降低(P<0.01),软骨组织退变明显,Mankin评分增加(P<0.01),软骨组织ColⅩ、MMP13、TNF-α、IL-1β、p-NF-κBp65蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),Acan、PPARγ蛋白表达降低(P<0.01);与MS-OA组比较,中药高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、瘦素含量降低(P<0.05,P<0.01),IL-10含量增加(P<0.05),软骨组织病理损伤改善,Mankin评分降低(P<0.01),软骨组织ColⅩ、MMP13、TNF-α、IL-1β、p-NF-κBp65蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Acan、PPARγ蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05).结论 防己黄芪消肿方可改善MS-OA大鼠脂代谢紊乱、改善关节内炎症环境、平衡软骨代谢、延缓软骨退变,其作用机制可能与调节PPARγ/NF-κB信号通路有关.

目的:本研究旨在探讨环黄芪醇对糖尿病性皮肤溃疡模型大鼠创面愈合的影响及其作用机制.方法:受试动物设正常对照组、模型对照组、环黄芪醇20 mg/kg组、环黄芪醇20 mg/kg+IWR-1(Wnt通路抑制剂)8.2 μg/kg组、环黄芪醇20 mg/kg+STF-31(GLUT 1抑制剂)5.8 mg/kg组.除正常对照组外,其余大鼠经腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,剪去大鼠背部标记区域的皮肤和皮下组织建立皮肤溃疡模型.大鼠按分组灌胃给药14 d,并在给药第5、10、14 d测定大鼠创面愈合率;检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)的含量;HE染色检测创面组织的病理变化;免疫组化法检测创面组织中血管内皮生长因子A(VEGFA)和内皮型一氧化氮合酶(ENOS)的表达情况;细胞划痕法检测环黄芪醇对脐静脉内皮细胞(HU-VEC)在LPS诱导的炎症状态下迁移率的影响;Western blot法检测给药第10 d的创面组织和LPS诱导后的HUVEC细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、特异性顶部盘状底板反应蛋白-3(RSPO3)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)蛋白的表达情况.结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠在给药第5、10 d时创面愈合率显著降低(P＜0.01),创面组织中ENOS的表达和血清SOD活力明显降低(P＜0.05或P＜0.01),血清MDA含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01);在给药第10 d时,β-catenin、CyclinD1和MMP2蛋白的表达显著下调(P＜0.01);与模型对照组比较,环黄芪醇20 mg/kg组大鼠在给药第10 d时创面愈合率显著升高(P＜0.01),在给药第5、10 d时血清中SOD活力和创面组织中ENOS的蛋白表达显著升高(P＜0.01),β-catenin、cyclinD1和MMP2蛋白的表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01).与空白对照组比较,模型对照组细胞的迁移率明显降低(P＜0.05或P＜0.01),CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白的表达显著下调(P＜0.01);与模型对照组比较,环黄芪醇25 μg/mL组细胞的迁移率明显升高(P＜0.05或P＜0.01),CyclinD1和MMP9蛋白的表达显著上调(P＜0.01)o结论:环黄芪醇能促进糖尿病性皮肤溃疡模型大鼠的创面愈合,其作用机制涉及Wnt/β-catenin信号通路的激活.

玉屏风散是历代医家常用的经典名方之一,由黄芪、白术、防风3味药组成,具有益气固表止汗之功效,主治表虚自汗症,现代药理学研究表明该方具有抗炎、抗菌、抗病毒、调节机体免疫功能、抗肿瘤等药理作用,临床常用于治疗消化系统、免疫系统、呼吸系统、皮肤科及儿科常见疾病.该文总结了近年来玉屏风散的化学成分、药理作用及临床应用的研究情况,并基于中药质量标志物(Q-marker)"五原则"——传递与溯源、特有性、有效性、复方配伍环境及可测性对玉屏风散的Q-marker进行预测分析,提示黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷、芒柄花素、芒柄花苷、升麻素、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、白术内酯I可作为玉屏风散的Q-marker,后续可选择以上成分为指标对玉屏风散及其制剂进行全程质量把控和评价,并建立质量溯源体系.

氧化应激(OS)是指机体遭受各种有害刺激时产生过多的活性氧自由基而无法及时清除,导致氧化系统和抗氧化系统平衡失调,引起组织或细胞功能紊乱和损伤的一种状态.OS与男性不育症(MI)关系密切,OS通过影响精子发生,损伤精子膜、脱氧核糖核酸(DNA)、线粒体,降低精子运动能力,加速细胞凋等途径使精子质量下降,导致MI.研究发现,单味中药的有效成分多糖类化合物(黄芪多糖、党参多糖、枸杞多糖、黄精多糖、山茱萸多糖、当归多糖、女贞子多糖、石斛多糖),黄酮类化合物(菟丝子总黄酮、槲皮素、紫云英苷、羊藿苷、金丝桃苷),皂苷类化合物(人参皂苷、蒺藜皂苷、薯蓣皂苷元),苯丙素类化合物(五味子甲素、姜黄素、白藜芦醇),环烯醚萜苷类化合物(桃叶珊瑚苷),氮苷类化合物(红景天苷),低聚糖类化合物(巴戟甲素),苯乙醇苷类化合物(肉苁蓉苯乙醇苷)多肽类化合物(牡蛎肽)具有抗氧化作用,可提升雄性动物MI模型的生殖功能.

目的 构建乌金胶囊活性成分-作用靶点网络和蛋白相互作用网络,对靶点涉及的功能以及通路进行分析,探讨乌金胶囊抗肝细胞癌作用机制.方法 通过TCMSP数据库(http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)获取乌金胶囊中延胡索、郁金、黄芪、山楂和通关藤的主要活性成分及其靶点,通过GenCards、OMIM、TTD、DRUGBANK数据库获取肝细胞癌疾病相关靶点.采用Cyto-scape构建活性成分-肝细胞癌靶点网络,并分析核心成分和靶点;利用String(http://string-bd.org)平台进行蛋白质相互作用分析;采用Metascape平台对靶点进行GO及KEGG通路分析.结果 筛选得到乌金胶囊活性成分66个,作用于139个肝细胞癌靶点;核心活性成分有槲皮素、山柰酚、柚皮素和刺芒柄花素等,核心靶点包括TGS2、HSP90AA1和RXRA等;GO分析结果表明,乌金胶囊抗肝细胞癌的靶点主要涉及细胞对氮化合物的反应、蛋白质磷酸化的正向调节、细胞对有机环状化合物的反应、细胞对生长因子刺激的反应和细胞对化学应激的反应等生物过程.KEGG分析结果显示,乌金胶囊抗肝细胞癌作用的靶点主要涉及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B 信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路和肿瘤坏死因子等信号通路.结论 乌金胶囊抗肝细胞癌作用具有多成分、多靶点与多通路的特点,其可能通过调节磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、丝裂原活化蛋白激酶和肿瘤坏死因子等相关通路发挥作用.

原发性肝癌为我国高发恶性肿瘤,中医认为肝癌的主要病因是"气虚血瘀",其治法以"益气活血"为主.黄芪-莪术为益气活血法代表性药对,已有研究表明该药对及其活性成分具有明确的抗肝癌作用.通过对黄芪-莪术药对及其活性成分抗肝癌作用机制相关文献进行梳理,从抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制细胞迁移和侵袭、抑制新血管生成、改善免疫微环境、逆转多药耐药等角度对其抗肝癌作用机制进行综述,为黄芪-莪术药对的临床用药和抗肝癌中药新药研发提供依据.

目的 基于网络药理学的方法筛选补肺汤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的有效成分及作用靶点,探讨其相关机制.方法 基于中药系统药理数据库与分析平台(TCMSP)分析既往文献中补肺汤组成中药(人参、黄芪、熟地黄、五味子、紫菀、桑白皮)的有效成分及其作用靶点.基于Gene Expression Omnibus(GEO)、Drugbank及Gene-cards数据库筛选COPD相关靶点,与补肺汤作用靶点取交集得到补肺汤治疗COPD的潜在基因,对潜在基因进行GO功能及KEGG信号通路富集分析.构建蛋白互作网络(PPI)图,采用拓扑分析的方法明确补肺汤治疗COPD的作用靶点.结果 筛选后获得人参的有效成分40种、黄芪27种、熟地9种、五味子19种、紫菀22种、桑白皮36种;其中,槲皮素、黄芪异黄烷苷、山奈酚、异鼠李素、刺芒柄花素、β-谷甾醇、谷甾醇、原阿片碱、3,9-二甲氧基紫檀烷、7-甲基醚-青榆烯C为重要性排名前10位的有效成分.筛选得到有效成分的作用靶点141个,补肺汤治疗COPD的潜在基因1 730个,取交集后共得到补肺汤治疗COPD的潜在靶点基因80个.补肺汤治疗COPD潜在基因的GO功能分析结果显示,主要涉及炎症反应、细胞凋亡、细胞增殖、氧化还原等方面;KEGG信号通路分析结果显示,主要涉及细胞衰老途径、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞周期循环途径、神经营养蛋白信号通路、细胞凋亡途径、Th17细胞分化途径、FoxO信号通路、PI3K/AKT信号通路、Rap1信号通路、Ras信号通路.PPI图筛选后的作用靶点包括丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、热休克蛋白90α家族A类成员1(HSP90AA1)、禽肉瘤病毒17的转化基因(JUN)等.结论 补肺汤治疗COPD的有效成分是槲皮素、山奈酚等,可能通过作用于MAPK1、HSP90AA1、JUN等靶点调控细胞衰老途径、MAPK信号通路、细胞凋亡途径等而发挥治疗作用.

建立了 UPLC-MS/MS法检测SD大鼠和Beagle犬血浆中环黄芪醇(1)的含量,以20(S)-原人参二醇为内标,采用甲醇沉淀蛋白.并设计了 SD大鼠和Beagle犬口服或注射1的体内试验以考察1的药代动力学行为.将24只SD大鼠随机分成4组,分别灌胃1、3、10mg/kg剂量的1混悬液,或静脉注射1mg/kg的1注射液.结果显示,SD大鼠口服1、3、10 mg/kg的1混悬液在0.5 h左右达峰,半衰期在0.83～0.93 h,AUC0→t分别为190、602、1 818 μg·L-1·h,血浆暴露量与给药剂量呈线性比例增加,口服生物利用度为29.4％.将12只Beagle犬随机分成2组,分别灌胃30 mg/kg剂量的1混悬液,或静脉注射1 mg/kg的1注射液.结果显示,Beagle犬口服30 mg/kg的1混悬液在0.75 h达峰,半衰期为1.26 h,消除速度稍慢于SD大鼠,AUC0→t为110 μg·L-1·h,口服生物利用度为0.5％.本研究首次对比了 1混悬液在SD大鼠和Beagle犬体内的药代动力学特征,为该药物的进一步研究提供了参考依据.

随着生活水平的提高和生活方式的改变,糖尿病的发病率及死亡率逐年上升.糖尿病发病10年后,约30％ ～ 40％的患者至少会发生一种并发症,如糖尿病视网膜病变、肾脏病变或心血管病变等,这些慢性并发症大大影响患者生活质量和寿命.糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是指糖尿病患者出现左心室肥厚和舒张功能障碍,进而发展为收缩功能不全,且这种改变不与患者其他潜在的心血管疾病相关.线粒体是细胞内重要的能量代谢场所,它直接参与细胞生长、增殖、胞内信号转导和细胞凋亡等过程.近年来研究发现,线粒体障碍与DCM多个发病环节密切相关,其作用涉及糖脂代谢紊乱、氧化应激损伤、钙调控障碍、线粒体脱偶联、质量控制失衡以及MicroRNAs对线粒体的调节等多个方面.现代生物学研究进展同样启发中医药工作者以线粒体为靶向探寻有效治疗措施,越来越多的单味中药或其提取物(如人参、黄芪、葛根、黄连、姜黄、白藜芦醇等)以及复方制剂(如止消通脉宁、糖心乐、通心络等)被证实可以通过调节线粒体功能,改善糖尿病性心肌损伤.基于以上背景,该文将就线粒体障碍在DCM发病中的作用以及中医药在该领域的干预研究进展进行综述,以期为DCM的预防和治疗提供新的思路.