目的 探讨肺癌胸腔镜术后肺部感染危险因素及血清瓜氨酸化组蛋白H3(Cit H3)、髓细胞上表达的触发受体1(TREM-1)早期预测术后肺部感染的价值.方法 选取2020年7月至2023年7月安徽省蒙城县第一人民医院肺癌胸腔镜手术患者89例,统计术后肺部感染发生情况,采用Logistic回归分析肺部感染危险因素,采用受试者工作特征(ROC)分析血清Cit H3、TREM-1水平对肺部感染的预测价值.结果 89例肺癌胸腔镜手术患者术后共18例出现肺部感染,发生率为20.45％(18/88);Logistic回归分析显示,年龄、吸烟指数、术前FEV1％、病理分期、手术时间及术前血清Cit H3、TREM-1水平均为肺癌胸腔镜术后肺部感染影响因素(P<0.05);ROC曲线显示,Cit H3、TREM-1联合预测肺癌胸腔镜术后肺部感染的AUC值0.715最大,对应敏感度为0.814,特异度为0.828.结论 肺癌胸腔镜术后肺部感染率较高,联合检测Cit H3、TREM-1有助于提高对胸腔镜术后肺部感染的诊断价值.

目的:探讨瓜氨酸（citrulline, Cit）对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）导致的小鼠急性肺损伤（acute lung injury, ALI）是否具有保护作用。方法:42只7~9周的C57雄性小鼠，进行2批实验，每批小鼠按完全随机分组法分为3组（每组7只）：正常对照组（Con组）、LPS组和LPS+Cit组。首先对小鼠腹腔注射Cit 900 mg·kg ?1·d ?1（LPS+Cit组）或等容量生理盐水（Con组、LPS组）进行预处理7 d，第8天腹腔注射LPS 10 mg/kg（LPS组、LPS+Cit组）或等容量生理盐水（Con组），LPS干预后6 h麻醉插管检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中蛋白浓度和细胞数量，测定肺组织湿/干重比（wet/dry weight ratio, W/D），观察肺组织病理改变，Western blot法检测肺组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NOD-like receptor pyrin domain containing 3, NLRP3）炎性体、半胱氨酸蛋白酶-1（cysteine aspartate-specific protease-1, caspase-1）蛋白水平，ELISA法检测肺组织中IL-1β、IL-18水平。 结果:与Con组比较，LPS组BALF中蛋白浓度、细胞数量及肺组织W/D明显升高（ P<0.05），NLRP3、caspase-1蛋白水平及IL-1β、IL-18蛋白含量明显升高（ P<0.05）；与LPS组比较，LPS+Cit组BALF中蛋白浓度、细胞数量及肺组织W/D明显降低（ P<0.05），NLRP3、caspase-1蛋白水平及IL-1β、IL-18蛋白含量明显降低（ P<0.05）。 结论:Cit可能通过抑制NLRP3炎性体激活，降低炎症因子释放，从而发挥对肺损伤的保护作用。

目的:总结河南人群瓜氨酸血症Ⅰ型的发病率及基因变异特点，为瓜氨酸血症Ⅰ型的早期诊断、治疗和遗传咨询提供依据。方法:横断面研究。回顾性分析2016年1月至2022年12月在郑州大学第三附属医院应用串联质谱法完成的河南省814 625例新生儿的遗传代谢病筛查结果。采用二代高通量测序法对瓜氨酸血症Ⅰ型筛查阳性患儿进行 ASS1基因变异分析及父母基因验证。对新检测到的 ASS1基因变异使用罕见外显子组变体集成学习器(REVEL)方法分析表型-基因型相关性，并构建蛋白质三维结构模型进行生物信息学分析。 结果:814 625例新生儿中共确诊8例(1/101 828)瓜氨酸血症Ⅰ型患儿。8例患儿均有特异性瓜氨酸水平增高。基因测序共检出12种变异，均为错义突变，其中包括5种新发现的变异：c.552C>A(p.N184K)、c.140C>T(p.A47V)、c.173A>G(p.K58R)、c.920G>A(p.R307H)和c．790G>A(p.G264S)，其中c.552C>A检出率最高，占18.75%(3/16)。REVEL分析预测这5种变异均为有害性，ASS蛋白三维结构模型显示c.140C>T(p.A47V)和c.920G>A(p.R307H)未发生氨基酸残基间氢键数量的变化，而c.552C>A(p.N184K)、c.173A>G(p.K58R)和c.790G>A(p.G264S)导致氢键减少，可能会影响到ASS蛋白的功能。结论:河南省新生儿瓜氨酸血症Ⅰ型发病率为1/101 828。新发现了5种变异，丰富了人类 ASS1基因变异谱，为瓜氨酸血症Ⅰ型的早期诊断、治疗和遗传学研究提供了重要依据。

目的:通过肠道生物标志物肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）、瓜氨酸的动态变化来协助评价不同程度休克患者早期肠内营养是否能够获益。方法:①由2021年2月至2023年2月，纳入南京医科大学附属苏州医院重症监护室目标患者133例，观察期为入院7 d，肠道生物标志物监测3次，分别为：入院后24 h（D1）、入院第3天（D3）、入院第7天（D7）。②纳入患者根据入院48 h内接受去甲肾上腺素剂量分为：安全剂量组[接受去甲肾上腺素<0.3 μg/（kg·min）]，危险剂量组[接受去甲肾上腺素≥0.3 μg/（kg·min）]。③安全剂量组标按照指南推荐意见实施早期肠内营养，危险剂量组随机予早期肠内营养（EEN）和延迟肠内营养（DEN）。④观察三组肠型脂肪酸结合蛋白、瓜氨酸的动态变化；比较危险剂量EEN/DEN不同时间点肠道生物标志物的差异。⑤记录危险剂量EEN/DEN组28 d内生存时间，绘制Kaplan-Meier生存曲线。⑥纳入总体进行28 d死亡的单因素及多因素回归分析。结果:①比较安全剂量EEN组/危险剂量EEN组基线资料，APACHE Ⅱ评分、动脉血乳酸、AGI分级、喂养中断、7 d内喂养总时间、28 d生存人数差异有统计学意义（ P<0.05）；比较危险剂量EEN组/危险剂量DEN组基线资料，仅喂养中断数差异有统计学意义（ P<0.05）。②安全剂量EEN组与危险剂量DEN组变化趋势相同：I-FABP从D3至D7开始有明显下降趋势（ P<0.05）；瓜氨酸从D1至D3降低，但从D3至D7开始回升（ P<0.05）；危险剂量EEN组，I-FABP在监测期内无明显变化（ P>0.05）；瓜氨酸在D1至D3有明显下降（ P<0.05）；危险剂量EEN/DEN比较仅D7-I-FABP差异有统计学意义（ P<0.05）。③比较危险剂量EEN/DEN生存曲线，DEN可以提高危险剂量下危重患者早期生存率（Breslow检验 P = 0.0447）。④年龄（ OR=1.069, 95% CI: 1.002~1.140， P=0.044）是28 d死亡的独立危险因素；BMI（ OR=0.772, 95% CI: 0.604~0.987， P=0.039）、无喂养中断（ OR=0.044，95% CI: 0.004~0.455， P=0.009）、7 d内喂养总时间（ OR=0.959，95% CI: 0.923~0.997， P=0.036）是其保护因素。 结论:安全剂量下EEN和危险剂量下DEN能有效地逆转肠细胞的的坏死，促进肠细胞功能的恢复。危险剂量EEN不能明确是28 d死亡的危险因素，但其不仅增加了喂养中断发生率，从肠道生物标志物的角度也不利于肠细胞功能的恢复。

目的:探讨胆总管结石患者胆汁中性粒细胞胞外诱捕网(NET)激活水平及其临床意义。方法:纳入2021年5月至2022年10月在安徽医科大学第一附属医院消化内科行内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)的患者130例。根据病因，将患者分为胆总管结石组(90例)和非胆总管结石组(40例)，胆总管结石组进一步分为大结石组(最大径>1 cm，36例)和小结石组(最大径≤1 cm，54例)。收集130例患者术中和16例留置鼻胆管患者ERCP术后24 h胆汁样本。采用酶联免疫吸附试验测定胆汁中髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)的水平。比较胆总管结石组与非胆总管结石组、小结石组与大结石组、胆总管结石患者ERCP治疗前与治疗后的MPO、NE、CitH3水平。统计学方法采用Mann-Whitney U检验、Wilcoxon符号秩检验。 结果:胆总管结石组患者胆汁MPO、NE、CitH3分别为32.6 U/L(28.5 U/L)、30.6 ng/L(35.2 ng/L)、0.37 μg/L(0.73 μg/L)，均高于非胆总管结石组[MPO为19.9 U/L(36.4 U/L)、NE为18.2 ng/L(27.4 ng/L)、CitH3为0.10 μg/L(0.25 μg/L)]，差异均有统计学意义( Z＝2.91、3.20、3.34， P＝0.004、0.001、0.001)。大结石组患者胆汁MPO、NE、CitH3分别为47.0 U/L(49.4 U/L)、48.4 ng/L(39.5 ng/L)、0.83 μg/L(1.08 μg/L)，均高于小结石组[MPO为29.3 U/L(17.5 U/L)、NE为24.0 ng/L(25.8 ng/L)、CitH3为0.27 μg/L(0.45 μg/L)]，差异均有统计学意义( Z＝2.01、3.58、3.63， P＝0.044、<0.001、<0.001)。胆总管结石患者行ERCP治疗后的胆汁MPO[19.4 U/L(19.8 U/L)]、NE[12.7 ng/L(15.1 ng/L)]、CitH3[0.05 μg/L(0.12 μg/L)]与ERCP治疗前[MPO为33.6 U/L(36.7 U/L)、NE为22.7 ng/L(25.9 ng/L)、CitH3为0.14 μg/L(0.27 μg/L)]相比均明显降低，差异均有统计学意义( Z＝3.52、3.30、3.18，均 P<0.001)。 结论:胆总管结石患者胆汁中NET激活水平升高，ERCP术后胆汁NET激活水平降低，提示NET可能参与胆总管结石的形成过程。

目的:评价GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只，5~6周龄，体质量15~20 g，采用随机数字表法将小鼠分为4组( n＝12)：自主呼吸组(S组)、自主呼吸+GSK484干预组(SG组)、VILI组(V组)、VILI +GSK484干预组(VG组)。S组及SG组气管插管后自主呼吸4 h；V组及VG组机械通气4 h(潮气量30 ml/kg、呼吸频率75次/min、吸呼比1∶2、呼吸末正压0 mmHg、吸入氧气浓度21%)。于VILI建模前3 d，SG组及VG组腹腔注射GSK484 4 mg/kg，1次/d，S组及V组每天以等容量生理盐水代替。小鼠自主呼吸或机械通气4 h时，采集腹主动脉血样，行血气分析，记录PaO 2；随后处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。确定肺组织湿重/干重比值(W/D)；肺组织HE染色后，光镜下观察病理学结果并行损伤评分；采用ELISA法检测BALF IL-1β、IL-6、TNF-α及髓过氧化物酶(MPO)浓度；采用Western blot法检测肺组织肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及瓜氨酸化组蛋白3(Cit-H3)表达水平。 结果:与S组和SG组比较，V组和VG组肺损伤评分和W/D比值升高，PaO 2降低，BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度升高，肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达上调( P<0.05)；与V组比较，VG组肺损伤评分和W/D比值降低，PaO 2升高，BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度降低，肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达下调( P<0.05)。 结论:GSK484可减轻小鼠VILI，机制与抑制PAD4表达，减少NETs产生，减轻肺组织炎症反应有关。

目的:评价高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在肠缺血再灌注小鼠肺损伤中的作用及其与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的关系。方法:SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠24只，体重20～25 g，采用随机数字表法分为4组( n＝6)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、IgY对照抗体组(IgY组)和Anti-HMGB1中和抗体组(Anti-HMGB1组)。采用夹闭肠系膜上动脉1 h后恢复灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。Anti-HMGB1组于缺血1 h后肠道血流恢复即刻腹腔注射Anti-HMGB1中和抗体1.0 mg/kg；IgY组于缺血1 h后肠道血流恢复即刻腹腔注射IgY同型对照抗体1.0 mg/kg。于再灌注4 h时处死小鼠，收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)，测定总蛋白、游离双链DNA(dsDNA)及HMGB1的浓度；取肺组织HE染色后光镜下观察病理学结果，采用Western blot法测定瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)表达。 结果:与Sham组比较，I/R组和IgY组肺组织病理学损伤评分、BALF总蛋白、HMGB1和dsDNA浓度升高，Cit-H3表达上调( P<0.05)；与IgY组比较，Anti-HMGB1组肺组织病理学损伤评分、BALF总蛋白、HMGB1和dsDNA浓度降低，肺组织Cit-H3表达下调( P<0.05)。 结论:HMGB1参与了肠缺血再灌注小鼠肺损伤的过程，与介导NETs形成有关。

目的:评价小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)时内质网肌醇需要酶1α-X盒结合蛋白1(IRE1α-XBP1)信号通路与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只，6～8周龄，体质量25～30 g，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：对照组(C组)、STF-083010组(ST组)、内毒素性ALI组(ALI组)和内毒素性ALI＋STF-083010组(ALI＋ST组)。ALI组和ALI＋ST组采用雾化吸入LPS的方法建立小鼠内毒素性ALI模型，C组和ST组雾化吸入等量生理盐水，ST组和ALI＋ST组于建模前1 h腹腔注射IRE1α抑制剂STF-083010 50 mg/kg，其余2组腹腔注射等容量生理盐水。建模后24 h时麻醉后处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)与肺组织，光镜下观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分，确定肺湿质量/干质量(W/D)比值；ELISA法测定BALF IL-1β、IL-18和髓过氧化物酶(MPO)浓度；Western blot法检测肺组织p-IRE1α、XBP1s和瓜氨酸化组蛋白3(Cit H3)表达。 结果:与C组相比，ALI组和ALI＋ST组建模后24 h时肺损伤评分、W/D比值、BALF IL-1β、IL-18和MPO浓度升高，肺组织p-IRE1α、XBP1s和Cit H3表达上调( P<0.05)；与L组相比，ALI＋ST组建模后24 h时肺损伤评分、W/D比值、BALF IL-1β、IL-18和MPO浓度降低，肺组织p-IRE1α、XBP1s和Cit H3表达下调( P<0.05)。 结论:IRE1α-XBP1信号通路参与了小鼠内毒素性ALI的过程，与上调NETs表达有关。

目的:旨在明确百日咳毒素（PTX）能否促进实验性自身免疫性肌炎（EAM）模型间质性肺疾病（ILD）的发生并探究其潜在的致病机制。方法:构建单用骨骼肌匀浆或骨骼肌匀浆联合PTX诱导的EAM模型，通过组织病理学、血清学研究明确PTX与EAM小鼠ILD表型及中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的关系；健康小鼠单独给予PTX腹腔注射，明确是否能在体内诱发NETs形成，PTX体外干预健康人中性粒细胞明确能否诱发NETs形成。计量资料使用Shapiro-Wilk正态性检验，采用 t检验或单因素方差分析，采用图基事后检验（Tukey）进一步比较组间差异。 结果:与单用骨骼肌匀浆组相比，使用骨骼肌匀浆联合PTX组的EAM模型肺组织有着类似于多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM）相关ILD的多种病理学改变，以非特异型间质性肺炎、普通型间质性肺炎为主要类型；EAM组肺间质伴有明显的NETs浸润；EAM组血清NETs标记物水平明显升高，与对照组[ n=5，（87±10）ng/ml]相比，肌匀浆组[ n=4，（115±27）ng/ml]和EAM组[ n=7，（150±50）ng/ml]循环核酸（cfDNA）水平均升高且差异具有统计学意义（ F=4.24， P=0.038）；与对照组（ n=4，0.13±0.02）相比，肌匀浆组（ n=4，0.24±0.09），EAM组（ n=6，0.33±0.11）的瓜氨酸化组蛋白H3（Cit-H3）-DNA水平升高（ F=6.21， P=0.016）。PTX干预后，PTX组血清cfDNA水平[ n=3，（100±40）ng/ml]高于对照组[ n=3，（45±12）ng/ml， t=2.27， P=0.086]；PTX在体外可诱导中性粒细胞形成NETs。 结论:PTX可能通过诱导NETs形成促进EAM模型ILD的发生，提示EAM小鼠可以作为靶向NETs研究ILD的模型。

目的:探讨中性粒细胞胞外诱捕网（NET）在重症脑静脉窦血栓（CVST）患者中的临床特征及其对急性期、亚急性期患者的预后价值。方法:本研究为回顾性病例系列研究。回顾性分析2019年6月至2022年6月在天津市环湖医院神经外科接受血管内治疗的52例重症CVST患者的临床和病理学资料。男性20例，女性32例，年龄（40.1±13.6）岁（范围：18~66岁）。纳入同期45名健康体检者作为对照组。CVST患者术前均行高分辨MRI对血栓进行分期，根据分期将患者分为急性组（11例）、亚急性组（28例）和慢性组（13例），并经血管内治疗获取血栓标本，经免疫荧光染色对比不同分期患者外周血NET标志物［瓜氨酸化组蛋白H3（CitH3）、髓过氧化物酶-DNA复合物（MPO-DNA）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）］的荧光强度，并采用ELISA测定患者外周血附着蛋白水平。采用Spearman秩相关分析法分析急性、亚急性组患者外周血中不同NET标志物与静脉窦内血栓体积、治疗后静脉窦再通程度、出院时改良Rankin量表（mRS）评分的相关性；通过绘制受试者工作特征（ROC）曲线并计算曲线下面积（AUC）分析不同NET标志物预测重症脑静脉窦血栓患者预后的准确性。结果:免疫荧光染色和ELISA实验结果显示，对照组外周血中未见NET结构形成，CVST患者外周血中CitH3、MPO-DNA、NE水平均升高，其中急性期组最高，亚急性组次之，慢性组最低。Spearman相关分析结果显示，急性组、亚急性组患者外周血CitH3、MPO-DNA、NE水平均与血栓体积及患者出院时mRS评分成正相关（ P值均<0.05）。静脉窦完全再通患者外周血CitH3、MPO-DNA水平均低于静脉窦部分再通患者（ P值均<0.01）。ROC曲线分析结果显示，MPO-DNA、NE对CVST患者预后无预测能力（ P值分别为0.614、0.324），CitH3的AUC为0.800（95% CI：0.638~0.962， P=0.032），最佳截点值为13.5 μg /L，灵敏度为100%，特异度为58.8%。 结论:CVST患者体内有大量的NET形成，外周血NET含量高的急性期、亚急性期重症CVST患者治疗后静脉窦完全再通率低，神经功能恢复差。CitH3水平对急性期、亚急性期重症CVST患者有一定预后价值。