目的 采用超高液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术与网络药理学探讨人参黄精杏麦饮抗疲劳的药效物质及作用机制.方法 通过UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定人参黄精杏麦饮化学成分,并利用TCMSP、Swiss Target Prediction数据库预测化学成分相关靶点;利用Disgenet、Genecards数据库检索疲劳靶点,利用韦恩图绘制平台获取共有靶点,并将信息导入Cyto-scope3.7.1 软件和STRING在线分析平台,进行网络拓扑学分析,构建药物-活性成分-关键靶点网络.最后,通过DAVID数据库进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and gnomes,KEGG)通路富集分析.结果 通过UPLC-Q-TOF-MS分析鉴定出35 个药物活性成分,主要为黄酮类;对药物和疾病靶标集进行拓扑分析,获得 14 个关键成分和39 个核心靶点;通过KEGG富集到癌症、流体剪切应力与动脉粥样硬化通路、PI3K-Akt、脂质与动脉粥样硬化和糖尿病并发症中的AGE-RAGE等信号通路.结论 人参黄精杏麦饮的活性成分通过作用于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、磷酸甘油醛脱氢酶、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子等靶标改善机体氧化应激反应、减轻免疫介导的炎症和感染以及调控细胞增殖、分化、凋亡等多种细胞功能发挥抗疲劳作用,初步阐明人参黄精杏麦饮抗疲劳的作用,为后续深入研究提供参考.

目的:构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂/3-磷酸甘油醛脱氢酶复合表位基因（CPI502/GAPDH720）真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720，并观察其在人宫颈癌细胞（Hela细胞）中的蛋白表达。方法:根据T细胞表位预测的基因序列设计引物，以质粒pGEM-T-CPI621为模版，利用反转录PCR（RT-PCR）扩增目的基因片段，将该片段克隆至原核表达质粒pET-28a（+）中，构建原核表达质粒pET28a（+）-BmCPI502。根据软件设计合适引物，RT-PCR分别扩增BmCPI502基因和BmGAPDH720基因，pcDNA3.1（+）、BmCPI502、BmGAPDH720分别进行双酶切后进行连接，构建复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720。将复合表位基因重组质粒转染至Hela细胞后，进行RT-PCR验证，获得与预期相符目的条带；将表达产物利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行检测。结果:获得了原核表达重组质粒pET28a（+）-BmCPI502，经酶切鉴定得到502 bp特异性片段，与预期值符合；成功构建了复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720，酶切鉴定所产生的片段大小与预期符合；复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720转染Hela细胞后得到稳定表达，SDS-PAGE鉴定分析显示重组蛋白相对分子质量（ Mr × 10 3）约为50。 结论:成功构建了周期型马来丝虫复合表位基因真核表达质粒pcDNA3.1（+）-BmCPI502/BmGAPDH720，并在真核细胞中获得相应的重组蛋白，为进一步研究重组蛋白纯化和测定其生物学活性奠定了基础。

目的:探讨糖化碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)影响人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)增殖及血管化效应的受体途径。方法:采用实验研究方法。采用葡萄糖、bFGF制备糖化bFGF刺激液。取第3～6代HDMEC进行实验。取细胞，分为小干扰RNA(siRNA)-阳性对照组、siRNA-阴性对照组、siRNA-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)组和siRNA-成纤维细胞生长因子受体(FGFR)组，分别转染siRNA-阳性对照3-磷酸甘油醛脱氢酶、siRNA-阴性对照、siRNA-RAGE和siRNA-FGFR 4～6 h，之后加入HDMEC培养基常规培养，反转录PCR法鉴定siRNA转染效果。取细胞，分为正常对照组、单纯糖化bFGF组、单纯siRNA-RAGE组、siRNA-RAGE＋糖化bFGF组，接种于96孔板和6孔板。单纯siRNA-RAGE组、siRNA-RAGE＋糖化bFGF组细胞转染siRNA-RAGE之后，加入HDMEC培养基常规培养，2 d后，弃去原HDMEC培养基，单纯siRNA-RAGE组细胞加入HDMEC培养基常规培养，siRNA-RAGE＋糖化bFGF组细胞加入糖化bFGF刺激液常规培养；正常对照组细胞采用HDMEC培养基常规培养；单纯糖化bFGF组细胞采用糖化bFGF刺激液常规培养。取细胞，同前转染siRNA-RAGE后，接种于48孔板，分为单纯siRNA-RAGE组和siRNA-RAGE＋糖化bFGF组；另取细胞不转染直接同前接种到48孔板，分为正常对照组及单纯糖化bFGF组，4组分别同前处理。取细胞，分为正常对照组、单纯糖化bFGF组、单纯siRNA-FGFR组、siRNA-FGFR＋糖化bFGF组，分别接种于96、6、48孔板中，相应处理同前，仅siRNA-RAGE换为siRNA-FGFR。采用细胞计数试剂盒8法测定培养2 d细胞增殖活性(样本数为6)，流式细胞术检测培养2 d细胞凋亡情况(样本数为3)，成管实验检测培养6 h细胞成管能力(样本数为4)。对数据行单因素方差分析、LSD- t检验。 结果:200 bp条带处，未见siRNA-阳性对照组、siRNA-RAGE组和siRNA-FGFR组表达目的基因，可见siRNA-阴性对照组表达目的基因，说明siRNA转染成功。培养2 d后，单纯糖化bFGF组细胞吸光度值明显低于正常对照组( t＝2.359， P<0.05)；siRNA-RAGE＋糖化bFGF组细胞吸光度值明显高于单纯糖化bFGF组( t＝3.858， P<0.01)，与单纯siRNA-RAGE组相近( t＝2.148， P>0.05)。培养2 d后，siRNA-FGFR＋糖化bFGF组细胞吸光度值与单纯糖化bFGF组相近( t＝0.805， P>0.05)，但明显低于单纯siRNA-FGFR组( t＝4.201， P<0.01)。培养2 d后，单纯糖化bFGF组细胞凋亡率明显高于正常对照组( t＝2.416， P<0.05)，siRNA-RAGE＋糖化bFGF组细胞凋亡率明显低于单纯糖化bFGF组和单纯siRNA-RAGE组( t＝3.861、2.724， P<0.05或 P<0.01)。培养2 d后，正常对照组、单纯糖化bFGF组、单纯siRNA-FGFR组、siRNA-FGFR＋糖化bFGF组细胞凋亡率组间总体比较，差异无统计学意义( F＝2.218， P>0.05)。培养6 h后，正常对照组细胞小管成环数[(636±5)个]明显多于单纯糖化bFGF组[(580±8)个， t＝10.825， P<0.01]，siRNA-RAGE＋糖化bFGF组细胞小管成环数[(647±10)个]明显多于单纯糖化bFGF组和单纯siRNA-RAGE组[(628±4)个， t＝13.040、3.641， P<0.01]。培养6 h后，siRNA-FGFR＋糖化bFGF组细胞小管成环数[(619±5)个]明显多于单纯糖化bFGF组( t＝9.000， P<0.01)，但少于单纯siRNA-FGFR组[(632±3)个， t＝2.814， P<0.05]。 结论:糖化bFGF通过RAGE途径影响HDMEC的增殖和血管生成，可能是造成糖尿病皮肤创面难愈的原因之一。

目的:探讨复合人表皮干细胞（ESC）的猪脱细胞真皮基质（ADM）对裸鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:采用实验研究方法。采用数码相机拍照观察猪ADM形态，采用苏木精-伊红（HE）染色观测猪ADM中细胞残留，采用扫描电子显微镜观察猪ADM表面结构，采用红外光谱仪分析猪ADM二级结构，采用动态光散射粒度分析仪分析猪ADM粒径，采用纳米粒度电位仪分析猪ADM电位。采用倒置荧光显微镜观察猪ADM在培养基中放置30 min、1 d、5 d的形态（样本数为2）；采用随机数字表法（分组方法下同）将猪ADM分为5 min组、10 min组、20 min组、30 min组、60 min组、120 min组，常温静置相应时间，称量法计算吸水量（样本数为3）；将Swiss小鼠胚胎成纤维细胞（Fb）分为仅有培养基的空白对照组和另加入相应终质量浓度的ADM浸提液的50.0 g/L ADM浸提液组、37.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、6.5 g/L ADM浸提液组，分别于培养24、48、72 h，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖率并进行细胞毒性分级（样本数为5）；将1只6周龄雄性SD大鼠红细胞分为生理盐水组、超纯水组及添加相应终质量浓度猪ADM浸提液的5 mg/mL ADM浸提液组、10 mg/mL ADM浸提液组、15 mg/mL ADM浸提液组，于反应3 h，采用酶标仪检测血红蛋白的吸光度值代表猪ADM血液相容性（样本数为3）。从陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院泌尿外科2020年7月收治的1名6岁健康男童包皮环切术后废弃包皮中分离培养ESC并采用流式细胞术鉴定。混合培养法构建复合ESC的猪ADM（以下简称ESC/ADM）颗粒，培养3 d后采用HE染色和激光扫描共聚焦显微镜观察ESC/ADM复合效果。将36只7~8周龄雄性无胸腺裸鼠分成单纯磷酸盐缓冲液（PBS）组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组，每组9只，并建立全层皮肤缺损创面模型，伤后即刻，创面均一次性采用相应试剂处理。分别于伤后1、7、11、15 d，观察创面愈合情况并计算创面愈合率（样本数为3）；伤后7 d，行HE染色观察创面上皮化情况并测量未上皮化长度（此处及以下样本数均为4）；伤后11 d，行Masson染色观察创面胶原沉积和真皮化情况并计算创面切面真皮面积，行免疫荧光染色并计算创面表达ESC特异性标志物CD49f的细胞数，行实时荧光定量反转录PCR检测创面移植ESC的3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）的mRNA表达。对数据行独立样本 t检验、单因素方差分析、重复测量方差分析、LSD- t检验。 结果:猪ADM为白色微粒状，内部无细胞存在，由网状结构组成，结构排列无序，表面粗糙；猪ADM分别在1 659、1 549、1 239 cm -1波数处出现吸收峰；猪ADM在溶液中主要粒径分布在500~700 nm；猪ADM表面带负电荷。放置30 min、1 d、5 d，猪ADM均形态相对稳定；放置30~120 min猪ADM吸水量保持相对高水平。6.5 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组小鼠胚胎Fb在培养24 h细胞毒性分级为1级，其余各组各时间点细胞毒性分级均为0级。反应3 h，超纯水组红细胞中血红蛋白的吸光度值明显高于生理盐水组和15 mg/mL ADM浸提液组（ t值分别为8.14、7.96， P<0.01）。第4代细胞常规培养3 d形态呈鹅卵石样且低表达CD71和高表达CD49f的被鉴定为ESC。猪ADM颗粒上有ESC附着、生长。伤后1 d，单纯PBS组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面大小基本一致。伤后7、11、15 d，各组裸鼠创面收缩，其中单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面收缩明显。伤后7 d，单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面愈合率明显高于单纯PBS组（ t值分别为2.83、4.72， P<0.05或 P<0.01）；伤后11 d，ESC/ADM组裸鼠创面愈合率明显高于单纯PBS组（ t=4.86， P<0.01）；伤后15 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面愈合率均明显高于单纯PBS组（ t值分别为2.71、2.90、3.23， P<0.05）。伤后7 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面未上皮化长度分别为（816±85）、（635±66）、（163±32）μm，明显短于单纯PBS组的（1 199±43）μm（ t值分别为5.69、10.19、27.54， P<0.01）。伤后11 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面切面真皮面积明显大于单纯PBS组（ t值分别为27.14、5.29、15.90， P<0.01）；单纯ADM组和ESC/ADM组裸鼠创面的胶原生成比单纯PBS组明显，单纯ESC组和单纯PBS组相近。伤后11 d，单纯ESC组和ESC/ADM组裸鼠创面中CD49f表达阳性数量分别为（135±7）、（185±15）个，GAPDH的mRNA表达阳性；单纯PBS组、单纯ADM组裸鼠创面均无CD49f、GAPDH的mRNA表达。 结论:ESC/ADM颗粒能够促进裸鼠全层皮肤缺损创面愈合，这可能与其提高了ESC移植后的存活率和ADM促进了真皮结构重排、血管新生有关。

目的:通过生物信息学分析骨性关节炎(OA)软骨下骨改变过程中的潜在生物标志物及相关通路。方法:从基因表达数据库(GEO)下载GSE51588数据集，鉴定差异表达基因(DEGs)并进行富集分析。构建蛋白互作网络(PPI)，模块分析并筛选Hub基因。预测Hub基因的靶向MicroRNAs(miRNAs)，鉴定关键miRNAs并绘制其受试者工作特征(ROC)曲线。结果:最终鉴定出与OA软骨下骨改变相关的10个Hub基因，3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、白蛋白(ALB)、骨髓肿瘤细胞(MYC)、Toll样受体2(TLR2)、髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞表达的弹性蛋白酶(ELANE)、甲酰肽受体2(FPR2)、精氨酸酶1(ARG1)、前血小板碱性蛋白(PPBP)、甲酰肽受体1(FPR1)，及8个关键miRNAs(hsa-miR-6809-3p、hsa-miR-4263、hsa-miR-6759-5p、hsa-miR-6165、hsa-miR-6754-5p、hsa-miR-5588-5p、hsa-miR-877-3p、hsa-miR-4270)。结论:本研究结果显示的潜在生物标志物及相关通路为OA的诊断和治疗研究提供候选靶点。

目的:探讨橙皮素对膀胱肿瘤细胞T24细胞株生长繁殖的影响，探讨橙皮素的相关作用机制。方法:体外培养购自美国模式培养无集存库人膀胱肿瘤T24细胞株，将2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0 μmol/L橙皮素分别作用于T24细胞株24、48、72 h并通过噻唑蓝(MTT)法观察细胞生长和增殖状况；通过流式细胞仪检测细胞生长G 0期与G 1比值百分比的变化；并通过Transwell实验观察橙皮素对T24细胞迁移和侵袭的影响；蛋白质印迹法(Western blot)观察磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、细胞外信号调节激酶(ERK) 、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达及与内参甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)比值的变化。两组之间的比较使用独立样本 t检验，多组间比较使用单因素方差分析。 结果:橙皮素可明显抑制T24细胞株的增殖，且经橙皮素处理24 h组的半抑制浓度(IC 50)[(20.79±1.82) μmol/L]与处理48 h组的IC 50[(21.34±1.64) μmol/L]相当，两者差异无统计学意义( t＝0.562， P>0.05)，而两组高于72 h组(10.28±1.16) μmol/L，有统计学意义( t＝10.498、11.060， P<0.05)；10、20 μmol/L组作用48 h后细胞周期G 0/G 1百分比分别为(70.12±5.21)%、(78.46±7.43)%，高于对照组[(57.86±5.39)%]，差异有统计学意义( t＝12.260、20.600， P<0.05)；10 、20 μmol/L组作用48 h后侵袭抑制率分别为(25.37±1.76)%、(41.31±1.86)%，迁移的抑制率分别为(21.23±1.09)%、(34.67±1.58)%，高于对照组侵袭抑制率[(0.21±0.02)%]和迁移抑制率[(0.27±0.03)%]，差异有统计学意义( t＝25.170、41.110； t＝21.030、34.470， P<0.05)；10 、20 μmol/L组作用48 h后p-ERK、PI3K、p-Akt、N-Cadherin蛋白表达降低，与内参的比值分别为(0.46±0.06、0.44±0.06；0.54±0.08、0.51±0.09；0.48±0.06、0.47±0.07；0.50±0.05、0.49±0.05)比对照组与内参比值(0.67±0.06、0.82±0.11、0.71±0.04、0.78±0.10)低，差异有统计学意义( t＝4.205、4.283、4.231、5.278； t＝4.231、4.310、4.240、5.281， P<0.05)，E-Cadherin蛋白表达升高，与内参的比值分别为(0.73±0.14、0.74±0.20)比对照组与内参比值(0.56±0.08)高，差异有统计学意义( t＝7.181、7.183， P<0.05)。 结论:橙皮素对膀胱癌T24细胞株生长有抑制作用，其机制可能与PI3K/Akt和RAS/MAPK信号通路有关。

目的:检测p53和DNA损伤调控基因1(PDRG1)在结直肠癌细胞中的表达，探讨PDRG1在结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移过程中的作用及其机制。方法:实时定量反转录聚合酶链反应法(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测结肠癌(SW620)和正常结肠(NCM460)2种细胞中PDRG1 mRNA及蛋白的表达。转染PDRG1过表达载体和小干扰RNA(siRNA)感染序列至SW620细胞，实验分为3组，过表达转染组，阴性转染对照组，抑制组。Western blot检测PDRG1、锌指蛋白转录因子1(Snail1)、上皮型钙黏附蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)，Transwell小室检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。检测转染Snail1 siRNA感染序列对过表达PDRG1 SW620的影响。计数数据采用 χ2检验或者Fisher′s精确检验，采用 t检验比较各组间差异。 结果:PDRG1 mRNA和蛋白在SW620的相对表达量分别为1.853±0.118、1.563±0.064，明显高于NCM460中的1.00±0.00、1.00±0.00( t＝12.51、15.08， P<0.01)。SW620细胞转染PDRG1过表达载体后mRNA和蛋白的相对表达量较对照组( t＝20.073、16.842， P<0.01)明显升高，转染72 h后细胞增殖水平高于对照组( t＝4.857， P<0.01)，侵袭和迁移细胞数122.3±18.1、174.6±13.2，较对照组99.5±16.2、110.5±12.2明显增加( t＝2.956、11.271， P<0.01)。Snail1、Vimentin的表达明显升高( t＝9.756、10.950， P<0.01)，E-Cadherin的表达明显降低( t＝-6.060， P<0.01)。SW620细胞转染PDRG1 siRNA后mRNA和蛋白的表达较对照组明显降低( t＝8.072、12.704， P<0.01)，转染48、72 h后增殖水平低于对照组( t＝5.557、-4.782， P<0.01)，侵袭和迁移细胞数(30.8±8.6、37.5±8.9)，较对照组(117.6±12.8、126.9±11.9)明显降低( t＝-17.734、-18.873， P<0.01)。Snail1、Vimentin蛋白的表达明显降低( t＝-7.588、-7.187， P<0.01)，E-Cadherin的表达明显升高( t＝13.239， P<0.01)。转染Snail1 siRNA感染序列逆转了PDRG1调节的上皮-间充质化(EMT)过程和细胞迁移和侵袭。 结论:PDRG1可通过调控Snail1的表达来影响EMT过程，从而促进肿瘤细胞的增殖，侵袭和迁移。

目的:探讨WW域结合蛋白2(WBP2)对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和代谢的影响及其机制。方法:2015年6月到2018年6月安阳市人民医院收集正常脑胶质和脑胶质瘤组织59例，采用免疫组织化学分析脑胶质和胶质瘤组织中WBP2蛋白的表达水平。采用WBP2短发卡RNA(shRNA)和对照shRNA慢病毒感染U251脑胶质瘤细胞株，建立WBP2沉默和对照细胞株，分别为实验组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)试剂盒和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色分析两组细胞的增殖能力；采用Transwell分析两组细胞的迁移能力；采用异种移植瘤模型分析两组细胞在体内的增殖能力。采用乳酸试剂盒分析两组细胞乳酸分泌。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析糖酵解甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的表达。采用 t检验。 结果:与正常脑胶质细胞(54.31±5.69)比较，脑胶质瘤组织中WBP2蛋白表达水平(169.57±10.69)显著升高，差异有统计学意义( t＝4.312， P<0.01)。与对照组细胞(1.59±0.26)比较，实验组细胞72 h增殖能力(1.05±0.15)明显下降，差异有统计学意义( t＝3.105， P<0.05)。与对照组细胞EdU染色率[(67.25±6.98)%]比较，实验组EdU染色率[(19.33±4.89)%]显著下降，差异有统计学意义( t＝2.954， P<0.05)。实验组细胞迁移数量[(64.32±8.91)个]较对照组[(21.38±11.20)个]明显下降，差异有统计学意义( t＝3.984， P<0.01)。实验组细胞培养上清乳酸[(68.54±6.87) μmol/L]含量较对照组[(100.85±9.51) μmol/L]显著下调，差异有统计学意义( t＝3.029， P<0.05)。 结论:WBP2蛋白在脑胶质瘤组织中呈高表达，参与胶质瘤细胞的增殖和迁移，并可调节肿瘤细胞糖酵解。

目的:观察芪参益气滴丸对心肌缺血再灌注损伤2型糖尿病大鼠心肌的保护作用及线粒体自噬磷酸甘油酸变位酶5（PGAM5）/Fun14结构相关蛋白1（FUNDC1）信号通路的影响。方法:雄性SD大鼠48只，分为空白对照组、假手术组、心肌缺血再灌注损伤（MIRI）1组、MIRI 2组、抑制剂组和芪参益气滴丸组。除空白对照组和MIRI 1组外，其余大鼠通过高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射，建立2型糖尿病模型。芪参益气滴丸组灌胃芪参益气滴丸450 mg/kg，1次/d，抑制剂组除给予芪参益气滴丸外同时腹腔注射三甲基腺嘌呤（3-MA）100 mmol/L，1次/d，其余4组灌胃等体积生理盐水。灌胃1周后，除空白对照组、假手术组外，其余4组采用左冠状动脉前降支结扎30 min、再灌注2 h的方法构建MIRI模型，再灌注2 h后取材。计算大鼠死亡率，检测心肌酶肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平和心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平，实时荧光定量PCR测定心肌组织PGAM5/FUNDC1通路节点蛋白表达水平的变化。结果:与MIRI 1组比较，MIRI 2组大鼠血清AST、LDH、CK和MDA水平升高（均 P<0.05），SOD水平降低（ P<0.05），心肌组织中FUNDC1、PGAM5、B细胞淋巴瘤-xL（Bcl-xL）、蛋白轻链3（LC3）、自噬相关蛋白5（ATG5）、Beclin-1水平降低（均 P<0.05），P62水平升高（ P<0.05），含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9（Caspase-9）水平有增高的趋势，但差异无统计学意义（ P>0.05）；与MIRI 2组及抑制剂组比较，芪参益气组大鼠血清AST、LDH、CK和MDA水平降低（均 P<0.05），SOD水平升高（ P<0.05），心肌组织FUNDC1、PGAM5、Bcl-xL、LC3、ATG5、Beclin-1水平升高（均 P<0.05），而P62、Caspase-9水平降低（均 P<0.05）。 结论:高血糖加重了MIRI，芪参益气滴丸通过调节PGAM5/FUNDC1通路介导线粒体自噬减轻MIRI，对糖尿病大鼠心肌发挥保护作用。

目的:探讨核转录因子红系2相关因子2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, Nrf2）信号通路在硫化氢（hydrogen sulfide, H 2S）减轻新生鼠缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic encephalopathy, HIE）中的作用。 方法:36只7日龄C57BL野生型（wild type, WT）小鼠和36只7日龄Nrf2基因敲除（knock out, KO）小鼠分别按随机数字表法分为野生型对照组（WT-Con组）、Nrf2基因敲除对照组（KO-Con组）、野生型模型组（WT-HI组）、Nrf2基因敲除模型组（KO-HI组）、野生型模型+NaHS组（WT-NaHS组）和Nrf2基因敲除模型+NaHS组（KO-NaHS组），每组12只。结扎一侧颈总动脉后缺氧环境中处理2 h复制小鼠HIE模型，腹腔注射3 mg/kg NaHS干预。缺氧缺血（hypoxic and ischemic, HI）后24 h，收集小鼠全脑组织，应用H-E染色检测神经元损伤情况，JC-1法检测线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP），酶标仪检测活性氧（reactive oxygen species, ROS）释放，Clark氧电极检测呼吸率（respiration3/respiration4, R3/R4），生物发光法检测ATP含量，Western blot检测B淋巴细胞瘤-2蛋白（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-Associated X, Bax）、血红素氧合酶（heme oxygen, HO）-1、硫氧还蛋白（thioredoxin, Trx）-1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH）、Nrf2和组蛋白（Histone）3。分别在HI后4周和6周，应用Y迷宫检测小鼠学习记忆能力。结果:与WT-Con组比较：WT-HI组小鼠存活神经元明显减少（ P<0.05）；Bax、Nrf2、HO-1和Trx-1表达增加（ P<0.05），Bcl-2表达减少（ P<0.05）；MMP、线粒体呼吸率（R3/R4）和ATP水平降低（ P<0.05），ROS释放增加（ P<0.05）；交替次数百分比和新异臂停留时间减少（ P<0.05）。与WT-HI组比较：WT-NaHS组小鼠存活神经元增加（ P<0.05）；Bax表达减少（ P<0.05），Bcl-2、Nrf2、HO-1和Trx-1表达增加（ P<0.05）；MMP、线粒体呼吸率和ATP水平增加（ P<0.05），ROS释放减少（ P<0.05）；交替次数百分比和新异臂停留时间增加（ P<0.05）。与WT+NaHS组比较：KO+NaHS组存活神经元明显减少（ P<0.05）；Bax表达增加（ P<0.05），Bcl-2、Nrf2、HO-1和Trx-1表达减少（ P<0.05）；MMP、线粒体呼吸率和ATP水平降低（ P<0.05），ROS释放增加（ P<0.05）；交替次数百分比和新异臂停留时间减少（ P<0.05）。 结论:NaHS通过激活Nrf2信号通路发挥对HI导致的学习记忆和神经元存活的保护作用。