历经数十年的创新与发展，Ilizarov技术已在世界范围内得到充分认可并广泛应用于肢体畸形矫正及创伤后遗症等治疗中，为骨科发展做出举世瞩目的贡献。张力-应力诱导组织再生是Ilizarov技术核心，机械应力刺激信号经转导后引发生物级联反应，包括局部骨形态发生蛋白表达改变、炎症反应和免疫反应、血管再生、干细胞归巢以及其他系统性反应，从而共同维持组织再生。新生骨矿化速率缓慢是Ilizarov技术的主要局限性之一，为帮助Ilizarov技术更好地应用于临床，近年来促进牵拉区骨矿化的基础研究成为该领域研究的热点，如物理措施、化学药物和生物疗法等。随着对机械牵拉促进组织再生的逐步探索和深入理解，胫骨横向骨搬移越来越多地被用于治疗下肢血管性疾病，如糖尿病足和血栓闭塞性脉管炎。归纳及总结Ilizarov技术基本生物学机制和促进牵拉区域骨矿化方法，为今后牵拉成组织技术机制的研究和临床技术的革新提供思路。

目的:探索一种操作简单、实用性强的体内构建大尺寸骨组织的方法。方法:采用大鼠双侧股骨及胫骨原代培养骨髓间充质干细胞（BMSCs），应用流式细胞仪鉴定BMSCs表面标志物、倒置显微镜观察细胞形态、Von Kossa矿化结节染色观察BMSCs成骨分化、油红O染色观察BMSCs的成脂分化情况。用CBD-BMP2（具有胶原结合区的BMP2）和微米级胶原丝结合构建分化微控单元，用大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和Cultispher-s胶原微球构建细胞单元。分别用注射器把分化微控单元-细胞单元混合组（实验组）、细胞单元组（对照组1）、分化微控单元组（对照组2）注入到11只SD雄性大鼠背部皮肤下，3组大鼠养至30 d后处死，取出皮下培养出的仿生组织。电镜及显微（Micro）CT扫描观察仿生组织表面和内部结构，对仿生组织进行HE染色、碱性磷酸酶（ALP）染色来观察组织内细胞分布及成骨成分的染色表达。采用5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐（BCIP）/四唑淡蓝（NBT）ALP显色试剂盒对仿生组织进行碱性磷酸酶活性检测；能谱分析测定仿生组织的钙离子含量；压缩模量检测仿生组织的生物力学强度。结果:P3代BMSCs表面阳性抗原CD44和CD90表达比例分别为95.11%、96.18%；造血表面标志CD11b和CD45的比例分别为1.18%、1.82%。BMSCs呈梭形、融合成片、旋涡状。BMSCs成骨诱导后可见大量的黑色矿化结节形成；BMSCs成脂诱导后可见大量的圆形红色的脂滴形成。实验组培养出大小约为1.3 cm×2.1 cm×0.6 cm、质地较硬的骨样组织，对照组1组培养出大小为1.0 cm×1.0 cm×0.4 cm、质地软的组织，对照组2未培养出成形组织。电镜及Micro-CT可见实验组仿生组织的外表为高信号的骨性结构，内部也充满大范围的高信号的骨性结构；对照组1仿生组织则未发现高信号结构。HE染色显示实验组形成大量骨组织，对照组1则未形成骨组织。实验组较对照组1产生更多的ALP，且实验组ALP活性高于对照组1[（0.023±0.005）nmol·mg -1·min -1比（0.005±0.002）nmol·mg -1·min -1， P<0.05]。实验组钙离子含量为7.42%，对照组1为0.34%。实验组压缩模量高于对照组1[（2.62±1.41）MPa比（0.03±0.01）MPa， P<0.05]。 结论:利用细胞单元和分化调节单元在体内构建出大尺寸骨组织简单可行。细胞单元和分化微控单元具有可注射性，可以直接将其注入到骨折或者骨缺损处进行治疗，为组织工程走进临床试验提供了新思路。

目的:探究一种新型可注射型水凝胶早期促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的能力，以及在体内修复大鼠颅骨缺损的效果和可行性。方法:使用丝素蛋白溶液和磷酸镁基水凝胶制备成不同磷酸镁含量的4组水凝胶，分别命名为Mg0、Mg1、Mg2和Mg5并研究分析材料表征。体外实验检测水凝胶的生物活性及诱导成骨分化的能力。体内实验采用10只SD大鼠进行颅骨缺损模型制备，简单随机法分为实验组和空白组，对该种新型可注射型水凝胶用于修复缺损颅骨的疗效及可行性进行评价。计量资料应用Graph Pad 9.0进行ANOVA方差分析。结果:电镜扫描(SEM)显示了4组水凝胶的表面微观形态。细胞计数试剂盒(CCK-8)结果示共培养1 d时对照组与Mg0、Mg1、Mg2和Mg5的吸光度( A)值分别为0.399±0.024、0.436±0.043、0.364±0.020、0.3205±0.029和0.338±0.028，在共培养3 d时为0.606±0.045、0.590±0.042、0.557±0.014、0.453±0.056和0.610±0.046，第5天时分别为0.882±0.022、0.841±0.147、0.824±0.040、0.828±0.049和0.830±0.021，第7天时分别为1.162±0.029、1.397±0.056、1.059±0.050、1.063±0.084和1.102±0.046( F(12，77)＝8.0， P<0.01)。使用氯化十六烷吡啶(CPC)对14 d时的成骨矿化物进行定量，Mg0、Mg1、Mg2和Mg5的 A值结果分别为0.937±0.107、1.646±0.507、2.181±0.038及2.006±0.043( F＝56.0， P<0.05)。体内实验示可注射型水凝胶修复效果显著，在修复后第4周可见大量新生骨胶原。 结论:丝素蛋白-磷酸镁基可注射型水凝胶能有效修复骨缺损，并可在体内促进早期骨胶原的形成。

目的:探讨基于软骨脱细胞外基质微载体体外构建具有功能化和自我更新能力的软骨类器官。方法:取新鲜的猪关节软骨，将部分仅粉碎处理的软骨微粒设置为天然软骨组；利用物理离心化学萃取相结合的脱细胞方法，制备粒径合适的细胞外基质（ECM）微载体，设置为微载体组。通过旋转式生物反应器将人脐带干间充质干细胞（hUCMSCs）和人软骨细胞（hCho）按照3∶1的比例与微载体负载，体外构建软骨类器官，将诱导不同时间的类器官分为诱导0、7、14及21 d组。4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）荧光染色观察、DNA定量评估微载体组和天然软骨组细胞残留情况；番红O、甲苯胺蓝染色观察微载体ECM保留情况，二甲氨基苯甲醛比色法测定微载体组和天然软骨组胶原蛋白含量；二甲基亚甲蓝（DMMB）比色法测定微载体组和天然软骨组糖胺聚糖（GAGs）含量。扫描电镜及能谱分析对微载体进行进一步表征；将添加体积分数10%胎牛血清（FBS）的杜尔伯克改良伊戈尔低糖培养基（DMEM）培养的hUCMSCs作为对照组，将微载体浸提液培养的hUCMSCs作为实验组，两组分别设置培养1、3、5 d共3个时间点的亚组，细胞增殖及毒性检测试剂盒（CCK-8）检测两组生物相容性。活死染色检测诱导0、7、14及21 d组的软骨类器官细胞活性，Ki67荧光染色鉴定诱导14 d软骨类器官的自我更新能力。RT-PCR测定诱导7、14、21 d组的软骨类器官，包括软骨形成相关标记物聚蛋白聚糖（ACAN）、Ⅱ型胶原（COL2A1）、性别决定区Y框蛋白9（SOX9）及软骨肥大、矿化相关标记物Ⅰ型胶原（COL1A1）、Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨钙素（OCN）的表达水平；比色法和DMMB法测定诱导0、7、14及21 d组的类器官分泌胶原蛋白和GAGs能力。结果:DAPI荧光染色结果显示，天然软骨组具有大量细胞核，而微载体组则基本无细胞核。微载体组DNA含量为（7.8±1.8）ng/mg，较天然软骨组的（526.7±14.7）ng/mg显著降低（ P<0.01）。番红O、甲苯胺蓝染色可见微载体着色较深且均一，保留大量软骨ECM成分。微载体组胶原蛋白含量为（252.9±1.4）μg/mg，GAGs含量为（173.4±0.8）μg/mg，均显著低于天然软骨组的（311.9±2.2）μg/mg、（241.3±0.7）μg/mg（ P<0.01）。扫描电镜显示，微载体表面有凹凸不平相互交错的胶原纤维网络。能谱分析结果显示，C、O、N元素均匀分布在微载体，表明该微载体成分组成均匀。微载体生物相容性良好，培养1、3 d时，对照组和实验组CCK-8实验结果比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）；培养5 d，实验组 A值为0.53±0.02，优于对照组的0.44±0.03（ P<0.05）。诱导0、7、14及21 d组中，hUCMSCs和hCho贴附在微载体表面且细胞活性好，活死比例分别为（70.6±1.1）%、（80.5±0.6）%、（94.5±0.9）%、（90.8±0.5）%（ P<0.01）；诱导14 d时，软骨类器官有大量Ki67阳性细胞。RT-PCR显示，诱导7 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为1.00±0.09、1.00±0.24、1.00±0.18、1.00±0.03、1.00±0.06、1.00±0.13；诱导14 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为4.16±0.28、5.09±1.25、5.65±1.05、0.47±0.01、1.68±0.02、0.21±0.06；诱导21 d组ACAN、COL2A1、SOX9、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平分别为13.42±0.92、3.07±0.21、1.84±1.08、2.72±0.17、2.91±0.18、3.32±1.20。与诱导7 d组比较，诱导14 d组ACAN、COL2A1、SOX9、RUNX2表达水平均升高（ P<0.05），COL1A1表达水平降低（ P<0.05），OCN表达水平差异无统计学意义（ P>0.05）；与诱导7 d组比较，诱导21 d组ACAN、COL1A1、RUNX2表达水平均显著升高（ P<0.01），COL2A1、SOX9、OCN表达水平差异均无统计学意义（ P>0.05）；与诱导14 d组比较，诱导21 d组ACAN、COL1A1、RUNX2、OCN表达水平均升高（ P<0.05或0.01），COL2A1表达水平差异无统计学意义（ P>0.05），SOX9表达水平降低（ P<0.05）。诱导0、7、14及21 d组胶原蛋白含量分别为（219.15±0.48）μg/mg、（264.07±1.58）μg/mg、（270.83±0.84）μg/mg、（280.01±0.48）μg/mg，GAGs含量分别为（171.18±1.09）μg/mg、（184.06±1.37）μg/mg、（241.08±0.84）μg/mg、（201.14±0.17）μg/mg。与诱导0 d组比较，诱导7、14、21 d组胶原蛋白和GAGs含量均显著升高（ P<0.01）。在诱导7、14、21 d组中，诱导7 d组胶原蛋白含量最低（ P<0.01），诱导21 d组胶原蛋白含量最高（ P<0.01）；诱导7 d组GAGs含量最低（ P<0.01），诱导14 d组GAGs含量最高（ P<0.01）。 结论:物理化学方法结合制备的微载体脱细胞成功，其基质保留较多，成分均一且无细胞毒性。基于微载体负载hUCMSCs与hCho体外成功构建软骨类器官，具有细胞活性好、自我更新能力、软骨形成相关基因表达强及分泌胶原蛋白和GAGs等特点，诱导14 d时构建的软骨类器官成软骨活性最佳。

目的:探讨运用机械挤压法制备细胞外基质囊泡模拟物的生物学性能及其对人牙周膜干细胞（PDLSC）细胞活性和成骨分化潜能的影响。方法:胶原酶消化法制备PDLSC来源细胞外基质囊泡，机械挤压法制备亲本细胞来源囊泡模拟物；将获取的天然细胞外基质囊泡和亲本细胞来源囊泡模拟物分为4组：基础培养基培养7 d的PDLSC来源基质囊泡（MVs）和基础培养基培养7 d的PDLSC来源囊泡模拟物（CVMs），成骨诱导培养基培养7 d的PDLSC来源基质囊泡（O-MVs）和成骨诱导培养基培养7 d的PDLSC来源囊泡模拟物（O-CVMs）；透射电镜和纳米颗粒示踪分析观察囊泡形态和大小，免疫荧光检测细胞摄取囊泡情况；以PDLSC作为对照组，细胞活性实验检测囊泡对PDLSC细胞活性的影响，茜素红染色和蛋白质印迹法检测囊泡对PDLSC成骨分化潜能的影响。结果:MVs、O-MVs、CVMs和O-CVMs均表现为圆形囊泡结构（直径50~250 nm），均能被PDLSC摄取，且不影响PDLSC的细胞活性；成骨诱导条件下，O-MVs和O-CVMs孵育的PDLSC相比于对照组细胞形成更多的矿化结节；MVs、O-MVs、CVMs和O-CVMs均能促进PDLSC表达成骨相关蛋白，O-CVMs孵育的PDLSC碱性磷酸酶（1.571±0.348）、骨桥蛋白（1.827±0.627）和骨钙蛋白（1.798±0.537）表达水平均显著高于MVs孵育的细胞（分别为1.156±0.170、1.260±0.293和1.286±0.302）（均 P<0.05），Runt相关转录因子2（1.632±0.455）和骨桥蛋白（1.827±0.627）表达水平均显著高于CMVs孵育的细胞（分别为1.176±0.128和1.428±0.427）（均 P<0.05），MVs、O-MVs和CVMs孵育的PDLSC成骨相关蛋白表达水平差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:机械挤压法制备的囊泡模拟物与天然细胞外基质囊泡的形态、大小类似，不影响PDLSC的细胞活性，并可在一定程度上促进PDLSC的成骨分化潜能。

目的:构建微流控器官芯片，并评估其在模拟骨关节炎进程中软骨下骨骨重塑的能力。方法:基于微流控技术和细胞共培养技术设计芯片主体，MC3T3-E1细胞贴壁培养在细胞接种小室的内部，在细胞接种小室的底部以0.5 ml/min的流速灌流培养基。评价指标：（1）微流控器官芯片的评价：灌流生长培养基，采用模拟仿真实验测试不同时间点细胞接种小室内部和底部液体的浓度差和平衡时间；活死染色观察细胞在设定流速下连续培养3、7 d的生物相容性，分为3 d组和7 d组。（2）微流控器官芯片的促成骨作用：灌流成骨诱导培养基，通过碱性磷酸酶（ALP）染色和PCR比较细胞在静态和灌流条件下3、7 d的黑色ALP阳性细胞数量和成骨相关标志基因成骨特异性转录因子2（RUNX2）、Ⅰ型胶原（COL1A1）、骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、骨钙素（OCN）的表达情况，分为静态未诱导组、静态诱导组和灌流诱导组。（3）三种成骨细胞亚型外泌体（EVs）的形态和大小表征及生物相容性：获取三种不同细胞亚型［内皮型成骨细胞（EnOB）-EVs、基质型成骨细胞（StOB）-EVs和矿化型成骨细胞（MinOB）-EVs］，通过透射电镜和粒径分析获取形态和大小；灌流含有三种不同细胞亚型EVs的生长培养基，通过细胞增殖/凋亡检测实验比较添加不同EVs浓度（1、1.25、2.5、5 μg/ml）24 h的生物相容性，分为EnOB-EVs组、StOB-EVs组、MinOB-EVs组。（4）三种成骨细胞亚型EVs的促成骨作用：灌流含有三种不同细胞亚型EVs的成骨诱导培养基3 d，通过ALP染色和PCR比较黑色ALP阳性细胞数量和成骨相关标志基因RUNX2、COL1A1、BMP-2、OCN的表达情况，分为无EVs组、EnOB-EVs组、StOB-EVs组和MinOB-EVs组。结果:（1）微流控器官芯片的评价：模拟仿真结果显示，在持续灌流12 h后，上室最上层浓度达到下室浓度的95%以上，最下层为下室浓度的96.5%左右，上下室的浓度差达到平衡状态。活死染色结果表明，芯片在0.5 ml/min的流速下，生物相容性好，灌流3、7 d细胞存活率分别为（99.48±0.12）%、（97.07±1.05）%（ P<0.01）。（2）ALP染色结果显示，3 d时灌流诱导组黑色ALP阳性细胞最多，静态诱导组其次，静态未诱导组最少；7 d时静态诱导组黑色ALP阳性细胞最多，灌流诱导组其次，静态未诱导组最少。PCR结果显示，3 d时静态未诱导组RUNX2、COL1A1、BMP-2、OCN表达水平分别为1.00±0.03、1.00±0.12、1.00±0.01、1.00±0.02，静态诱导组分别为1.80±0.04、4.05±0.37、9.80±1.94、4.38±0.89，灌流诱导组分别为2.45±0.23、5.48±0.42、91.50±4.56、10.82±4.96（ P<0.01）。7 d时静态未诱导组RUNX2表达水平为1.00±0.01，静态诱导组为1.46±0.46，灌流诱导组为1.11±0.08（ P>0.05）；静态未诱导组COL1A1、BMP-2、OCN表达水平分别为1.00±0.03、1.00±0.13、1.00±0.09，静态诱导组分别为9.38±0.25、14.27±4.35、84.01±4.02，灌流诱导组分别为2.39±0.08、133.64±8.87、86.64±8.36（ P<0.01）。3、7 d时静态未诱导组、静态诱导组和灌流诱导组相互比较，均为灌流诱导组的促成骨能力最强。（3）三种成骨细胞亚型EVs的形态和大小表征及生物相容性：透射电镜下EnOB-EVs、StOB-EVs、MinOB-EVs均为典型的茶托状形态。粒径分析结果显示，EnOB-EVs、StOB-EVs、MinOB-EVs的大小分别为（91.3±14.7）nm、（106.0±16.0）nm、（68.1±10.7）nm。细胞增殖/凋亡检测结果显示，EnOB-EVs、StOB-EVs、MinOB-EVs的最佳给药浓度均为1.25 μg/ml。（4）微流控器官芯片对于三种EVs促成骨功能验证：ALP染色结果显示，无EVs组黑色ALP阳性细胞最少，添加EnOB-EVs组其次，StOB-EVs组再者，MinOB-EVs组最多。PCR结果显示，无EVs组RUNX2、COL1A1、BMP-2、OCN表达水平分别为1.00±0.01、1.00±0.03、1.00±0.02、1.00±0.02，EnOB-EVs组分别为1.95±0.11、6.78±2.04、7.99±0.57、6.93±3.83，StOB-EVs组分别为0.79±0.12、5.68±1.53、12.59±3.15、25.59±0.95，MinOB-EVs组分别为0.68±0.10、4.36±0.69、18.75±3.21、34.74±3.98（ P<0.01）。无EVs组、EnOB-EVs组、StOB-EVs组和MinOB-EVs组相互比较，MinOB-EVs组促成骨效果最明显。 结论:基于微流控技术和细胞共培养技术所构建的微流控器官芯片能够维持MC3T3-E1细胞的正常生长、促进MC3T3-E1细胞的增殖和成骨诱导分化能力。不同时期的成骨细胞所释放的EVs具有促成骨作用，加速骨关节炎进程中软骨下骨骨重塑中骨硬化的现象。

目的:探讨寡脱氧核苷酸 (ODN) MT01对大鼠骨髓间充质干细胞 (BMSCs) 形态、增殖及成骨分化的影响。方法:4周龄清洁级SD雄性大鼠5只，以全骨髓贴壁法培养SD大鼠BMSCs，通过观察不同代次的细胞形态、流式细胞仪检测表面相关标志物和成骨分化潜能，对所提取的干细胞进行鉴定。设立PBS组(对照组)和不同浓度 (0.5、1.0、2.0、4.0 μg/ml) ODN MT01组进行对照研究，每组实验重复3次。通过DAPI和鬼笔环肽荧光染色观察各组BMSCs细胞核及骨架的形态变化；通过CCK-8法检测不同时间各组BMSCs的增殖活性；成骨诱导培养基培养7 d和21 d, 分别行碱性磷酸酶染色及其活性检测和茜素红染色鉴定各组BMSCs的成骨分化程度。组间两两比较采用 t 检验，多组间比较采用单因素方差分析， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:随着代次增加，BMSCs纯度越来越高，第3代细胞整体呈鱼群样分布。流式细胞仪分析结果显示，细胞高表达CD29 (99.8%)、CD44 (96.1%)，低表达CD11b (1.03%)、CD45 (1.74%)。成骨诱导7 d后碱性磷酸酶染色及21 d后茜素红染色均为阳性。细胞核及骨架染色显示，ODN MT01浓度为4.0 μg/ml时会导致BMSCs皱缩并降低伸展性。CCK-8结果显示，培养4 d时对照组吸光度值为0.446±0.018，1.0、2.0 μg/ml ODN MT01组分别为0.505±0.019、0.528±0.014，与对照组比较差异有统计学意义 ( t＝2.954、4.083， P＝0.033、0.008)，培养7 d时对照组吸光度值为0.514±0.027，1.0、2.0 μg/ml ODN MT01组分别为0.607±0.007、0.636±0.023，与对照组比较差异有统计学意义 ( t＝4.664、6.091， P＝0.009、0.008)，BMSCs增殖能力较对照组明显升高，而4.0 μg/ml ODN MT01 (0.427±0.013) 对BMSCs增殖能力具有抑制作用 ( t＝4.332， P＝0.015)；诱导BMSCs成骨分化过程中随着ODN MT01浓度的升高，蓝色团块和矿化结节均显著增加，培养7 d后的碱性磷酸酶活性升高趋势与ALP染色结果相类似，对照组碱性磷酸酶活性为1.207±0.023，0.5、1.0、2.0、4.0 μg/ml ODN MT01组分别为1.747±0.095、2.200±0.136、3.560±0.088、3.490±0.144，与对照组比较差异均有统计学意义 ( t＝4.313、7.934、18.800、18.240， P＝0.005、0.001、<0.001、<0.001)，而2.0、4.0 μg/ml组的诱导效果相比基本无差异 ( t＝0.562， P＝0.590)。 结论:在不影响BMSCs形态的情况下，浓度为2.0 μg/ml的ODN MT01可显著促进BMSCs的增殖和成骨分化。

背景:甲基丙烯酸酐改性明胶(gelatin-methacryloyl,Gel-MA)与经处理牙本质基质(treated dentin matrix,TDM)在一定比例下经过紫外线交联后形成的复合水凝胶支架具有良好的孔隙率、机械性能、溶胀性能及生物降解率,这为临床上年轻恒牙的牙髓再生提供了新的思路和方法.目的:探究1∶2质量比Gel-MA/TDM复合光交联水凝胶支架对人牙髓干细胞增殖能力及成骨/成牙本质分化能力的影响.方法:将第3代牙髓干细胞接种至1∶2质量比Gel-MA/TDM复合水凝胶支架中,采用CCK-8实验检测人牙髓干细胞在复合水凝胶支架中的增殖能力.将第3代牙髓干细胞接种至1∶2质量比Gel-MA/TDM复合水凝胶支架中并进行成骨诱导,采用碱性磷酸酶染色及茜素红染色观察矿化结节的形成情况,采用RT-PCR检测成牙相关因子(牙本质基质蛋白1、牙本质涎磷蛋白)和成骨相关因子(骨钙素、Runt相关转录因子2)的基因表达.结果与结论:①CCK-8检测结果显示,前7 d的牙髓干细胞增殖能力明显升高,第10天时速度减缓;②碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,Gel-MA/TDM复合水凝胶组牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性及矿化结节生成强于单纯Gel-MA水凝胶组(P<0.05);③RT-PCR结果显示,Gel-MA/TDM复合水凝胶组牙髓干细胞中牙本质基质蛋白1、牙本质涎磷蛋白、骨钙素、Runt相关转录因子2的基因表达量明显高于单纯Gel-MA水凝胶组(P<0.05),且14 d基因表达量明显高于7 d(P<0.05).结果表明,培养在1∶2 Gel-MA/TDM复合水凝胶支架上的牙髓干细胞表现出较好的增殖能力,能够强化牙髓干细胞的成骨、成牙本质分化能力.

目的:构建一种缓释钼(Mo)离子的可注射性骨充填材料并对其性能进行评价.方法:将生物矿化硅(DBs)负载不同比率的Mo离子,再与壳聚糖(CS)基水凝胶共混,构建Mo/DBs/CS缓释体系.通过扫描电镜(SEM)、能谱仪(EDS)、傅里叶红外光谱仪(FTIR)、电感耦合等离子体质谱仪(ICP)等仪器检测其理化性质,并通过细胞毒性实验及碱性磷酸酶(ALP)分泌水平、ALP和茜素红染色方法观察其生物相容性和促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化能力.结果:SEM、EDS、FTIR检测结果证明DBs可以成功负载Mo离子;DBs对Mo离子的包封率为8％左右.第21天时,Mo/DBs/CS对Mo离子累计释放率为81％,缓释效果最佳.Mo离子低于200 mg/L、DBs浸提液低于2 500 mg/L时对BMSCs无细胞毒性(P＜0.001),而且Mo离子浓度在25～3.13 mg/L可以提高BMSCs分泌ALP的水平(P＜0.05).ALP及茜素红染色结果表明Mo/DBs/CS缓释体系可以显著促进MSCs成骨分化.结论:Mo/DBs/CS缓释体系是一种具有良好生物相容性、骨诱导活性及可注射性等优点的骨缺损充填材料.

目的 评估新型生物陶瓷类材料c-Root SP对人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)的细胞增殖及骨诱导能力.方法 制备不同浓度c-Root SP浸提液,采用CCK-8 法检测其对hSCAPs的细胞增殖情况,使用碱性磷酸酶(ALP)活性测定法测定ALP酶水平和茜素红染色法观察钙化结节形成情况,数据采用单因素方差分析,与iRootSP对比,评价c-Root SP促进细胞增殖及骨诱导能力.结果 c-Root SP对hSCAPs的细胞增殖具有浓度依赖性,1/10 浓度浸提液增殖水平最好,c-Root SP1/5、1/10、1/1000 浓度浸提液对hSCAPs的细胞增殖的影响显著高于同浓度iRoot SP浸提液(P<0.05).成骨方面,矿化诱导 7 天,iRoot SP ALP活性显著高于c-Root SP(P<0.05),矿化诱导 14 天 c-Root SP矿化结节显著多于iRoot SP.结论 c-Root SP具有对hSCAPs的良好细胞增殖及骨诱导能力,与iRoot SP相似.