目的:探讨负载蛋白聚糖4(PRG4)的温度敏感性聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯共聚物(PCEC)可注射水凝胶材料表征及修复新西兰兔软骨缺损的效果。方法:2022年3月至2023年6月，利用PCEC温敏性水凝胶负载了PRG4效应因子(PRG4@PCEC)，使用扫描电子显微镜观察冷冻干燥的PRG4@PCEC水凝胶的形貌，测量PCEC和PRG4@PCEC水凝胶的最低共溶温度；使用活/死细胞染色技术评估水凝胶的生物安全性；采用雄性新西兰大白兔18只，36个膝关节缺损样本，随机分为3组，其中12个缺损组用PRG4@PCEC水凝胶修复，12个缺损组用PCEC水凝胶修复，12个缺损组为空白对照组，观察水凝胶的软骨修复能力；通过微型计算机断层扫描(Micro-CT)分析软骨下骨再生，标本组织切片苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)染色及荧光定量聚合酶链反应(PCR)评估水凝胶对软骨缺损的修复作用。组间比较采用 t检验。 结果:水凝胶具有明显的多孔微观结构，PCEC和PRG4@PCEC水凝胶分别在35 ℃和38 ℃表现出最低共溶温度；激光共聚焦观察活/死细胞染色结果证明PRG4@PCEC水凝胶对于兔软骨细胞具有良好的生物相容性；载有PRG4的水凝胶组在8周时，缺损已经完全被高含量的新生软骨组织填充，表明软骨缺损修复最佳；Micro-CT显示在8周时PCEC组[(37.33±0.39) mm 3]和PRG4@PCEC组[(25.33±0.21) mm 3]软骨下骨缺损体积均小于对照组[(51.57±0.49) mm 3， t＝32.19、69.56， P<0.01]；切片染色显示PRG4@PCEC水凝胶组软骨下骨有效形成；荧光定量PCR结果显示在4周和8周PCEC组(2.79±0.07、2.18±0.10)与PRG4@PCEC组白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平(1.54±0.07、0.80±0.10)均低于对照组(3.21±0.08、2.54±0.07， t＝0.68、4.97、27.63、24.43， P<0.01)，同时PCEC组(0.95±0.24、1.45±0.34)和PRG4@PCEC组Ⅱ型胶原蛋白(COL2)基因表达水平(1.19±0.45、1.53±0.26)高于对照组(0.64±0.07、1.01±0.14， t＝7.47、0.08、10.70、3.12， P<0.05)。 结论:负载PRG4的温度敏感性PCEC可注射水凝胶具有良好的温度敏感性和生物安全性，对关节软骨缺损有明显修复作用。

使用聚丙烯酰胺水凝胶(PAHG)进行隆乳手术曾在中国十分流行。该文报道了1例PAHG隆乳20年后，无其他诱因于2019新型冠状病毒(2019-nCoV)感染后出现单侧乳房迟发型炎症反应的患者。患者女，45岁，在2019-nCoV感染3周后出现右侧乳房明显红肿热痛，范围上至锁骨、下至上腹部，考虑诊断为病毒感染伴发乳房迟发型炎症反应。急诊手术术中发现PAHG呈黄绿色、稀糊状涌出，腐臭味明显，存在大量组织坏死糜烂及脓液，创面广泛弥漫性渗血，术中血红蛋白下降明显。术后无并发症，于术后1周出院。2019-nCoV对人体异物及免疫系统的影响还有很多未知区域，可能会引起凶险的迟发型炎症反应，如该例中的电解质紊乱、大量失血及可能发生的感染性休克，在临床中需引起足够重视、给予及时干预。报道各种可能出现的症状和机制有利于提高整形外科医生的认识水平、加强对填充材料使用的谨慎程度。

目的:探究Wnt3a对人牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cell，PDLSC）增殖、迁移和成骨分化的影响，确定Wnt3a对小鼠实验性牙周炎牙槽骨再生的作用。方法:分别用不同质量浓度的Wnt3a（0、20、100、200、500 μg/L）刺激PDLSC（计为5组），培养2、4、7或10 d后通过细胞计数检测细胞增殖，通过Transwell实验检测细胞迁移；培养21 d时通过实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Ⅰ型胶原、runt 相关转录因子2（runt-related transcription factor 2，Runx2）的表达情况。将Wnt3a蛋白包裹在聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球复合透明质酸水凝胶中，注入牙周炎小鼠的龈沟中。在1、2、4和8周取上颌牙槽骨样本，用显微计算机断层扫描、HE染色及骨形成标志物碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、Runx2和骨钙蛋白免疫组化染色评估牙槽骨再生情况。结果:培养10 d后，与0 μg/L Wnt3a组相比，Wnt3a在20~500 μg/L时均可显著促进PDLSC增殖（ P<0.01）。培养21 d时，0、20、100、200及500 μg/L组Ⅰ型胶原mRNA的表达量分别为0.96±0.27、1.90±0.47、2.18±0.24、2.32±0.15、1.99±0.43，Runx2 mRNA的表达量分别为1.08±0.15、3.19±0.17、6.19±0.28、9.19±0.41、5.55±0.06，Ⅰ型胶原和Runx2 mRNA的表达与0 μg/L Wnt3a组相比差异均有统计学意义（ P<0.05）。在注射水凝胶第1、2、4、8周后，包裹Wnt3a的水凝胶组小鼠上颌第二磨牙颊侧釉质牙骨质界至牙槽嵴顶的距离［分别为（497.3±18.2）、（455.7±12.5）、（401.0±8.5）、（362.3±15.5） μm］与牙周炎组小鼠［分别为（710.3±10.2）、（614.0±16.4）、（564.3±12.5）、（502.3±6.8） μm］相比均显著减少（ P<0.01），牙周炎症减轻。注射水凝胶4周后免疫组化结果显示，与牙周炎组相比，Wnt3a水凝胶组成骨相关基因ALP（0.72±0.01）、Runx2（0.77±0.03）及骨钙蛋白（0.72±0.07）的表达水平均显著升高（ P<0.01）。 结论:Wnt3a可以促进PDLSC的增殖、迁移和成骨分化以及实验性牙周炎小鼠的牙槽骨再生。

目的:制备改良型富血小板纤维蛋白（A-PRF）/壳聚糖温敏水凝胶（以下简称复合水凝胶）并探讨复合水凝胶对糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法:该研究为实验研究。成功制备具有多孔网状结构及温敏特性的含质量浓度为10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶。取6~8周龄雄性SD大鼠，通过腹腔注射链脲佐菌素成功制造糖尿病大鼠模型，并在每只大鼠背部制造4个全层皮肤缺损创面（最终36只大鼠成功造模）。将每只大鼠3个创面分别作为空白组（不进行药物干预）、阳性对照组（滴加重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶）、壳聚糖水凝胶组（滴加壳聚糖水凝胶溶液）。取其中30只大鼠，将每只大鼠剩余的1个创面共30个创面分为10、15、20、50、100 g/L复合水凝胶组，每组6个创面，分别滴加含10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液；取剩余6只大鼠，于每只大鼠剩余的1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液。伤后14 d，取其中1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠，行苏木精-伊红（HE）染色，观察大鼠心、肝、脾、肺和肾等炎症、出血或坏死情况；伤后10 d，取其中1个创面滴加含15 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠，采用激光血流成像系统观测4组创面血流灌注量（样本数为6）。伤后7、14 d，计算8组创面愈合率。伤后14 d，取8组创面组织，分别行HE、Masson染色，观察新生上皮形成和胶原生成情况；采用免疫组织化学法检测CD31、血管内皮生长因子A（VEGFA）的阳性表达情况并计算阳性面积百分比；采用蛋白质印迹法检测CD31、VEGFA的蛋白表达；采用实时荧光定量反转录PCR法检测CD31、VEGFA的mRNA表达（样本数均为4）。结果:伤后14 d，6只大鼠心、肝、脾、肺、肾中均未观察到明显的炎症、出血或坏死。伤后10 d，15 g/L复合水凝胶组创面血流灌注量明显多于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组（ P值均<0.05）。伤后7、14 d，空白组创面愈合率分别为（26.0±8.9）%、（75.0±1.8）%，均分别明显低于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组及10、15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组的（45.8±3.2）%、（49.8±3.7）%、（51.2±2.9）%、（68.5±2.4）%、（68.8±1.5）%、（72.7±2.1）%、（75.0±3.7）%及（79.1±1.9）%、（77.2±1.7）%、（82.3±1.3）%、（89.6±1.9）%、（89.8±1.3）%、（87.3±1.1）%、（87.9±1.3）%（ P<0.05）；阳性对照组、壳聚糖水凝组、10 g/L 复合水凝胶组创面愈合率均明显低于15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05）。伤后14 d，15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组创面上皮化程度较其他4组创面更高、新生微血管情况更好，胶原数量更多且排列更整齐。伤后14 d，阳性对照组创面CD31、VEGFA及壳聚糖水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组（ P<0.05），10 g/L 复合水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比明显高于空白组、壳聚糖水凝胶组、阳性对照组（ P值均<0.05），15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组创面CD31、VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05）。伤后14 d，壳聚糖水凝胶组、阳性对照组、10 g/L 复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组（ P<0.05），10 g/L复合水凝胶组创面组织中VEGFA蛋白表达明显高于阳性对照组（ P<0.05）和CD31、VEGFA mRNA表达均明显高于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组（ P<0.05），15、20、50、100 g/L复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05），壳聚糖水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA的mRNA表达均明显低于阳性对照组（ P<0.05）。 结论:复合水凝胶生物安全性高，可改善创面血流灌注，有效促进创面组织中血管和胶原生成，从而促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合；15 g/L为复合水凝胶中A-PRF的较优使用质量浓度。

目的:探究石榴皮多酚对大鼠耳廓痤疮模型的抗炎作用及机制。方法:将36只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、石榴皮多酚低、中、高浓度组和阳性组，除空白组外，其余各组于大鼠双耳内侧面耳导管开口处均匀涂抹100%油酸，0.5 ml/次，1次/d，并于涂抹油酸的第21天开始在大鼠耳廓同一部位皮下注射痤疮丙酸杆菌液50 μl，1次/d，连续3 d，构建大鼠耳廓痤疮模型。肉眼观察提示造模成功后外用药物，石榴皮多酚组给予不同浓度（质量分数分别为1.4%、2.8%、5.6%）石榴皮多酚软膏0.5 mg，阳性组给予盐酸克林霉素凝胶0.5 mg，空白组及模型组予等量蒸馏水，2次/d，连续用药2周。末次用药24 h后，取腹主动脉血，ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素17（IL-17）水平；剪取大鼠耳廓模型处组织，HE染色观察各组皮肤组织病理学变化，免疫组化法检测局部组织中mTOR/HIF-1α/RORγt表达水平。对满足方差齐性的数据，采用单因素方差分析；对不满足的数据，采用Kruskal-Wallis H检验；两两比较采用LSD- t检验。 结果:与模型组相比，石榴皮多酚组及阳性组大鼠耳廓造模处囊肿脱屑及痂皮明显改善，表皮角化改善，真皮层炎症因子浸润减少。IL-17水平在石榴皮多酚低浓度组（61.03 ± 5.99）ng/L、中浓度组（55.35 ± 2.24）ng/L、高浓度组（54.35 ± 4.29）ng/L、阳性组（48.11 ± 4.07）ng/L及空白组（42.10 ± 5.62）ng/L均明显低于模型组（70.24 ± 3.30）ng/L， t = 3.12、5.34、5.70、8.29、10.54，均 P<0.05。免疫组化显示，HIF-1α表达水平在石榴皮多酚低浓度组（0.29 ± 0.05）、中浓度组（0.29 ± 0.03）、高浓度组（0.33 ± 0.02）及阳性组（0.30 ± 0.01）均明显低于模型组（0.41 ± 0.04）， t值分别为4.89、5.50、3.62、5.21，均 P<0.05；RORγt表达水平在石榴皮多酚低浓度组（0.28 ± 0.02）、高浓度组（0.31 ± 0.04）均低于模型组（0.35 ± 0.02）， t值分别为3.68、2.18，均 P<0.05；各组间mTOR表达差异无统计学意义（ P = 0.119）。 结论:石榴皮多酚可以改善大鼠痤疮模型炎症反应，其机制可能与下调HIF-1α/RORγt信号通路有关。

目的:构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型，并对其表型进行分析。方法:将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1 f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交，获得子代小鼠，饲养1~2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA，经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后，在DNA水平检测小鼠基因型；选取经鉴定后生长至3周龄的Bicc1基因条件性敲除小鼠(实验组)、野生型小鼠(对照组)各3只进行后续实验：通过腹腔注射他莫昔芬进行诱导敲除Bicc1基因，于1周后取小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤及脂肪组织，一部分组织通过实时定量PCR(RT-qPCR)鉴定其中的Bicc1 mRNA表达水平；另一部分组织以10%多聚甲醛固定，随后进行HE染色和Masson染色，在光镜下观察分析。应用SPSS 28.0软件对数据进行分析，组间比较采用 t检验， P<0.05表示差异有统计学意义。 结果:通过繁育获得间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠，基因型为Bicc1 f/fCre +/－，野生型小鼠基因型为Bicc1 f/fCre －/－；RT-qPCR检测结果显示，实验组小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤、脂肪组织中Bicc1 mRNA表达水平均显著低于对照组( P均<0.01)；HE染色和Masson染色显示，与对照组相比，实验组小鼠肾小球萎缩，肾小囊形状不规则，部分肾小囊消失；骨骼肌纤维排列疏松散乱，肌纤维堆积不致密；皮肤及脂肪组织未见明显差别。 结论:成功建立了间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠模型，可以为研究Bicc1基因在组织器官间质细胞中的作用提供动物模型；3周龄小鼠间质细胞中敲除Bicc1后1周，其肾脏和骨骼肌发生病理性改变。

快速有效的止血和创面愈合对于挽救生命和提高生活质量至关重要。目前，传统的止血和促进伤口愈合材料效果有限，存在组织黏附效果不理想、免疫原性，二次损伤和感染风险等局限性，故亟待开发新型高效的材料。蛋白质基水凝胶因生物相容性好、可降解、可注射、机械性能可调、可湿粘接，在止血和促进伤口愈合领域受到越来越多的关注。笔者就蛋白质基水凝胶的定义及各种蛋白质基水凝胶止血和促进创面愈合的研究进展进行综述，为创面修复领域应用蛋白质基水凝胶提供参考。

目的:探究一种新型可注射型水凝胶早期促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的能力，以及在体内修复大鼠颅骨缺损的效果和可行性。方法:使用丝素蛋白溶液和磷酸镁基水凝胶制备成不同磷酸镁含量的4组水凝胶，分别命名为Mg0、Mg1、Mg2和Mg5并研究分析材料表征。体外实验检测水凝胶的生物活性及诱导成骨分化的能力。体内实验采用10只SD大鼠进行颅骨缺损模型制备，简单随机法分为实验组和空白组，对该种新型可注射型水凝胶用于修复缺损颅骨的疗效及可行性进行评价。计量资料应用Graph Pad 9.0进行ANOVA方差分析。结果:电镜扫描(SEM)显示了4组水凝胶的表面微观形态。细胞计数试剂盒(CCK-8)结果示共培养1 d时对照组与Mg0、Mg1、Mg2和Mg5的吸光度( A)值分别为0.399±0.024、0.436±0.043、0.364±0.020、0.3205±0.029和0.338±0.028，在共培养3 d时为0.606±0.045、0.590±0.042、0.557±0.014、0.453±0.056和0.610±0.046，第5天时分别为0.882±0.022、0.841±0.147、0.824±0.040、0.828±0.049和0.830±0.021，第7天时分别为1.162±0.029、1.397±0.056、1.059±0.050、1.063±0.084和1.102±0.046( F(12，77)＝8.0， P<0.01)。使用氯化十六烷吡啶(CPC)对14 d时的成骨矿化物进行定量，Mg0、Mg1、Mg2和Mg5的 A值结果分别为0.937±0.107、1.646±0.507、2.181±0.038及2.006±0.043( F＝56.0， P<0.05)。体内实验示可注射型水凝胶修复效果显著，在修复后第4周可见大量新生骨胶原。 结论:丝素蛋白-磷酸镁基可注射型水凝胶能有效修复骨缺损，并可在体内促进早期骨胶原的形成。

目的:研究复方苦参注射液对原位肺癌小鼠吗啡耐受的影响，检测其对原位肺癌小鼠模型吗啡激活的多药耐药基因1(MDR1)介导的P糖蛋白(P-gp)过表达的关系。方法:建立原位肺癌小鼠吗啡耐受模型，采用梯度浓度的复方苦参注射液处理，热辐射甩尾法测定不同条件下痛阈值；采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法，检测MDR1 mRNA和P-gp蛋白的表达；采用凝胶迁移技术检测MDR1基因上游启动子环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的DNA结合活性的改变。结果:吗啡组小鼠在第8天的最大镇痛百分率(MPE)为(85.21±6.53)%，第10天和第12天分别下降至(38.45±5.52)%和(28.14±4.52)%，表明原位肺癌小鼠已经形成吗啡耐受。而吗啡＋300 mg/kg复方苦参注射液组小鼠在第8天的MPE为(79.34±6.50)%，第10天和第12天分别下降至(62.16±5.53)%和(40.20±4.50)%。RT-PCR检测结果显示，吗啡组、生理盐水组、吗啡＋300 mg/kg复方苦参注射液组和200 mg/kg复方苦参注射液组小鼠脑组织中MDR1 mRNA的相对表达量分别为2.33±0.79、1.04±0.38、1.37±0.38和1.43±0.53。吗啡组与生理盐水组比较，差异有统计学意义( P<0.05)；生理盐水组与200 mg/kg复方苦参注射液组比较，差异无统计学意义( P＝0.05)；吗啡组与吗啡＋300 mg/kg复方苦参注射液组比较，差异有统计学意义( P<0.05)。Western blot法检测结果显示，吗啡组、生理盐水组、吗啡＋300 mg/kg复方苦参注射液组小鼠脑组织中P-gp蛋白的相对表达量分别为1.86±0.40、1.00±0.23和1.27±0.27。吗啡组P-gp蛋白的表达量明显高于生理盐水组( P<0.05)；吗啡＋300 mg/kg复方苦参注射液组与吗啡组比较，P-gp蛋白的表达亦明显下降( P<0.05)。吗啡＋纳络酮组CREB的DNA结合活性为(0.89±0.23)Pu；生理盐水组CREB的DNA结合活性为(0.23±0.07)Pu，明显低于吗啡组[(0.81±0.23)Pu， P<0.05]和吗啡＋纳络酮组( P<0.05)；而吗啡＋300 mg/kg复方苦参注射液组CREB的DNA结合活性为(0.79±0.21)Pu，对吗啡依赖所诱导的CREB的DNA结合活性升高未显示调节作用( P>0.05)。 结论:复方苦参注射液能明显改善吗啡耐受，同时可抑制被吗啡激活的MDR1 mRNA和P-gp蛋白的表达，这与其延缓吗啡耐受的机制有关。

目的:探讨基于“MLT”原则采用扩张皮瓣整复面颈部瘢痕的方法及其临床效果。方法:该研究为回顾性观察性研究。2019年1月—2022年5月，中南大学湘雅医院收治74例符合入选标准的烧创伤后面颈部瘢痕患者，其中男38例、女36例，年龄5~58岁，单纯面部受累者24例、单纯颈部受累者24例、面部和颈部均受累者26例，瘢痕面积12~145 cm2。遵循色泽、质地与面部相似；皮瓣面积足够大以修复整个缺损；皮肤组织足够薄，能传递表情，以利于面部形态和五官的塑形的“MLT”原则，Ⅰ期行皮肤软组织扩张器（以下简称扩张器）置入术，Ⅱ期行扩张器取出+瘢痕切除+皮瓣移植术修复继发创面，将皮瓣供区创面直接缝合。术后采用硅凝胶制剂、激光治疗等抗瘢痕增生。观察并记录扩张器扩张倍数、扩张周期，皮肤软组织扩张术并发症发生情况，以及采用的皮瓣类型、Ⅱ期术后皮瓣成活情况。术后随访，评估患者面颈部远期整复效果和皮瓣供、受区恢复情况。结果:135个扩张器扩张倍数为1.36~3.00倍，扩张周期为6~14个月。行皮肤软组织扩张术期间，8例患者出现扩张器置入后切口愈合不良、7例患者出现扩张器破裂、5例患者出现扩张器置入后切口感染、3例患者出现扩张器外露、2例患者出现注射壶注水困难、1例患者出现注射壶漏水。8例患者采用颈横动脉与旋肩胛动脉双血供肩背部扩张皮瓣，11例患者采用颈横动脉前穿支扩张皮瓣，12例患者采用胸廓内动脉穿支扩张皮瓣，16例患者采用上胸部及颈部串联扩张皮瓣，5例患者采用胸背动脉穿支扩张皮瓣，22例患者采用邻近旋转推进扩张皮瓣。Ⅱ期术后，71例患者皮瓣完全成活；1例患者皮瓣出现血运障碍，经高压氧治疗后成活；2例患者皮瓣末端出现坏死，经换药后愈合。术后对42例患者随访3~24个月，皮瓣颜色、质地、厚度均佳，与受区周围正常皮肤组织相近，面颈部外形及功能明显改善，皮瓣供、受区创面位置隐蔽且瘢痕形成较轻。结论:整复面颈部瘢痕时，遵循“MLT”原则，在术前精心设计扩张皮瓣，Ⅱ期手术时重建亚单位内局部美学特征，术后积极采取规范的抗瘢痕治疗措施，整复后可使皮瓣颜色、质地、厚度与面颈部正常皮肤接近，面颈部外形及功能改善明显，遗留线性瘢痕较轻，有利于提升治疗效果。