目的:探讨慢性肾衰竭（chronic renal failure，CRF）幼鼠胫骨生长板软骨细胞线粒体自噬水平及对细胞凋亡的影响。方法:雄性4周龄Sprague-Dawley（SD）幼鼠40只，按照随机数字表法分为正常对照组（蒸馏水灌胃）和CRF组（腺嘌呤150 mg·kg -1·d -1灌胃），连续灌胃6周后处死幼鼠，X线测量胫骨长度，组织学切片测量比较胫骨生长板宽度，应用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测生长板软骨细胞凋亡率；体外培养正常对照组和CRF组幼鼠胫骨生长板软骨细胞至第3代，应用TUNEL技术检测软骨细胞凋亡率，应用荧光双染技术观测软骨细胞线粒体与自噬溶酶体共定位情况，应用Western印迹法检测线粒体标志蛋白线粒体外膜转位酶（translocase of the outer mitochondrial membrane-20，Tom-20）和自噬标志轻链蛋白-3（light chain-3，LC-3）表达情况，应用透射电镜观察软骨细胞线粒体自噬情况。 结果:与正常对照组相比，CRF组幼鼠胫骨长度较短[（27.32±5.81）mm比（35.43±3.61）mm， t=5.226， P<0.001]，生长板相对宽度较窄（0.56±0.19比1.00±0.21， t=6.744， P<0.001），软骨细胞凋亡率较高（17.2%±4.8%比5.1%±3.4%， t=6.505， P<0.001）。CRF组体外培养生长板软骨细胞凋亡率高于正常对照组（11.8%±6.2%比3.1%±1.2%， t=4.357， P<0.001），荧光双染技术结果显示CRF组软骨细胞线粒体与自噬溶酶体出现明显的共定位现象，CRF组软骨细胞LC-3蛋白（ t=8.944， P<0.001）及Tom-20蛋白（ t=6.708， P<0.001）表达均少于正常对照组，电镜结果显示CRF组软骨细胞内出现较多的自噬囊泡吞噬线粒体并降解的现象。 结论:CRF幼鼠胫骨生长板软骨细胞线粒体自噬水平出现增高现象，导致线粒体减少，引起软骨细胞凋亡、数量减少，最终导致胫骨发育不良。

目的:探讨应用转染重组大鼠血小板衍生生长因子-BB (rrPDGF-BB)基因的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）对于牵张成骨的治疗效果。方法:2019年10月至2020年6月,选取48只幼年SD大鼠培养出48瓶BMSCs,其中24瓶使用慢病毒转染rrPDGF-BB基因；同时随机选取雄性成年SD大鼠72只,制作大鼠右侧股骨牵张成骨模型,将大鼠平均分为3组,分别在各组牵张间隙注射PBS(空白对照组)、未干预的BMSCs（阴性对照组）和转染rrPDGF-BB基因的大鼠BMSCs（实验组）,随后用影像学和组织学染色方法等评价该实验结果。将数据进行统计学分析, P<0.05为差异有统计学意义。 结果:培养的大鼠BMSCs长势良好,第3代BMSCs低表达CD34（0.1%）和CD45（2.8%）、高表达CD29（95.1%）,和文献描述的BMSCs表型一致；转染基因后,发现绿色荧光的表达随着转染时间的延长而逐渐增强,证实转染成功；制作大鼠股骨牵张成骨模型后,经过14 d牵张,所有大鼠达到预期牵张距离；在2、4、8周不同时间点观察,股骨标本大体观察,实验组牵张间隙可见连续性骨痂,硬度、颜色接近正常骨组织,牵张间隙活动度较差,低于空白对照组；X线片提示,实验组牵张间隙新生骨痂更多,骨髓腔较对照组提前再通；Micro-CT检查提示,实验组愈合较好,离断端已连接,矢状面可见骨髓腔再通；标本Micro-CT参数表明,实验组骨小梁厚度（0.297±0.005）mm、骨小梁数量（1.663±0.032）mm、骨体积分数（59.832±2.187）%和骨密度（0.586±0.014）g/cm 3最大,实验组骨小梁分离度（0.399±0.051）mm最小,各组之间差异有统计学意义（ P<0.05）；苏木精-伊红（HE）染色和VEGF免疫组化染色证实,实验组较空白对照组更早、更多形成血管及软骨细胞。8周时实验组镜下可见新生骨痂连接成片,骨髓腔有再通趋势,腔内可见大量红细胞。 结论:研究结果表明注射rrPDGF-BB基因转染的BMSCs可能促进大鼠牵张区新骨的形成,缩短新生骨痂的矿化时间,促进牵张成骨区域新生骨的成熟。

目的:研究核骨架-细胞骨架连接复合体(LINC complex)在周期性张应力调控大鼠生长板软骨细胞肥大分化中的作用。方法:采用四点弯曲张力仪，对体外培养的SD大鼠(华中科技大学同济医学院动物实验中心提供)生长板软骨细胞行周期性张应力，采用小干扰RNA(siRNA)抑制LINC complex(SUN1和SUN2)的活性，实验分组为对照组、对照组+siSUN、应力组和应力组+siSUN，蛋白质印迹法(Western blot)检测力学刺激对FAK、YAP和RhoA蛋白活性的改变，QPCR检测肥大分化指标Ihh和COL X的mRNA表达变化。两组间比较采用 t检验。 结果:应力组FAK、YAP和RhoA的蛋白活化明显高于对照组[磷酸化FAK(p-FAK)：0.993±0.082比0.423±0.111， t＝36.539， P<0.01；磷酸化YAP(p-YAP)：0.734±0.071比1.635±0.127， t＝19.722， P<0.01；活化RhoA(Active RhoA)：1.288±0.076比0.646±0.132， t＝18.157， P<0.01]，同时应力组Ihh和COL X的mRNA表达水平低于对照组(Ihh：0.973±0.227比3.634±0.381， t＝104.589， P<0.01；COL X：1.957±0.274比5.991±0.421， t＝47.177， P<0.01)，给予细胞siSUN抑制LINC complex(SUN1和SUN2)的活性，应力组FAK、YAP和RhoA蛋白的活化与对照组比较，差异无统计学意义(p-FAK：0.559±0.062比0.527±0.073， t＝1.595， P>0.05；p-YAP：1.258±0.064比1.342±0.075， t＝1.334， P>0.05；active RhoA：0.494±0.065比0.508±0.094， t＝2.245， P>0.05)，同时应力组Ihh和COL X的mRNA的表达与对照组比较，差异也无统计学意义(Ihh：1.264±0.262比1.719±0.345， t＝2.197， P>0.05；COL X：1.747±0.185比2.361±0.367， t＝2.175， P>0.05)。 结论:持续的周期性张应力通过LINC complex调控大鼠生长板软骨细胞的肥大分化。

目的:观察低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及骺板软骨肝细胞生长因子（HGF）、HGF受体（C-Met）表达的影响。方法:选择24只健康雄性SD大鼠，体质量为60~80 g，按体质量采用随机数字表法分为常规饲料组（硒含量为101.5 μg/kg）和低硒饲料组（硒含量为1.1 μg/kg），每组12只。喂养30 d后，将常规饲料组分为常规组和T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），低硒饲料组分为低硒组和低硒+T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），每组6只。继续喂养30 d后处死大鼠，取膝关节软骨组织，采用HE染色光镜下观察膝关节软骨及骺板软骨形态学改变；免疫组织化学法检测膝关节软骨及骺板软骨HGF和C-Met表达情况，计算HGF和C-Met阳性表达率。 结果:光镜下，低硒+T-2毒素组关节软骨及骺板软骨细胞排列稀疏，深层可见坏死无结构区，区域内软骨细胞细胞外基质降解而淡染，附近可见增生的肉芽组织。低硒、T-2毒素、低硒+T-2毒素组大鼠关节软骨及骺板软骨HGF阳性表达率[（21.97 ± 6.90）%、（49.41 ± 8.24）%、（76.39 ± 5.88）%，（23.36 ± 12.49）%、（58.43 ± 14.48）%、（66.59 ± 10.83）%]高于常规组[（9.13 ± 6.01）%、（11.14 ± 4.67）%， P均< 0.05]。低硒、T-2毒素、低硒+T-2毒素组关节软骨及骺板软骨C-Met阳性表达率[（25.34 ± 7.53）%、（58.21 ± 12.54）%、（81.46 ± 7.89）%，（35.21 ± 4.71）%、（40.84 ± 2.03）%、（49.41 ± 6.29）%]高于常规组[（11.21 ± 5.11）%、（12.12 ± 4.71）%， P均< 0.05]。 结论:低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及骺板软骨HGF、C-Met表达有影响。

大骨节病（Kashin-Beck disease，KBD）是一种地方性、多发性、对称性、变形性骨关节病，好发于发育期儿童的骨骺生长板和关节软骨，可致软骨细胞变性、降解和坏死，临床上依据患者病变范围和畸形程度分为早期、Ⅰ度、Ⅱ度和Ⅲ度4个阶段。KBD的病因与发病机制至今仍不清楚，针对此病尚无特效药，对各种医学干预手段有效性的研究也较少。目前，KBD的治疗多参照中西医关于骨关节炎的相关方法。本文以现有研究作为基础，依据KBD的疾病分期对其中西医治疗方法进行了总结分析，提出应在阶梯化和个体化原则下，中西医并重治疗，并以药物治疗为主、手术治疗为辅，最大程度减轻患者疼痛、保护关节和预防损伤，以期为临床治疗KBD提供参考依据。

目的:观察SD大鼠乳鼠胫骨生长板软骨细胞甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein，PTHrp)的表达情况并分析其对印度刺猬蛋白(indian hedgehog，IHH)-PTHrp信号通路的意义。方法:SD大鼠乳鼠10只，颈椎脱臼处死后取膝关节标本并制作组织学切片。应用免疫组织化学技术检测PTHrp蛋白在乳鼠胫骨生长板的表达区域，同时应用原位杂交技术检测生长板PTHrp mRNA的表达区域；应用免疫组织化学技术检测IHH-PTHrp信号通路关键因子IHH蛋白、Patched(Ptc)蛋白、PTHrp受体蛋白在胫骨生长板的表达区域。结果:乳鼠胫骨生长板软骨膜下软骨细胞、生长板前肥大区软骨细胞内均表达PTHrp蛋白及PTHrp mRNA；IHH蛋白主要在生长板前肥大区软骨细胞内表达，Ptc蛋白主要在生长板周围软骨膜细胞内表达，PTHrp受体蛋白主要在生长板增殖区软骨细胞内表达，少量在前肥大区软骨细胞内表达。结论:乳鼠胫骨生长板软骨膜下软骨细胞和前肥大区软骨细胞内均表达PTHrp蛋白；PTHrp蛋白在前肥大区软骨细胞内表达，可以补充调控胫骨生长板纵向发育的IHH-PTHrp信号通路学说。

目的:探讨慢性肾功能不全幼鼠脊柱椎体生长板区甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone-related protein，PTHrp)受体表达对椎体发育的影响。方法:将60只2周龄的雄性Sprague-Dawley大鼠按每组20只，平均分为假手术组、模型组和治疗组。假手术组大鼠切开暴露左侧输尿管后缝合，模型组大鼠行左侧输尿管结扎，治疗组大鼠行左侧输尿管结扎并用依那普利治疗。术后4周，3组各处死10只大鼠并检测其血PTHrp浓度。拍摄脊柱正位X线片测量腰椎1～腰椎6长度，组织学切片观测脊柱椎体生长板增殖区组成细胞柱的细胞数量，免疫组织化学检测椎体生长板区PTHrp受体表达。将每组剩余大鼠处死后提取椎体生长板区软骨细胞进行体外培养至P3代，原位杂交检测PTHrp受体mRNA表达，并应用PCR行定量分析；免疫荧光检测PTHrp受体蛋白表达，并用Western-blot行定量分析。应用EDU技术检测细胞24 h增殖率。最后应用单因素方差分析对各组间差异进行统计学分析。结果:假手术组、模型组和治疗组大鼠血PTHrp浓度分别为(0.48±0.14)ng/L、(1.05±0.21)ng/L和(0.70±0.19)ng/L，另两组与假手术组比较，差异均有统计学意义( P均<0.05)。模型组和治疗组腰椎1～腰椎6长度分别为(44.6±11.5)mm和(46.8±13.5)mm，均较假手术组(58.1±9.6)mm短，且差异有统计学意义( P均<0.05)；模型组和治疗组椎体生长板增殖区细胞柱细胞数分别为(2.3±1.1)个和(2.1±1.4)个，均较假手术组(4.1±1.2)个减少，且差异有统计学意义( P均<0.05)。免疫组织化学结果显示，假手术组PTHrp受体高表达，定量分析评分为(7.1±1.8)分；治疗组次之，为(5.4±2.1)分，模型组表达最少，为(3.6±1.9)分，组间比较，差异均有统计学意义( P均<0.05)。模型组和治疗组体外培养软骨细胞内PTHrp受体mRNA相对表达量分别为0.24±0.14和0.36±0.13，均低于假手术组1.01±0.32，且差异有统计学意义( P均<0.05)。模型组和治疗组细胞24 h增殖率分别为(8.7±2.6)%和(14.3±7.1)%，均低于假手术组(21.4±7.3)%，且差异有统计学意义( P均<0.05)。 结论:慢性肾功能不全幼鼠血液PTHrp浓度增高，椎体生长板区软骨细胞PTHrp受体由于负反馈原因表达减少，PTHrp无法发挥促进增殖作用，最终导致椎体发育障碍。

遗传性多发性骨软骨瘤（hereditary multiple exostoses，HME）是以常染色体显性遗传为特征的良性骨肿瘤，可导致青少年骨发育畸形，严重影响机体美观及运动功能。目前，HME尚无诊疗指南，其主要治疗方式为手术治疗，切除肿瘤并矫正畸形。但骨软骨瘤具有多发性，难以全部切除。因此，越来越多的学者正在探索保守治疗的方法。但当前对HME发病机制的认识有限，临床尚无安全、有效的药物。关于HME发病机制的相关假说多基于遗传基因突变，HME患者可能发生了因基因杂合性缺失等二次突变而导致的 EXT抑癌基因突变及功能丧失，最终诱导生长板中软骨增殖及分化异常。 EXT基因表达异常引起硫酸乙酰肝素（heparan sulphate，HS）水平的降低，导致多条调控生长板软骨细胞发育及分化的分子信号通路异常，共同参与HME的发生、发展全过程。本文综述了近年来关于HME发病机制的相关研究，以期更好地理解HME的病理过程，为HME的诊疗提供理论依据，同时也为HME靶点药物的研发提供思路。

目的:探究脐带组织间充质干细胞(UB-MSCs)联合富血小板血浆(PRP)在骨折愈合过程中的影响效果及作用机制。方法:制作股骨骨折大鼠动物模型，分为模型组及实验组，正常组为空白对照组，每组各6只，实验组于骨折端分别注射PRP、人脐带组织间充质干细胞(hUB-MSCs)及hUB-MSCs+PRP，分别于治疗后3周和5周进行取材，通过苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学染色及蛋白免疫印迹实验，观察股骨组织愈合情况，测定骨相关标志物Runx2、血小板源性生长因子-B(PDGF-B)、骨桥蛋白(OPN)、类胰岛素生长因子(IGF)及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad的表达阳性率，评估各组骨折愈合情况。结果:HE病理分析，3周后，模型组骨折处出现大量松软的纤维组织，hUB-MSCs组可见少量软骨细胞浸润生长，PRP组软骨细胞量较hUB-MSCs组更多，hUB-MSCs+PRP组可见大量软骨细胞浸润生长，出现排列紊乱、稀疏的新生骨小梁。5周后，模型组出现少量软骨细胞浸润，hUB-MSCs组软骨细胞明显增多，PRP组股骨骨折处出现新生骨小梁结构，hUB-MSCs+PRP组可见较成熟的骨组织。免疫组化结果显示Runx2、PDGF-B、OPN、IGF在hUB-MSCs+PRP组中表达阳性率分别为14.01±1.72、23.35±4.45、22.09±1.39、13.69±3.03均显著高于模型组(5.56±0.68、15.15±2.71、8.12±0.68、4.87±0.46， P<0.001)。PRP和hUB-MSCs能通过激活BMP-2/Smad通路，上调BMP-2以及促进Smad1/5磷酸化的表达，hUB-MSCs联合PRP作用更强。 结论:hUB-MSCs+PRP联合用药能显著增强成骨细胞分化能力，促进成骨相关的分子表达，提高骨折处骨组织愈合能力。

矮身材的诊断过程实质上是确定身材矮小病因的过程。随着遗传学新技术的广泛临床应用，已证实越来越多的基因与矮小相关。下丘脑垂体发育异常的基因变异,下丘脑垂体-生长激素-胰岛素样生长因子1轴相关的基因变异,生长板参与软骨细胞增殖、肥大和分泌软骨细胞外基质过程的基因异常,染色体及基因组印记基因异常等均可导致身材矮小。为明确矮身材病因，规范生长激素合理临床应用，须重视对矮身材儿童的遗传学分析和研究力度。