目的:研究吴门抑激散对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠肠道、下丘脑5-羟色胺(5-HT)信号传导系统的调控作用。方法:将60只SD雄性大鼠按随机数字表法分为空白组(10只)、腹泻型肠易激综合征组(50只)，腹泻型肠易激综合征组经番泻叶灌胃+束缚应激2周后形成IBS-D模型，将其按随机数字表法分为模型组、得舒特组(1.5 mg/kg)、吴门抑激散低剂量组(6 g生药/kg)、吴门抑激散中剂量组(12 g生药/kg)和吴门抑激散高剂量组(24 g生药/kg)，每组10只。连续给药2周后，采用ELISA法检测大鼠血清、结肠和下丘脑组织中5-HT含量；HE染色法观察各组大鼠结肠病理改变；采用Western blot法和RT-PCR法分别检测结肠和下丘脑组织中色氨酸羟化酶1(TPH-1)、5-羟色胺受体3 (5-HT3R)、5-羟色胺受体4(5-HT4R)、5-羟色胺转运体(SERT)蛋白和mRNA水平。结果:与模型组比较，各给药组结肠病理形态有所改善；与模型组比较，吴门抑激散中、高剂量组大鼠血清、结肠5-HT水平降低( P<0.05)，下丘脑5-HT水平升高( P<0.05)；吴门抑激散中、高剂量组结肠TPH-1、5-HT3R、5-HT4R蛋白表达降低( P<0.05)、SERT蛋白表达升高( P<0.05)；吴门抑激散高剂量组下丘脑TPH-1、5-HT3R、5-HT4R蛋白表达升高( P<0.05)、SERT蛋白表达降低( P<0.05)；吴门抑激散低、中、高剂量组结肠TPH-1 mRNA[(4.778±0.604)、(3.278±0.668)、(1.670±0.361)比(6.877±0.148)]、5-HT3R mRNA[(3.807±0.463)、(2.697±0.455)、(1.132±0.136)比(6.322±0.778)]、5-HT4R mRNA[(4.521±0.234)、(2.801±0.351)、(1.331±0.142)比(6.741±0.293)]水平降低( P<0.05)；吴门抑激散中、高剂量组下丘脑5-HT4R mRNA[(0.616±0.208)、(0.726±0.226)比(0.521±0.062)]水平升高( P<0.05)，吴门抑激散高剂量组SERT mRNA[(1.563±1.023)比(2.612±1.035)]水平降低( P<0.05)。 结论:吴门抑激散在一定剂量范围内可双向调节IBS-D大鼠结肠和下丘脑组织中5-HT信号传导系统相关蛋白和mRNA表达，从而改善IBS-D症状。

目的:比较直肠黏膜内脱垂兔造模过程中直肠黏膜变化的差异，探讨直肠黏膜内脱垂的形成机制。方法:采用中药大黄和番泻叶液灌胃、站立与无水酒精肛周注射3种方法联合造模，用电子显微镜观察兔直肠黏膜的超微结构。结果:正常组扫描电镜见直肠黏膜微绒毛排列紧密、细胞界限不清；透射电镜见基底膜均连续、完整，未见破坏，结缔组织中可见纤维细胞及散在的纤维束，细胞膜完整。造模中期组透射电镜见基底膜结构完整，下方结缔组织局灶见成纤维细胞凋亡，凋亡小体形成。造模完成组扫描电镜见直肠黏膜细胞交界处微绒毛明显凹陷；透射电镜见基底膜结构被破坏；结缔组织中均可见到毛细血管不同程度扩张、内皮细胞变性，小部分区域见大量纤维细胞凋亡，间质中可见成片细胞坏死，细胞膜被破坏、细胞器外溢，间质纤维组织疏松、排列紊乱。结论:直肠黏膜内脱垂的形成与成纤维细胞改变、细胞外基质稳态破坏，致基底膜破坏、结缔组织间质改变，从而引起纤维结构变化等一系列病理改变有关。

目的:观察车前子对腹泻模型大鼠小肠组织水通道蛋白4(aquaporin4, AQP4)基因及蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法:将60只大鼠按体重随机分为正常组、模型组、氢氯噻嗪组和车前子低、中、高剂量组。除正常组外，其余各组大鼠采用番泻叶灌胃法复制腹泻模型。车前子低、中、高剂量组灌胃0.95、1.90、3.80 g/kg车前子配方颗粒溶液，氢氯噻嗪组大鼠灌胃氢氯噻嗪混悬液9 mg/kg，按1 ml/100 g大鼠体重灌胃，连续灌胃14 d。实验结束后，记录各组大鼠粪便性状和大便次数，计算稀便率、平均稀便级和腹泻指数；采集小肠组织，采用HE染色法观察小肠组织病理形态学改变，采用PCR法和Western blot法检测小肠组织中AQP4基因和蛋白表达。结果:与模型组比较，车前子低、中、高剂量组大鼠稀便率[(50.89±6.17)%、(41.14±4.48)%、(36.37±4.81)%比(67.45±7.35)%]、平均稀便级[(2.16±0.34)级、(1.73±0.28)级、(1.52±0.25)级比(2.63±0.29)级]、腹泻指数[(1.10±0.19)、(0.71±0.11)、(0.57±0.12)比(1.77±0.24)]降低( P<0.01)；小肠黏膜损伤程度、充血和中性粒细胞浸润现象均减轻；小肠组织AQP4 mRNA[(0.48±0.10)、0.69±0.12)、(0.97±0.15)比(0.21±0.03)]、AQP4蛋白[(0.59±0.08)、(0.64±0.09)、(0.78±0.11)比(0.32±0.05)]表达升高( P<0.01)。 结论:车前子可上调AQP4 mRNA和蛋白表达水平、增加小肠对水的吸收、调节水液代谢，从而发挥止泻作用。

目的 基于表皮生长因子受体/丝裂原活化蛋白激酶/黏蛋白 5AC(EGFR/MAPK/MUC5AC)通路探析益肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌的治疗作用及机制.方法 将SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、氨溴索组及益肺健脾方低、中、高剂量组.烟熏联合脂多糖滴注、番泻叶灌胃泻下的方式复制肺脾两虚型COPD大鼠模型.阿利新蓝-过碘酸-雪夫染色(AB-PAS)观察大鼠支气管黏液分泌及杯状细胞增生程度;苏木精-伊红染色(HE)观察大鼠肺组织病理形态;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠肺组织MUC5AC、EGFR蛋白和c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38 丝裂活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白及磷酸化蛋白的表达;采用实时荧光定量 PCR法(RT-qPCR)检测大鼠肺组织 EGFR、JNK、p38 MAPK、MUC5AC及ERK mRNA的表达.结果 AB-PAS染色显示氨溴索组及益肺健脾方各剂量组杯状细胞增生明显改善.HE染色下见氨溴索组及益肺健脾方高剂量组明显改善肺组织病理损伤.相较于空白组,模型组肺组织中 ERK、MUC5AC、p38 MAPK、JNK 及 EGFR mRNA 的表达皆明显升高(P＜0.01),MUC5AC、EGFR蛋白和p38 MAPK、JNK、ERK蛋白及磷酸化蛋白表达量皆明显升高(P＜0.01).相比于模型组,氨溴索组及益肺健脾方中、高剂量组各蛋白表达量明显下降(P＜0.01,P＜0.05),低剂量组EGFR、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达量皆降低(P＜0.01,P＜0.05);高剂量组与氨溴索组EGFR、ERK、JNK、p38 MAPK及MUC5AC mRNA的表达皆降低(P＜0.01,P＜0.05),中、低剂量组MUC5AC mRNA的表达下降(P＜0.05).结论 益肺健脾方可减少MUC5AC的表达,从而改善气道黏液高分泌,其作用机制与EGFR/MAPK信号通路有关.

目的探讨直肠癌患者MRI检查前采用不同肠道准备方式(番泻叶肠道准备和单纯限制饮食)对扩散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)超高b值DWIb2000(b=2000 s/mm2)和常规b值DWIb1000(b=1000 s/mm2)图像质量的影响.材料与方法回顾性分析番泻叶肠道准备组和单纯限制饮食组共203例直肠癌患者的DWI(DWIb1000和DWIb2000)图像质量及相关影响因素.评估组间肠道准备质量指标(包括直肠扩张程度、直肠内容物性质、直肠肠腔气体量、肿瘤层面肠腔气体量)和DWI图像的磁敏感伪影程度(整体伪影、肿瘤区伪影).采用Mann-Whitney U检验或t检验比较两组间肠道准备质量评分和DWI图像伪影评分的差异.肿瘤区DWIb2000伪影评分≤3分被定义为肿瘤区DWIb2000临床显性伪影,使用单因素和多因素logistic回归模型分析肿瘤区DWIb2000临床显性伪影的相关因素(肠道准备方式、性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤环周占比、直肠后系膜厚度).结果两名独立观察者间在图像质量指标评估中具有良好一致性[组内相关系数(intra-class correlation coefficient,ICC)均>0.70].番泻叶肠道准备组的肠内容物性质、直肠肠腔气体量、肿瘤层面气体定量评分均高于单纯限制饮食组(P均<0.05).番泻叶肠道准备组的DWIb1000和DWIb2000的整体伪影和肿瘤区伪影程度均显著低于单纯限制饮食组(P均<0.05).在相同的肠道准备方式中,DWIb2000的整体伪影及肿瘤区伪影程度均显著高于DWIb1000(P均<0.01).多因素logistic回归分析表明肠道准备方式是肿瘤区DWIb2000临床显性伪影的独立相关因素(OR=3.463,95％CI:1.738～6.901,P<0.001).结论与单纯限制饮食相比,番泻叶肠道准备可以改善肠道准备质量,减少DWI的磁敏感伪影水平,提高直肠超高b值DWIb2000和常规DWIb1000图像质量.

目的:探讨参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征(CFS)脾肾阳虚证模型大鼠的影响以及免疫调节作用.方法:将50只无特定病原体(SPF)级健康雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,参杞强精颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组,采用游泳力竭实验造成大鼠体力疲劳,慢性束缚应激造成大鼠心理疲劳,同时给予番泻叶煎煮液灌胃造成脾肾阳虚证候,构建CFS脾肾阳虚证大鼠模型,造模成功后分别按照各组剂量灌胃,连续给药21 d后,测定各组大鼠的胸腺和脾脏指数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)浓度以及细胞因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)含量,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞法检测各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群分布情况.结果:行为学结果显示,模型大鼠的体质量增长缓慢,精神萎靡,摄食水量减少,活动减少,便质稀软,力竭游泳时间减少,悬尾静止时间增加.药物干预后,与模型组比较,各给药组大鼠精神状态、体质量、摄食水量均显著改善,力竭游泳时间增加、悬尾静止时间减少(P＜0.01或P＜0.05);参杞强精颗粒各剂量组能显著提升大鼠胸腺和脾脏指数,提高IgG、Ig M、IgA浓度和IL-2、IL-6、IFN-γ的含量,显著提高脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,也能提高CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率和CD4+/CD8+T比值,降低CD8+T淋巴细胞百分率,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论:参杞强精颗粒能显著改善慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫功能,缓解疲劳症状,且具有很好的免疫调节作用.

目的 通过比较 2,4-二硝基氯苯(2,4-Dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导特应性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)小鼠疾病模型、"外湿+饮食失节+番泻叶灌胃"复合因素诱导脾虚湿蕴证小鼠模型,以及两者病证结合模型,建立特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合小鼠研究模型,探索该方法的可行性.方法 采用"外湿+饮食失节+番泻叶灌胃"复合因素造模方法,探索构建小鼠(Balb/c)脾虚湿蕴证,进一步应用DNCB诱导Balb/c小鼠出现特应性皮炎样病变,建立脾虚湿蕴证特应性皮炎病证结合模型.观察各组小鼠一般情况及体质量,进行脾虚、湿证症状评分;通过比较各组皮损程度、EASI评分、经皮水分散失(TEWL)值、脾脏系数和胸腺系数评价小鼠特应性皮炎严重程度;测定小鼠肌酐、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、胃泌素、淀粉酶水平.结果 (1)在脾虚湿蕴证造模期间,与正常组比较,脾虚湿蕴证组、脾虚湿蕴型特应性皮炎组小鼠出现肥胖、精神萎靡、毛发污秽油腻、腹泻、肛周清洁度差等情况.在结合施加特应性皮炎模型后,与正常组比较,特应性皮炎组(P＜0.001)、脾虚湿蕴证组(P＜0.05)、脾虚湿蕴型特应性皮炎组(P＜0.001)的体质量都有所降低.(2)与特应性皮炎组比较,脾虚湿蕴型特应性皮炎组的皮损程度更严重,EASI评分(P＜0.05)、TEWL值(P＞0.05)更高.(3)与正常组比较,特应性皮炎组的脾脏系数升高(P＜0.001)、胸腺系数降低(P＜0.001);与特应性皮炎组比较,脾虚湿蕴型特应性皮炎组脾脏系数(P＞0.05)、胸腺系数都降低(P＜0.05).(4)血清生化指标结果显示,与正常组比较,脾虚湿蕴证组小鼠肌酐(P＜0.01)、葡萄糖(P＜0.001)、总胆固醇(P＞0.05)、甘油三酯(P＞0.05)、胃泌素(P＜0.001)水平升高,淀粉酶水平降低(P＜0.01);与特应性皮炎组比较,脾虚湿蕴型特应性皮炎组小鼠肌酐(P＞0.05)、葡萄糖(P＜0.05)、总胆固醇(P＞0.05)、甘油三酯(P＞0.05)、胃泌素(P＜0.001)水平升高,淀粉酶水平降低(P＞0.05).结论 "外湿+饮食失节+番泻叶灌胃"复合因素结合DNCB诱导特应性皮炎脾虚湿蕴病证结合小鼠模型既可表现出明显的脾虚湿蕴证中医指征,也可表现出特应性皮炎病样特征,可作为可靠的特应性皮炎脾虚湿蕴证中医病证结合动物模型,为后续脾虚湿蕴型特应性皮炎病理机制探讨、中药复方药效评价、药理机制探讨等方面研究提供参考.

目的 探讨鼻敏方治疗变应性鼻炎(AR)肺脾气虚证黏液高分泌的可能作用机制.方法 34只SD大鼠随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、鼻敏方低剂量组(8只)、鼻敏方高剂量组(10只).除空白组外,其余各组大鼠以烟熏+番泻叶灌胃+卵清蛋白法建立AR肺脾气虚证大鼠模型.造模结束后,鼻敏方低、高剂量组大鼠分别给予鼻敏方浓缩液(浓度为2.16g/ml)1.08g/100g、2.16g/100g灌胃,模型组给予0.5 ml/100 g生理盐水灌胃,均每日1次,持续28天;空白组不干预.干预后进行行为学评价,ELISA法检测大鼠外周血总免疫球蛋白E(IgE)水平,HE染色观察大鼠鼻上皮黏膜病理学变化,免疫组化法检测鼻上皮黏膜的跨膜蛋白16A(TMEM16A)、黏蛋白5AC(MUC5AC)蛋白表达,Western Blot法检测鼻上皮黏膜核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达,RT-PCR法检测鼻上皮黏膜TMEM16A、MUC5AC、NF-κBmRNA表达.结果 HE染色显示,空白组大鼠鼻上皮黏膜上皮细胞结构完整无脱落,无水肿、坏死等病变;模型组大鼠鼻上皮黏膜上皮组织增厚且部分脱落,可见嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润;鼻敏方高、低剂量组大鼠鼻上皮黏膜组织病理均有改善,且鼻敏方高剂量组改善更明显.与空白组比较,模型组大鼠行为学积分及外周血总IgE水平显著升高,鼻上皮黏膜TMEM16A、MUC5AC、NF-κB蛋白及mRNA表达升高(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,鼻敏方高剂量组大鼠行为学积分及外周血总IgE水平降低,鼻上皮黏膜TMEM16A、MUC5AC、NF-κB蛋白及mRNA表达降低(P＜0.05或P＜0.01);鼻敏方低剂量组大鼠行为学积分及外周血总IgE水平降低,鼻上皮黏膜TMEM16A、MUC5AC蛋白及mRNA表达降低,NF-κB蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01),NF-κB mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).与鼻敏方低剂量组比较,鼻敏方高剂量组NF-κB蛋白表达降低(P＜0.01).结论 鼻敏方可能通过调控鼻上皮黏膜TMEM16A/NF-KB/MUC5AC信号通路改善AR肺脾气虚症状及黏液高分泌.

大黄是典型的多基原大宗中药材,研究不同基原大黄药效成分含量和比例的差异,以期实现对不同基原大黄药材质量的精准评价,为大黄在临床上的精准用药提供理论依据.该研究以相同生长年限(四年生)的唐古特大黄、掌叶大黄和药用大黄为材料,采用拟靶向代谢组学技术测定 3 种基原大黄中蒽醌、蒽酮及鞣质类共计 220 个成分的相对含量,并运用多元统计方法对差异成分进行筛选.主成分分析(PCA)结果显示,大黄样品按照基原明显聚为3 类.通过正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),最终筛选出 117 种差异成分,其中包括:游离蒽醌类 8 种,结合蒽醌类 18 种,蒽酮类 80 种,鞣质类 11 种.综合比较,28 种成分在唐古特大黄中含量较高,主要为番泻苷类、结合蒽醌类和原花青素类化合物;35 种成分在药用大黄中含量较高,主要为游离蒽醌类和儿茶素类化合物;54 种成分在掌叶大黄中含量较高,主要为二蒽酮类化合物,但其结构暂不能确定.通过对 3 种基原大黄差异成分的分析,根据差异成分在 3 种基原大黄中的含量分布情况可推测出:唐古特大黄的泻下攻积之力最强,药用大黄的清热泻火功效最强,且两者的逐瘀通经功效强于掌叶大黄.

目的:基于促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)/CRF受体1(CRFR1)通路探讨培土抑木针法对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠肠黏膜屏障功能的影响及机制.方法:将40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、激动剂组,每组10只.除空白组外,其余各组大鼠采用番泻叶浸液灌胃联合慢性不可预知性温和刺激构建IBS-D大鼠模型.针刺组大鼠于造模后针刺一侧"天枢",电针"足三里""太冲"(2 Hz/15 Hz),每次 20 min,隔日左右交替,干预 14 d;激动剂组尾静脉注射CRFR1激动剂尿促皮素后 30 min进行针刺,针刺方法及时间均同电针组.干预后检测各组大鼠内脏痛阈值,进行粪便Bristol评分,采用高架十字迷宫实验和旷场实验评价大鼠焦虑抑郁行为,采用ELISA法检测大鼠血清CRF、CRFR1的含量,采用免疫组织化学法检测结肠组织中CRF、CRFR1,紧密连接蛋白闭锁连接蛋白 1(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白1(Claudin-1)阳性表达.结果:与空白组相比,模型组大鼠内脏痛阈值,高架十字迷宫开臂时间比(OT%)、旷场实验运动总距离,结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1阳性表达下降(P<0.01,P<0.05),粪便Bristol评分,血清CRF、CRFR1含量,结肠CRF、CRFR1阳性表达上升(P<0.01).与模型组相比,干预后电针组内脏痛阈值,OT%、旷场实验运动总距离,结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1阳性表达均上升(P<0.05,P<0.01),粪便Bristol评分,血清CRF、CRFR1含量,结肠CRF、CRFR1阳性表达下降(P<0.01);激动剂组粪便Bristol评分,血清CRF含量和结肠CRF阳性表达显著下降(P<0.01).结论:培土抑木针法可以显著改善IBS-D大鼠的内脏高敏、焦虑抑郁状态,其机制可能与抑制CRF/CRFR1通路,恢复肠道紧密连接蛋白表达有关.