目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术比较板蓝根Isatidis Radix和大青叶 Isatidis Folium 的化学成分.方法 采用 Accliam 120 C18 色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5 μm;Thermo Fisher),以 0.1％甲酸的乙腈溶液-0.1％甲酸的水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.3mL/min,柱温为40 ℃,采用电喷雾离子源(ESI),在正、负离子模式下进行数据采集,以PeakView 1.2质谱分析软件分析数据.结果 通过化合物的保留时间、精确质荷比、二级质谱裂解碎片等信息,结合对照品、参考文献和Massbank等数据库共鉴定或指认出板蓝根和大青叶的71个共有成分,主要包括生物碱、黄酮、木脂素、含硫化合物、有机酸等类化合物;板蓝根特有成分6个,主要包括含硫化合物类等;大青叶特有成分2个,均为生物碱类.结论 该方法能够系统、快速地比较分析板蓝根和大青叶的化学成分,为其质量控制和药效物质基础研究提供了重要依据.

目的:测定不同生长时期菘蓝及不同悬浮培养时间毛状根中抗流感病毒活性成分直铁线莲宁B的含量,研究其累积变化规律,为菘蓝的采收和菘蓝毛状根体系评价提供参考.方法:应用超高效液相色谱测定菘蓝叶片、根及毛状根中直铁线莲宁B的含量.结果:菘蓝叶片中未检测到直铁线莲宁B;在整个生育期内,菘蓝根中直铁线莲宁B动态累积变化曲线为“单峰型”,含量在生长100 d左右达到峰值后逐渐降低;毛状根中直铁线莲宁B含量随悬浮培养时间持续增加,在20 d达到5.40 mg ·g-,超过根中最大含量.结论:整个生长周期内,菘蓝和毛状根中直铁线莲宁B累积变化呈一定规律性,原植物中直铁线莲宁B在九月下旬产量达到最大;毛状根在10 ～20 d期间直铁线莲宁B含量增长处于生长对数期,20 d后即超过原植物的最大含量,说明菘蓝毛状根体系是研究直铁线莲宁B生物合成的理想体系,也可为后续利用菘蓝毛状根体系大量制备直铁线莲宁B提供参考.

目的 应用人源肝微粒体孵育体系考察直铁线莲宁B的体外代谢.方法 将直铁线莲宁B与人肝微粒体共同温孵,用蛋白沉淀法处理样品,采用LC-MS/MS法对代谢产物进行定性和定量分析.色谱条件:Phenomenex Luna C18色谱柱(100 mm×2.0 mm,5μm);流动相:乙腈(含0.1％甲酸)-水(含0.1％甲酸),梯度洗脱;流速400 μL· min-1;进样量10 μL.质谱条件:电喷雾离子源,负离子模式检测.结果 直铁线莲宁B(化合物1)在人肝微粒孵育体系中可代谢为落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(化合物2)和落叶松脂醇-4'-0-β-D-葡萄糖苷(化合物3).结论 在人肝微粒孵育体系中,直铁线莲宁B可以部分代谢为抗流感活性更强的化合物2,提示在体内可能通过原型药和活性代谢物共同发挥抗流感药效,为该化合物药效评价提供了重要依据.

目的:建立HPLC法测定板蓝根颗粒中直铁线莲宁B(落叶松脂素-4,4'-二-O-β-D-二葡萄糖苷clemastanin B)的含量测定法,并考察28批次产品中直铁线莲宁B的含量,为扳蓝根颗粒的质量控制提供依据.方法:色谱为:Angilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-水(22∶78),等度洗脱.柱温为30℃,流速:1 mL· min-1,检测波长为224 nm,进样量为10 μL.结果:直铁线莲宁B在0.038,8～3.88 μg范围内线性关系良好,r=0.999(n=6);平均加样回收率为103.61％,RSD=2.15％(n=6).结论:本方法选取的指标化合物稳定,且操作简便,结果准确、专属性强、重复性好,可对板蓝根颗粒中直铁线莲宁B进行含量测定.

目的 建立HPLC同时测定板蓝根颗粒中(R,S)-告衣春和直铁线莲宁B含量的方法.方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为0.8 mL·min-1,进样量为10 μL,柱温为30℃,检测波长230 nm.结果 (R,S)-告衣春、直铁线莲宁B在2.39～47.80 μg·mL-1(r=1.000 0)和3.18～63.60 μg·mL-1(r=0.999 9)内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.90％(RSD=1.56％)和99.48％(RSD=1.08％).结论 本方法操作简便、准确稳定、专属性强、重复性好,可为提高板蓝根颗粒质量标准提供依据.

目的 建立板蓝根Isatisindigotica中(R,S)-告依春、直铁线莲宁B、胞苷、鸟苷、尿苷、腺苷6种不同类成分的一测多评方法.方法 采用HPLC法,以(R,S)-告依春为内参物,建立了(R,S)-告依春与胞苷、鸟苷、尿苷、腺苷和直铁线莲宁B的相对校正因子,并考察相对校正因子的耐用性和重现性.比较外标法和一测多评法对新疆软紫草中6种成分的测定结果.结果 各相对校正因子重复性良好,一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著差异.结论 建立同时测定6种成分的一测多评法控制板蓝根的质量准确、可靠.

目的 建立HPLC法同时测定利咽解毒颗粒中7种成分(R,S)-告依春、直铁线莲宁B、连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷、哈巴苷和哈巴俄苷的质量分数,同时采用聚类分析和主成分分析等化学计量学方法对不同生产企业利咽解毒颗粒进行综合评价.方法 流动相:乙腈-0.2％磷酸溶液,流速:0.9 mL/min;色谱柱:Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,柱温:30℃;检测波长分别为230 nm[0～23.0 min检测(R,S)-告依春和直铁线莲宁B]、275 nm(23.0～37.0 min检测连翘酯苷B、连翘酯苷A和连翘苷)和210 nm(37.0～60.0 min检测哈巴苷和哈巴俄苷);采用SPSS 26.0统计软件对7种成分的质量分数进行聚类分析和主成分分析.结果 (R,S)-告依春、直铁线莲宁B、连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷、哈巴苷、哈巴俄苷分别在1.63～40.75、0.59～14.75、1.01～25.25、6.38～159.50、2.27～56.75、6.86～171.50、1.99～49.75μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9991);平均加样回收率分别为98.52％、97.26％、96.83％、100.0％、98.96％、99.29％、99.03％,RSD分别为1.44％、1.18％、1.01％、0.73％、1.39％、0.88％、1.21％;12批利咽解毒颗粒样品聚为2类,主成分1～3是影响利咽解毒颗粒质量评价的主要因子,化学计量学分析结果 表明同一生产企业样品较为稳定,不同企业间样品的整体质量一致性存在一定差异.结论 该方法操作便捷、重复性好,可用于利咽解毒颗粒的质量评价.

目的 采用大气压基质辅助激光解吸电离-离子阱-飞行时间质谱(atmospheric pressure matrix assisted laser desorption combined with ion trap-time of flight mass spectrometry,AP-MALDI-IT-TOF/MS)和解吸电喷雾电离-四级杆-飞行时间质谱(desorp-tion electrospray ionization combined with quadrupole-time of flight mass spectrometry,DESI-Q-TOF/MS)两种技术,实现板蓝根的全质谱成像分析,揭示多种成分的组织原位可视化分布,寻找品质特征相关指标群.方法 不同商品规格的板蓝根,分别喷涂2,5-二羟基苯乙酮(2,5-DHAP)和1,5-二氨基萘(1,5-DAN)基质,在正、负离子模式下进行AP-MALDI-IT-TOF/MS质谱成像、成分鉴定和偏最小二乘回归(partial least squares regression,PLSR)分析.不同品质特征的板蓝根,在正、负离子模式下进行DESI-Q-TOF/MS 质谱成像、成分鉴定和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discrimination analysis,OPLS-DA)分析.结果 板蓝根经质谱成像分析,初步鉴别得到多个类别约100余个化合物,AP-MALDI-IT-TOF/MS和DESI-Q-TOF/MS均可揭示板蓝根化合物的空间分布,并可区分不同规格、品质样品,3-醛基吲哚、前告依春/表前告依春、isatithioetherin C/isati-thioetherin E、松柏苷、紫丁香酚苷、直铁线莲宁B、腺苷、腺嘌呤、尿苷、精氨酸、2-羟基丁二酸、顺丁烯二酸/富马酸、枸橼酸、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、异牡荆素在高商品规格/品质样品中特定空间分布信号更强,对分类影响显著,组成品质特征相关指标群.结论 质谱成像可将中药材的品质与化学信息建立连接,为其质量评价和进一步开发利用提供实验基础和新的手段.