目的:观察斯钙素2(STC2)蛋白在胃癌腹腔侵袭转移中的作用。方法:2018年6月至2019年4月利用腺病毒载体将短发夹RNA(shRNA)转染人胃癌SGC7901细胞(湖北省重点实验室提供)以沉默STC2，构建沉默STC2的SGC7901细胞株，分为实验组(STC2-shRNA组)及对照组(SGC7901组)，并用蛋白质印迹法(Western blot)验证沉默STC2效果。构建裸鼠胃癌模型：选取6～8周龄雌性裸鼠36只(购自武汉大学动物实验中心)，实验组及对照组各18只。经胃前壁大弯侧直接注射胃癌细胞SGC7901悬液接种构建鼠胃癌转移模型。接种后两组裸鼠成瘤数量、瘤体大小及重量比较采用 t检验；两组裸鼠腹腔各脏器成瘤率、抑瘤率、裸鼠生存时间、存活率、生命延长率等比较采用 χ2检验，最后Western blot检测两组胃癌肿瘤的血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、白细胞介素-10(IL-10)蛋白表达水平。 结果:Western blot实验显示，沉默STC2基因后，实验组细胞STC2蛋白量的表达较对照细胞明显减少，说明STC2沉默成功。接种8～15 d后裸鼠均有肿瘤生长，术区可触及质硬且活动不良结节。STC2-shRNA组裸鼠瘤体(0.76±0.14) mm 3、重量(1.23±0.14) g、数目(5.25±1.17)个，与SGC7901组[(3.61±0.44) mm 3、(3.98±0.21) g、(18.65±2.39)个]比较，差异有统计学意义( t＝2.364、3.022、2.523， P<0.05)。STC2-shRNA组裸鼠胃、肝脏、脾、肾、肠及肠系膜、腹膜的成瘤率依次为50.0%、33.3%、11.1%、16.7%、22.2%、5.6%，SGC7901组成瘤率依次为100.0%、100.0%、55.6%、67.7%、72.2%、67.7%，STC2-shRNA组抑瘤率达到69.1%，两组各指标比较差异有统计学意义( χ2＝5.464、5.995、7.281、5.462、9.826， P<0.05)；STC2-shRNA组组裸鼠存活时间上明显延长，30 d后裸鼠存活14只，存活率77.8%，生命延长率达到64.5%，差异有统计学意义( χ2＝6.044， P<0.05)。免疫组织化学结果显示，STC2-shRNA组VEGF-C、IL-10蛋白蛋白表达水平明显弱于胃癌细胞组，抑瘤率分别达到70.7%、71.4%。 结论:沉默STC2后的胃癌细胞SGC7901侵袭转移潜能下降，提示STC2可能有促进胃癌发生侵袭转移的作用。

目的:构建大鼠RNAi-腺苷A2a受体(A2aR)慢病毒载体并进行鉴定。方法:首先构建3对短发夹RNA(shRNA)-A2aR序列(shRNA-A2aR 1、shRNA-A2aR 2、shRNA-A2aR 3)，在shRNA慢病毒载体中分别插入3对双链shRNA oligo，shRNA慢病毒重组质粒构建成功后，将重组质粒、包装载体、穿梭载体共转染293T细胞，从而获得病毒液。实验Ⅰ　采用随机数字表法将大鼠原代心肌细胞分为3组( n＝6)：空载组(V组)、shRNA-A2aR 1组和shRNA-A2aR 3组，各组分别转染MOI为10的相应病毒液，转染48 h时，Western blot法检测A2aR表达水平，确定干扰效率，以筛选最佳慢病毒载体。实验Ⅱ　采用随机数字表法将大鼠原代心肌细胞分为5组( n＝36)：空载组(V组)、MOI5组、MOI10组、MOI15组和MOI20组，各组分别转染相应MOI的病毒液(最佳慢病毒载体)，于转染24、48和72 h时，采用CCK-8法测定细胞存活率，荧光显微镜下观察细胞活力和细胞死亡情况，Western blot法检测A2aR表达水平，确定干扰效率。 结果:实验Ⅰ　成功构建了2种shRNA-A2aR慢病毒载体(shRNA-A2aR 1、3)。shRNA-A2aR 3病毒液滴度为3.5×10 8 TU/ml。与V组和shRNA-A2aR 1组比较，shRNA-A2aR 3组心肌细胞A2aR表达下调( P<0.01)，shRNA-A2aR 3慢病毒载体干扰效率73%。实验Ⅱ　选择shRNA-A2aR 3慢病毒载体转染24 h时，各组细胞存活率均>85%；转染48 h时，MOI5组和MOI10组细胞存活率>80%；转染72 h各组细胞存活率<70%。倒置荧光显微镜下可见，MOI5组荧光密度稍低，MOI10组转染48 h及MOI20组转染24 h时，荧光密度较高且细胞状态较好；转染72 h时各组心肌细胞活力明显下降、死亡细胞增加。Western blot显示：MOI10组转染48 h、MOI15组转染48 h、MOI20组转染24和48 h时干扰效率均>70%。 结论:成功构建了大鼠shRNA-A2aR慢病毒载体，且MOI为10、转染48 h或MOI为20、转染24 h为最佳转染方案。

目的:探讨慢病毒稳定下调腺苷二磷酸核糖基化因子的三磷酸鸟苷酶激活蛋白1(ASAP1)表达对肺腺癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:收集郑州大学第一附属医院病理科2022年8月1日至2023年5月1日手术切除肺腺癌及配对癌旁组织各5例，免疫组织化学(IHC)检测ASAP1在人肺腺癌组织中的表达，结合在线数据库(KM-plotter、HPA、UALCAN)分析ASAP1表达与肺腺癌患者预后的关系。在体外用ASAP1阴性对照慢病毒(NC)和ASAP1敲低短发夹RNA慢病毒(ASAP1 KD)感染A549和HCC4006细胞，构建稳定下调ASAP1表达的肺腺癌细胞系。蛋白印迹(WB)检测ASAP1蛋白下调效率，通过平板克隆实验、细胞活力检测试剂盒(CCK-8)、迁移实验、Transwell侵袭实验、蛋白印迹检测下调ASAP1对细胞增殖侵袭的影响和对上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达的影响，两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:ASAP1在人肺腺癌组织中的表达远高于癌旁正常组织(209.70±9.02比48.33±2.89， t＝29.51， P<0.01)，且多个数据库显示ASAP1的表达与患者不良预后明显相关[KM-plotter数据库( P<0.0001)、HPA数据库( P<0.001)、UALCAN数据库( P<0.01)]；体外实验结果显示，较NC组，ASAP1 KD组的ASAP1蛋白表达明显下调(A549细胞株：0.99±0.03比0.36±0.01， t＝27.39， P<0.01；HCC40006细胞株：1.02±0.07比0.27±0.07， t＝11.08， P<0.01)，细胞形成的克隆数量明显减少(A549细胞株：233.70±5.51比33.67±10.02， t＝69.28， P<0.01；HCC4006细胞株：333.3±30.55比50.33±5.508， t＝14.17， P<0.01)，细胞在450nm波长处的吸光度值降低(A549细胞株：1.18±0.06比0.64±0.11， t＝8.20， P<0.05；HCC4006细胞株：0.94±0.04比0.57±0.09， t＝4.79， P<0.05)。此外，ASAP1 KD组穿过小室成功迁移的细胞数量明显减少(A549细胞株：137.00±8.54比19.67±5.03， t＝32.00， P<0.01；HCC4006细胞株：42.67±3.51比12.33±2.51， t＝45.50， P<0.01)，穿过基质胶成功侵袭的细胞数量明显减少(A549细胞株：207.70±9.07比(41.33±4.73， t＝49.17， P<0.01；HCC4006细胞株：35.00±5.00比6.67±1.53， t＝9.39， P<0.01)；ASAP1 KD组EMT相关蛋白E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达升高(A549细胞株：0.45±0.2比0.82±0.06， t＝10.58， P<0.01；HCC4006细胞株：0.42±0.06比0.78±0.07， t＝6.59， P<0.01)；N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达降低(A549细胞株：0.79±0.05比0.39±0.03， t＝11.67， P<0.01；HCC4006细胞株：0.72±0.06比0.25±0.02， t＝11.91， P<0.01)；波形蛋白(Vimentin)表达降低(A549细胞株：0.69±0.02比0.36±0.01， t＝24.56， P<0.01；HCC4006细胞株：0.79±0.03比0.48±0.02， t＝13.25， P<0.01)。 结论:ASAP1在肺腺癌中高表达并与患者不良预后相关，下调ASAP1表达可抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭。

目的:通过短发夹RNA（shRNA）干扰膜联蛋白A1（AnnexinA1，ANXA1）在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）细胞系中的表达，探讨ANXA1对PTC细胞的生物行为学影响。方法:设计使用具有专一高效性的shRNA在TPC-1和BCPAP细胞系中特异性干扰ANXA1的表达，分别对TPC-1及BCPAP细胞系进行转染，包括特异性ANXA1干扰及阴性对照病毒转染，分为shANXA1组和阴性对照病毒组，然后通过半定量逆转录PCR（Q-PCR）与蛋白免疫印迹法（Western Blot）验证基因表达，以shANXA1组为实验组，未转染病毒组及阴性对照病毒组为对照组，比较三组细胞ANXA1的表达水平，验证shRNA干扰效率，再通过划痕、CCK8、Transwell侵袭实验探究ANXA1敲减后对TPC-1和BCPAP细胞系增殖、迁移及侵袭能力的影响。使用独立样本 t检验比较两组间均数，多组间比较采用单因素方差分析， P<0.05差异具有统计学意义。 结果:shRNA可高效沉默ANXA1在PTC细胞系中转录和翻译水平上的表达，通过慢病毒转染成功后的TPC-1和BCPAP和阴性对照组细胞相比，细胞增殖（BCPAP，24 h： F=25.15, P<0.001；48 h： F=6.44， P<0.001；48 h： F=46.94， P<0.001；TPC-1，24 h： F=207.50， P<0.001；48 h： F=202.45， P<0.001；48 h： F=55.89， P<0.001），迁移（BCPAP， F=12511.10， P<0.001；TPC-1， F=3966.10， P<0.001）及侵袭能力（BCPAP： F=94.65， P<0.001；TPC-1： F=681.74， P<0.001）明显下降。 结论:shRNA敲减ANXA1基因后，TPC-1及BCPAP细胞系增殖、迁移及侵袭能力显著下降，表明沉默该基因可降低肿瘤的侵袭性，并初步揭示ANXA1可能是PTC生物治疗中一个重要的潜在靶点。

目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因（PTEN）表达对活化肝星状细胞（HSC）的纽蛋白（vinculin）、细丝蛋白A（filamin A）及皮层肌动蛋白（cortactin）的影响。方法:体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6，将携带靶向PTEN的RNA干扰序列[短发夹RNA（short hairpin RNA, shRNA）]的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN及对照空病毒Ad-GFP转染HSC；采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测各组HSC的PTEN mRNA及蛋白表达；借助激光扫描共聚焦显微镜，采用免疫荧光法检测各组HSC的vinculin、filamin A及cortactin表达变化，并利用Image-pro plus 6.0软件进行图像分析处理，计算所测蛋白荧光表达的积分光密度值（IOD）。实验分为3组：对照组（在腺病毒转染步骤以DMEM代替腺病毒液）、Ad-GFP组（转染仅表达绿色荧光蛋白的空病毒Ad-GFP）、Ad-shRNA/PTEN组（转染携带靶向PTEN的shRNA并表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN）。3组间均数比较采用单因素方差分析，组间比较采用LSD检验。结果:靶向PTEN的shRNA成功转染并显著下调HSC的PTEN mRNA及蛋白表达（ P < 0.05）；HSC的vinculin主要表达于细胞质，Ad-shRNA/PTEN组HSC的vinculin荧光IOD （19 758.83±1520.60）较对照组（7 737.16±279.93）及Ad-GFP组（7 725.50±373.03）显著升高（ P < 0.05），而对照组与Ad-GFP组之间HSC的vinculin荧光IOD差异无统计学意义（ P > 0.05）。3组HSC的filamin A荧光IOD差异无统计学意义（ P > 0.05），但3组HSC的filamin A亚细胞分布发生了变化，Ad-shRNA/PTEN组HSC的filamin A主要分布于细胞质，而对照组和Ad-GFP组HSC的filamin A主要位于细胞核，Ad-shRNA/PTEN组HSC的filamin A核质比（0.60±0.15）明显低于对照组（1.20±0.15）及Ad-GFP组（1.08±0.23）， P < 0.05；而对照组与Ad-GFP组之间HSC的filamin A核质比差异无统计学意义（ P > 0.05）。3组HSC的cortactin主要分布于细胞质，Ad-shRNA/PTEN组HSC的cortactin荧光IOD（54 688.50±2 095.53）较对照组（22 959.94±1 710.42 ）及Ad-GFP组（22 547.11±1 588.72）显著升高（ P < 0.05），而对照组与Ad-GFP组之间HSC的cortactin荧光IOD差异无统计学意义（ P > 0.05）。 结论:PTEN表达下调使体外活化肝星状细胞的微丝结合蛋白vinculin及cortactin的表达上调，并使另一微丝结合蛋白filamin A的亚细胞分布发生改变即出现胞核向细胞质转位。

目的:探讨脊髓损伤后大鼠线粒体自噬变化及靶向Nix对脊髓损伤的影响。方法:30只SD大鼠按照数字表格法分为对照组、脊髓损伤组和Nix下调组，每组10只。Nix下调组小鼠在术前24 d脊髓中注射Nix短发卡RNA(shRNA)腺相关病毒，对照组和脊髓损伤组相同位置注射等体积对照腺相关病毒。脊髓损伤组和Nix下调组大鼠采用动脉瘤夹压迫型损伤法制备脊髓损伤模型，对照组不做处理。两组建模14 d后采用染色法分析脊髓部位变性神经元的数量；采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)运动功能评分表分析3组大鼠损伤后运功功能变化；采用蛋白质免疫印迹分析3组大鼠线粒体外膜蛋白TOM20、线粒体内膜蛋白Tim23、第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因诱导激酶(PINK1)、Parkin表达水平。采用透射电子显微镜分析3组大鼠3组大鼠脊髓细胞自噬体数量；采用流式细胞术分析3组小鼠脊髓细胞线粒体膜电位；组间比较采用单因素方差分析。结果:Nix下调组大鼠骨髓组织Nix蛋白表达水平(0.89±0.31)明显低于脊髓损伤组(1.79±0.11)，差异有统计学意义( t＝15.320， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓组织TOM20和Tim23蛋白表达水平(0.80±0.07、0.69±0.06)明显高于脊髓损伤组(0.53±0.12、0.39±0.09)，差异有统计学意义( t＝6.029、8.270， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓组织PINK1和Parkin蛋白表达水平(1.04±0.11、0.83±0.07)明显低于对照组(1.48±0.15、1.24±0.13)，差异有统计学意义( t＝7.565，9.019， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓组织死亡神经元数量[(6.70±1.34)个]明显低于脊髓损伤组[(17.9±5.26)个]，差异有统计学意义( t＝6.527， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓细胞自噬数量[(14.00±2.58)个]明显高于脊髓损伤组[(29.70±3.56)个]，差异有统计学意义( t＝11.290， P<0.05)。Nix下调组大鼠骨髓细胞线粒体膜电位荧光强度(179.54±12.02)明显高于脊髓损伤组(108.14±12.89)，差异有统计学意义( t＝12.810， P<0.05)。Nix下调组大鼠BBB评分[(12.50±2.80)分]明显高于脊髓损伤组[(5.80±1.48)分]，差异有统计学意义( t＝6.960， P<0.05)。 结论:脊髓损伤后线粒体自噬水平显著增加，下调Nix可抑制抑制线粒体自噬，降低线粒体损伤，保护脊髓神经元，进而改善大鼠神经功能。

目的:探讨沉默肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基2（ARPC2）基因对甲状腺乳头状癌（PTC）TPC-1细胞生物学特性的影响。方法:采用无义短发夹RNA（shRNA）序列慢病毒（shCtrl）感染的TPC-1细胞作为对照组，采用含有ARPC2 shRNA干扰序列慢病毒（shARPC2）感染的TPC-1细胞作为实验组。利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法、流式细胞术、蛋白质印迹法以及克隆形成实验检测抑制ARPC2表达对TPC-1细胞增殖、细胞周期及其相关蛋白表达、克隆形成的影响；利用流式细胞术和蛋白质印迹法检测抑制ARPC2基因对TPC-1细胞凋亡及相关蛋白的影响。结果:shARPC2可以高效感染TPC-1细胞，72 h后感染效率达到85%以上。MTT法检测显示，与对照组相比，实验组TPC-1细胞的增殖被抑制。实验组S期细胞比例较对照组低[（14.79±0.21）%比（21.13±0.33）%， t=27.77， P<0.05]，实验组G 1与G 2/M期细胞比例较对照组增高[G 1期：（67.57±0.08）%比（62.06±0.36）%， t=25.56， P<0.05；G 2/M期：（17.64±0.12）%比（16.91±0.17）%， t=6.154， P<0.05]。实验组细胞周期相关蛋白CDK2、CyclinE和CyclinD的表达均降低。实验组形成克隆数低于对照组，差异有统计学意义[（10±2）个比（161±6）个， t=9.011， P<0.05]。实验组细胞凋亡率高于对照组[（8.60±0.77）%比（4.08±0.40）%， t=9.011， P<0.05]。对照组抗凋亡因子p21与bcl-2蛋白表达降低，促凋亡因子bax蛋白表达上调。 结论:shRNA干扰ARPC2基因的表达可以抑制PTC TPC-1细胞的增殖，并促进细胞凋亡。ARPC2可能是PTC治疗的生物学新靶标。

目的:观察差异显示编码3(DD3)启动子调控的携带精子相关抗原9(SPAG9)基因短发夹RNA(shRNA)的新型溶瘤腺病毒(DD3-ZD55-SPAG9)对激素依赖性前列腺癌LNcap细胞系裸鼠移植瘤的治疗作用。方法:构建裸鼠前列腺癌LNCaP细胞皮下移植瘤模型，当肿瘤体积为100 mm 3随机分成3组，空白对照组(PBS组)、对照病毒组(ZD55-SPAG9组)、病毒组(DD3-ZD55-SPAG9组)。测量肿瘤体积，绘制肿瘤时间-体积生长曲线。苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤细胞的生长。原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肿瘤组织内细胞凋亡。免疫组织化学检测肿瘤组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-8蛋白的表达。采用方差分析(One way-ANOVA)，组间比较采用SNK法。 结果:成功构建裸鼠LNcap细胞移植瘤模型。DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和PBS组移植瘤终体积分别为(1 104.04±110.39)、(1 003.20±150.89)和(2 321.36±173.87) mm 3。DD3-ZD55-SPAG9组和ZD55-SPAG9组肿瘤体积均小于PBS组，差异有统计学意义( F＝203.997， P<0.05)，但DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组之间差异无统计学意义( P>0.05)。HE染色结果显示，DD3-ZD55-SPAG9组和ZD55-SPAG9组的肿瘤组织中均可见较多的死细胞，细胞裂解成碎片，细胞核固缩碎裂，其正常的组织结构消失，两者差异无统计学意义( P>0.05)。TUNEL结果显示，DD3-ZD55-SPAG9组和ZD55-SPAG9组的肿瘤组织切片荧光下均可见较多红色信号，提示细胞凋亡，凋亡信号强度明显高于PBS组，差异有统计学意义( F＝80.932， P<0.05)，两者之间差异无统计学意义( P>0.05)。免疫组织化学法检测肿瘤组织中Caspase-3和Caspase-8蛋白表达的结果显示，DD3-ZD55-SPAG9组和ZD55-SPAG9组与PBS组比较，Caspase-3和Caspase-8蛋白表达量增多，差异有统计学意义( F＝73.848、61.514， P<0.05)，两者之间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:DD3-ZD55-SPAG9可以有效抑制前列腺癌LNCaP细胞皮下移植瘤的生长，与对照病毒ZD55-SPAG9比较差异无统计学意义，其机制包括抑制肿瘤细胞生长、诱导凋亡。

目的:探讨钙调蛋白2(CALM2)对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:通过基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA2.0)对癌症基因组图谱(TCGA)和基因型组织表达(GTEx)数据库中的179例胰腺癌和171例癌旁组织中CALM2基因的表达使用方差分析(ANOVA)进行差异分析，对89例高表达CALM2的胰腺癌患者和89例低表达CALM2的胰腺癌患者分别绘制Kaplan-Meier曲线，使用log-rank检验进行预后分析。采用短发夹RNA(shRNA)慢病毒感染人源胰腺癌细胞系SW1990和ASPC1，建立对照组和CALM2敲低组细胞系；采用慢病毒包被质粒感染人源胰腺癌细胞系BxPC-3，建立对照组和CALM2过表达组细胞系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测敲低或过表达CALM2后细胞内CALM2的mRNA和蛋白表达水平。采用克隆形成和皮下注射裸鼠荷瘤实验验证敲低或过表达CALM2对胰腺癌细胞增殖能力的影响，采用划痕愈合实验和Transwell实验验证敲低或过表达CALM2对胰腺癌细胞的迁移、侵袭能力的影响。结果:CALM2在胰腺癌中的表达水平高于癌旁组织( P<0.05)，预后分析显示高表达CALM2与胰腺癌预后不良呈正相关[总体生存期：风险比( HR)＝1.9， P<0.05；无病生存期： HR＝1.8， P<0.05)]。低表达CALM2的SW1990和ASPC1组细胞的集落形成数量明显低于对照组(SW1990：185.30±20.13比728.30±24.58， t＝29.60， P<0.05；ASPC1：168.70±13.01比551.30±35.35， t＝17.60， P<0.05)，小鼠皮下荷瘤结果表明CALM2敲低组的肿瘤质量明显低于对照组[SW1990：(0.635±0.085) g比(0.343±0.053) g， t＝5.83， P<0.05；ASPC1：(0.845±0.083) g比(0.329±0.030) g， t＝11.76， P<0.05]，CALM2敲低组的平均划痕距离显著低于对照组[SW1990：(43.67±4.04)%比(68.67±4.73)%， t＝6.96， P<0.05；ASPC1：(41.67±3.51)%比(70.33±1.53)%， t＝12.96， P<0.05]，CALM2敲低组的迁移细胞数明显低于对照组(SW1990：206.30±27.15比480.00±23.64， t＝13.17， P<0.05；ASPC1：155.70±18.56比326.00±13.45， t＝12.87， P<0.05)。过表达CALM2的BxPC3组细胞形成的集落数量明显高于空转质粒组(209.30±26.63比117.70±12.74， t＝5.38， P<0.05)，小鼠皮下荷瘤结果显示CALM2过表达组的肿瘤质量明显高于空转质粒组[(0.478±0.044) g比(1.354±0.209) g， t＝8.22， P<0.05]，CALM2过表达组的平均划痕距离显著高于空转质粒组[(64.67±3.06)%比(51.67±3.51)%， t＝4.84， P<0.05]、CALM2过表达组的迁移细胞数明显高于空转质粒组(887.00±73.55比430.00±23.64， t＝10.42， P<0.05)。 结论:CALM2能促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，并与胰腺癌的预后明显相关。

目的:探讨lncRNA SNHG6与乳腺癌的关系及其可能的作用机制。方法:荧光定量PCR检测人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A与人乳腺癌细胞系MCF-7中SNHG6、miR-30-5p、FKBP3的表达情况；按照实验内容将MCF-7细胞分组：①si-NC组、si-SNHG6组、si-NC+miR-30-5p inhibitor组和si-SNHG6+miR-30-5p inhibitor组；②miR-NC组、miR-30-5p inhibitor组、miR-30-5p inhibitor+sh-NC组和miR-30-5p inhibitor+sh-FKBP3组。通过siRNA技术抑制SNHG6表达，采用脂质体介导法分别将miR-30-5p模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）及其阴性对照（miR-NC）转染MCF-7细胞，构建针对FKBP3基因的短发夹RNA（shRNA）慢病毒表达载体抑制FKBP3表达。CCK-8、细胞集落形成实验、细胞伤口愈合实验及Transwell实验观察各组MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭。通过生物信息学软件、双荧光素酶报告基因实验及蛋白质印迹法分析SNHG6与miR-30-5p、miR-30-5p与FKBP3之间的靶向关系。结果:与MCF-10A细胞比较，MCF-7细胞中SNHG6和FKBP3的表达水平显著增加而miR-30-5p的表达水平显著下降（ t=21.097, P=0.000； t=17.812， P=0.000； t=33.671， P=0.000）。与si-NC组比较，si-SNHG6组MCF-7细胞增殖活性被显著抑制（ t=19.569， P=0.000； t=25.077， P=0.000），细胞集落形成数显著下降（ t=34.071， P=0.000），细胞迁移与侵袭也受到抑制（ t=33.419， P=0.000； t=29.372， P=0.000）。miR-30-5p与SNHG6存在互补结合位点，miR-30-5p mimic与SNHG6-WT共转染组荧光素酶活性较miR-NC与SNHG6-WT共转染组显著降低（ t=31.596， P=0.000）。各组MCF-7细胞的增殖、迁移与侵袭之间差异显著（ F=268.014， F=398.483， F=244.962），与si-SNHG6组比较，si-SNHG6+miR-30-5p inhibitor组的MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭能力显著增加（ P=0.000），与si-NC+miR-30-5p inhibitor组比较，si-SNHG6+miR-30-5p inhibitor组的MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭能力显著下降（ P=0.000）。miR-30-5p与FKBP3的3’UTR存在互补结合位点，miR-30-5p mimic与FKBP3-WT共转染组荧光素酶活性较miR-NC与FKBP3-WT共转染组显著降低（ t=28.557， P=0.000）。转染后各组MCF-7细胞间FKBP3蛋白表达差异显著（ F=102.523），与miR-NC组比较，miR-30-5p mimic组FKBP3的蛋白表达显著降低，而miR-30-5p inhibitor组FKBP3蛋白表达则显著升高（ P=0.000）。各组MCF-7细胞间的增殖、迁移与侵袭差异均显著（ F=177.036， F=285.530， F=217.992），与miR-30-5p inhibitor组和miR-30-5p inhibitor+sh-NC组比较，miR-30-5p inhibitor+sh-FKBP3组的MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭能力显著下降（ P=0.000）。 结论:抑制miR-30-5p表达可逆转下调SNHG6对MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。