目的:探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清C-X-C基序趋化因子配体16(CXCL16)、硫氧还蛋白80(Trx80)与认知功能和预后的关系。方法:选取2020年1月至2021年8月张家口市第一医院收治的189例AD患者为AD组，另选取同期110例于本院体检的健康志愿者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清CXCL16、Trx80水平，通过简易精神状态检查量表(MMSE)评分评估认知功能。采用Spearman相关性方法分析AD患者血清CXCL16、Trx80水平与MMSE评分的相关性。189例AD患者根据预后情况分为预后不良组和预后良好组，采用单因素及多因素logistic回归方法分析AD患者预后不良的影响因素，受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CXCL16、Trx80水平对AD患者预后不良的预测价值。结果:与对照组比较，AD组血清CXCL16、Trx80水平更高，MMSE评分更低(均 P<0.05)。Spearman相关性分析显示，AD患者血清CXCL16、Trx80水平与MMSE评分呈负相关(均 P<0.05)。随访1年，189例AD患者预后不良率为32.80%(62/189)。单因素分析显示，年龄、病程、β-淀粉样蛋白(Aβ) 1－40、Aβ 1－42、MMSE评分、CXCL16和Trx80与AD患者预后不良有关(均 P<0.05)。多因素logistic回归分析显示，年龄增加、病程延长和CXCL16、Trx80水平升高为AD患者预后不良的危险因素( P<0.05)，MMSE评分增加为其保护因素(均 P<0.05)。ROC曲线分析显示，MMSE评分、CXCL16、Trx80、CXCL16＋Trx80两项联合、MMSE评分＋CXCL16＋Trx80三项联合预测AD患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.750、0.763、0.771、0.851、0.896，三项联合预测AD患者预后不良的AUC最大。 结论:AD患者血清CXCL16、Trx80水平升高，与认知功能降低、预后不良有关，可能成为AD患者预后不良的辅助预测指标。

目的:探讨槲皮素（QR）对敌草快（DQ）中毒致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法:将80只SPF级健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、DQ模型组、QR治疗组和QR对照组，每组20只。采用一次性腹膜腔注射40 mg/kg DQ溶液1 mL的方法建立DQ中毒模型；正常对照组和QR对照组腹膜腔注射等量纯水。制模4 h后，QR治疗组和QR对照组灌胃50 mg/kg QR溶液0.5 mL；正常对照组和DQ模型组灌胃等量纯水；均每日1次，连续7 d。7 d后麻醉小鼠取眼球血，处死后收集肝组织。透射电镜下观察小鼠肝组织结构改变；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平；分别采用水溶性四氮唑-1比色法（WST-1）、硫代巴比妥酸法（TBA）和酶促反应法检测肝组织还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肝组织核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）、Kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）、活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9（caspase-9）的蛋白表达。结果:透射电镜下显示，DQ模型组小鼠肝组织线粒体严重损伤，QR治疗组线粒体损伤情况较DQ模型组明显减轻。与正常对照组比较，DQ模型组血清ALT和AST水平及肝组织MDA水平均显著升高，肝组织GSH和SOD水平均显著降低；与DQ模型组比较，QR治疗组血清ALT和AST水平及肝组织MDA水平均显著降低〔ALT（U/L）：52.60±6.44比95.70±8.00，AST（U/L）：170.45±19.33比251.10±13.09，MDA（nmol/mg）：12.63±3.41比18.04±3.72〕，肝组织GSH和SOD水平均显著升高〔GSH（μmol/mg）：39.49±6.33比20.26±3.96，SOD（U/mg）：121.40±11.75比81.67±10.01〕，差异均有统计学意义（均 P<0.01）。Western blotting检测结果显示，与正常对照组比较，DQ模型组肝组织Nrf2和HO-1蛋白表达均显著降低，Keap1和活化caspase-9蛋白表达均显著升高；与DQ模型组比较，QR治疗组肝组织Nrf2、HO-1蛋白表达均显著升高〔Nrf2/β-actin：1.17±0.08比0.92±0.45，HO-1/β-actin：1.53±0.17比0.84±0.09〕，Keap1和活化caspase-9蛋白表达均显著降低〔Keap1/β-actin：0.48±0.06比1.22±0.09，活化caspase-9/β-actin：1.17±0.12比1.59±0.30〕，差异均有统计学意义（均 P<0.01）。 结论:QR可通过激活Keap1/Nrf2信号通路减轻DQ中毒所致小鼠急性肝损伤。

目的:探讨银杏叶片调控核因子E2相关因子2（Nrf2）-Kelch样ECH联合蛋白1（Keap1）-抗氧化反应元件（ARE）信号通路在燃煤污染型地方性砷中毒（简称燃煤型砷中毒）大鼠肝损伤中的作用。方法:采用成组设计，30只Wistar大鼠按体重（80~100 g）采用随机数字表法分为5组，每组6只，雌雄各半。正常对照组常规喂饲4.5个月；银杏叶片对照组常规喂饲3个月后给予银杏叶片（25 mg/kg，6 d/周）1.5个月；饮水型砷中毒组和砷粮食污染组分别给予100 mg/L三氧化二砷（As 2O 3）水溶液和含砷100 mg/kg饲料3个月后，常规喂饲1.5个月；银杏叶片治疗组喂饲含砷100 mg/kg饲料3个月后给予银杏叶片（25 mg/kg，6 d/周）1.5个月。采用硫代巴比妥酸比色法检测5组大鼠血清丙二醛（MDA）含量，黄嘌呤氧化酶法检测血清铜锌超氧化物歧化酶（SOD1）活力，二巯双硝基苯甲酸还原法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活力；荧光定量PCR、免疫组织化学及免疫印迹法检测5组大鼠肝组织Nrf2-Keap1-ARE信号通路指标基因的mRNA和蛋白表达；并采用Pearson相关分析指标间的相关性。 结果:饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组血清MDA含量[（3.54±0.51）、（3.83±0.87）、（2.93±0.84）μmol/L]均高于正常对照组[（1.85±0.36）μmol/L， P均< 0.05]；SOD1[（68.21±4.37）、（64.53±9.96）、（73.09±5.43）U/ml]和GPx活力[（486.41±40.45）、（458.24±42.25）、（539.79±79.43）U/L]均低于正常对照组[（81.47±5.73）U/ml、（747.86±80.33）U/L， P均< 0.05]；与砷粮食污染组比较，银杏叶片治疗组MDA含量较低，SOD1和GPx活力均较高（ P均< 0.05）。饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织SOD1和GPx1 mRNA表达均高于正常对照组（ P均< 0.05），银杏叶片治疗组均高于砷粮食污染组（ P均< 0.05）。砷粮食污染组肝组织SOD1蛋白表达低于正常对照组（ P < 0.05），饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织GPx1蛋白表达均低于正常对照组（ P均< 0.05），银杏叶片治疗组SOD1和GPx1蛋白表达均高于砷粮食污染组（ P均< 0.05）。与正常对照组和砷粮食污染组比较，银杏叶片治疗组肝组织Keap1蛋白表达均较低（ P均< 0.05）。饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织细胞质Nrf2、磷酸化Nrf2（pNrf2）蛋白表达均高于正常对照组（ P均< 0.05），银杏叶片治疗组pNrf2蛋白表达低于砷粮食污染组（ P < 0.05）。饮水型砷中毒组、砷粮食污染组和银杏叶片治疗组肝组织细胞核Nrf2、pNrf2蛋白表达均高于正常对照组（ P均< 0.05），且银杏叶片治疗组均高于砷粮食污染组（ P均< 0.05）。细胞核Nrf2、pNrf2蛋白表达与Keap1蛋白表达均呈负相关（ r=-0.523、-0.401， P均< 0.05），与SOD1、GPx1 mRNA表达均呈正相关（ r=0.658、0.530，0.555、0.603， P均< 0.05）；SOD1、GPx1蛋白表达与其酶活力也均呈正相关（ r=0.472、0.629， P均< 0.05）。 结论:砷能诱导氧化应激损伤肝脏，银杏叶片能降低Keap1蛋白表达，促进Nrf2核转位后增强SOD1和GPx1 mRNA表达及部分逆转砷对SOD1和GPx1的转录后调控作用，增加其蛋白表达和酶活力，从而改善燃煤型砷中毒氧化应激状态和肝损伤。

目的 探讨原发性喉癌(PLC)患者血清硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP),凋亡抑制因子5(BIRC5)水平在临床分期判断及疗效监测中的价值.方法 选取本院2020年6月至2023年1月期间收治的68例PLC患者为PLC组,将80例良性病变患者设为良性肿瘤组,患者治疗6个月后根据RECIST实体瘤疗效评价标准将PLC组患者分为治疗有效组(50例)和治疗无效组(18例).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清TXNIP、BIRC5水平;TXNIP、BIRC5对PLC分期诊断效能及PLC患者疗效预测效能采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析.结果 PLC组和良性肿瘤组患者血清TXNIP、BIRC5水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗有效组血清TXNIP水平[(99.52±14.12)pg/mL]显著高于治疗无效组[(85.19±15.17)pg/mL],差异有统计学意义(t=3.621,P＜0.05),BIRC5水平[(15.26±3.65)μg/mL]显著低于治疗无效组[(19.13±3.74)pg/mL],差异有统计学意义(t=3.833,P＜0.05).早期PLC患者血清TXNIP水平[(101.39±12.85)pg/mL]显著高于晚期患者[(91.27±13.36)pg/mL],差异有统计学意义(t=3.154,P＜0.05),BIRC5水平[(14.43±3.07)pg/m L]显著低于晚期患者(17.74＋3.04),差异有统计学意义(t=4.439,P＜0.05).血清 TXNIP、BIRC5 诊断 PLC 分期的线下面积(AUC)分别为 0.829(95％CI:0.718～0.909)、0.795(95％CI:0.679～0.883),灵敏度分别为 81.58％、89.47％,且 TXNIP、BIRC5 联合诊断 PLC 分期的AUC 为 0.899(95％CI:0.802～0.959),灵敏度为 94.74％;血清 TXNIP、BIRC5 预测 PLC 患者疗效的 AUC分别为 0.818(95％CI:0.705～0.901)、0.761(95％CI:0.642～0.856),二者联合 AUC 为 0.921(95％CI:0.830～0.973),具有更高的预测效能(P＜0.05).结论 TXNIP在PLC患者血清中呈低表达,BIRC5PLC患者血清中呈高表达,TXNIP和BIRC5二者联合检测对PLC分期的诊断和PLC患者疗效的预测具有一定效能.

目的 观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(r-bFGF)联合妥布霉素治疗外伤性角膜上皮缺损及对患者生长因子、可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)水平的影响.方法 纳入我院2016年5月至2021年2月门诊就诊的外伤性角膜上皮缺损患者160例,根据信封抽签法分为对照组80例和观察组80例,对照组患者予以妥布霉素治疗,观察组在对照组的基础上联合r-bFGF治疗,对比两组疗效、眼表症状指标、泪液细胞因子、角膜上皮愈合时间、生长因子水平、炎症因子水平,观察两组用药不良反应发生情况.结果 观察组的临床总有效率高于对照组(P<0.05).治疗2周后,观察组泪液分泌时间(TST)、泪膜破裂时间(BUT)高于对照组,眼表疾病指数(OSDI)、角膜荧光染色(FL)低于对照组(P<0.05).治疗2周后,观察组患者血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)、表皮生长因子(EGFR)、血清成纤维细胞生长因子23(FGF-23)均高于对照组(P<0.05).治疗2周后,观察组患者sICAM-1、HMGB1、TXNIP均低于对照组(P<0.05).观察组的角膜上皮的愈合时间明显短于对照组(P<0.05).两组患者均未见明显的不良反应发生情况.结论 r-bFGF联合妥布霉素治疗外伤性角膜上皮缺损,可促进症状改善,缩短角膜上皮的愈合时间,同时还可有效降低泪液炎症因子水平,提高患者的生长因子水平,具有较好的临床应用价值.

目的 探讨猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ESA)硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)对仔猪树突状细胞(DC)活化的影响.方法 体外诱导培养健康仔猪髓源DC,培养7 d后,加入终浓度为100 ng/ml的脂多糖(LPS)刺激,继续孵育2d,分别收集培养未成熟DC(imDC)和成熟DC(mDC),光学显微镜和扫描电镜下观察其培养1～9 d的形态学变化,流式细胞术检测其表面标志物CD1和主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表达情况.另收集培养后7 d的imDC,设阴性对照组、TPx组、排泄分泌抗原(ESA)组、LPS阳性对照组,分别加入 RPMI 1640 培养基、TPx(50μg/ml)、ESA(50μg/ml)、LPS(100 ng/ml)刺激 48 h后,流式细胞术检测DC表面标志物MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达情况;ELISA检测DC细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、1L-10、IL-12的分泌水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 光学显微镜下可见,培养第1天,imDC呈卵圆形,形态单一;随着培养时间延长,DC体积逐渐增大,出现伪足和刺突等,并从卵圆形变为不规则状.扫描电镜下可见,与imDC相比,mDC形态不规则,大致呈长梭形,从胞体辐射出众多长短不一的突起,呈树枝状分布,为典型的树突状结构.流式细胞术检测结果显示,imDC中表达CD1、MHC-Ⅱ的DC占比分别为(0.113±0.005)％、(0.430+0.016)％,低于 mDC 的(21.400±0.327)％、(21.333±0.450)％(t=130.341、92.906,均P＜0.05).TPx 组表达 MHC-Ⅱ、CD80、CD86 的 DC 占比分别 为(15.300±0.245)％、(22.900±0.374)％、(13.033±0.249)％,均低于 LPS 阳性对照组的(19.000±0.374)％、(31.600±0.082)％、(21.300± 0.245)％(t=11.53、46.32、43.84,均P＜0.05)和 ESA 组的(18.365±0.618)％、(40.400±0.356)％、(30.300±0.283)％](t=9.55、93.17、91.57,均P＜0.05);TPx 组表达 MHC-Ⅱ 的 DC 占比高于阴性对照组的(12.133±0.492)％(t=9.87,P＜0.05).ELISA检测结果显示,培养上清中,TPx组DC分泌IL-6水平为 15.682±0.660,低于阴性对照组的 21.041±0.901(t=6.51,P＜0.05);分泌 TNF-α、IL-6、IL-10 和 IL-12水平均低于 LPS 阳性对照组的 169.037±7.823、42.118±1.932、34.730±1.772、52.504±2.431(t=36.79、32.09、13.09、35.05,均P＜0.05);分泌 IL-12 水平低于 ESA 组的 23.854±1.020(t=6.93,P＜0.05).结论 TPx通过诱导DC表面MHC-Ⅱ高表达、CD80和CD86低表达,以及降低IL-6的分泌水平来介导免疫耐受.

[目的]探讨四种不同饮用水对小鼠抗氧化功能的影响.[方法]取80只清洁级ICR小鼠按体重随机分为纯水组、矿泉仿生水组、自来水组、过滤水组,每组20只,雌雄各半,以对应受试水作为唯一水源喂养90d.测定水质参数,包括pH值、溶解性总固体(total dissolved solids,TDS)、氧化还原电位(oxidation-reduction potential,ORP)、电导率(electrical conductivity,EC)以及钙、镁、锌、铜、锰、硒、硝酸根、硫酸根离子.测定受试水体中1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率、羟自由基抑制能力及抗超氧阴离子能力.实验期结束后取小鼠肝、肾组织测定其总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、羟自由基抑制能力、抗超氧阴离子能力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、抗氧化物谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)的活性.[结果]纯水、矿泉仿生水、自来水、过滤水的羟自由基抑制能力分别为(-11.22±3.78)、(-12.37±1.82)、(-16.81±2.88)、(48.33±2.28)U/mL,过滤水的羟自由基抑制能力大于其他饮用水类型(P＜0.05).小鼠肝组织中,自来水组T-AOC[(4.69±0.49)U/mg(以1mg蛋白计,余同)]高于纯水组[(3.06±0.30) U/mg],过滤水组GSH-PX活性[(344.40±14.12)U/mg]高于纯水组[(261.72±21.59)U/mg]、矿泉仿生水组[(291.73±10.54)U/mg],自来水组GST活性[(1047.56±56.18)U/mg]高于纯水组[(776.18±64.97)U/mg]、矿泉仿生水组[(810.40土50.41)U/mg],差异有统计学意义(P＜0.05);肾组织中,自来水组SOD活性[(310.24±7.95)U/mg]高于纯水组[(274.98±7.80)U/mg],过滤水组GSH-PX活性[(308.54±13.29)U/mg]高于纯水组[(252.67±11.30) U/mg],自来水组GST活性[(701.63±28.93) U/mg]高于矿泉仿生水组[(555.63±40.13)U/mg],差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]四种饮用水对小鼠抗氧化功能的影响不同,过滤水及自来水更可能提高小鼠体内相关抗氧化酶的活性而降低氧化损伤,而纯水、矿泉仿生水则未表现出有利于小鼠抗氧化功能的作用.

目的 了解法舒地尔联合丹参治疗对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)患者应激状态的影响.方法 以2014年1月至2016年12月诊治的ASO患者160例为研究对象,患者随机分为试验组和对照组,每组80例.选取同期体检的正常者50例作为正常对照组.对照组给予丹参注射液20 ml加入5%葡萄糖注射液500 ml,静脉滴注,1次/d,给药2周;试验组在使用丹参注射液的基础上给予法舒地尔30 mg/次,加入0.9%氯化钠溶液100 ml,静脉滴注, 8 h/次,给药2周.2组患者其他治疗措施无差异.记录ASO患者的症状改善情况及药物相关不良反应.检测ASO患者及正常对照组的氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、硫氧还蛋白(TRX)、髓过氧化物酶(MPO)活性及炎性因子(IL-8、IL-6、CRP等)的水平;并检测试验组和治疗对照组ASO患者治疗前后氧化应激指标及炎性因子的变化情况.结果 试验组和治疗对照组患者均顺利完成治疗,试验组在提高临床疗效、改善症状方面优于治疗对照组(P<0.05);试验组和治疗对照组的不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05).ASO患者的部分氧化应激指标及炎性因子与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05).氧化应激指标及炎性因子在治疗后均比治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);试验组改善比治疗对照组改善更为明显(P<0.05).结论 ASO患者存在明显的应激状态.法舒地尔联合丹参可有效减轻机体的应激,对ASO治疗有较好的效果.

目的:探讨前列腺癌患者组织中核糖体蛋白L6(RPL6)表达,分析其对肿瘤恶性程度的评估作用.方法:收集2013年12月-2015年12月在本院接受治疗的前列腺疾病患者117例,根据病理结果分为前列腺炎组63例、前列腺癌组54例;另取同期进行健康体检的健康者80例作为正常对照组.采用Western-blot法检测三组研究对象的前列腺组织RPL6表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清肿瘤标志物含量,采用RT-PCR法检测前列腺组织增殖基因、侵袭基因mRNA表达,采用Pearson检验分析RPL6表达量与肿瘤恶性程度的相关关系.结果:前列腺癌组患者的前列腺组织RPL6表达量高于前列腺炎组及正常对照组(P＜0.05);前列腺癌组患者的血清前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺特异性酸性磷酶(PSAP)、尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、硫氧还蛋白(TRX)含量高于前列腺炎组及正常对照组(P＜0.05);前列腺癌组患者的前列腺组织增殖基因URG11、PTENmRNA表达量高于前列腺炎组及正常对照组,PRDM5 mRNA表达量低于前列腺炎组及正常对照组,侵袭基因IgGHG1、TMPRSS2-ER、PIK3C2BmRNA表达量高于前列腺炎组及正常对照组(P＜0.05).前列腺癌患者的组织RPL6表达量与肿瘤标志物含量、增殖及侵袭基因活性均呈直接相关关系(P＜0.05).结论:高表达的RPL6是前列腺癌早期诊断的可靠指标,且与肿瘤恶性程度直接相关,有望成为前列腺癌辅助诊断及预后评估的重要手段.

硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein,Txnip)是一种氧化还原调节蛋白质,与硫氧还蛋白结合并抑制其活性,调节细胞氧化还原状态,影响细胞多种生理过程,然而其在猪脂肪细胞分化中的作用尚不明确.本文设计合成3对靶向猪Txnip基因的shRNA寡核苷酸,分别连接于重组慢病毒载体pGLV3/Ht/GFP+Puro构建siRNA表达质粒.测序验证后,与包装质粒共转染293T细胞,获得滴度1×108 pfu/mL的慢病毒干扰质粒.以MOI值100转染原代培养猪前体脂肪细胞,转染率均达80％以上,其中Txnip-shRNA-2转染细胞Txnip基因沉默率达75％.转染Txnip-shRNA-2的猪前体脂肪细胞用成脂分化培养液诱导后,每隔1d检测细胞成脂分化及相关基因表达.结果 发现,其分化比阴性对照质粒转染或未转染细胞显著增强(P＜0.05),PPARγ和FASmRNA表达水平显著提高(P＜0.05).本文构建siRNA慢病毒表达质粒能有效干扰猪Txnip基因表达,Txnip表达沉默可通过上调PPARγ表达促进猪前体脂肪细胞分化.本研究提示,Txnip可能是猪脂肪细胞分化的抑制因子.