目的:探讨异鼠李素对急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型，将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、法舒地尔组（30 mg/kg）及异鼠李素低、中、高剂量（25、50、100 mg/kg）组，每组各5只，灌胃给药，1次/d，连续处理14 d。采用心脏彩超仪检测心脏功能指标左心室收缩末期内径（LVESd）、左心室舒张末期内径（LVEDd）和左室短轴缩短分数（FS），TTC染色法检测心肌梗死面积，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测大鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、白细胞介素（IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数，含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）活性检测试剂盒检测心肌组织中Caspase-3活性，Western Blot检测心肌组织中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白的表达。结果:与假手术组相比，模型组FS、SOD含量和Bcl-2蛋白的表达水平均明显降低（均 P<0.05），且LVEDd、LVESd、心肌梗死面积、MDA水平、IL-6水平、TNF-α水平、IL-1β水平、细胞凋亡指数、Caspase-3活性和Bax蛋白的表达水平均明显升高（均 P<0.05）；与模型组相比，低剂量异鼠李素处理后，上述指标比较差异均无统计学意义（均 P>0.05），但给予法舒地尔和中、高剂量异鼠李素处理后上述改变均明显得到逆转（均 P<0.05）。 结论:异鼠李素可通过减轻心肌细胞氧化应激和炎症损伤、抑制心肌细胞凋亡改善心功能保护AMI大鼠心肌损伤。

目的:探讨轴突生长抑制因子(Nogo)-少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(Omgp)/Ras同源基因(Rho)-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Rock)信号通路在一氧化碳(CO)中毒急性脑损伤中的作用，以及Rock抑制剂盐酸法舒地尔对其治疗的可行性。方法:将135只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、CO中毒组和盐酸法舒地尔组，每组45只。后2组大鼠采用高压氧舱吸入法建立急性重症CO中毒模型。各组大鼠均接受高压氧治疗2周，其中盐酸法舒地尔组大鼠同时给予腹腔注射盐酸法舒地尔[15 mg/(kg·d)，1次/d，共2周]，CO中毒组和正常对照组大鼠给予相同体积的生理盐水注射。于造模后1周时应用透射电镜观察各组大鼠海马组织超微结构的改变，于造模后1 d、1周、1个月、2个月时采用免疫组化染色或免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock阳性细胞染色强度，采用Western blotting检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock蛋白的表达水平。结果:CO中毒组大鼠海马组织超微结构及血脑屏障损伤明显，以细胞核、线粒体及突触结构改变显著，而盐酸法舒地尔治疗能有效地维持海马组织超微结构及功能的完整性，减轻脑水肿。造模后1 d、1周、1个月、2个月时，CO中毒组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显高于同一时间点的正常对照组，盐酸法舒地尔组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显低于同一时间点的CO中毒组，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:Nogo-OMgp/Rho-Rock信号通路相关分子的激活与CO中毒急性脑损伤密切相关，而盐酸法舒地尔能有效下调Nogo、OMgp和Rock蛋白的表达水平，从而明显减轻CO中毒后脑损伤程度。

目的:探讨法舒地尔通过Rho/ROCK信号通路调控转化生长因子TGF-β1(TGF-β1)诱导的尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成的机制。方法:体外分离培养人尿道瘢痕组织来源成纤维细胞，将其分为对照组、TGF-β1诱导模型组及法舒地尔组；采用CCK-8测定各组细胞的增殖情况，采用ELISA法测定细胞分泌Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)及纤维结合素蛋白(FN)的表达情况，采用Western blot法检测Rho相关蛋白激酶1、2(ROCK-1、ROCK-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。再用梯度浓度法舒地尔处理TGF-β1诱导的尿道瘢痕成纤维细胞模型，采用同样方法检测评估尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成情况。结果:TGF-β1诱导的细胞培养液随着TGF-β1浓度增加作用时间延长，其增殖活性增高，且5和10 ng/mL TGF-β1诱导的细胞增殖率均显著高于0 ng/mL(均 P<0.01)。Col Ⅲ、FN含量随TGF-β1浓度和作用时间的增加而增高，与浓度、时间呈相关性(均 P<0.01)。12.5、25.0、50.0 μmol /L法舒地尔组的活细胞增殖减少。各组细胞的Col Ⅲ、FN含量随法舒地尔的浓度增加而降低，与浓度、时间有相关性(均 P<0.01)。随着不同浓度法舒地尔梯度干预后，细胞中ROCK-1、ROCK-2、α-SMA表达逐步降低(均 P<0.01)。 结论:TGF-β1可体外诱导人尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质过度合成；法舒地尔可通过下调ROCK-1、ROCK-2、α-SMA的表达水平，从而抑制尿道瘢痕成纤维细胞的表型转化，降低细胞外基质Col Ⅲ及FN的分泌。

目的:探讨过表达破骨细胞刺激性转膜蛋白（osteoclast stimulatory transmembrane protein，OC-STAMP）对上皮-间质转化的作用及机制。方法:于2021年4月，将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞分为过表达对照组（NC组）、 Ocstamp过表达组（over- Ocstamp组）、法舒地尔（Fasudil）干预组（over- Ocstamp+Fasudil组）、沉默对照组（si-NC组）、 Ocstamp沉默组（si- Ocstamp组）。采用蛋白免疫印迹（Western blotting）法、免疫细胞化学染色法检测OC-STAMP、上皮标志蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）、间质标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、Ras基因家族成员A（Ras homolog gene family member A，RhoA）、Rho GDP解离抑制因子α（Rho GDP dissociation inhibitor α，Rho GDIα）、Rho相关蛋白激酶（Rho-associated protein kinase，ROCK）、磷酸化肌球蛋白磷酸酶（phosphate myosin phosphatase，p-MYPT）蛋白表达，采用鬼笔环肽法检测细胞骨架肌动蛋白（filamentous actin，f-actin）的变化。采用 t检验比较两组间各蛋白的相对表达量。 结果:Western blotting及免疫细胞化学染色法结果显示，与NC组比较，over- Ocstamp组E-cad蛋白表达下调，α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达增加，F-actin表达增强，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与si-NC组比较，si- Ocstamp组E-cad和α-SMA蛋白表达差异均无统计学意义（ P>0.05）；与over- Ocstamp组比较，over- Ocstamp+Fasudil组E-cad蛋白表达上调，α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达下降，F-actin表达减弱，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞过表达OC-STAMP，可能通过激活Rho GDIα/RhoA/ROCK信号通路，诱导肌动蛋白细胞骨架重塑，进而促进上皮-间质转化。

目的:评估应用法舒地尔防治老年患者蛛网膜下腔出血所致血管痉挛的效果。方法:纳入2015年1月至2018年5月在河南省人民医院诊治的蛛网膜下腔出血老年患者100例为研究对象，按照随机数字表将患者随机分为法舒地尔组(50例)和尼莫地平组(50例)，分别给予Rho激酶抑制剂法舒地尔治疗和钙离子通道抑制剂尼莫地平治疗，评估两组患者脑血管痉挛和新增脑梗死病灶情况、日常生活能力、临床预后评分、症状性脑血管痉挛的发生率及治疗期间的不良反应。结果:治疗后法舒地尔组新发脑血管痉挛的发生率和新发脑梗死病灶的发生率分别为2.04%(1/49)、6.12%(3/49)，均低于尼莫地平组12.50%(6/48)、20.83%(10/48)( χ2＝6.134、6.794， P＝0.047、0.033)；且法舒地尔组患者日常生活能力评分(16.09±1.06)分，优于尼莫地平组(22.91±1.66)分，差异有统计学意义( t＝7.721， P＝0.026)。法舒地尔组不良反应发生率(4.08%、2/49)低于尼莫地平组(16.7%、8/48)，差异具有统计学意义( χ2＝6.362， P＝0.040)。法舒地尔组患者预后佳的比例83.7%(41/49)，略高于尼莫地平组75.0%(36/48)，但差异无统计学意义( χ2＝2.475， P＝0.295)。 结论:Rho激酶抑制剂法舒地尔能够有效预防和改善蛛网膜下腔出血引起的脑血管痉挛，有利于提高老年蛛网膜下腔出血患者的临床预后、改善患者生活质量。

目的:探讨法舒地尔对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用。方法:4~6周龄雄性C57BL小鼠45只随机（随机数字法）分为对照组（Control组）、脂多糖组（LPS组）、法舒地尔干预组（FAS+LPS组），每组15只。LPS溶液腹腔注射及气道内滴注建立脓毒症小鼠急性肺损伤模型。法舒地尔干预组分别于腹腔注射LPS前30 min和气道滴注LPS后1 h，腹腔内注射盐酸法舒地尔溶液（10 mg/kg）。造模后4 h处死小鼠取肺组织。HE染色观察病理形态学变化；测定肺组织湿重/干重比（W/D）；TBA比色法测定MDA含量及MPO活性；IHC测定caspase-3表达水平；Western Blot法检测肺组织中RhoA、ROCK1、eNOS及p-eNOS的蛋白表达水平。结果:FAS预处理后肺组织中炎性细胞浸润和红细胞渗出显著减少，间质水肿及肺泡结构破坏显著减轻。与LPS组相比，FAS+LPS组的W/D值、MDA含量及MPO活性较LPS组均显著降低( P<0.01)。FAS+LPS组的Caspase-3表达较LPS组显著下降( P<0.01)。与Control组比，LPS组的RhoA、ROCK1的蛋白表达水平增高( P<0.05)，p-eNOS的蛋白表达水平下降( P<0.05)；与LPS组比，FAS+LPS组的RhoA和ROCK1的蛋白表达下调( P<0.05)，但p-eNOS的蛋白表达上调( P<0.05)；三组的eNOS总蛋白表达水平差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:法舒地尔可减轻脓毒症小鼠肺组织炎性细胞浸润程度，下调肺组织细胞凋亡，抑制RhoA/ROCK1信号通路活性并促进eNOS的磷酸化表达。

目的:探讨法舒地尔对主动脉平滑肌细胞（VSMC）自噬及凋亡的影响以及与磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的关系。方法:用10%胎牛血清+DMEM培养液培养SD大鼠VSMC，并利用免疫细胞化学染色法检测传代细胞α平滑肌肌动蛋白（a-SMA）的表达情况鉴定VSMC。采用血小板源性生长因子（PDGF）诱导VSMC，并将PDGF诱导的VSMC分为空白组、对照组、法舒地尔组（30 μmol/L法舒地尔）、法舒地尔+LY294002组（30 μmol/L法舒地尔+25 μmol/L LY294002）。采用MTT法检测各组细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞凋亡率和凋亡周期，GFP-mRFP-LC3双荧光检测细胞自噬水平。采用蛋白免疫印迹法（WB）检测各组细胞Bax、Bcl-2、LC3、Beclin-1及PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的蛋白表达情况并比较分析。结果:镜下观察培养细胞呈长梭形、放射性生长，出现典型的"峰-谷"样结构，a-SMA阳性表达率为99%，确认所培养细胞为高纯度主动脉VSMC。法舒地尔组细胞增殖能力低于对照组（ P<0.05），法舒地尔+LY294002组高于法舒地尔组（ P<0.05）。与对照组比较，法舒地尔组凋亡率及G 0-G 1期细胞比例升高（均 P<0.05）；与法舒地尔组相比，法舒地尔+LY294002组凋亡率及G 0-G 1期细胞比例回降（均 P<0.05）。与对照组比较，法舒地尔组自噬增强（ P<0.05），而法舒地尔+LY294002组的自噬则较法舒地尔组有所减弱（ P<0.05）。与对照组比较，Bax、Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin1水平以及PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平升高（均 P<0.05）；法舒地尔+LY294002组Bax、Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin 1水平以及PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平较法舒地尔组有所回降（均 P<0.05）。 结论:法舒地尔通过激活PI3K-AKT-mTOR信号通路抑制VSMC增殖，促进自噬及凋亡，改善血管功能。

目的:探究miR-451通过调控Rho/ROCK1信号通路对乳腺癌细胞糖酵解及凋亡的影响。方法:将乳腺癌MCF7细胞分为乳腺癌细胞（BC）组、乳腺癌细胞+miR-451-NC（MN）组、乳腺癌细胞+miR-451 inhibitor（MI）组、乳腺癌细胞+miR-451 mimic（MM）组、乳腺癌细胞+溶血磷脂酸（BL）组、乳腺癌细胞+法舒地尔（BF）组、乳腺癌细胞+miR-451 mimic+法舒地尔（MF）组。用葡萄糖摄取检测试剂盒和乳酸检测试剂盒检测细胞糖酵解，DAPI染色法检测细胞凋亡，蛋白质印迹法检测Rho/ROCK1通路蛋白表达，双荧光素酶报告实验证实miR-451和Rho/ROCK1的相互作用。结果:BC组、MN组、MI组、MM组细胞葡萄糖摄取量分别为（14.22±2.36）×10 5 mg/h、（14.20±2.37）×10 5 mg/h、（21.55±2.43）×10 5 mg/h、（6.19±1.34）×10 5 mg/h（ F=5.30， P<0.001），乳酸生成量分别为（1.52±0.21）×10 5 μg/h、（1.53±0.22）×10 5 μg/h、（2.05±0.32）×10 5 μg/h、（0.54±0.12）×10 5 μg/h（ F=3.28， P=0.008），凋亡率分别为（10.13±1.35）%、（10.16±1.37）%、（5.36±1.24）%、（28.47±2.56）%（ F=6.36， P<0.001），Rho蛋白相对表达量分别为2.31±0.46、2.32±0.41、2.95±0.35、1.05±0.25（ F=2.86， P=0.017），ROCK1蛋白相对表达量分别为2.51±0.41、2.52±0.42、3.05±0.33、1.15±0.13（ F=2.43， P=0.035），MN组和MI组、MN组和MM组、MI组和MM组间差异均有统计学意义（均 P<0.05）。BC组、BL组、BF组细胞葡萄糖摄取量分别为（14.22±2.36）×10 5 mg/h、（21.54±2.40）×10 5 mg/h、（6.20±1.35）×10 5 mg/h（ F=5.33， P<0.001），乳酸生成量分别为（1.52±0.21）×10 5 μg/h、（2.01±0.30）×10 5 μg/h、（0.55±0.12）×10 5 μg/h（ F=3.28， P=0.008），凋亡率分别为（10.13±1.35）%、（5.34±1.22）%、（28.44±2.54）%（ F=6.45， P<0.001），Rho蛋白相对表达量分别为2.31±0.46、2.94±0.45、1.01±0.24（ F=2.40， P=0.037），ROCK1蛋白相对表达量分别为2.51±0.41、3.08±0.42、1.13±0.12（ F=2.38， P=0.039），3组间两两比较差异均有统计学意义（均 P<0.05）。MF组细胞葡萄糖摄取量为（3.21±0.89）×10 5 mg/h，乳酸生成量为（0.33±0.04）×10 5 μg/h，凋亡率为（38.01±2.87）%，Rho蛋白相对表达量为0.55±0.14，ROCK1蛋白相对表达量为0.51±0.10，MM组、BF组、MF组3组间差异均有统计学意义（ F=4.53， P=0.001； F=4.26， P=0.002； F=6.12， P<0.001； F=4.06， P=0.002； F=9.72， P<0.001），MF组与BF组间差异均有统计学意义（均 P<0.05）。双荧光素酶报告结果显示，转染miR-451后可显著降低ROCK1-3′-UTR-WT的荧光素酶活性（0.59±0.03比1.01±0.05， t=17.64， P<0.001），但对突变基因无显著影响（1.01±0.07比1.02±0.04， t=0.30， P=0.767）。 结论:过表达miR-451可显著抑制乳腺癌细胞糖酵解，并促进乳腺癌细胞凋亡，其机制可能与抑制Rho/ROCK1信号通路有关。

目的:探讨盐酸法舒地尔(fasudil hydrochloride，FH)对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)大鼠早期脑损伤海马区Rho激酶2(Rho-associated kinase 2，ROCK2)蛋白及铁死亡的影响。方法:36只SPF级Sprague-Dawley大鼠用随机数字表法分为3组：假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)、SAH+ROCK2蛋白抑制剂FH组(FH组)，每组12只。颈内动脉刺破法建立SAH大鼠模型，FH组大鼠于造模成功后30 min腹腔注射FH(15 mg/kg)，Sham组与SAH组注射等体积0.9%氯化钠溶液。干预后24 h，采用穿梭箱实验观察大鼠学习记忆能力，比色法检测大鼠海马区脑组织中Fe 2+含量，免疫组化及Western blot检测海马组织中ROCK2蛋白及铁死亡相关蛋白长链脂酰辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4，ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPX4)的表达水平。采用SPSS 20.0软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。 结果:(1)穿梭箱实验中3组大鼠的躲避反应次数及躲避反应时间均差异有统计学意义( F＝20.348，22.316，均 P<0.05)，SAH组大鼠躲避反应次数少于Sham组[(17.92±2.94)次，(27.13±3.48)次， P<0.05]，躲避反应时间长于Sham组[(9.15±2.87)s，(3.68±1.09)s， P<0.05]，而FH组反应次数[(21.63±4.11)次]多于SAH组，躲避反应时间[(6.08±1.76)s]短于SAH组(均 P<0.05)。(2)比色法检测结果显示，3组大鼠海马组织Fe 2+含量差异有统计学意义( F＝7.965， P<0.05)，SAH组Fe 2+含量高于Sham组[(0.091±0.032)nmol/mg，( 0.038±0.024)nmol/mg， P<0.05]，FH组Fe 2+含量[(0.065±0.021)nmol/mg]低于SAH组( P<0.05)。(3)免疫组化中3组大鼠海马组织ROCK2、ACSL4、GPX4阳性细胞数差异有统计学意义( F＝7.602，14.171，36.077，均 P<0.05)，SAH组ROCK2及ACSL4阳性细胞[(21.63±4.72)个，(55.13±19.41)个]显著高于Sham组[(11.63±3.62)个，(23.38±3.74)个] (均 P<0.05)，FH组ROCK2及ACSL4阳性细胞数[(15.88±6.64)个，(44.75±8.29)个]均低于SAH组(均 P<0.05)，而SAH组GPX4阳性细胞数[(25.38±6.30)个]显著低于Sham组[(60.25±10.36)个]( P<0.05)，FH组GPX4阳性细胞数[(45.13±7.51)个]高于SAH组( P<0.05)。(4) Western blot结果显示，3组大鼠海马组织ROCK2、ACSL4、GPX4蛋白表达水平均差异有统计学意义( F＝4.812，12.573，10.849，均 P<0.05)，SAH组ROCK2及ACSL4蛋白表达水平均显著高于Sham组(均 P<0.05)，FH组ROCK2及ACSL4蛋白表达水平均低于SAH组(均 P<0.05)，而SAH组GPX4蛋白表达水平显著低于Sham组( P<0.05)，FH组GPX4蛋白表达水平高于SAH组( P<0.05)。 结论:FH可抑制海马区的铁死亡，改善大鼠学习记忆能力，其机制可能与下调ROCK2蛋白有关。

目的:探讨高压氧联合法舒地尔治疗下肢动脉硬化闭塞症的临床疗效及其作用机制。方法:选取2018年5月至2021年5月临沂市中心医院血管外科收治的下肢动脉硬化闭塞症患者102例作为研究对象。采用随机数字表法将患者分为对照组和联合组，每组51例。对照组患者在常规对症治疗的基础上予以盐酸法舒地尔治疗，联合组在对照组治疗的基础上予以高压氧辅助治疗。采用血管超声及动脉硬化检测仪测量治疗前后患者血足背动脉血流量，计算耻-肱指数、踝-肱指数，并评估临床治疗效果。采用微量热沉法检测血清纤维蛋白原（FIB）水平，采用酶联免疫吸附法检测血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-8（IL-8）水平。采用免疫荧光法检测血清尿酸转运蛋白（UAT）表达水平；采用双抗夹心酶联免疫吸附法检测血清热休克蛋白27（HSP27）表达水平。结果:联合组患者治疗总有效率（92.16%）明显高于对照组（76.47%），差异有统计学意义（ χ2=4.744， P=0.029）。联合组患者治疗后足背动脉血流量、耻-肱指数、踝-肱指数及血清UAT水平均明显高于对照组，FIB、全血黏度、血浆黏度及血清hs-CRP、TNF-α、IL-8、HSP27水平均明显低于对照组（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:高压氧联合法舒地尔治疗能明显改善下肢动脉硬化闭塞症患者的血流动力学，减轻炎症反应，延缓下肢动脉硬化的进展，具有较好的临床应用价值。