目的 基于网络药理学整合体内实验对比四物汤中4种单味药(川芎Chuanxiong Rhizoma、白芍Paeoniae Radix Alba、当归 Angelicae Sinensis Radix、熟地黄 Rehmanniae Radix Praeparata)治疗胆汁淤积性肝损伤(cholestatic liver injury,CLI)的药效差异,并探讨各单味药的作用机制.方法 利用TCMSP数据库获取川芎、白芍、当归、熟地黄的主要活性成分及作用靶点,通过GeneCards数据库获取CLI靶点,使用Cyctoscape 3.10.1软件分析并构建"单味药-活性成分-作用靶点"网络,借助在线网站获取各单味药与CLI之间的交集靶点,并绘制韦恩图.将靶点基因导入DAVID数据库进行基因富集分析.构建胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)动物模型,给予各单味药水提物后,检测血清肝功能相关生化指标,并对肝组织进行病理染色对比药效作用.同时结合qRT-PCR检测CLI相关靶点的基因表达.结果 网络药理学结果显示,四物汤中川芎、白芍、当归、熟地黄与CLI之间均存在3个交集靶点[核受体亚家族3C组成员2(nuclear receptor subfamily 3 group C member 2,Nr3c2)、类视黄醇 X 受体(retinoid X receptor alpha,Rxra)、前列腺素内过氧化物合成酶 2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,Ptgs2)].通过体内验证实验表明白芍、川芎、当归、熟地黄水提物均可显著改善CLI以及相关的肝纤维化情况,且均能下调上述3个共同靶点表达(P＜0.05、0.01、0.001).此外,白芍、川芎的体内抗CLI疗效优于当归、熟地黄提取物.结果 还显示白芍与CLI有18个、川芎与CLI有4个与其他单味药不同的独立交集靶点,而当归、熟地黄与CLI之间不存在独立的交集靶点.进一步生信分析发现,白芍作用靶点基因富集于血管生成、肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)信号通路;川芎作用靶点富集于血管内皮、血管生成、血管生成因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路.进一步验证结果显示白芍通过下调肝脏中血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule 1,Vcaml)、Tnf、有丝分裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase8,Mapk8)、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT serine/threonine kinase 1,Aktl)表达改善CLI,川芎通过下调肝脏激酶插入结构域受体(kinase insert domain receptor,Kdr)、Mapk14表达改善CLI.结论 四物汤中川芎、白芍、当归、熟地黄均能不同程度地改善胆汁淤积引起的肝损伤及纤维化,它们通过靶向Nr3c2、Rxra、Ptgs2共同改善CLI.白芍、川芎改善CLI疗效优于当归、熟地黄,前者可基于TNF信号通路而后者则是通过调控VEGF信号通路分别特异性改善CLI.

目的:探讨类视黄醇X受体(RXR)在缺氧/复氧(HR)诱导的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECII)氧化应激反应中的调控作用.方法:随机将细胞实验分成5组:对照(C)组、HR组、HR+溶剂二甲基亚砜(DMSO)组(HD组)、HR+RXR激动剂9-顺式维甲酸(9-RA)组(RA组)和HR+RXR抑制剂HX531组(HX组).采用CCK-8法检测各组细胞活力;免疫荧光法进行AECII特异性指标表面活性物质蛋白A(SP-A)的鉴定和RXRα表达的观察;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;透射电镜观察细胞内超微结构的变化;Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白水平;RT-PCR检测Nrf2的mRNA表达水平.结果:与C组相比,HR、HD、RA和HX组细胞活力均显著降低(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05),MDA含量显著增高(P<0.05),Nrf2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),RXRα的免疫荧光表达显著增加(P<0.01);与HR和HX组相比,RA组细胞活力增加(P<0.05),SOD活性上升(P<0.05),MDA含量下降(P<0.05),Nrf2的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01),RXRα的免疫荧光表达显著增加(P<0.01).结论:HR可加剧大鼠AECII的氧化应激反应,RXR激动剂干预后可通过抑制氧化应激反应减轻HR引起的大鼠AECII损伤.

基于网络药理学研究杜仲和菟丝子治疗骨质疏松的作用机制。 方法:从 TCMSP、OMIM、Drugbank、GeneCards、PharmGkb、TTD 数据库中确定杜仲和菟丝子的潜在活性成分、作用靶点和疾病的差异基因,取两者交集,利用Cytoscape 3. 9. 0 软件构建“中药-活性成分-交集靶点-疾病”调控网络图,string数据构建杜仲、菟丝子和骨质疏松的PPI网络;通过R包进行GO和KEGG功能富集分析。结果:经TCMSP数据库确定杜仲、菟丝子2 个药物共有39 个化合成分,211 个药物靶标;经OMIM、Drugbank、GeneCards、PharmGkb、TTD 数据库分析确定杜仲和菟丝子治疗骨质疏松共同靶点83个,利用string数据构建杜仲、菟丝子和骨质疏松的靶点。GO分析表明生物过程( BP)涉及对药物的反应、对氧化应激的反应、细胞对化学压力等,细胞成分( CC)涉及膜筏、膜微域、膜区等区域,分子功能( MF)涉及核受体活性、配体激活的转录因子活性、DNA结合的转录因子结合等生物学过程。KEGG结果表明,杜仲、菟丝子治疗骨质疏松的信号通路包括药物的反应、氧化应激反应、细胞对化学压力的反应、活性氧代谢过程等通路。结论:杜仲和菟丝子改善骨质疏松的作用机制可能是通过影响蛋白激酶(Akt1)、原癌基因 c-FOS(FOS)、雌激素受体α基因(ESR1)、钙黏蛋白相关蛋白(CT-NNB1)、肿瘤抑制蛋白(TP53)、促分裂原活化蛋白激酶1(mapk1)、类视黄醇X受体(RXRA)、表皮生长因子受体(EGFR)、核受体辅激活蛋白1基因(NCOA1)、白介素10(IL10)等基因的表达进而调控氧化应激反应、荷尔蒙反应、雌性激素反应等信号传导途径实现的。

库欣病发生、发展的分子机制包括受体类、配体类、相关的转录因子、基因突变、蛋白修饰等,涵盖了促肾上腺皮质激素(ACTH)的产生及分泌的过程.泛素特异肽酶8及主要的核受体包括糖皮质激素受体、睾丸孤核受体4、孤核受体Nur77、视黄酸受体与类视黄醇X受体、肝X受体、过氧化物酶体增殖物活化受体,在库欣病发病机制中具有一定作用,对其深入研究,将为库欣病的早期诊断及潜在的靶向治疗提供思路.

人体内的脂肪组织可分为白色脂肪组织和棕色脂肪组织,分别负责能量的储存和消耗.其中,白色脂肪有望转化为一种类似棕色脂肪的"米色脂肪",从而消耗更多能量,这一过程被称之为"白色脂肪棕色化".白色脂肪棕色化的过程受许多机制的调控和影响,视黄酸也参与其中.视黄酸通过与过氧化物酶体增殖物激活受体及视黄酸相关受体的结合作用增加解偶联蛋白的表达,同时也能通过促进血管生成影响后代棕色脂肪的生成,从而促进白色脂肪棕色化.未来,应深入研究视黄酸对白色脂肪棕色化作用的机制,以为肥胖及相关代谢性疾病的治疗提供新方法.

肝脏X受体(liver X receptors,LXR)是一种配体激活的核转录因子,属于核受体超家族成员.LXR不但参与脂类和胆固醇代谢的调节,还影响了多种炎症反应过程,因此其在脂类代谢异常和炎症相关疾病中的研究较多.近年发现,LXR在眼部疾病的发生发展中也发挥了重要作用.本文拟就LXR的结构、特征、参与眼部疾病的作用机制以及临床治疗前景进行综述.

从糖脂代谢调控蛋白类视黄醇X受体(RXR)/糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)对心力衰竭的分子调控机制和相互作用方面进行综述,提出中药治疗心力衰竭调控的干预环节和潜在的有效药物.

目的:研究miR-21、PPARα和RXRα在帕金森大鼠中的表达,以探讨它们在PD发生发展中的作用.方法:40只雄性SD大鼠,随机分为实验组和对照组,在大鼠左侧黑质注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)溶液,损伤左侧黑质,建立PD大鼠模型,之后检测miR-21、PPARα和RXRα的RNA表达情况.结果:实验组PD大鼠注射侧黑质miR-21的表达比未注射侧升高了4.32倍;PPARα的表达在纹状体和黑质均低于未注射侧;RXRα的表达无明显变化.结论:PD大鼠miR-21高表达,PPARα表达下降,而RXRα的表达无变化.

目的 初探补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育的潜在分子机制.方法 结合生物信息学方法建立补肾阳中药的成分库、表征美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)批准用于治疗促性腺激素缺乏男性不育的药物靶标库;再应用通路分析软件(ingenuity pathway analysis,IPA)将成分库投影靶标库,筛选出可作用于靶标及通路的成分,预测分子成分功能,构建"成分-靶标"分子网络.结果 分别建立了补肾阳中药成分库(242个化合物)与FDA批准药物靶标库(565个靶标),成分库与靶标库投影后发现补肾阳中药成分库中的30个化学成分可直接激活或抑制药物靶标库中的60个靶标,参与缺氧诱导因子1-α(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF1α)信号途径,血小板反应蛋白1(thrombospondin 1,TSP1)抑制血管生成途径,芳基烃受体信号途径,孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)/类视黄醇X受体(retinoid X receptor,RXR)激活等18条通路的直接调控.结论 本研究构建了补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育的"成分-靶标"分子网络,分析其治疗效应机制,为补肾阳中药治疗促性腺激素缺乏型男性不育奠定理论基础和实验依据,具有一定的科学意义.

目的:观察类视黄醇X受体α(RXRα)激动剂贝萨罗汀(Bex)对载脂蛋白E缺陷(ApoE?/?)小鼠动脉粥样硬化及转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,并探讨Bex抑制动脉粥样硬化的机制.方法:选取10只C57BL/6小鼠为正常对照组,选取30只ApoE?/?小鼠随机分为3组:ApoE?/?组、ApoE?/?+Bex5(5 mg·kg?1·d?1 Bex)组及ApoE?/?+Bex10(10 mg·kg?1·d?1 Bex)组.Bex采用灌胃法给药,每天1次,连续8周.氧化酶法检测血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平;选择遮蔽法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;Western blot法测TGF-β1和p-Smad2/Smad2水平;HE染色观察胸主动脉内膜硬化斑块形成情况.组织贴块法培养VSMCs,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测VSMCs增殖活性.结果:ApoE?/?组小鼠血清TG、TC和LDL-C水平,以及胸主动脉TGF-β1和p-Smad2水平显著高于C57BL/6组(P<0.01);Bex呈剂量依赖性增加ApoE?/?小鼠胸主动脉组织p-Smad2蛋白水平,抑制内膜斑块形成及中膜增生,显著减小斑块面积(P<0.01).ApoE?/?组、ApoE?/?+Bex5组和ApoE?/?+Bex10组之间血清TG、TC、HDL-C和LDL-C水平,以及胸主动脉TGF-β1和Smad2水平均无显著差别(P>0.05).体外实验显示,TGF-β1(0.1～10μg/L)促进VSMCs增殖,但Bex呈浓度依赖性抑制TGF-β1(5μg/L)诱导的VSMCs增殖.Bex(10?7 mol/L)可增强TGF-β1(5μg/L)诱导的p-Smad2水平(P<0.01),却抑制TGF-β1(5μg/L)诱导的p-Smad2细胞核转位.结论:RXRα激动剂Bex抑制ApoE?/?小鼠动脉粥样硬化的形成,其机制可能与调控TGF-β1/p-Smad2通路从而抑制VSMCs增殖有关.