目的:探讨IL-6诱导人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）成骨样分化及钙化的跨膜信号转导机制。方法:体外培养HUASMC，分别给予IL-6、IL-6+可溶性IL-6受体（sIL-6R）、IL-6+sIL-6R+可溶性gp130（sgp130）刺激，设空白对照。茜素红及Von Kossa染色检测钙化水平，免疫印迹检测钙化相关分子组织非特异性碱性磷酸酶（TNAP）、骨桥蛋白（OPN）、骨形态发生蛋白（BMP-2）及Runt相关转录因子2（Runx2）表达，免疫荧光检测膜型IL-6R（mIL-6R）表达。计量资料组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD- t检验。 结果:IL-6+sIL-6R组钙化染色较其他组增多，IL-6+sIL-6R+sgp130组较IL-6组及空白组增多。蛋白印迹结果显示，干预12 h，TNAP蛋白表达量：空白组（0.44±0.08)、IL-6组（0.52±0.14）、IL-6+sIL-6R组（0.84±0.16）、IL-6+sIL-6R+sgp130组（0.55±0.10），各组差异具有统计学意义（ F=290.96， P<0.001）；干预72 h，OPN蛋白的表达量：空白组（0.61±0.84）、IL-6组（0.95±0.16）、IL-6+sIL-6R组（1.65±0.24）、IL-6+sIL-6R+sgp130组（0.99±0.10），各组差异具有统计学意义（ F=507.72， P<0.001）。干预12 h，BMP-2蛋白的表达量：空白组（(0.77±0.05）、IL-6组（1.69±0.16）、IL-6+sIL-6R组（2.81±0.26）、IL-6+sIL-6R+sgp130组（0.57±0.12），各组差异具有统计学意义（ F=959.09， P<0.001）；干预72 h，Runx2蛋白的表达量：空白组（0.57±0.03）、IL-6组（0.92±0.10）、IL-6+sIL-6R组（1.31±0.13）、IL-6+sIL-6R+sgp130组（0.66±0.06），差异具有统计学意义（ F=1 141.27， P<0.001）。IL-6+sIL-6R组中TNAP、OPN、BMP-2、Runx2的表达均高于其他组。免疫荧光结果显示HUASMC少量表达mIL-6R。 结论:IL-6可能主要通过sIL-6R介导的反式信号通路诱导HUASMC成骨样分化和钙化。

目的:探讨干燥综合征（SS）合并肝损伤的临床病理特征，以提高对该病的认识。方法:收集首都医科大学附属北京地坛医院2008年10月至2022年1月49例SS合并肝损伤患者，患者均行超声引导下肝脏穿刺活检，所有标本进行HE染色，观察其组织形态学特点并进行病理指标分级，采用免疫组织化学EnVision两步法行细胞角蛋白（CK）7、CK19、CD38、MUM1、CD10染色，并进行网状纤维、Masson染色、罗丹宁染色、普鲁士蓝染色、过碘酸-雪夫（PAS）及淀粉酶消化PAS等组织化学特殊染色。结果:患者男性3例，女性46例，年龄31~66岁。SS合并药物性肝损伤最多见（22例，44.9%），其后依次为自身免疫性肝病［13例，26.5%；包括原发性胆汁性胆管炎（PBC）8例，自身免疫性肝炎3例，原发性胆汁性胆管炎-自身免疫性肝炎（PBC-AIH）重叠综合征2例］，非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）9例（18.4%），其他病变5例（10.2%；包括3例肝脏非特异性炎症，1例肝淀粉样变，1例肝脏门静脉肝窦血管性疾病）。其中28例（57.1%）伴有较明显的小叶间胆管损伤，以SS合并PBC组及药物性肝损伤组为著；23例（46.9%）伴不同程度肝细胞脂肪变性。13例SS合并自身免疫性肝病组其肝组织ISHAK炎症评分、纤维化程度、胆管损伤程度、胆管改建程度、汇管区淋巴细胞浸润程度、浆细胞浸润程度、MUM1表达、CD38表达、血清碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、IgM、球蛋白升高比例、抗线粒体抗体（AMA）阳性比例、抗线粒体抗体M2亚型（AMA-M2）阳性比例、IgM阳性比例显著高于其他组（均 P<0.05）；SS合并药物性肝损伤组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、结合胆红素、SSA阳性比例显著高于其他组（均 P<0.05）；SS合并PBC组（ P=0.006）及NAFLD组（ P=0.011）血清总胆固醇水平显著高于其他组（ P<0.05）。 结论:SS合并肝损伤者病理表现多样，炎症病变以SS合并自身免疫性肝病最重，SS合并非酒精性脂肪性肝病及非特异性炎症最轻。综合分析患者肝组织病理改变及实验室检查有助于SS合并不同类型肝损伤的诊断。

目的:对1例围生期致死型(新生儿型)低磷酸酶症(HPP)患者及其父母进行临床分析及基因突变检测，以期能更好地认识该病。方法:对l例罕见的围生期致死型低磷酸酶症患者的临床表现、实验室及影像学检查结果进行总结。提取患儿及其亲属外周血基因组DNA，采用针对组织非特异性碱性磷酸酶(ALPL)基因调控区及编码区的特异性引物进行PCR扩增，直接对产物进行测序分析。结果:患儿血碱性磷酸酶水平显著降低，血钙增高；骨骼显示骨软骨发育障碍类疾病样改变。ALPL基因测序结果显示患儿为复合杂合突变，同时携带位于第5外显子及第10外显子上c.346G>A(p.A116T)和c.1171C>T(p.R391C)的错义突变。临床表现正常的父亲、母亲为杂合子，分别携带c.346G>A(p.A116T)和c.1171C>T(p.R391C)的错义突变。该家系符合常染色体隐性遗传。结论:围生期致死型HPP死亡率很高，骨骼发育异常、高血钙、血清低碱性磷酸酶在其鉴别诊断中非常重要。

低磷酸酶血症(HPP)是由编码组织非特异性碱性磷酸酶(TNSALP)的基因变异导致功能缺失引起的。HPP的症状、体征和并发症非常多变，包括骨骼低矿化、钙和磷酸盐代谢障碍、反复发生的骨折、疼痛、活动受限、牙齿过早脱落、生长发育迟缓和癫痫等。针对HPP有不同的治疗尝试，Asfotase alfa是一种骨靶向重组TNSALP，能够显著降低围生期和婴儿HPP患者的发病率和病死率，同时可改善生长发育、运动功能及生活质量。这种酶替代疗法耐受性良好，大多数不良反应为轻中度。现就近年来对该疾病的治疗新进展进行综述。

目的:对1例表现为骨骼和牙齿矿化不全、乳牙早脱、佝偻病、身材矮小女性患儿的 ALPL基因进行变异分析，明确其可能的遗传学病因。 方法:采集患儿及其正常表型亲代外周血样，提取基因组DNA，应用高通量测序技术进行变异检测，对疑似致病变异进行Sanger测序、家系分析和生物信息学分析。结果:测序结果显示患儿的 ALPL基因第10外显子存在c.1130C>T(p.Ala377Val)和第11外显子c.1300G>A(p.Val434Met)复合杂合变异，其中c.1130C>T(p.Ala377Val)遗传自父亲，为已报道的致病变异，c.1300G>A(p.Val434Met)遗传自母亲，尚未见文献报道，生物信息分析软件预测有害，美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南评级为可能致病(PM2+PM5+PP3+PP4)。 结论:ALPL基因第10外显子c.1130C>T(p.Ala377Val)和第11外显子c.1300G>A(p.Val434Met)复合杂合变异可能是患儿的致病原因，新变异的发现丰富了 ALPL基因变异谱。

目的:分析低碱性磷酸酶血症（HPP）患儿的临床特点、基因变异类型及随访资料。方法:回顾性总结分析2010年10月至2019年1月北京儿童医院内分泌遗传代谢中心收治的6例HPP患儿的临床资料，并对其中5例患儿及家系进行致病基因测序分析，总结其临床特点和基因变异类型及转归。结果:6例HPP患儿中男5例、女1例，年龄2月龄至6岁4月龄，血碱性磷酸酶均明显降低（2~49 U/L），婴儿型4例、儿童型与牙型各1例。婴儿型患儿均有纳差、体重增长缓慢及高钙血症，儿童型与牙型患儿均有牙齿脱落，儿童型患儿伴有跛行等运动功能改变。5例患儿及其中4个家系发现10个组织非特异性碱性磷酸酶基因变异，7个错义变异，1个插入变异，1个移码变异，1个缺失变异，其中3个为新发变异（p.Y28C、p.268，F>L、p.A176V）。4例婴儿型HPP患儿中3例死亡，1例好转后失访，儿童型和牙型HPP患儿经治疗后好转。结论:HPP各型之间的临床表现变异性大又相互重叠，儿童型及牙型预后较好，婴儿型预后较差，基因检测是明确诊断的主要方法。

目的:探讨CXorf67、H3K27me3在中枢神经系统生殖细胞肿瘤（GCT）中的表达情况及其在诊断和鉴别诊断中的价值。方法:选取复旦大学附属华山医院病理科中枢神经系统GCT病例370例，通过免疫组织化学（EnVision法）检测石蜡标本中CXorf67、H3K27me3及常用指标OCT4、胎盘碱性磷酸酶（PLAP）、CD117、D2-40、CD30在中枢神经系统GCT不同亚型的表达情况，采用列联表及受试者工作特征曲线（ROC曲线）下面积比较各指标灵敏度及特异度。结果:（1）男性282例，女性88例，年龄范围2~57岁，平均发病年龄19岁，中位年龄17岁；在具有生殖细胞瘤成分的GCT中，男性及鞍区发病患者比例更高（ P<0.05）。（2）CXorf67特异性表达于原始生殖细胞及生殖细胞瘤细胞核上，在其他非生殖细胞瘤性GCT中不表达；H3K27me3在生殖细胞瘤中缺失表达，在其他亚型瘤细胞及周围正常组织细胞核上阳性表达。（3）在283例具有生殖细胞瘤成分的GCT中，H3K27me3均缺失表达，CXorf67阳性表达率为90.5%（256/283）；二者具有显著负相关性（ r2=-0.831， P<0.01）；PLAP、OCT4、CD117、D2-40表达率依次为：81.2%（231/283）、89.4%（253/283）、73.9%（209/283）、88.3%（250/283）。（4）在63例含生殖细胞瘤的混合性GCT中，H3K27me3均缺失表达，CXorf67阳性率为84.1%（53/63），PLAP、OCT4、CD117、D2-40表达率依次为：79.4%（50/63）、79.4%（50/63）、66.7%（42/63）、87.3%（55/63）。（5）各指标ROC曲线下面积排名依次为H3K27me3、CXorf67、D2-40、OCT4、PLAP、CD117（ P<0.05）。 结论:CXorf67和H3K27me3两指标灵敏度高、特异性强，呈显著负相关，可以作为新的特异性免疫组织化学指标联合应用于GCT的诊断及鉴别诊断。

目的:对2例低磷酸酶症(hypophosphatasia，HPP)患者及其家系进行临床分析及基因变异检测，以探讨HPP的致病机制，加强我们对HPP的诊治经验。方法:收集2例HPP患者及其家属外周血提取基因组DNA，采用全外显子组测序进行致病基因检测，并通过Sanger测序和家系验证确认其遗传方式。利用生物信息学软件对变异位点进行功能分析。结果:先证者1临床表现为发育迟滞、漏斗胸和乳牙过早脱落等临床表现，血清碱性磷酸酶水平略低于正常值，临床高度怀疑HPP进行基因检测，结果发现先证者1的碱性磷酸酶基因ALPL上带有复合杂合变异(c.1120G>A和c.1334C>G)，分别遗传自父母，符合常染色体隐性遗传；且两种错义变异经多种生物信息学预测均为有害，美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)分级为疑似致病性；综合以上结果先证者1被诊断为儿童型HPP。先证者2临床表现为恒牙缺失3颗而无骨折史以及其他骨骼异常，血清碱性磷酸酶水平明显低于正常值范围，基因检测发现该患者携带c.1190-3C>G的单杂合变异，遗传情况不明，ACMG指南初步判定为临床意义未明变异；综合以上结果先证者2被诊断为牙齿型HPP。以上三种变异均未见报道，认为是新发变异。结论:本研究进一步证实HPP是一种与ALPL变异相关的疾病。其中变异c.1120G>A和c.1334C>G分别位于组织非特异性碱性磷酸酶的重要功能域：同型二聚体结合区和冠状区，影响该酶的功能；而c.1190-3C>G可能通过影响基因的剪切，影响碱性磷酸酶的活性。

目的 研究除草剂丁草胺对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)体内重要器官过氧化物酶(POX)、非特异性酯酶(NSE)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和腺苷三磷酸酶(ATPase)等6种代谢与免疫相关酶活力的影响.方法 将泥鳅暴露在不同浓度的丁草胺中96 h,解剖取其心脏、肝胰脏、鳃、头肾、胃和肠等6种器官,采用冰冻切片、酶组织化学及光密度分析技术检测酶活力变化.结果 POX在头肾中活性显著较高,其余器官中活性均较低;高浓度丁草胺显著抑制头肾POX活性,但显著促进肝胰脏、胃和肠POX活性.NSE在肝胰脏中活性显著较高,心脏中活性显著较低;高浓度丁草胺对除心脏和胃以外的体内器官NSE活性具有显著抑制作用.ALP在胃中活性显著较高,心脏和头肾中未检测出明显的酶活性;高浓度丁草胺显著抑制胃和肠ALP活性,对肝胰脏和鳃ALP活性无显著影响.ACP在胃和肠中活性显著较高,心脏中活性显著较低;高浓度丁草胺显著抑制肝胰脏、鳃、头肾、胃和肠ACP活性,对心脏ACP活性无显著影响.SDH在心脏中活性显著较高,鳃和头肾中未检测出明显的酶活性;高浓度丁草胺显著抑制心脏、肝胰脏和胃SDH活性,对肠SDH活性无显著影响.ATPase在心脏中活性显著较高,头肾和肠中活性显著较低;高浓度丁草胺显著抑制心脏、肝胰脏和头肾ATPase活性,但对胃和肠ATPase活性具有显著促进作用.结论 丁草胺可能通过抑制心脏SDH和ATPase活性影响泥鳅的血液循环,通过抑制胃和肠ALP和ACP活性降低泥鳅对营养物质的消化和吸收能力,通过抑制肝胰和头肾NSE、ACP和ATPase活性损害泥鳅的解毒与免疫防御功能.

目的 探索血清泛素羧基末端水解酶-L1(UCH-L1)、组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)在老年脓毒症相关性脑病(SAE)患者中的表达及临床意义.方法 选取2019 年3 月—2021 年3 月空军军医大学空军第 986 医院老年病科诊治老年脓毒症患者 177 例为研究对象,根据是否合并SAE分为SAE组(n =80)和非SAE组(n =97).根据28d内的生存情况,将SAE组分为生存亚组(n =48)和死亡亚组(n =32).采用酶联免疫吸附实验检测血清UCH-L1、TNAP的表达;指标之间的相关性采用Pearson相关分析;多因素Logistic回归分析影响SAE患者死亡预后的因素;受试者工作特征曲线分析血清UCH-L1、TNAP及联合对SAE患者死亡预后的评估价值.结果 SAE组血清UCH-L1、TNAP、C反应蛋白、降钙素原、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、SOFA评分、APACHEⅡ评分均高于非SAE组(t/P =14.268/<0.001,18.872/<0.001,4.607/<0.001,11.589/<0.001,7.689/<0.001,7.572/<0.001,8.177/<0.001).SAE患者血清UCH-L1、TNAP水平与降钙素原、C反应蛋白、NSE、SOFA评分、APACHEⅡ评分呈明显正相关(r/P =0.547/<0.001,0.661/<0.001,0.602/<0.001,0.514/<0.001,0.498/<0.001;0.477/<0.001,0.529/<0.001,0.632/<0.001,0.607/<0.001,0.474/<0.001).死亡亚组SAE患者血清降钙素原、C反应蛋白、NSE、UCH-L1、TNAP、APACHE Ⅱ评分、SOFA评分均高于生存亚组(t/P =7.586/<0.001,3.311/0.001,6.735/<0.001,13.569/<0.001,11.592/<0.001,5.205/<0.001,12.180/<0.001);血清NSE、UCH-L1、TNAP、APACHE Ⅱ评分及SOFA评分升高是影响SAE患者死亡预后的独立危险因素[OR(95%CI)=1.868(1.323～2.638),1.840(1.193～2.838),1.578(1.122～2.219),1.659(1.119～2.576),1.606(1.105～2.336)];血清UCH-L1、TNAP及二者联合评估SAE患者死亡预后的AUC分别为 0.848、0.813、0.904,二者联合优于各自单独评估价值(Z/P =3.864/0.003、4.270/<0.001).结论 SAE患者血清UCH-L1、TNAP表达升高,两者与病情严重程度有关,血清UCH-L1、TNAP联合对老年SAE患者死亡预后具有较高的评估价值.