果蝇Zeste基因增强子人类同源物EZH2是多梳抑制复合物2的催化亚基之一，具有组蛋白甲基转移酶的作用，通过甲基化组蛋白3第27位赖氨酸参与对目的基因的负性表观遗传调控。既往研究表明，EZH2在头颈恶性肿瘤组织中高表达，且与肿瘤发生发展、侵袭转移和预后不良密切相关，因此EZH2有望成为治疗头颈恶性肿瘤新的分子靶点。本文就EZH2的结构与功能，EZH2在头颈恶性肿瘤的作用机制做一综述。

zeste基因增强子同源物2（EZH2）是一种组蛋白甲基转移酶，在组蛋白甲基化修饰中研究较为广泛，其可促进基因的表观遗传学基因沉默，并通过多种调控机制介导肿瘤的发生。EZH2的功能获得和丧失突变在许多癌症中已被证实。目前，随着EZH2在表观遗传机制中的调控作用得到广泛重视，EZH2失调影响血液系统恶性肿瘤发病机制的确切方式仍有待阐明。文章对EZH2在血液系统肿瘤中的致病作用进行综述，以期为血液系统肿瘤的防治寻找新的靶点。

目的:探讨SH-SY5Y细胞中果蝇zeste基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）调控胶质细胞源性神经营养因子受体（glial cell linederived neurotrophic factor receptor，GFR）α1启动子DNA甲基化的分子机制。方法:SH-SY5Y细胞中EZH2及DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase，DNMT）3B过表达及干扰后，采用实时定量聚合酶链反应（real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）及蛋白质印迹法检测EZH2、DNMT3B、GFRα1表达水平，染色质免疫共沉淀qPCR检测转染各组DNMT3B启动子区EZH2结合水平及组蛋白H3第27位赖氨酸（H3K27）甲基化水平，亚硫酸氢盐测序检测转染各组GFRα1启动子DNA甲基化的程度。采用独立样本 t检验比较两组间差异；多组数据的组内比较使用one-way ANOVA分析，并使用LSD- t检验进行两两比较。 结果:qRT-PCR及蛋白质印迹法显示，EZH2过表达组EZH2的mRNA及蛋白相对表达量高于过表达对照组，EZH2干扰组EZH2的mRNA及蛋白相对表达量低于干扰对照组（均 P<0.05）；DNMT3B过表达组DNMT3B的mRNA及蛋白的相对表达量高于过表达对照组；DNMT3B干扰组DNMT3B的mRNA及蛋白的相对表达量低于干扰对照组（均 P<0.05）。染色质免疫共沉淀qPCR显示，EZH2过表达组DNMT3B启动子区EZH2结合水平为2.25±0.15，高于过表达对照组的1.00±0.05（ t=-12.82， P=0.006）；EZH2过表达组DNMT3B启动子区H3K27甲基化水平为2.47±0.44，高于过表达对照组的1.01±0.09（ t=-6.17， P=0.025）。EZH2干扰组DNMT3B启动子区EZH2结合水平为0.57±0.08，低于干扰对照组的1.00±0.06（ t=5.80， P=0.029）；EZH2干扰组DNMT3B启动子区H3K27甲基化水平为0.31±0.09，低于干扰对照组的1.08±0.17（ t=12.24， P=0.007）。qRT-PCR及蛋白质印迹法显示，EZH2过表达组DNMT3B的mRNA相对表达水平为0.58±0.09，低于过表达对照组的1.01±0.13（ t=17.75， P=0.003）；EZH2过表达组DNMT3B的蛋白质相对表达水平为0.32±0.06，低于过表达对照组的0.54±0.05（ t=23.64， P=0.002）。EZH2干扰组DNMT3B的mRNA相对表达水平为1.79±0.05，高于干扰对照组的1.01±0.1（ t=-12.00， P=0.007）；EZH2干扰组DNMT3B的蛋白质相对表达水平为0.85±0.08，高于干扰对照组的0.51±0.07（ t=-18.78， P=0.003）。亚硫酸氢盐测序结果显示，EZH2过表达组GFRα1启动子区DNA甲基化水平为0.28±0.03，低于过表达对照组的0.52±0.01（ t=8.93， P=0.012）；EZH2干扰组GFRα1启动子区DNA甲基化水平为0.79±0.02，高于干扰对照组的0.52±0.01（ t=-44.45， P=0.001）。qRT-PCR结果显示，EZH2过表达组GFRα1 mRNA相对表达量为1.87±0.05，高于过表达对照组的1.01±0.14（ t=-10.04， P=0.001）；EZH2过表达+DNMT3B过表达组GFRα1 mRNA相对表达量为0.73±0.04，低于过表达对照组1.01±0.14（ t=3.27， P=0.031）；EZH2过表达+DNMT3B过表达组GFRα1 mRNA相对表达水平为0.73±0.04，低于EZH2过表达组的1.87±0.05（ t=30.00， P=0.001）。蛋白质印迹法显示，EZH2过表达组GFRα1蛋白相对表达量为0.89±0.07，高于过表达对照组的0.59±0.03（ t=-7.09， P=0.002）；EZH2过表达+DNMT3B过表达组GFRα1蛋白相对表达量为0.48±0.03，低于过表达对照组的0.59±0.03（ t=3.51， P=0.025）；EZH2过表达+DNMT3B过表达组GFRα1蛋白相对表达水平为0.48±0.03，低于EZH2过表达组的0.89±0.07（ t=8.84， P=0.001）。qRT-PCR结果显示，EZH2干扰组GFRα1 mRNA相对表达量为0.57±0.13，低于干扰对照组的1.03±0.13（ t=4.29， P=0.013）；EZH2干扰+DNMT3B干扰组GFRα1 mRNA相对表达量为1.59±0.06，高于干扰对照组1.03±0.13（ t=-6.67， P=0.003）；EZH2干扰+DNMT3B干扰组GFRα1 mRNA相对表达水平为1.59±0.06，高于EZH2干扰组的0.57±0.13（ t=-12.60， P=0.001）。蛋白质印迹法结果显示，EZH2干扰组GFRα1蛋白相对表达量为0.28±0.05，低于干扰对照组的0.58±0.04（ t=7.59， P=0.002）；EZH2干扰+DNMT3B干扰组GFRα1蛋白相对表达量为0.79±0.07，高于干扰对照组0.58±0.04（ t=-4.19， P=0.014）；EZH2干扰+DNMT3B干扰组GFRα1蛋白相对表达水平为0.79±0.07，高于EZH2干扰组的0.28±0.05（ t=-9.78， P=0.001）。 结论:SH-SY5Y细胞中EZH2通过抑制DNMT3B的表达，下调GFRα1启动子区DNA甲基化，进而上调GFRα1的表达。

目的:研究孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响及其可能的表观遗传学机制。方法:通过随机数字表法将10只C57BL/6孕鼠分为对照组（皮下注射生理盐水）及孕期尼古丁暴露（prenatal nicotine exposure，PNE）组（皮下注射尼古丁溶液），每组5只，孕鼠生产后分别收集出生后0 d（postnatal day 0，P0；P14、P25含义依此类推）、P14、P25新生小鼠，根据母代分组分为子代对照组及子代PNE组，并记录P0、P25子代小鼠体质量。采用显微CT（micro-CT）扫描分析、扫描电镜和维氏显微硬度检测对子代小鼠牙槽骨和下颌切牙进行硬组织相关参数分析。提取P25子代小鼠下颌骨组织及第3代牙上皮干细胞（dental epithelial stem cell，DESC）中的总RNA，通过实时荧光定量PCR检测成骨向及成釉向分化相关基因、增殖相关标志物和干细胞标志物的表达水平。采用石蜡切片免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，Pcna）、釉原蛋白（amelogenin，Amelx）、甲基转移酶ZESTE增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，Ezh2）、组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化修饰（histone H3 trimethylated at lysine 27，H3K27me3）阳性染色分布及水平。使用细胞增殖（cell counting kit-8，CCK-8）试剂盒对外源性添加不同浓度（0.01、0.1、1 mmol/L）尼古丁以及Ezh2抑制剂GSK126的DESC进行细胞活力检测。结果:PNE组孕鼠较对照组更容易出现不良妊娠结局，P0时子代PNE组小鼠体质量［（0.99±0.02）g］显著低于子代对照组［（1.20±0.04）g］（ P<0.001）；P25时，子代PNE组小鼠体质量［（9.65±1.32）g］显著低于子代对照组［（15.26±1.70）g］（ P<0.001），死产率［（46.40±9.30）%］显著高于对照组（0）（ P<0.001）。P14和P25时，子代PNE组小鼠下颌切牙釉质矿化沉积点与第一磨牙近中面的距离数值［分别为（-1 349±45）、（-506±380）μm］均较子代对照组［分别为（-1 192±147）、（504±198）μm］显著减小（ P<0.05， P<0.001），提示矿化沉积点延迟。子代PNE组小鼠切牙釉柱及釉柱间质较对照组排列松散无序，显微硬度［（245.7±18.4）MPa］较子代对照组［（371.9±28.7）MPa］显著降低（ P<0.001）。HE染色显示子代PNE组小鼠前成釉细胞（pre-ameloblast，Pre-Am）区域排列较对照组紊乱，矿化沉积点推迟，暂时性扩增细胞（transit-amplifying cell，TA）及Pre-Am区域延长。免疫组织化学染色显示，子代PNE组小鼠唇侧颈环（labial cervical loop，LaCL）整体Pcna表达较子代对照组显著增多（ P<0.05），H3K27me3较对照组显著富集（ P<0.01），对应区域可见Ezh2表达显著增加（ P<0.01），同时成釉细胞胞质中Amelx阳性信号减弱。体外实验添加1 mmol/L 尼古丁能显著上调子代PNE组DESC的Pcna基因表达水平（ P<0.01），同时显著下调DESC标志物B淋巴瘤Mo-MLV插入蛋白1、富亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1和成釉细胞向分化的相关基因Amelx等的基因表达水平（ P<0.05， P<0.05， P<0.01）。此外，与0 h时相比，干预24 h后1 mmol/L尼古丁可显著增强DESC的增殖活性（ P<0.001），添加10 μmol/L Ezh2抑制剂GSK126可挽救1 mmol/L尼古丁对DESC带来的增殖促进作用。 结论:孕期尼古丁暴露可能导致成釉向谱系定向分化过程延迟，致子代小鼠DESC增殖及分化异常，并且影响H3K27me3表观遗传修饰水平，造成子代牙釉质发育障碍，提示孕期尼古丁暴露是牙发育的危险环境因素。

目的 探讨组蛋白甲基化转移酶Zeste同源物增强子2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)调控卵巢癌(ovarian cancer,OC)生物学行为的机制,为寻找OC治疗的新靶点提供实验支持.方法 采用EZH2小干扰RNA(small interfered RNA,siRNA)在不同OC细胞系中敲减EZH2,并使用qRT-PCR、Western blot分析干扰siEZH2 mRNA和蛋白质的效率.进一步采用CCK-8法、细胞划痕试验、Transwell试验以及流式细胞术检测干扰EZH2后对OC细胞增殖、迁移及侵袭能力和凋亡水平等生物学行为的影响.采用Western blot分析干扰EZH2后,早期生长反应因子1(early growth response 1,EGR1)和H3K27me3蛋白的表达水平,并分析EZH2调控OC细胞生物学行为的机制.结果 转染siEZH2后,OC细胞系中EZH2 mRNA的表达水平显著低于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),且A2780细胞中EZH2蛋白的表达水平亦明显下调(P＜0.05).Western blot检测结果表明,EGR1以及H3K27me3蛋白水平出现了不同程度地降低.转染siEZH2-1后,转染组A2780细胞的增殖能力显著低于阴性对照组(P＜0.05);细胞划痕试验和Transwell试验结果显示,转染siEZH2-1后细胞的迁移和侵袭能力显著减弱(P＜0.05);流式细胞术结果显示,转染siEZH2-1后细胞凋亡水平显著增强(P＜0.05).结论 EZH2在OC细胞系中高表达,并促进A2780细胞的增殖、迁移、侵袭和抗凋亡.但EZH2并非通过其H3K27me3转移酶功能调控EGR1的表达而调控影响OC的生物学行为.

Zeste增强子同源物2(EZH2)是一种组蛋白甲基转移酶,主要通过多梳抑制复合体2(PRC2)依赖的组蛋白H3中27位的赖氨酸三甲基化(H3K27me3)、PRC2依赖的非组蛋白甲基化、不依赖于PRC2的非组蛋白甲基化和不依赖于PRC2的转录激活4种途径调控基因表达.EZH2在多种恶性肿瘤中的表达水平明显上调,参与了肿瘤的发生与发展,与肿瘤的增殖、转移、侵袭、肿瘤分级、肿瘤耐药、不良预后等密切相关.多种EZH2抑制剂在恶性肿瘤生长方面表现出良好抑制效果,延缓了肿瘤的生长与转移,EZH2在恶性肿瘤治疗方面展现了广泛的应用前景.因此,本文对EZH2及其抑制剂在恶性肿瘤中的作用及机制的研究进展进行综述,从而为开发靶向EZH2的肿瘤治疗方法提供理论依据.

目的 探讨环状RNA(circRNA)蛋白质精氨酸甲基化转移酶(circPRMT)5、果蝇zeste基因增强子同源物(EZH)2 在宫颈癌(CC)患者中表达水平及其临床意义.方法 选取 84 例CC患者癌组织和对应癌旁正常组织,检测cir-cPRMT5、EZH2 mRNA表达水平;分析癌组织circPRMT5、EZH2 mRNA表达水平与临床病理特征及预后的关系、癌组织cir-cPRMT5 表达水平与EZH2 mRNA的相关性及影响CC患者预后的因素.结果 CC患者癌组织circPRMT5、EZH2 mRNA表达水平均显著高于癌旁正常组织(P＜0.05);癌组织circPRMT5、EZH2 mRNA表达水平与肿瘤分化程度、淋巴结转移、FIGO分期相关(P＜0.05);癌组织circPRMT5 表达水平与EZH2 mRNA呈正相关(P＜0.05);circPRMT5、EZH2 低表达组36 个月生存率均明显高于circPRMT5、EZH2 高表达组(P＜0.05);circPRMT5、EZH2 mRNA、FIGO分期、淋巴结转移是影响CC患者不良预后的独立危险因素(P＜0.05).结论 circPRMT5、EZH2 在CC患者癌组织中均呈高表达,两者均可能与CC患者不良预后有关,检测癌组织circPRMT5、EZH2 表达水平有助于CC患者预后评估.

zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)是一种组蛋白赖氨酸甲基转移酶,可通过调控组蛋白H3在赖氨酸27位点的三甲基化(trimethylation of Lys27 in histone 3,H3K27me3),诱导靶基因沉默,在腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)相关性腹膜纤维化过程中发挥重要作用.研究显示EZH2在腹膜纤维化过程中高表达,通过促进上皮细胞—间充质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)、腹膜炎症和血管新生来促进腹膜纤维化的发生发展,抑制EZH2可抑制甚至部分逆转腹膜纤维化.深入研究EZH2有助于进一步明确腹膜纤维化的发病机制,并为腹膜纤维化的靶向治疗提供参考.

组蛋白甲基化转移酶同源序列增强子(enhancer of zeste homolog,EZH)是由EZH基因编码的一种组蛋白赖氨酸甲基化转移酶,有EZH1和EZH2两种亚型,属于多梳家族(Polycomb Group,PcG)蛋白成员.PcG家族的成员相互结合形成多聚蛋白复合物参与基因转录调控、DNA甲基化,促进异染色质的形成从而发挥沉默基因的功能、维持胚胎细胞的正常增殖与分化.本文主要介绍EZH2的基本功能及其在哺乳动物生殖和相关疾病中的研究新进展.

目的 通过筛选小鼠RAW246.7巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)激活后的核定位结合特异性甲基转移酶,初步验证山姜素可通过激活PPAR引起表观遗传修饰效应.方法 RAW246.7细胞按照不同处理分为对照组、(100、200、500、1000) μg/mL山姜素处理组、1000 μg/mL山姜素联合0.1 mmol/mL GW9662处理组.孵育完成后,首先在String生物信息数据库检索与PPAR作用的甲基转移酶类,再利用免疫共沉淀技术筛选与RAW246.7核内PPAR作用的特异甲基转移酶,荧光定量PCR法验证山姜素对上述甲基转移酶合成的作用.结果 免疫共沉淀结果显示山姜素呈剂量依赖性促进胞核内甲基转移酶Zeste基因增强子同源物2(EZH2)、DNA甲基转移酶3α(DNMT3α)以及胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)与PPAR结合,与String数据库预测的互相作用蛋白情况基本吻合,且GW9662组中无甲基转移酶与PPAR作用;荧光定量PCR显示仅1000 μg/mL高剂量山姜素可促进TDG mRNA合成,而对DNMT3A以及EZH2 mRNA含量无显著影响.结论 PPAR激动剂山姜素可易化相关甲基转移酶与PPAR结合或诱导酶合成,提示山姜素具有潜在的甲基化修饰效应.