目的:探讨细胞周期依赖性蛋白12(CDK12)在前列腺癌(PCa)中的表达，并分析其与患者临床病理特征间的关系。方法:选取2015年1月至2016年10月本院行前列腺癌根治术的PCa患者89例(PCa组)和行前列腺电切术的良性前列腺增生(BPH)患者50例(BPH组)，收集两组术中病理标本，采用免疫组化(IHC)染色检测组织中CDK12表达量，并分析CDK12蛋白与PCa患者临床病理特征间的关系。PCa患者根据生存情况将其分为生存组与死亡组，先后行COX单因素及多因素分析PCa患者预后的危险因素。根据病理检查中CDK12蛋白表达结果，将PCa患者分为阳性组与阴性组，绘制生存曲线，比较3年生存状况。结果:PCa组的CDK12蛋白阳性表达率显著高于BPH组( P<0.05)；PCa患者中阳性组与阴性组的年龄比较，差异无统计学意义( P>0.05)，而前列腺特异抗原(PSA)水平、Gleason评分及肿瘤分期与CDK12蛋白表达呈正相关( r＝0.311、0.457、0.441， P<0.05)。89例PCa患者3年期间死亡33例，存活56例。COX回归模型单因素分析提示，存活组和死亡组的PSA、Gleason评分、肿瘤分期及病理组织的CDK12蛋白表达情况比较，差异有统计学意义( P<0.05)，COX多因素分析提示，PSA水平>20 μg/L、Gleason评分>7分、肿瘤分期T3期、CDK12蛋白阳性表达均是影响PCa患者预后的独立危险因素。CDK12蛋白阳性表达者的3年累积生存率低于阴性表达者，差异有统计学意义( χ2＝5.912， P<0.05)。 结论:CDK12蛋白的过度表达可能在PCa发生发展过程中发挥重要作用，且其阳性表达水平可能与PCa恶性程度呈正相关，研究CDK12阳性表达量在评估PCa进展风险，规划临床治疗方案中具有潜在价值，CDK12表达情况也是影响PCa患者预后的关键因素。

目的:探讨长链非编码RNA细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN)2B-AS1及其邻近基因CDKN2A在特发性肺纤维化(IPF)合并肺癌中的作用及机制。方法:收集8例肺腺癌患者手术中切除的少许癌组织标本及癌旁的正常肺组织标本，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CDKN2B-AS1及其邻近基因CDKN2A的含量。选择人肺成纤维细胞系MRC-5为研究对象，将细胞分为正常组、干预组[转化生长因子β1(TGF-β1)干预]、阴性siRNA干预组(TGF-β1干预，转染无义序列小干扰RNA)和阳性siRNA干预组(TGF-β1干预，转染CDKN2B-AS1的小干扰RNA)。干预24 h后倒置显微镜下观察细胞形态变化，RT-qPCR方法检测CDKN2B-AS1及CDKN2A的表达，蛋白质印迹法检测CDKN2A和P53蛋白的含量。结果:与对照组21.90±19.83、19.83±7.67比较，肺癌组织中CDKN2B-AS1及CDKN2A均低表达，分别为2.60±1.33和0.34±0.10( t＝2.747、7.187， P＝0.016、0.000)，与在IPF中的结果一致。在细胞试验中，观察到TGF-β1的干预可促使MRC-5肺成纤维细胞从多突的纺锤形或星形结构，逐渐转化为扁平状纤维结构的肌成纤维细胞，并出现不同程度的分化；与正常组56.12±2.46、64.54±3.89比较，TGF-β1干预后CDKN2B-AS1及CDKN2A mRNA的表达均明显减少，分别为6.80±0.30和9.39±0.37( t＝47.746、33.797，均 P<0.001)；转染CDKN2B-AS1的siRNA后，与干预组6.80±0.30、9.39±0.37比较，CDKN2B-AS1及CDKN2A的表达进一步下调，分别为2.38±0.29、2.81±0.36( t＝4.279、4.032， P＝0.003、0.004)，且两者表达量呈正相关( r＝0.988， P＝0.000)；此外，蛋白水平干预组CDKN2A及P53的表达3.12±0.06、1.12±0.07，较正常组4.12±0.59、2.11±0.06均减少，差异有统计学意义( t＝2.921、19.599， P＝0.043、0.000)，且两者表达量呈正相关( r＝0.772， P＝0.000)。 结论:长链非编码RNA CDKN2B-AS1在IPF和肺癌中均低表达，通过调节其邻近基因CDKN2A的表达，参与了P53通路，可能是IPF患者肺癌高发的原因之一。

目的 探讨血清细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)和极光激酶A(AURKA)在HBV相关肝细胞癌(HBV-HCC)患者中的诊断价值.方法 收集2022年6月—2023年12月在甘肃省人民医院消化内科住院部的HBV-HCC患者、HBV相关肝硬化患者(HBV-LC)及慢性乙型肝炎患者(CHB)各50例,收集同期体检中心与病例组年龄、性别相匹配的健康人群50例,记录患者的年龄、性别、并发症以及入院后首次的血常规、肝功能、凝血等检验指标.ELISA法检测各组血清中CDK1和AURKA水平.符合正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;非正态分布的计量资料多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Bonferroni检验.计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法.CDK1与AURKA表达的关系采用Spearman相关分析;受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)分析CDK1与AURKA对HBV-HCC的诊断价值.结果 与对照组相比,HBV-HCC患者肝功能各项指标差异均有统计学意义(P值均<0.05);CHB组与HBV-HCC组Alb、Glb、DBil、AST、GGT、ALP水平比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);HBV-LC组与HBV-HCC组Glb、AST、GGT水平比较差异均有统计学意义(P值均<0.05).HBV-HCC组患者血清中CDK1及AURKA水平明显高于HBV-LC组、CHB组和对照组(P值均<0.05).CDK1水平与AURKA在总研究人群和HBV-HCC患者中均存在显著的正相关性(r值分别为0.526 6、0.815 2,P值均<0.001).以对照组为参照,CDK1诊断HBV-HCC的AUC为0.832 3,敏感度为92.86%,特异度为75%;AURKA诊断HCC的AUC为0.886 6,敏感度为95.80%,特异度为74%.以CHB组为参照,CDK1诊断HBV-HCC的AUC为0.833 3,敏感度为93.75%,特异度为75%;AURKA诊断HBV-HCC的AUC为0.972 7,敏感度为95.83%,特异度为91.67%.以HBV-LC组为参照,CDK1诊断HBV-HCC的AUC为0.608 5,敏感度为66.67%,特异度为54.17%;AURKA诊断HBV-HCC的AUC为0.762 2,敏感度为95.83%,特异度为47.92%.结论 血清CDK1与AURKA水平随着HBV相关慢性肝病的进展而升高,二者对HBV相关HCC有一定的诊断价值.

目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶7 (cyclin-dependent kinase 7,CDK7)对卵巢癌细胞增殖的作用.方法:应用特异性siRNA转染法沉默卵巢癌OVCA433、TOV-112D和IGROV1细胞中CDK7基因表达后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力.应用成簇的规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)及其相关核酸内切酶9(CRISPR-associated endonuclease 9,Cas9)基因编辑系统敲除卵巢癌HEY、OVCA420、OVCA433和IGROV1细胞中的CDK7基因后,采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力.用CDK7抑制剂THZ1处理卵巢癌TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8、OV90、SKOV3和COV413B细胞后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8和OV90细胞增殖和克隆形成能力,蛋白质印迹法检测IGROV1、OVCA433、SKOV3和COV413B细胞中CDK7蛋白表达水平和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化水平.结果:沉默或敲除CDK7基因后,卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力均明显减弱(P值均＜ 0.05).THZ1处理可抑制卵巢癌细胞的增殖和克隆形成,并下调CDK7蛋白表达和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化(P值均＜0.05).结论:CDK7可能通过调控RNA聚合酶Ⅱ磷酸化,促进卵巢癌细胞的增殖.

细胞周期失调是肿瘤的基本特征.目前,新型细胞周期依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6)高度选择性抑制剂已被FDA批准联合内分泌治疗用于雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性、人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阴性乳腺癌患者的治疗.随着CDK4/6抑制剂应用的推广,研究者发现其并非对所有ER+乳腺癌患者有效,缺乏可靠的生物标志物以预测疗效或筛选患者群体是限制其临床应用的主要挑战.随着二代测序技术的进步,通过组学信息预测治疗策略的敏感性和实现个体化治疗对减轻患者负担和提高治疗效率具有重要意义.本文回顾近期对CDK4/6抑制剂生物标志物的研究,旨在为今后的深入研究提供思路,也为CDK4/6抑制剂的临床应用提供参考.

目的 探讨微小RNA-1180(miR-1180)转染对肾癌细胞系786-O和ACHN生长的影响.方法 肾癌细胞分为两组:dsControl组和miR-1180组.实时定量(qRT)-PCR检测p21 mRNA的表达变化.Western blot检测p21、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达变化.流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化,使用多靶扫描法(MTS)和集落形成实验检测细胞活力和增殖能力.结果 qRT-PCR结果显示,与对照组相比,转染miR-1180后786-O和ACHN细胞中p21 mR-NA水平分别上调2.54倍(P＜0.01)和2.49倍(P＜0.01).p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符,CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调.FCM结果显示,转染miR-1180后,位于G0/G1期的细胞比例明显增大,而位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降,表明细胞周期被阻滞在Go/G1期.MTS结果显示,与dsControl组相比,转染miR-1180后,两种肾癌细胞活力明显降低.集落形成实验显示,miR-1180组的集落数数量明显较少,表明细胞增殖能力降低.结论 miR-1180能显著激活肾癌细胞中p21蛋白的表达,并抑制肾癌细胞786-O和ACHN的生长.

目的:筛选肝癌细胞Hep-3B和Hep-G2敏感的细胞周期蛋白质依赖激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)抑制剂,并检测CDK抑制剂对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用CCK-8法检测10种CDK抑制剂对2株肝癌细胞Hep-3B和Hep-G2的增殖抑制率,选取抑制率较高的一种作为目标抑制剂,计算其对2株细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50).采用FCM法检测目标抑制剂处理后,肝癌Hep-3B和Hep-G2细胞周期分布及凋亡率的变化;进一步采用蛋白质印迹法检测细胞增殖及凋亡相关蛋白的表达水平变化.结果:6号抑制剂BMS-265246(5 μmol/L作用48 h)对肝癌细胞Hep-3B和Hep-G2增殖的抑制率可达到80％,该药物对2株细胞的IC5o值分别为2.84和1.73 μmol/L.5 μmol/L BMS-265246处理肝癌Hep-3B和Hep-G2细胞24 h后,G1期细胞所占百分率明显升高(P值均＜0.05),细胞中磷酸化Rb蛋白的水平明显降低(P值均＜0.01),转录因子E2F的靶蛋白c-Myc表达明显下调(P值均＜ 0.01).另外,5μmol/L BMS-265246对2株肝癌细胞均有明显的凋亡诱导作用,与未处理对照组相比,24 h和48 h凋亡率均明显升高(P值均＜ 0.05);药物处理组细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达明显下调(P值均＜ 0.05),而促凋亡蛋白Bax和Bak的表达明显上调(P值均＜ 0.05),同时可检测出caspase-3及其底物聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的活化片段.结论:CDK抑制剂BMS-265246在体外可诱导肝癌Hep-3B及Hep-G2细胞凋亡,并抑制细胞增殖;其作用机制可能与Bcl-2家族抗/促凋亡失衡、caspase通路激活,以及Rb去磷酸化和E2F活性受抑制有关.

血液系统恶性肿瘤系突变的造血干细胞或前体祖细胞过度增殖,而正常造血系统被破坏的一组恶性肿瘤.正常细胞增殖受细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK)严格调控,这些激酶不仅在细胞周期中发挥重要作用,还参与造血干细胞的自我更新与分化、表观遗传调节及DNA损伤修复等细胞活动.对于CDK基因敲除小鼠的研究发现,CDK表达缺失与肿瘤发生相关,而其染色体易位、基因突变引起的CDK表达改变均在肿瘤发生、发展中起作用,这也使更多的肿瘤研究聚焦在CDK及其靶向药物抑制剂的研究方面.细胞周期蛋白(cyclin)D可以与CDK形成CDK4/6-cyclin D复合体,参与造血干细胞细胞周期的调控.笔者拟就CDK、cyclin D及CDK4/6-cyclin D复合体在正常造血及血液系统恶性肿瘤的作用机制,以及CDK4/6靶向抑制剂在血液系统恶性肿瘤治疗中的应用的最新研究进展进行综述.

选择性细胞周期素依赖激酶(CDK)抑制剂已用于ER+/HER2晚期乳腺癌的治疗,在其他实体肿瘤的临床前研究和临床研究也正在进行中.CDK4/6抑制剂在实体肿瘤中显示出良好疗效,未来CDK4/6抑制剂发展的方向是寻找预测标志物、克服耐药和探索联合治疗模式.

细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK)4/6抑制剂因可阻滞细胞增殖,成为激素受体阳性乳腺癌有效且安全的治疗选择.CDK4/6抑制剂联合内分泌治疗方案能显著改善激素受体阳性晚期乳腺癌患者的预后,尤其可改善内分泌耐药患者预后.CDK4/6抑制剂的适应证还有望拓宽到早期乳腺癌中.但CDK4/6抑制剂耐药机制仍不明确.