女，27岁，因"原发不孕"就诊。15岁月经初潮，同年因"右卵巢囊肿蒂扭转"行切除术，术后月经周期延长至2 ~ 3月，经期延长至10余天。16岁因"左卵巢囊肿"行剥除术，术后月经周期最长达半年，多次查孕酮> 60 ng/mL。查体：身高181 cm，体重87 kg，体质指数26.56 kg/m 2。血压116/57 mmHg。无高雄性激素表现，双乳Tanner Ⅳ期，心率71次/分，无腋毛，外阴幼稚，阴毛Tanner Ⅱ期，双足第4趾畸形(图1)。

目的:分析中国汉族人群CYP2C9和VKORC1的基因多态性及其与华法林稳定维持剂量的相关性。方法:回顾性研究。收集2017年10月至2018年4月在北京大学人民医院进行凝血分析检测的458例中国汉族患者，男性213例，女性245例，年龄范围26~94岁。采用PCR-荧光探针法检测CYP2C9*3位点和VKORC1-1639A>G位点基因多态性，458例患者中服用华法林进行抗凝治疗且凝血酶原时间国际标准化比值（INR）达标（在2.0~3.0范围内）的患者130例，记录患者基本信息、华法林用药剂量及凝血酶原时间国际标准化比值（INR），应用SPSS统计分析数据，与美国FDA推荐的不同基因型患者华法林推荐剂量的参考表格进行对比，并且对华法林预测剂量公式进行简单验证。结果:458例抗凝患者中CYP2C9*1/*1（AA）基因型频率90.8%，CYP2C9*1/*3（AC）基因型频率8.5%，CYP2C9*3/*3（CC）基因型频率0.7%；VKORC1-1639GG基因型频率0.9%，VKORC1-1639AG基因型频率14.2%；VKORC1-1639AA基因型频率84.9%。在达到抗凝指标（国际标准化比值INR 2.0~3.0）后，结果显示CYP2C9*1/*3与*3/*3基因型患者平均每日剂量为（2.92±1.29）；3（2.75，3.375）mg，低于野生型CYP2C9*1/*1基因型患者所需的平均每日华法林剂量（3.91±1.63）；3（3，5）mg，差异有统计学意义（ P=0.018）。VKORC1纯合突变基因型VKORC1-AA患者平均每日剂量为（3.68±1.64）；3（3，4.31）mg，低于杂合基因突变型的平均每日剂量（4.54±1.29）；4.5（3.28，6）mg，差异有统计学意义（ P=0.001）。不同VKORC1+CYP2C9基因型患者的华法林应用剂量与美国FDA参考表格的推荐剂量具有一致性。Miao2007公式的预测准确度较IWPC公式低，且94.1%的患者华法林剂量被低估。 结论:携带CYP2C9*3突变基因或VKORC1-AA纯合突变基因型的患者所需华法林剂量较低，CYP2C9和VKORC1基因多态性与华法林稳定维持剂量具有一定的相关性。

细胞色素P450氧化还原酶缺乏症是一种罕见病，临床表现多样，主要为骨骼畸形、性发育障碍和肾上腺功能不全。部分病例症状严重，可在围生期死亡。本文报道1例因POR基因变异导致的细胞色素P450氧化还原酶缺乏症早产儿的诊疗过程，加强临床医生对该病的认识。

本文报道1例细胞色素P450氧化还原酶缺陷症（cytochrome P450 oxidoreductase deficiency，PORD）患儿的诊治过程。患儿，男，38日龄，生后10 d出现鼻塞、吃奶费力、体重增长不满意，收入山东大学附属儿童医院，体格检查示：额缝早闭、手足畸形，外生殖器未见异常；实验室检查：血清促肾上腺皮质激素水平轻度升高、皮质醇水平降低。全外显子组测序结果示，患儿 POR基因存在c.1370G>A（p.R457H）纯合变异，确诊为PORD。本例提示骨骼畸形合并外生殖器畸形和/或肾上腺皮质激素异常是PORD重要的诊断线索。

目的:探讨细胞色素P450氧化还原酶缺陷症（cytochrome P450 oxidoreductase deficiency，PORD）合并不孕症的早期发现、鉴别诊断及有效治疗。方法:回顾性分析1例PORD患者的临床诊治资料。结果:该患者疾病特点包括原发性闭经、不孕、生殖系统轻度畸形、双侧卵巢多发黄素化囊肿、高孕酮血症，经内分泌科检验指标和基因筛查确诊PORD，给予口服地塞米松，进行体外受精-胚胎移植后成功妊娠，顺利分娩一健康儿。结论:PORD属于罕见的常染色体隐性遗传病，存在类固醇激素代谢障碍，疾病特征多样，合并不孕时易被误诊，需要及时鉴别诊断，给予恰当的地塞米松治疗后，可以经过辅助生殖技术获得成功妊娠。

目的:研究1，2-二氯乙烷（1，2-dichloroethane，1，2-DCE）染毒过程中不同脑区细胞色素P450 2E1（cytochrome P-450 2E1，CYP2E1）表达的变化，探讨CYP2E1对1，2-DCE中毒引起的脑水肿形成的影响和作用。方法:于2018年12月，选择雌性SPF级昆明种小鼠40只随机分为对照组、染毒1、2和3 d组共4组，每组10只。将染毒组小鼠置于100 L静式染毒柜中（5只/柜），以1.2 mg/L 1，2-DCE每天吸入染毒3.5 h，分别染毒1、2和3 d，对照组不进行染毒，其他处理方式与染毒组相同。分别于染毒结束后次日处死，取脑组织并分区，采用HE染色法对不同脑区进行组织病理学观察，检测不同脑区丙二醛（malondialdehyde，MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量和过氧化氢酶（catalase，CAT）活力；同时以蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测不同脑区中CYP2E1、occludin和claudin5蛋白含量，再以实时荧光定量PCR法检测CYP2E1、occludin和claudin5 mRNA表达水平。实验数据采用SPSS 20.0进行统计分析，多组组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），组间两两比较采用SNK（q检验）法分析。结果:与对照组比较，染毒2 d和3 d组小鼠小脑组织出现明显的脑水肿改变；与对照组比较，染毒3 d组小鼠小脑组织中MDA含量、CYP2E1蛋白和mRNA表达水平明显增高，差异均有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，各个染毒组小鼠小脑组织中GSH含量、CAT活力及occludin和claudin5蛋白表达水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。各组小鼠额叶皮质组织中上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:1，2-DCE染毒可以诱导小鼠小脑组织中CYP2E1的表达增强，引起脑组织氧化损伤和脑水肿，对小鼠额叶皮质组织中CYP2E1的表达无明显影响。

目的:对1例特殊面容、性发育障碍、怀疑为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症的患儿及其同症姐姐进行临床和遗传学分析，为患者的临床诊断提供依据。方法:提取先证者及其父母、姐姐基因组DNA，应用二代外显子目标区域捕获测序技术对先证者进行基因变异分析，并对疑似致病性变异进行Sanger测序验证和家系分析。结果:基因测序结果显示先证者和姐姐的 POR基因存在c.1370G>A和c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC复合杂合变异，其中c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC变异未见报道。患儿母亲携带 POR基因c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC杂合变异，父亲携带 POR基因c.1370G>A杂合变异，因此两个变异分别遗传自父母。 结论:POR基因变异分析结果明确了姐弟二人为细胞色素P450氧化还原酶缺陷症。新发现的c.517-19_517-10delGGCCCCTGTGinsC变异扩大了 POR基因的变异谱。

目的:比较骨重塑能力正常和骨重塑能力缺陷大鼠肩袖撕裂（RCT）修复术后色氨酸代谢的差异，探讨色氨酸代谢是否与骨长入有关。方法:共选取50只成年雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠进行研究，随机选择18只大鼠接受双侧卵巢摘除手术（OVX），设为OVX组；余32只大鼠接受双侧卵巢摘除假手术，设为假手术组。术后3个月，OVX组和假手术组各自随机选择4只大鼠，采用显微计算机断层扫描（Micro-CT）鉴定肱骨头的骨量流失情况。OVX组剩余大鼠进行RCT造模，并接受急性冈上肌横断修复术，设为OVX+RCT组（ n=14）；假手术组剩余大鼠分别选取14只接受急性冈上肌横断修复术和RCT假手术，分别设为RCT组（ n=14）和SO组（ n=14）。修复手术后2周检测大鼠抓力，并取出冈上肌腱骨复合体，通过实时荧光定量多聚酶链式反应（qPCR）检测、苏木素伊红（HE）染色和免疫组化（IHC）染色评估新骨生成和骨长入情况，采用超高效液相色谱（UPLC）分析检测色氨酸代谢。 结果:抓力测试结果表明，SO组大鼠抓力最大，RCT组次之，OVX+RCT组抓力最小，三组间差异有统计学意义（ P<0.05）。qPCR分析结果表明，SO组腱骨复合体的骨硬化素相对表达量显著高于OVX+RCT组和RCT组，IHC染色显示RCT组的骨织素相对表达量显著高于SO组和OVX+RCT组，以上项目组间差异均有统计学意义（ P<0.05）。UPLC检测结果表明，SO组、RCT组、OVX+RCT组肩袖腱骨复合体色氨酸含量相近，差异无统计学意义（ P>0.05）。qPCR结果表明，犬尿酸代谢途径的吲哚胺2，3-双加氧酶2的表达量在SO组、RCT组、OVX+RCT组呈递增趋势：OVX+RCT组显著高于SO组，OVX+RCT组的3-羟基邻氨基苯甲酸3，4-双加氧酶的表达量显著高于RCT组和SO组，5-羟色胺代谢途径的单胺氧化酶A亚型和B亚型在SO、RCT、OVX+RCT三组间递增，OVX+RCT组吲哚代谢途径的多巴脱羧酶的表达量显著高于SO组，而细胞色素P450氧化还原酶的表达量在SO、RCT、OVX+RCT三组间递增，以上项目组间差异有统计学意义（ P<0.001）。 结论:大鼠正常肩袖和RCT后修复的肌腱复合体中色氨酸代谢以犬尿酸代谢为主，5-羟色胺代谢次之；在RCT骨重塑中，5-羟色胺代谢途径改变最大，吲哚途径次之。犬尿酸代谢途径的烟酸、黄尿酸含量和5-羟色胺代谢途径的5-羟色氨酸、5-羟色胺、羟基吲哚乙酸、褪黑素及吲哚代谢途径的色氨醇、吲哚乳酸均与骨长入有关。因此，色氨酸代谢与骨长入有关，为RCT寻找潜在治疗靶点。

目的:从中华大蟾蜍(Bufo gargarizans Cantor)肝脏组织中克隆细胞色素P450还原酶基因(BgCPR,GenBank登录号:OQ572435)进行生物信息学分析,并进行功能验证.方法:基于中华大蟾蜍转录组数据库挖掘BgCPR基因序列,使用SnapGene软件设计BgCPR基因两端特异性引物,以蟾蜍肝脏组织总RNA逆转录成的cDNA为模板进行PCR扩增.利用生物信息学分析BgCPR蛋白理化性质、空间结构并构建系统进化树;基于CRISPR/Cas9基因编辑系统将蟾蜍BgCPR基因表达框经同源重组整合进入酿酒酵母基因组,利用聚乙二醇法制备转化子微粒体,验证其对细胞色素C的还原功能.结果:克隆得到全长2 043 bp的BgCPR基因cDNA,编码680个氨基酸,相对分子质量77 852 Da.结构预测显示,BgCPR蛋白为非分泌蛋白;有一段跨膜螺旋区,位于蛋白的第24～46位氨基酸之间;亚细胞定位预测显示该蛋白定位于内质网上.采用体外酶活实验证明其具有传递电子功能.结论:本研究克隆得到中华大蟾蜍BgCPR基因,并构建了表达具有生物活性的BgCPR的酿酒酵母工程细胞,为进一步研究蟾蜍CYP450基因功能乃至解析蟾蜍二烯内酯类化合物的生物合成途径奠定了基础.

细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯合或杂合变异引起的常染色体隐性遗传病.目前全球仅有100多例报告,大多是关于新生儿或儿童(76％)[1-2].成年女性由于卵泡发育过程中异常的激素水平,自然受孕困难,本文报道1例来提高对PORD诊断及助孕的认识.