目的:探讨循环上皮细胞采样针（CellCollector）体内循环肿瘤细胞（CTC）捕获系统在乳腺癌患者中疗效监测和临床意义。方法:回顾性分析2018年1月至2022年12月110例乳腺癌患者的临床资料，根据CTC检测结果（阈值为1个）将乳腺癌患者分成CTC阴性组（n=34例）和CTC阳性组（n=76例）。采用SPSS 23.0软件分析数据。符合正态分布的计量数据采用（）表示，组间比较采用独立样本t检验；计数资料以[例（%）]表示，组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法；相关性分析采用Spearman法。P<0.05为差异有统计学意义。结果:乳腺癌不同临床特征中，基线阳性CTC检出率在不同分子分型（LuminalA、LuminalB、TNBC、HER-2阳性）、HR（阳性、阴性组）、Ki-67（高、中、低组）中，差异显著，P值分别为0.021、0.043、0.041，均具有统计学意义。结论:CellCollector体内CTC捕获技术在乳腺癌患者中检出率较高，检出率与乳腺癌分子分型、HR分型、ki67表达水平相关，为CTC识别高复发风险人群预测预后提供了依据。

目的:建立一种快速检测新型冠状病毒N亚基因组（SgN）的方法，探讨其在新型冠状病毒肺炎病例及环境样本中的应用价值。方法:根据全球共享流感数据库（GISAID）公布的新型冠状病毒全基因组序列设计SgN特异性引物和探针，优化退火温度、引物与探针浓度等反应条件，建立新型冠状病毒SgN荧光定量PCR检测方法，绘制标准曲线，评价该方法的灵敏性、重复性和特异性。采用建立的病毒SgN荧光定量PCR检测方法检测21份环境和351份临床样本，并选取25份SgN阳性样本进行病毒分离以评估该检测方法的应用效果。结果:SgN的引物和探针对新型冠状病毒具有良好特异性。初步建立的病毒SgN荧光定量PCR检测方法最低检测限为1.5×10 2copies/ml，变异系数小于1%。372份样本的gRNA阳性率为97.04%（361/372），gRNA阳性样本中阳性环境样本和阳性临床样本的SgN阳性率分别为36.84%（7/19）和49.42%（169/342）。其中野生型毒株样本的SgN阳性率及拷贝数均比德尔塔（Delta）毒株低。在25份SgN阳性样本中，采样时间在5 d内的12份样本均分离到病毒；13份采样时间在12 d以上的样本未发生细胞病变。 结论:成功建立了一种检测新型冠状病毒SgN的荧光定量PCR方法，该方法的灵敏度、特异性和重复性均较好。

循环肿瘤细胞检测具有非侵入性采样、可动态反映肿瘤基因谱全貌、提供肿瘤患者疾病状态相关的实时信息等优势，在肿瘤临床诊疗中的应用价值受到越来越多关注。在精准医疗的时代背景下，为规范循环肿瘤细胞检测的合理应用，中华医学会检验医学分会分子诊断学组邀请多学科专家针对循环肿瘤细胞检测的临床应用、检测技术及质量管理中的关键问题进行讨论并推出相关共识。

目的 研究使用荧光探针法床边快速检测口腔黏膜脱落细胞标本亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因型的准确率和安全性.方法 选取2019年1月至2020年9月间就诊于十堰市太和医院心血管内科的门诊和住院高血压患者,患者均在实验室检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平,选取Hcy≥10μmol/L的高血压患者共482例,患者均采集口腔黏膜细胞及全血标本,分别用口腔黏膜脱落细胞荧光探针法及全血标本对比试剂检测上述标本MTHFR C677T基因型,若两者检测结果不一致则使用"金标准"Sanger测序法检测全血标本对MTHFR C677T基因型进行最终判定.比较两种检测方法的符合率并观察记录采集标本过程中发生不良事件的概率,评价荧光探针法检测患者口腔黏膜脱落细胞MTHFR C677T基因型的准确率和安全性.结果 482例高血压患者口腔黏膜脱落细胞标本和全血标本成功完成采集,且采样过程中患者未发生明显不良反应.荧光探针法和对比试剂检测MTHFR C677T基因总突变发生率为73.23％(353/482),两种方法检测MTHFR C677T基因纯合野生型(CC型)符合率为100.00％(95％CI:97.11～100.00),杂合突变型(CT型)符合率为99.14％(95％CI:96.91～99.76),纯合突变型(TT型)符合率为99.17％(95％CI:95.47～99.85),MTHFR C677T基因型总符合率为99.38％(95％CI:98.19～99.79),检测结果一致性Kappa值为0.9902.结论 采集口腔黏膜脱落细胞使用荧光探针法检测MTHFR C677T基因突变操作简便、创伤小,且快速、安全、准确.

研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对坐骨神经部分损伤(spared sciatic nerve injury,SNI)诱导的神经病理性疼痛模型大鼠血浆和脑透析液中的药代动力学和镇痛活性的影响,考察TMP的镇痛效应与其脑内的血药浓度的相关性.雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、SNI组和SNI+TMP组,采用von fray纤维丝机械刺激法和冷喷法评价大鼠机械痛敏和冷痛敏行为.另取Sham+TMP组和SNI+TMP组,分别采用大鼠颈总静脉插管和前扣带回脑区(ACC)植入微透析探针,按照 80 mg·kg-1 单次腹腔注射TMP,应用自动采血和脑内微透析(灌流速度 1.0 μL·min-1)采样系统,分别收集血液和脑细胞外液,连续收集 24 h.液相色谱分离采用HSS T3 C18 反相色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.5 μm),流动相为甲醇-水(含0.005%甲酸),流速0.25 mL·min-1,梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾离子源,扫描方式为多反应正离子监测模式.定量分析离子对分别为TMP m/z 137/122,阿司匹林m/z 179/137.利用DAS 2.11 软件计算药代动力学参数.TMP镇痛效应和冷痛敏抑制最佳时间均为药后 60 min.TMP在SNI大鼠血浆和脑细胞外液中Tmax 为 15、30 min,Cmax 为(2 866.43±135.39)、(1 462.14±197.38)μg·L-1,AUC0-t 为(241 463.30±28 070.31)、(213 115.62±32 570.07)μg·min·L-1,MRT0-t 为(353.13±47.73)、(172.16±12.72)min,CLz为 0.73、0.36 L·min·kg-1.TMP的镇痛效应与其疼痛敏感区ACC的血药浓度具有明显的相关性,说明该方法适用于大鼠血浆和脑内透析液中TMP的检测,准确可靠、灵敏度高,能够实现"自动采血-微透析/PK-PD"关联分析理论应用在神经病理性疼痛研究中.

目的·探索现场快速评估法(rapid on-side evaluation,ROSE)辅助超声引导下甲状腺细针穿刺(ultrasound-guided fine needle aspiration cytology,US-FNAC)的临床效果.方法·回顾性分析2019年1月—2022年12月于上海市浦东新区公利医院确诊的甲状腺结节患者资料(n=874).根据细胞学检测方法分为ROSE+液基薄层细胞学检测(thinprep cytologic test,TCT)组(n=469)和现场细胞涂片(cell smear,CS)+TCT组(n=405).ROSE+TCT组中,ROSE的组织细胞采样采用迪夫快速染色检测,穿刺直至标本满意;CS+TCT组采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)+巴氏液基细胞学染色检测.根据Bethesda报告系统(The Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology,TBSRTC)细胞学分类标准进行细胞学诊断,比较2种方法的样本细胞不满意度和临床效果.结果·ROSE+TCT组与CS+TCT组的标本不满意度分别为2.4%和14.1%,差异具有统计学意义(P=0.000).ROSE+TCT组的涂片细胞集中、结构清楚、易于观察.将ROSE+TCT组细胞学诊断结果为Ⅲ级及以上的样本制作为细胞蜡块,以提高后续诊断效率.CS+TCT组细胞涂片因细胞数少未能制作为细胞蜡块.ROSE+TCT组的穿刺次数与CS+TCT组的差异有统计学意义(P=0.011).结论·现场快速评估法辅助超声引导下甲状腺细针穿刺可现场评估标本的有效细胞数量,现场反馈穿刺医师,可满足病理医师实现准确诊断的细胞采集数量要求,减少穿刺次数和治疗时间,为临床医师的诊断和后续检查起到较好的辅助作用.

生物样本库是针对特定人群血液、体液、组织和亚细胞成分等生物样本(包含样本信息和来源人群相关信息)开展标准化收集、保藏和研究的机构[1-2].近年来,国内生物样本库建设蓬勃发展,相关制度、规范逐渐完善,为生物样本库的建设和运营提供了参考标准和技术规范.生物样本库工作涵盖生物样本的采集、运输、处理、存储、分发以及相关信息采集统计等,所有流程应依照标准作业程序(standard operating procedure,SOP)执行并根据质控结果持续改进.

目的:分析并对比基于体外核酸杂交捕获原理的HPV检测技术(careHPV)和实时荧光PCR HPV检测技术(PCR HPV)在新疆地区适龄妇女宫颈癌初级筛查中的应用效果.方法:纳入2018 年新疆塔城地区1943 例25～64 岁有性生活史的女性,收集宫颈脱落细胞标本行HPV检测(包括careHPV和PCR HPV),任一阳性者转阴道镜行病理学诊断.比较两种HPV检测技术的一致率,分析检测结果不一致HPV阳性者的HPV型别分布.以病理确诊的子宫颈上皮内瘤变2 级及以上(CIN2+)病变为金标准,比较care-HPV、PCR HPV(14 种)和PCR HPV(18 种)3 种初筛方法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果:针对14 种高危HPV型别,careHPV和PCR HPV的一致率为95.16%,Kappa值为0.715.careHPV和PCR HPV检测14 种高危型别均阳性妇女共126 例,其中HPV 16 型感染率最高,占18.25%(23 例);其次是HPV 51 型,占 12.70%(16 例);绝大多数是单一型别感染.在careHPV检测中,医生采样和自行采样组的高危型HPV阳性率分别为8.90%和9.83%,差异有统计学意义(P=0.006),而PCR HPV检测14 种高危型别阳性率在两组间差异无统计学意义(P=0.144).PCR HPV 检测的灵敏度最高,为88.89(95%CI为74.37～100),其次为careHPV,其灵敏度为 83.33(95%CI为 66.12～100);careHPV检测的特异度和阳性预测值最高,分别为91.79%和8.67%,PCR HPV检测的阴性预测值较高.结论:careHPV检测与PCR HPV检测一致率较高,在宫颈癌初级筛查方面,两种HPV检测方法均得到了很好的效果,且两种检测方法有其不同的优势,应根据不同地区的卫生资源,适当选择检测方法,运用于筛查及临床诊断中.

于2015年8月至2016年6月对迪沟采煤沉陷湖泊浮游植物进行采样调查,共鉴定出浮游植物8门10纲17目32科62属155种,其中绿藻门、硅藻门和蓝藻门种类总和占各时期浮游植物种类总数比例超过75%.调查期间主要优势种为小席藻(Phormidium tenu)、两栖颤藻(Oscillatoria amphibia)、肘状针杆藻(Synedra ulna)和尖尾蓝隐藻(Chroomonas acuta)等.浮游植物密度和生物量的变化范围分别是22.68×105~290.24×105cells/L和2.47~7.41 mg/L.浮游植物细胞密度的时间变化显著(F=15.48,P<0.05),其总体趋势为先降后升,生物量变化趋势与密度变化相似,蓝藻的细胞密度和生物量大多数时期占优势.Shannon-Wiener多样性指数(H′)呈现显著的空间差异,水系沟通提高了沉陷湖泊浮游植物多样性.冗余分析(RDA)表明,水温、透明度、总磷和硝酸盐氮是影响浮游植物群落结构的主要环境因子,水温是影响浮游植物时间变化的关键因子.迪沟采煤沉陷湖泊的水体呈现富营养状态,浮游植物群落结构有明显的富营养化特征,沉陷湖泊存在潜在的蓝藻水华风险.

目的 了解和掌握陕西省汉中市食品中食源性致病菌的污染状况,防止食源性疾病的发生,提高对食源性疾病的预警和控制能力.方法 2016年在全市4个监测点采样并检测5大类,共计281份.选取3家养鱼场、4家超市、3家农贸市场的样品进行了沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌、弯曲菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌的定性检测.结果 共检出致病菌83株,总阳性检出率29.54％.其中致病菌检出率依次为弯曲菌(74.29％),蜡样芽胞杆菌(46.67％),金黄色葡萄球菌(16.67％),沙门菌(11.2％),大肠埃希菌(10％),单核细胞增生李斯特菌(6.67％),霍乱弧菌(非致病性)(2.56％),创伤弧菌(0.64％);其他致病菌均为检出.结论 汉中市食品中存在不同程度的食源性致病菌污染,必须采取针对性措施加强食品安全工作,切实有效的预防和控制食源性疾病的发生;嗜盐性弧菌从内陆淡水动物性水产品养殖环节检出,可能对食物链产生的影响值得关注.