目的:对猪链球菌2型菌株98HAH33基因0267进行功能研究。方法:比较猪链球菌2型野生株98HAH33、突变株Δ0267及回复株CΔ0267在不同生长时期的生长速率，细菌黏附、全血杀伤及巨噬细胞吞噬试验比较对宿主的黏附和抗吞噬能力，仔猪试验比较在毒力方面的差异。结果:野生株、突变株及回复株生长速率一致；野生株对宿主细胞A549、Hep2、HBMEC的黏附率分别是突变株的2.59、4.87和3.08倍，回复株对宿主细胞A549、Hep2、HBMEC的黏附率分别是突变株的2.65、4.65和2.86倍；野生株、突变株和回复株1～3 h在全血中的存活率分别是36.91%、28.12%和41.61%，58.44%、44.06%和58.26%，93.02%、70.08%和95.85%；小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬试验结果显示RAW264.7吞噬野生株、突变株及回复株的菌量分别为2 767、5 322、2 567；仔猪竞争感染试验证明基因0267与猪链球菌2型98HAH33的毒力相关。结论:猪链球菌2型98HAH33基因0267与细菌黏附和抗吞噬相关，是一个新毒力因子。

目的 对乳钙咀嚼片进行细菌回复突变试验,评价其是否有潜在的致突变性,并探索乳钙咀嚼片中组氨酸含量对自发回复突变菌落数的影响.方法 采用鼠伤寒沙门菌突变型TA97a、TA98、TA100、TA102进行试验,用肝匀浆作为体外代谢活化系统(+/-s9),同时设空白对照组、溶剂对照组和阳性对照组.乳钙咀嚼片设50,10,2,0.4,0.08 mg/ml 5个剂量,按平板掺入法进行试验.另设1000,500,250,125,62.5,31.25 μg/ml 6个剂量的组氨酸对照组.结果 游离组氨酸在一定剂量范围内时,4种菌株自发回变菌落数随组氨酸剂量升高而增加,组氨酸剂量继续增高,回复突变菌落数降低.乳钙咀嚼片各剂量组在加与不加S9条件下各菌株回变菌落数均未超过溶剂对照组菌落数的2倍,未观察到剂量反应关系,Ames试验结果阴性.结论 在本试验剂量范围内,乳钙咀嚼片Ames试验结果为阴性,提示该受试物无致突变性,同时排除了组氨酸成分对乳钙咀嚼片Ames试验结果的影响.

本文根据国标方法系统地分析了云参的营养组分,并开展大鼠急性经口毒性试验和三项遗传毒性试验对云参进行食用安全性评价.结果表明,云参中蛋白质、脂肪和多糖的含量分别为9.190、3.700 mg/100g和12.100％,氨基酸总含量达5.238 g/100g,含有K、Ca等21种矿物元素,含量最高的K为8 120.000 0 mg/kg;含有维生素A、维生素C、维生素E和B族维生素4种维生素,其中B族维生素含量最高且种类丰富;苯醚甲环唑、井岗霉素、四聚乙醛、咪酰胺、噻呋酰胺、吡虫啉和烯酰吗啉7种农药残留以及沙门氏菌和金黄色葡萄球菌在云参中均未检出;云参对雌、雄大鼠的半数致死剂量(LD50)＞60.0 g/kg BW,按急性毒性剂量分级,属实际无毒;三项遗传毒性试验即细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验及小鼠精原细胞染色体畸变试验结果均为阴性.云参富含蛋白质、氨基酸、矿物元素和维生素(特别是B族维生素),农药残留和微生物指标均符合我国食品安全国家标准的规定,且在本实验条件下,未见明显毒性作用.

目的 评估益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)的毒理学安全性,为其应用提供依据.方法 通过大鼠急性经口毒性试验、细菌回复突变试验、小鼠红细胞微核试验、小鼠精母细胞染色体畸变试验及大鼠28d经口毒性试验研究益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)的安全性.结果 大鼠急性经口毒性试验结果 显示,益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)对大鼠的经口急性毒性LD50均大于15.00 g/(kg·BW),根据急性毒性分级标准属实际无毒.细菌回复突变试验、小鼠红细胞微核试验及小鼠精母细胞染色体畸变试验结果 均显示阴性.大鼠28d经口毒性试验结果表明,实验组大鼠体质量、摄食量、食物利用率、眼部状况、血液学指标、血液生化指标、脏器指数、大体及病理学检查结果 与对照组相比差异均无统计学意义.结论 益生菌粉(副干酪乳酪杆菌207-27)具有良好的毒理学安全性.

目的:对细菌回复突变试验(Ames试验)中的菌株鉴定方法进行比较分析,以期为试验菌株鉴定提供参考.方法:根据Ames试验相关的国家和行业标准、技术规范和指导原则要求,对试验菌株的组氨酸缺陷型鉴定、脂多糖屏障缺陷(rfa突变)鉴定、氨苄青霉素抗性(R因子)鉴定、四环素抗性(pAQ1质粒)鉴定和uvrB修复缺陷型(紫外线敏感性)鉴定方法进行了分析对比.结果:鉴定结果表明,TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535等5株菌株生长均需组氨酸,均具有rfa突变,除TA1535外均具有氨苄青霉素抗性,除TA102外均对紫外线敏感和均无四环素抗性.结论:虽然鉴定方法不同,但是判定标准和鉴定结果相同,各个实验室应规定好试验菌株鉴定的方法和频率,为Ames试验结果的真实、可靠提供根本保障.

目的 研制鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA102即用型标准菌株.方法 对高、低浓度鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA102的冻干菌株进行计数,测定了增菌3、5、7、18 h后冻干菌的 自发回变率,依据CNAS-GL003 2018《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》(CNAS-GL003)和GB 15193.4-2014《食品安全国家标准细菌回复突变试验》(GB 15193.4-2014),测定即用型标准菌株的均匀性、储藏和运输稳定性、自发回变率和诱变剂突变率.比较20株即用型标准菌株和新鲜菌株的 自发回变率和诱变剂突变率测试结果的标准偏差.结果 高浓度冻干样品浓度为107～108CFU/样品,低浓度样品浓度为105～106CFU/样品;增菌18h后 自发回变率的结果基本符合GB 15193.4-2014要求;4株即用型标准菌株的均匀性结果的F值分别为1.12、1.05、1.68、1.38,F＜F0 05(19,20),符合CNAS-GL003要求.4株冻干菌株在25 ℃ 5 d、4 ℃ 14d、-20 ℃ 6个月的储存条件,检测结果符合储存和运输稳定性要求.20株即用型冻干标准菌株的自发回变率较新鲜菌株标准偏差小.结论 本研究研制出适用于Ames试验的即用型标准菌株,其均匀性、储存和运输稳定性良好,自发回变的稳定性优于新鲜菌株.

目的:应用体外碱性彗星试验、体外胞质分裂阻滞微核细胞组学试验和细菌回复突变试验(Ames试验)评价三氯生(TCS)的体外遗传毒性.方法:采用TK6人淋巴母细胞进行体外彗星试验和体外微核试验,共设定5个剂量(3.5、8.8、17.5、26.3和35μmol/L)组.同时,应用鼠伤寒沙门氏菌TA98、TA100和DNA修复酶缺陷型YG7108(Ogt-/Ada-)菌株对TCS进行Ames试验,共设定8个剂量(0.000 5、0.001 67、0.005、0.016 7、0.05、0.167、0.5和1.67 μg/皿)组.结果:与对照组比较,彗星试验结果显示,TCS在各个剂量下均能引起TK6细胞的尾长、尾部DNA强度和尾矩的增加,差异均具有统计学意义(P均＜0.01),且尾部DNA强度呈现剂量效应(r=0.943,P=0.017);微核试验表明,TCS未引起TK6细胞微核率升高(P＞0.05);Ames试验结果表明TCS未引起TA98、TA100和YG7108菌株的回复突变菌落数增加(P＞0.05).结论:TCS主要引起细胞DNA损伤,但未对TK6细胞造成染色体损伤,对Ames试验菌株不具有致突变作用.

目的 建立细菌回复突变试验标准菌株的分子生物学质量控制(质控)方法.方法 使用分子生物学方法(16s rDNA、种属特异性鉴定PCR、组氨酸操纵子关键突变位点序列分析、凝胶电泳和多位点序列分析方法)鉴定细菌回复突变试验标准菌株,并与传统生物学特性的质控方法进行比对.结果 细菌回复突变试验标准菌株的生物学特性结果符合标准要求;16S rDNA序列比对为沙门菌,且种属特异性扩增结果为鼠伤寒沙门菌;标准菌株均具有组氨酸操纵子区原始构建的突变位点;脉冲场凝胶电泳带型均不一致,最低相似度为82％;多位点序列分析可分为ST19和ST3438两个ST型.结论 建立了细菌回复突变试验标准菌株的分子生物学质控方法,该方法具有操作性强和重复性好等特点,与传统生物学特征方法具有很好的一致性,特别是针对相应his基因突变位点的检测手段,确保了细菌回复突变试验标准菌株检测的遗传稳定性和准确性.

目的 通过试验观察黄芪的急性经口毒性、遗传毒性以及亚慢性毒性,为进一步开发利用黄芪提供了科学依据.方法 对黄芪进行急性经口毒性测定;通过细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验及小鼠精母细胞染色体畸变试验对其遗传毒性进行评价;对大鼠进行90 d经口毒性试验,通过血液学指标、血生化指标、尿常规指标、食物利用率及脏体比等指标对其亚慢性毒性进行评价.结果 黄芪的急性经口毒性LD5.＞62.0 g/kg BW,3项遗传毒性试验均为阴性,亚慢性毒性试验各项指标均为阴性.结论 黄芪在此次试验条件下未见急性毒性、遗传毒性以及亚慢性毒性.

目的 通过试验观察党参的急性经口毒性、遗传毒性以及亚慢性毒性,为进一步开发利用党参提供科学依据.方法 对党参进行急性经口毒性测定;通过细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验及小鼠精母细胞染色体畸变试验对其遗传毒性进行评价;对大鼠进行90d经口毒性试验,通过血液学指标、血生化指标、尿常规指标、食物利用率及脏体比等指标对其亚慢性毒性进行评价.结果 党参的急性经口毒性LD50＞ 40.0 g/kg BW,3项遗传毒性试验均为阴性,亚慢性毒性试验各项指标均为阴性.结论 党参在此次试验条件下未见急性毒性、遗传毒性以及亚慢性毒性.