本研究报道1例因双肺多发占位入院的患者，超声检查示甲状腺双侧叶实性结节，右侧叶囊实性结节；胸部计算机断层成像检查示甲状腺双叶低密度结节，双肺多发结节；结核感染T淋巴细胞斑点试验示抗原A(早期分泌抗原靶-6)孔斑点数为56个，抗原B(培养滤液蛋白10)孔斑点数为50个。行超声引导下甲状腺结节穿刺细针吸取细胞学检查，结合病理及临床病史，基本可诊断为肺结核合并甲状腺结核。经抗结核治疗，患者病情好转。本病例提示超声引导下细针吸取细胞学检查为甲状腺疾病的临床诊断提供了新思路，值得临床应用推广。

目的 建立一种快速便捷的单细胞核固定和荧光原位杂交(FISH)检测技术用于性别筛选,探究其可行性,同时分析植入前胚胎中非整倍体和嵌合体的发生情况.方法 解冻12位患者32枚胚胎,同时选择同期常规冻融胚胎移植周期23位患者51枚胚胎为囊胚培养对照组.激光打孔法活检卵裂期胚胎,每枚胚胎常规活检吸取2个卵裂球,活检后胚胎继续培养囊胚.改良吐温-20/HC1法游离和固定卵裂球细胞核,XY染色体计数探针和18号染色体计数探针同时孵育后荧光镜下观察结果.结果 32枚胚胎中,X、Y和18号染色体正常胚胎24枚,正常率75％;异常胚胎8枚,其中6例为嵌合体胚胎,嵌合体率18.8％.活检组与囊胚培养对照组的囊胚形成率和优质囊胚率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本实验所建立的改良单细胞核固定和FISH技术能够快速有效地对卵裂期胚胎进行性别选择,对解决性染色体异常和性连锁性疾病性别诊断的生育障碍有一定价值.

目的 应用全基因组扩增结合二代测序技术对废弃胚胎进行植入前遗传学筛查.方法 收集476个废弃胚胎,经继续培养后获得23个优质囊胚.根据Gardner囊胚分级法,对4BC级及以上的囊胚进行活检,在有部分滋养外胚层细胞孵出时用活检针吸取5～10个细胞,于全基因组扩增后进行二代测序,检测胚胎中有无染色体片段的缺失/重复以及染色体数目变异.结果 23个囊胚共吸取滋养外胚层细胞148个.进行单细胞全基因组扩增后,选取其中60个扩增产物进行高通量测序,结果显示有39个细胞染色体存在异常,来源于14个囊胚,即囊胚异常比率为60.87％(14/23).结论 应用全基因组扩增结合二代测序技术对废弃胚胎进行植入前遗传学筛查分析,可筛除染色体非整倍体及染色体结构异常的胚胎,对于改善高危人群试管助孕的效果和减少出生缺陷具有重要的意义.

未分化圆细胞肉瘤是一组异质性肿瘤性病变,新近的研究显示重现性CIC-DUX4融合基因是该类肿瘤的一大特征.该类肿瘤常发生于年轻人的肢体软组织,具有较强的侵袭性.细针吸取(FNA)细胞涂片技术结合免疫组织化学染色是未分化圆细胞肉瘤进一步精准基因分型的重要筛查方法.本文对该肿瘤的临床特征、FNA细胞学形态特征、病理诊断和鉴别诊断,以及CIC基因对肿瘤的调控机制作一综述.

肝脏肿瘤病死率高,在临床上有效区分良性和恶性肿瘤,分析肿瘤的转移性具有一定难度.目前依然无法排除恶性肿瘤过度手术或者误诊等现象,在手术前期对肝脏肿瘤进行准确的诊断是避免医疗误诊及事故的主要途径.细针抽吸细胞学检查是诊断恶性肿瘤的有效技术之一,常被用于诊断肝脏肿瘤中.调研表明国内外探讨细针吸取细胞学和组织学在肝细胞癌诊断中的应用研究相关报道较少.

目的 涎腺腺泡细胞癌(AcCC)是一种少见的低度涎腺上皮性恶性肿瘤,易误诊或漏诊.通过细针吸取细胞学(FNAC)检查中的标本采集并制作细胞块的方法,可以提高涎腺腺泡细胞癌的术前确诊率.方法 首先,采用持笔式细针穿刺技术获取足够的标本;其次,部分标本制作细胞涂片进行细胞学诊断,剩余标本采用蛋白乙醇凝固-甲醛固定法制作细胞块(CB)及石蜡切片,进行HE、PAS及免疫组化染色;最后,综合分析常规FNAC涂片、细胞块切片的形态学、PAS染色和免疫组化染色,完成病理诊断.结果 11例通过FNAC确诊为腺泡细胞癌的病例中,9例(3例FNAC怀疑腺泡细胞癌)进行了CB制作,通过细胞块切片HE、PAS及免疫组化染色,患者均确诊为涎腺腺泡细胞癌.患者术后病理切片,其组织学类型、免疫组织化学染色结果与细胞块相同.结论 细针穿刺取样并采用CB制作技术,能有效提高腺泡细胞癌的诊断准确率,并且,细胞块对组织分型及分类诊断接近术后病理诊断,有很高的应用价值.

目的 分析急性原发性闭角型青光眼(APACG)急性发作期房水蛋白表达差异.方法 病例对照研究.收集2016年10月至2017年6月在天津医科大学眼科医院拟手术治疗的APACG急性发作期合并白内障患者(APACG合并白内障组)与白内障患者(白内障组)各10例(10只眼).征得患者知情同意后,术中借助手术通道用1号针头接1 ml针筒进入前房中部吸取50μl房水,注入无菌收集管中,-80℃保存.通过非标记定量蛋白质组学质谱分析技术分析房水中提取的蛋白,采用Maxquant significances A的方法进行差异显著性检验,以P<0.05、差异倍数>2的标准筛选得到两组患者的差异蛋白,并将生物学大数据通过基因本体(GO)功能分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路显著性富集分析对两组患者房水差异蛋白的功能及调控的信号通路加以注解.结果 APACG合并白内障组男性3例,女性7例,年龄(68±6)岁;白内障组男性2例,女性8例,年龄(71±8)岁,两组性别分布及年龄差异均无统计学意义(均P>0.05).蛋白质组学分析显示与白内障组比,APACG合并白内障组房水中共检测到91个差异蛋白,包括50个上调蛋白(如膜联蛋白A1、波形蛋白、S100钙结合蛋白A8、白细胞介素6、C反应蛋白、层黏连蛋白 β2等)和41个下调蛋白(如角蛋白85、γ-晶状体蛋白D、突触结合蛋白5、脑信号蛋白4B、母系蛋白2、组织蛋白酶O、钙黏蛋白4、脑信号蛋白3B、血小板衍生生长因子D、转化生长因子β 等).GO分析显示两组房水中差异蛋白功能涉及诸多方面,其中膜联蛋白A1、CD163、S100钙结合蛋白A8、C反应蛋白、白细胞介素6参与炎性反应,钙黏蛋白4、层黏连蛋白 β2介导细胞黏附,母系蛋白2、波形蛋白、层黏连蛋白 β2等参与组织纤维化.KEGG显著性富集分析显示两组房水中差异蛋白主要参与磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路、转化生长因子β相关信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、Toll样受体信号通路、核因子-κB信号通路、黏附斑激酶信号通路和细胞外基质受体相互作用通路.结论 APACG急性发作期房水中膜联蛋白A1的表达显著上调,转化生长因子β、钙黏蛋白4和母系蛋白2等蛋白因子下调,房水中蛋白的改变可能与APACG急性发作有关.

目的 分析原发性开角型青光眼(POAG)患者房水的蛋白质表达变化,探寻与疾病发生相关的生物学标志及潜在治疗靶点.方法 采用回顾性病例-对照研究设计.纳入2016年10月至2017年12月由天津医科大学眼科医院收治的行白内障手术的年龄相关性白内障患者10例10眼作为年龄相关性白内障组,行青光眼联合白内障手术的POAG合并白内障患者10例10眼作为POAG合并白内障组.术中借助手术通道用1号针头接1 ml针筒进入前房中部吸取约100μl房水.通过非标记定量蛋白质组学质谱分析技术分析房水中提取的蛋白,采用Maxquant significances A的方法进行差异显著性检验,以P<0.05、差异倍数>2的标准筛选得到2个组患者的差异蛋白,并将生物大数据通过GO功能、KEGG显著性富集分析对差异蛋白的功能及调控的信号通路加以注解.结果 本次蛋白组学分析共检测到97个差异蛋白,其中包括48个上调蛋白和49个下调蛋白.GO分析显著差异蛋白功能涉及诸多方面,其中与炎症反应有关的有脂多糖结合蛋白(LBP)、CD163、C-反应蛋白(CRP)和膜联蛋白A1(ANXA1);与氧化还原有关的蛋白有谷胱甘肽S转移酶P(GSTP1)和硫氧还原蛋白(TXN);与细胞黏附运动有关:软骨寡聚基质蛋白(COMP)、桥粒胶蛋白(DSC2)和层连蛋白(LAMB2);与纤维化有关的有原胶原蛋白(PLOD1)和固生蛋白(TNC);与神经生长有关:颤蛋白(RELN)、脑信号蛋白(SEMA3F)和轴突导向因子(SEMA4B);与代谢相关的蛋白有丙酮酸激酶(PKM)和羧肽酶N亚型2(CPN2)等.KEGG分析表明NrF2/ERK信号通路、TGF-β/NF-κB信号通路表达在2个组细胞间存在差异.结论 POAG患者房水中GSTP1、TXN表达显著降低,可能通过调控NrF2/ERK1/2及TGF-β/NF-κB信号通路,调节细胞黏附性和活性以及细胞外基质表达来参与疾病的发展.GSTP1、TXN可能成为潜在生物学标志及治疗靶点.

目的 在人工助孕前预测某非梗阻性无精症(NOA)患者细针吸取(FNA)术后的镜检精子计数,以辅助临床工作人员评估实施辅助生殖治疗的预期效果,为该NOA患者男性不育治疗失败的风险评估提供参考依据.方法 收集379例NOA患者术前病例信息与临床指标,构建镜检精子计数的零膨胀负二项(ZINB)预测模型,并评价模型的拟合与预测效果.结果 年龄、睾丸容积、血清卵泡刺激素与睾酮水平是影响镜检精子计数的相关因素,其中零计数部分的OR值和95％CI为:年龄0.876 (0.824,0.932),睾丸容积0.882(0.810,0.962),卵泡刺激素1.179(1.121,1.241),负二项部分的RR值和95％CI为:睾酮1.027(1.004,1.052),卵泡刺激素0.969(0.950,0.990).模型评估结果提示ZINB模型相对于传统泊松和负二项模型具有更好的拟合优度与预测准确性.结论 随着年龄与睾丸容积增大、血清卵泡刺激素水平减小,患者更有机会成功获得精子;随着血清睾酮水平增高、卵泡刺激素水平减小,患者越有机会获取到精子密度较高的精液.基于ZINB模型对NOA患者FNA术后镜检精子计数的预测值可在一定程度上为患者提供辅助生殖治疗的风险参考.

目的:探讨重症社区获得性肺炎(CAP)患儿病原体分布及细菌耐药情况.方法:选取2017-2018年收治的重症CAP患儿450例作为研究对象.将1～<3岁120例纳入幼儿组,3～<6岁151例纳入学龄前组,≥6岁179例纳入学龄组.使用一次性吸痰管吸取口腔内痰液,器械通气的患儿经气管插入导管装置吸取痰液.利用分子生物学检查法来进行检测,以核酸阳性作为病毒标准;使用荧光定量PCR技术检测痰液标本中肺炎支原体;并给予静脉注射头孢呋辛钠、口服阿奇霉素干混悬、机械通气治疗.结果:450例患儿痰液中有389例检出病原体阳性,阳性率为86.44％,共检出632种病原体,其中细菌、病毒比例达到56.01％与35.60％.病毒、细菌、肺炎支原体(MP)、沙眼衣原体(CT)、真菌感染在幼儿组、学龄前组、学龄组分布率的差异比较有统计学意义(P<0.01),春季、夏季、秋季、冬季的病毒、细菌、MP、CT、真菌感染分布差异比较有统计学意义(P<0.01),各季节混合感染差异无统计学意义(P>0.05);流感嗜血杆菌对氧氟沙星耐药低.大肠埃希菌对亚胺培南、头孢克洛低耐药.肺炎链球菌对万古霉素、利奈唑胺、青霉素不耐药,对阿莫西林低耐药.金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺不耐药.结论:细菌是重症社区获得性肺炎患儿痰液中的主要病原体,幼儿病毒、细菌、MP、CT检出率较高,且细菌耐药情况严峻,推荐在病原检测及细菌耐药实验后根据相关数据使用针对性抗生素.