目的:明确肺高血压(PH)大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达的变化。方法:SPF级健康雄性SD大鼠16只，8周龄，体质量200~220 g，采用随机数字表法分为2组( n＝8)：对照组(C1组)和PH1组。采用皮下注射野百合碱的方法制备大鼠PH模型。模型制备开始后28 d时，测量大鼠平均肺动脉压力(mPAP)，计算Fulton指数，计算肺中小动脉中膜厚度百分比，计算肌化血管百分比，Western blot法检测肺组织TRAF6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT3)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)表达，计算p-STAT3/STAT3，免疫共沉淀法检测TRAF6与STAT3的相互作用。原代培养正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(C2组)和PH大鼠肺动脉平滑肌细胞(PH2组)于6孔板( n＝3)。采用qPCR法检测TRAF6 mRNA表达，Western blot法检测TRAF6、STAT3、p-STAT3和Cyclin D1表达。 结果:与C1组比较，PH1组大鼠mPAP、Fulton指数、肺中小动脉中膜厚度百分比及肌化血管百分比升高，肺组织TRAF6和Cyclin D1表达上调，p-STAT3/STAT3升高( P<0.05或0.01)，免疫共沉淀结果显示，TRAF6和STAT3相互作用。与C2组比较，PH2组TRAF6及其mRNA表达上调，Cyclin D1表达上调，p-STAT3/STAT3升高( P<0.05或0.01)。 结论:PH大鼠肺组织TRAF6表达上调，可能与促进STAT3活化，导致肺血管重构有关。

目的:探究急性胰腺炎（AP）患者血清三结构域35（TRIM35）和肿瘤坏死因子受体相关因子3（TRAF3）表达水平及其与病情程度和预后的相关性。方法:采用前瞻性研究的方法，选取青海红十字医院2020年7月至2022年9月AP患者93例（观察组），其中轻症急性胰腺炎（MAP）40例，中重症急性胰腺炎（MSAP）29例，重症急性胰腺炎（SAP）24例；另选取同期健康体检者40例作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测血清TRIM35和TRAF3水平。随访入院28 d后的生存状况。相关性分析采用Pearson法；采用多因素Logistic回归分析血清TRIM35和TRAF3与AP患者预后的关系；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清TRIM35和TRAF3对AP患者预后的评估价值。结果:观察组血清TRIM35和TRAF3水平明显高于健康对照组（3.76 ± 1.36比1.02 ± 0.19和5.37 ± 2.18比1.04 ± 0.16），差异有统计学意义（ P<0.01）。MSAP和SAP患者血清TRIM35和TRAF3水平明显高于MAP患者（4.11 ± 1.73和4.96 ± 1.47比2.79 ± 1.04、5.43 ± 2.15和7.01 ± 2.85比4.35 ± 1.79），SAP患者明显高于MSAP患者，差异有统计学意义（ P<0.05）。随访结果显示，死亡11例，存活82例。死亡患者血清TRIM35和TRAF3明显高于存活患者（4.94 ± 1.01比3.60 ± 1.67和7.08 ± 1.43比5.14 ± 2.57），差异有统计学意义（ P<0.05）。Pearson相关分析结果显示，AP患者血清TRIM35水平与血清TRAF3水平呈正相关（ r = 0.483， P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清TRIM35和TRAF3水平是影响AP患者预后的独立危险因素（ OR = 1.86和1.37，95% CI 1.12～3.09和1.02～1.82， P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清TRIM35联合TRAF3水平评估AP患者预后的曲线下面积明显大于血清TRIM35和TRAF3单独评估（0.85比0.81和0.81， Z = 0.03和0.04， P<0.05），血清TRIM35和TRAF3水平的最佳截断值为4.90和6.11。 结论:AP患者血清TRIM35和TRAF3水平明显升高，且与病情程度有关，血清TRIM35和TRAF3水平是影响AP患者预后的独立影响因素，两者联合检测评估AP患者的预后更有价值。

目的:了解血清补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白-3（CTRP-3）、D-二聚体与脑梗死溶栓后超急性期出血转化及脑损伤的相关性。方法:回顾性分析2016年8月至2019年8月六盘水市人民医院神经内、外科及重症监护病房行溶栓治疗的160例脑梗死患者临床资料。其中静脉溶栓后发生超急性期出血转化者29例（发生组）、无出血转化者131例（未发生组）；前循环脑梗死者132例，后循环脑梗死者28例。采用logistic回归分析法分析溶栓后超急性期发生出血转化的相关因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析溶栓后次日晨血清CTRP-3、D-二聚体对溶栓后超急性期发生出血转化的预测价值；采用Pearson相关系数法分析血清CTRP-3、D-二聚体水平与患者脑损伤的相关性。结果:发生组溶栓前美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、梗死灶直径≥5 cm占比、心房颤动占比、血清D-二聚体水平均高于未发生组[（18.6±2.2）比（14.0±2.1）分，69.0%（20/29）比39.7%（52/131），72.4%（21/29）比44.3%（58/131），（3.02±0.31）比（2.24±0.23）mg/L]，血清CTRP-3水平低于未发生组[（251.3±26.9）比（285.7±29.2）μg/L]，发病至治疗时间长于未发生组[（4.61±0.43）比（2.96±0.52）h]，差异均有统计学意义（ t=10.62， P<0.01；χ 2=8.22， P<0.01；χ 2=7.52， P<0.01； t=15.44， P<0.01； t=5.82， P<0.01； t=15.91， P<0.01）。logistic回归分析显示溶栓前NIHSS评分（ OR=1.69，95 %CI：1.02~2.15， P<0.01）、梗死灶直径>5 cm占比（ OR=3.73，95 %CI：1.96~5.10， P<0.01）、心房颤动（ OR=2.14，95 %CI：1.25~2.96， P<0.01）、发病至治疗时间（ OR=3.44，95 %CI：1.85~5.02， P<0.01）、血清D-二聚体（ OR=2.37，95 %CI：1.56~3.30， P<0.01）、血清CTRP-3（ OR=2.90，95 %CI：1.91~4.25， P<0.01）均为脑梗死溶栓后超急性期发生脑出血转化的危险因素。以CTRP-3为262.58 μg/L、D-二聚体为2.96 mg/L为界值，对脑梗死溶栓后超急性期发生出血转化预测的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.723、0.796，两者联合的AUC为0.823。28例前循环脑梗死患者的NIHSS评分为（18.7±2.1）分，Rankin修订量表（mRS）评分为（3.8±0.5）分，132例后循环脑梗死患者分别为（14.0±1.9）分和（3.2±0.6）分，前、后循环脑梗死患者CTRP3水平分别为（253.7±28.5）μg/L、（284.9±32.4）μg/L，D-二聚体水平分别为（3.1±0.4）mg/L、（2.2±0.3）mg/L，经Pearson相关性分析，血清CTRP-3水平与前循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈强负相关（ r=-0.72， P<0.01），与后循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈弱负相关（ r=-0.35， P<0.01），与脑损伤mRS评分呈强正相关（ r=0.80， P<0.01）；血清D-二聚体水平与前循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈强正相关（ r=0.88， P<0.01），与后循环脑梗死患者脑损伤NIHSS评分呈弱正相关（ r=0.24， P<0.01），与脑损伤mRS评分呈强负相关（ r=-0.76， P<0.01）。 结论:血清CTRP-3、D-二聚体联合检测对脑梗死溶栓后超急性期发生脑出血转化有较高的预测价值，并与患者脑损伤程度具有一定相关性。

背景:急性肺损伤(ALI)是重症急性胰腺炎(SAP)最常见的器官功能障碍.生长抑素类似物奥曲肽是临床上用于治疗急性胰腺炎的常见药物.目的:探讨奥曲肽对SAP小鼠肺损伤的保护机制.方法:第一部分实验小鼠随机分为4组,采用雨蛙肽联合脂多糖诱导SAP模型,造模后24 h、48 h、72 h处死小鼠.HE染色观察胰腺和肺组织病理学评分,检测血清淀粉酶、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,应用实时荧光定量PCR法检测肺组织中焦亡相关分子caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18和炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达,蛋白质印迹法检测肺组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白表达.第二部分实验小鼠随机分为对照组、SAP组和奥曲肽组,HE染色观察胰腺和肺组织病理学评分,检测血清淀粉酶和肺组织MPO活性,实时荧光定量PCR法检测肺组织中焦亡相关分子caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18和炎症因子IL-6、TNF-α、HMGB1 mRNA表达,免疫荧光染色法检测肺组织中NLRP3、caspase-1、GSDMD、ASC和IL-1β蛋白表达.结果:第一部分实验中,与对照组相比,SAP组小鼠胰腺和肺组织病理学评分、血清淀粉酶以及MPO活性均显著升高(P均<0.05),肺组织焦亡相关分子caspase-1、ASC、GSDMD、IL-1β、IL-18和炎症因子IL-6、TNF-α、HMGB1 mRNA表达显著升高(P均<0.05),NLRP3、caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白表达显著升高(P均<0.05),其中造模24 h组升高最为明显.第二部分实验中,与SAP组相比,奥曲肽组胰腺和肺组织病理学评分显著降低(P均<0.05);血清淀粉酶显著降低(P<0.05);肺组织焦亡相关分子caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18以及炎症因子IL-6、TNF-α、HMGB1 mRNA表达显著降低(P均<0.05);肺组织中NLRP3、caspase-1、GSDMD、ASC和IL-1β蛋白表达显著降低(P均<0.05).结论:细胞焦亡参与SAP小鼠肺损伤的发生和发展,奥曲肽可能通过抑制焦亡减轻SAP小鼠肺损伤.

目的 分析胃癌组织中磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-AKT)相关基因的表达及功能,寻找胃癌相关的潜在生物标志物.方法 在癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载胃癌数据,在分子特征数据库(MSigDB)下载PI3K-AKT相关基因集合,使用Wilcoxon检验和倍性变化筛选差异表达基因.通过R包"survival"进行生存分析.使用STRING数据库分析相关蛋白质交互作用(PPI)网络信息.基于Metascape对差异表达基因进行富集分析.应用CIBERSORT算法计算胃癌免疫细胞浸润水平.选取2023年3—5月在河北医科大学第四医院外三科行根治性手术的20例进展期胃癌患者标本,使用Western法检测肿瘤组织和癌旁组织中CXC基序受体4(CXCR4)的表达.结果 基于TCGA数据库,胃癌组织中上调基因10个,分别为溶质载体家族2成员1(SLC2A1)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、E2F转录因子1(E2F1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、tribbles假激酶3(TRIB3)、G蛋白亚基γ转导蛋白1(GNGT1)、成纤维细胞生长因子17(FGF17)、白细胞介素4(IL-4)和CXCR4.下调基因12个,分别为蛋白激酶Cβ型异构体(PRKCB)、双特异性蛋白磷酸酶3(DUSP3)、类钙结合蛋白39(CAB39L)、蛋白激酶AMP激活催化亚基α2(PRKAA2)、腺苷酸环化酶2(ADCY2)、丝裂原活化蛋白激酶10(MAPK10)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)、Toll通路中进化保守的信号传导中间体(ECSIT)、肽基脯氨酰顺/反异构酶-NIMA相互作用1(PIN1)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)、MAPK相互作用的丝氨酸/苏氨酸激酶2(MKNK2)和T细胞淋巴瘤侵袭转移诱导蛋白1(TIAM1).CXCR4基因的表达与患者的预后相关,103例高表达CXCR4患者的3和5年总生存率分别为33.8％和18.8％,303例低表达CXCR4患者的3和5年总生存率分别为51.3％和42.5％,差异有统计学意义(x2=16.60,P<0.001).对CXCR4进行PPI网络显示,其与其他蛋白具有广泛的相互作用.通路富集分析结果显示,在基因本体论(GO)数据库收录的通路中,CXCR4主要与细胞因子介导的信号通路、调节白细胞胞间黏附、正向调节细胞因子产生、调节肽基酪氨酸磷酸化、调节造血功能和调节防御反应密切相关.在京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库收录的通路中,CXCR4主要与趋化因子信号通路、Th17细胞分化、破骨细胞分化、人巨细胞病毒感染、细胞因子-细胞因子受体相互作用密切相关.免疫细胞浸润结果显示,胃癌组织中,CXCR4的表达与初始B细胞浸润呈正相关(r=0.24,P<0.001),与CD8+T细胞浸润也呈正相关(r=0.25,P<0.001).Western blot法检测显示,CXCR4蛋白在胃癌组织中的相对表达水平为1.52±0.27,明显高于其在癌旁组织中的相对表达水平(0.42±0.12;t=17.05,P<0.001).结论 PI3K-AKT相关基因CXCR4在胃癌组织中高表达,且与胃癌患者预后、多种信号通路及初始B细胞和CD8+T细胞浸润相关,是胃癌潜在的生物标志物.

目的 探讨九肽IVQKIKHCF激活肥大细胞引发类过敏反应的作用及潜在机制.方法 以人肥大细胞系LAD2为对象,以P物质为阳性对照,通过检测β-氨基己糖苷酶释放率、组胺释放量、炎症因子释放量来考察25、50、100 μmol/L IVQKIKHCF的激活作用;分别以敲低MrgprX2的LAD2细胞和Mas相关G蛋白偶联受体X2(MRGPRX2)高表达的人胚胎肾细胞系HEK293(MRGPRX2/HEK293细胞)为对象,通过检测β-氨基己糖苷酶释放率和细胞内钙离子浓度来评价IVQKIKHCF激活作用与MRGPRX2的相关性.结果 25、50、100 μmol/L的IVQKIKHCF可显著提高LAD2细胞的β-氨基己糖苷酶释放率和组胺释放量(P＜0.05),并不同程度地促进肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、巨噬细胞炎症蛋白1β、单核细胞趋化蛋白1的释放(P＜0.05);敲低MrgprX2后,25、50、100 μmol/L的IVQKIKHCF对LAD2细胞β-氨基己糖苷酶释放的促进作用被显著逆转(P＜0.05),且可升高MRGPRX2/HEK293细胞内的钙离子浓度.结论 九肽IVQKIKHCF可通过激活MRGPRX2而促进肥大细胞释放颗粒物质和炎症介质,从而引发类过敏反应.

探究补骨脂水提物对大鼠肝脏的损伤作用及其潜在机制.选取48只大鼠,随机分为4组:空白组、补骨脂低剂量组(BGZL,6.25 g·kg-1)、补骨脂中剂量组(BGZM,12.5 g·kg-1)和补骨脂高剂量组(BGZH,25 g·kg-1).给药周期为28 d,每天观察大鼠有无毒性反应和死亡情况.28 d后进行取材,计算大鼠体质量、肝脏器官系数和肝脑比,同时观察肝脏组织形态学变化并检测相关血清学生化指标.结果显示,与空白组相比,各补骨脂给药组大鼠体质量下降,肝脏器官系数和肝脑比升高,肝脏出现肝肿大病变;病理学检查发现,大鼠肝脏出现肝内胆管增生、炎症细胞浸润和肝细胞纤维化.肝功能生化指标结果显示,与空白组相比,BGZL组大鼠谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、α-谷胱甘肽S转移酶(α-glutathione S-transferase,α-GST)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)等指标显著升高(P<0.05);BGZM组、BGZH组大鼠ALT、TBA、α-GST、谷氨酰转移酶(γ-glutamyl transferase,γ-GT)、嘌呤核苷酸磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)、鸟氨酸甲酰基转移酶(ornithine car-bamoyltransferase,OCT)、精氨酸酶(arginase,ArgI)等指标显著升高(P<0.05).与空白组相比,各补骨脂给药组大鼠的胆酸盐外排泵(bile salt export pump,BSEP)、类法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)基因以及蛋白表达显著下降(P<0.05),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、核因子 κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7 alpha-hydroxylase,CYP7A1)基因以及蛋白表达显著升高(P<0.05).研究表明,补骨脂水提物对大鼠产生明显的中毒反应,呈现一定的量-毒关系,表明补骨脂水提物存在一定程度的肝损伤作用,可能是由于补骨脂影响肝脏胆汁酸分泌排泄与诱发炎症.

目的 探讨白蛋白紫杉醇与卡铂联合替雷利珠单抗治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的效果及对肿瘤标志物、无病生存期(disease-free survival,DFS)的影响.方法 回顾性分析 82 例晚期 NSCLC 患者的临床资料,对照组(n=40)给予白蛋白紫杉醇联合卡铂治疗,观察组(n=42)在对照组治疗的基础上给予替雷利珠单抗治疗,比较 2 组的临床疗效、血清相关因子[胃泌素释放肽前体(pro-gastrin-releasing peptide,ProGRP)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)]、肿瘤标志物[糖类抗原 125(carbohydrate antigen 125,CA125)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、细胞角蛋白 19 片段抗原 21-1(cytokeratin-19-fragment CYFRA21-1,CYFRA21-1)]、免疫功能、不良反应发生率、DFS 和总生存率.结果 观察组疾病缓解率(response rate,RR)高于对照组(73.81%vs.52.50%),P＜0.05.治疗后,2 组血清ProGRP、TNF-α、CA125、CEA、NSE和CYFRA21-1 水平均降低(P＜0.05);且观察组血清 ProGRP、TNF-α、CA125、CEA、NSE和CYFRA21-1 水平均显著低于对照组(P＜0.05);2 组表面抗原分化簇 3 受体(differentiation cluster 3 receptor,CD3+)、表面抗原分化簇 4 受体(differentiation cluster 4 receptor,CD4+)、CD4+/表面抗原分化簇 8 受体(differentiation cluster 8 receptor,CD8+)水平升高,CD8+水平降低(P＜0.05),且观察组 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著高于对照组,CD8+显著低于对照组(P＜0.05).2 组不良反应发生率比较差异无统计学意义.随访 6 个月,观察组复发(转移)率低于对照组(16.67%vs.37.50%),DFS长于对照组,总生存率高于对照组(80.95%vs.60.00%),P＜0.05.结论 白蛋白紫杉醇与卡铂联合替雷利珠单抗治疗晚期 NSCLC的效果显著,可抑制肿瘤新生血管形成,降低肿瘤标志物,提高免疫功能和延长 DFS.

目的:探讨风湿宁对风寒湿痹证胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型滑膜组织中Toll样受体4/核转录因子-κB (TLR4/NF-κB)信号通路的影响及相关的作用机制.方法:SPF级雌性Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,阳性药组(来氟米特片,2.33mg·kg-1),风湿宁低、中、高剂量组(9.12,18.24,36.48 g·kg-1),每组9只.除正常组外,其余各组大鼠采用风寒湿外感致病因素刺激,结合牛Ⅱ型胶原乳化剂诱导的方法,制备风寒湿痹证CIA大鼠模型.造模成功后,各组大鼠给予相应药物灌胃干预,每日1次,连续4周.观察药物对大鼠关节肿胀度,酶联免疫吸附测定法(ELISA)血清类风湿因子(RF),环瓜氨酶肽(ACPA),白细胞介素(IL)-1β,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)滑膜组织中TLR4,髓样分化因子88(MyD88),NF-κB酶抑制蛋白α(IκBα),NF-κB mRNA和蛋白表达的情况.结果:与正常组比较,模型组CIA大鼠模型的关节肿胀度明显升高,血清RF,ACPA,IL-1β,TNF-α含量显著升高,IL-10含量显著降低,滑膜组织中TLR4,MyD88,IκBα,NF-κB mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,风湿宁低、中、高剂量组可明显降低风寒湿痹证CIA大鼠模型的关节肿胀度与血清RF,ACPA,IL-1β,TNF-α含量,升高血清IL-10水平,下调滑膜组织中TLR4,MyD88,IκB-α,NF-κB mRNA与蛋白表达量(P<0.05,P<0.01).结论:风湿宁可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,从而抑制IL-1β,TNF-α的产生,起到治疗RA的作用,且其疗效与药物剂量有一定相关性.

目的:检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血B10细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)的表达,并分析其与RA患者临床和实验室指标的关系,探讨B10细胞在RA发病中的作用及其免疫调节功能缺陷的潜在机制.方法:选取RA患者25例(近半年未使用糖皮质激素、免疫抑制剂及生物制剂)和20名健康对照者(healthy controls,HC),利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测RANKL在健康对照组和RA患者外周血B10细胞及非B10细胞中的表达,分析表达RANKL的B10细胞比例与RA患者临床特征和实验室指标的相关性,体外刺激实验评价肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)对B10细胞表达RANKL的影响.数据分析采用独立样本t检验、Pearson和Spearman相关分析.结果:健康人外周血B10细胞能表达低水平RANKL,RA患者外周血表达RANKL的B10细胞比例较健康对照组显著升高(3.65％±1.59％ vs.2.25％±0.68％,P＜0.01).RA患者表达RANKL的B10细胞比例与关节压痛数、关节肿胀数及28-关节疾病活动度分值(disease activity score in 28 joints,DAS28)呈正相关(分别为r=0.479,P=0.035;r =0.519,P=0.008;r=0.526,P=0.019),与年龄、病程、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)及抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,A CPA)无显著相关性.TNF-α能促进B10细胞高表达RANKL(P＜0.01).结论:RA患者外周血表达RANKL的B10细胞比例升高,与关节肿痛数及疾病活动度正相关,提示RA患者B10细胞免疫调节功能受损的同时可能参与了RA的发病及骨破坏.