目的:探讨成人真皮成纤维细胞(HDF-a)中转化生长因子β 1(TGF-β 1)对Meox1的转录调控机制及细胞迁移功能的影响。 方法:(1)取HDF-a系细胞，用RPMI 1640完全培养基培养(下称常规培养)，将细胞分为TGF-β 1刺激组和空白对照组。TGF-β 1刺激组细胞加入10 μL质量浓度为1 mg/μL的TGF-β 1刺激，空白对照组加入等量磷酸盐缓冲液。培养72 h，取2组部分细胞进行转录组测序，筛选出2组差异表达比值≥2且 P<0.01的基因，对差异基因进行功能富集分析与京都基因和基因组百科全书代谢途径分析，记录Meox1每百万转录本(TPM)表达值，样本数为3；取2组部分细胞，采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法检测Meox1 mRNA表达，样本数为3。(2)取对数生长期HDF-a系细胞(细胞生长期下同)常规培养，分为空质粒组和Smad2过表达组、Smad3过表达组、Smad4过表达组，分别转染2 μg pcDNA3.1空质粒和各自搭载Smad2、Smad3、Smad4的pcDNA3.1质粒，转染6 h后常规培养48 h，实时荧光定量RT-PCR法检测各组细胞中Meox1 mRNA的表达，样本数为3。(3)取HDF-a系细胞常规培养，同实验(1)分组处理，常规培养72 h，采用染色质免疫共沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)法检测2组细胞中Smad2、Smad3和Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度，样本数为3。(4)取HDF-a系细胞常规培养，分为阴性干扰组、小干扰RNA(siRNA)-Smad2组、siRNA-Smad3组、siRNA-Smad4组和空质粒组、Smad2过表达组、Smad3过表达组、Smad4过表达组，分别转染50 μmol/L随机siRNA、siRNA-Smad2、siRNA-Smad3、siRNA-Smad4和2 μg pcDNA3.1空质粒及各自搭载Smad2、Smad3、Smad4的pcDNA3.1质粒，转染6 h后常规培养48 h，ChIP-qPCR法检测相应组别细胞中Smad2、Smad3和Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度，样本数为3。(5)取2个批次HDF-a系细胞常规培养，均分为阴性干扰组、siRNA-Meox1组、空质粒组、Meox1过表达组，分别转染50 μmol/L随机siRNA、siRNA-Meox1和2 μg pcDNA3.1空质粒、搭载Meox1的pcDNA3.1质粒，转染6 h后常规培养24 h，1个批次细胞进行划痕实验，划痕后24 h观察划痕宽度，与划痕后即刻对比划痕愈合宽度；1个批次细胞进行Transwell实验，常规培养24 h，计数迁移细胞，样本数为3。(6)2018年1月—2019年6月，陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院收治3例烧伤后8～12个月增生性瘢痕患者(男2例、女1例，年龄35～56岁)，取其术中切除的瘢痕组织和瘢痕边缘附带正常皮肤组织，行免疫组织化学染色，观察Meox1蛋白表达分布。对数据行单因素方差分析、独立样本 t检验。 结果:(1)培养72 h，2组细胞差异表达明显的基因共843个，涉及组织修复、细胞迁移、炎性细胞趋化诱导过程等功能以及肿瘤坏死因子、白细胞介素17、细胞外基质受体等潜在的信号通路；空白对照组细胞测序结果的Meox1 TPM表达值为45.9±1.9，显著低于TGF-β 1刺激组的163.1±29.5( t＝6.88， P<0.01)。培养72 h，空白对照组细胞Meox1 mRNA表达量为1.00±0.21，显著低于TGF-β 1刺激组的11.00±3.61( t＝4.79， P<0.01)。(2)培养48 h，Smad2过表达组、Smad3过表达组和Smad4过表达组细胞中Meox1 mRNA表达量分别为198.70±11.02、35.47±4.30、20.27±2.50，均显著高于空质粒组的1.03±0.19( t＝31.07、13.80、13.12， P<0.01)。(3)培养72 h，TGF-β 1刺激组细胞中Smad2、Smad3和Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度均显著高于空白对照组( t＝12.99、41.47、29.10， P<0.01)。(4)培养48 h，阴性干扰组细胞中Smad2蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.200 000±0.030 000)%，显著高于siRNA-Smad2组的(0.000 770±0.000 013)%( t＝11.67， P<0.01)；空质粒组细胞中Smad2蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.200 000±0.040 000)%，显著低于Smad2过表达组的(0.700 000±0.090 000)%( t＝8.85， P<0.01)。阴性干扰组细胞中Smad3蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.500 0±0.041 3)%，显著高于siRNA-Smad3组的(0.006 0±0.001 3)%( t＝17.79， P<0.01)；空质粒组细胞中Smad3蛋白在Meox1启动子上的富集度为(0.470 0±0.080 0)%，显著低于Smad3过表达组的(1.100 0±0.070 0)%( t＝9.93， P<0.01)。阴性干扰组细胞中Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度与siRNA-Smad4组相近( t＝2.11， P>0.05)，空质粒组细胞中Smad4蛋白在Meox1启动子上的富集度与Smad4过表达组相近( t＝0.60， P>0.05)。(5)划痕后24 h，siRNA-Meox1组细胞划痕愈合宽度较阴性干扰组窄，Meox1过表达组细胞划痕愈合宽度较空质粒组宽。培养24 h，阴性干扰组迁移细胞数显著多于siRNA-Meox1组( t＝9.12， P<0.01)，空质粒组迁移细胞数显著少于Meox1过表达组( t＝8.99， P<0.01)。(6)烧伤后增生性瘢痕患者瘢痕组织中Meox1蛋白表达明显高于正常皮肤组织。 结论:在HDF-a系细胞中，TGF-β 1通过Smad2/3转录调控Meox1表达，进而促进细胞迁移。

增生性瘢痕（HS）影响患者功能与美观，给患者带来沉重的心理负担，但其具体的分子生物学水平发病机制尚不明确，因此该病仍然是临床难防难治疾病之一。微小RNA（miR）是一类具有调节基因表达作用的单链内源性非编码RNA。miR在HS的成纤维细胞内的异常转录可影响下游信号通路或蛋白的转导与表达，对miR及其下游信号通路、蛋白的探究有助于深入了解瘢痕增生的发生和发展机制。该文总结并分析近年来miR与多种信号通路如何参与HS的形成与发展，并进一步概述miR与HS中靶基因之间的相互作用。

目的:观察尿道上皮细胞中微小RNA(miR)-155-5p对转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号通路的影响，从而参与创伤性尿道狭窄炎症和纤维化的调节。方法:将miR-155-5p mimics及miR-155-5p inhibitor转染到尿道上皮细胞SV-HUC-1中，转染24 h后使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测SV-HUC-1细胞中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平。qPCR和蛋白印记分别检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的mRNA和蛋白表达水平。组间分析采用单因素方差分析。结果:IL-1β、IL-6和TNF-α的水平在转染miR-155-5p mimics后增加(496.27±18.87比255.77±21.40， F＝213.184；931.93±78.50比494.90±30.81， F＝80.569；915.70±30.02比486.60±25.05， F＝361.323， P<0.01)，但在转染miR-155-5p inhibitor后下降(140.10±14.77比294.07±10.26， F＝219.855；257.63±33.75比495.47±29.66， F＝84.052；275.47±30.31比484.20±25.34， F＝83.746， P<0.01)。miR-155-5p mimics增加了SV-HUC-1细胞中VEGF、FN和Collagen Ⅳ的mRNA(1.87±0.08比0.96±0.07， F＝251.787；1.78±0.12比0.96±0.06， F＝116.780；2.04±0.12比0.98±0.06， F＝197.344)和蛋白质水平(1.55±0.05比0.98±0.12， F＝60.460；2.28±0.04比1.00±0.11， F＝391.095；1.97±0.06比0.99±0.06， F＝407.516)，但miR-155-5p inhibitor降低了SV-HUC-1细胞中VEGF、FN和Collagen Ⅳ的mRNA(0.47±0.06比0.99±0.07， F＝104.457；0.54±0.06比0.98±0.08， F＝58.767；0.39±0.03比0.96±0.07， F＝162.360)和蛋白质水平(0.35±0.03比0.98±0.09， F＝137.388；0.32±0.05比0.99±0.09， F＝127.047；0.43±0.05比0.98±0.06， F＝137.224， P<0.01)。转染miR-155-5p mimics后TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.42±0.07比1.01±0.05， F＝817.164；1.87±0.08比0.95±0.02， F＝399.340， P<0.01)和蛋白表达水平(1.56±0.13比0.99±0.05， F＝51.031；1.27±0.02比0.98±0.07， F＝48.519， P<0.05)升高，转染miR-155-5p inhibitor后下降mRNA水平(0.41±0.03比1.02±0.06， F＝249.053；0.38±0.05比1.00±0.04， F＝342.250)和蛋白水平(0.14±0.07比1.02±0.08， F＝194.139；0.72±0.03比1.02±0.09， F＝30.899， P<0.01)；而Smad7的mRNA水平(0.43±0.05比0.97±0.02， F＝301.655)和蛋白水平(0.20±0.03比0.95±0.04， F＝684.122)被miR-155-5p mimics下调并被miR-155-5p inhibitor上调(mRNA水平为2.16±0.07比0.97±0.07， F＝433.500；蛋白水平为1.40±0.09比0.98±0.07， F＝41.779， P<0.01)。 结论:miR-155-5p通过激活TGF-β/Smad信号通路，从而参与创伤性尿道狭窄炎症和纤维化的调节。

目的:观察尿道上皮细胞中BTB-CNC异体同源体1(BACH1)对转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的影响，从而参与微小RNA(miR)-155-5p诱导的炎症和纤维化的调节。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测BACH1敲低或过表达后SV-HUC-1细胞中的TGF-β信号通路TGF-β、信号转导分子7(Smad7)和信号转导分子3(Smad3)的信使RNA(mRNA)和蛋白水平。我们在转染了miR-155-5p的细胞中过表达了BACH1，酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β和IL-6水平，RT-qPCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的表达水平。采用单因素方差分析比较两组间差异。结果:TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.14±0.11比0.99±0.07， F＝238.581；1.78±0.06比0.96±0.08， F＝201.720， P<0.01)，和蛋白表达水平(1.36±0.08比1.0±0.08， F＝32.911；1.34±0.04比1.01±0.08， F＝39.361， P<0.05)在BACH1敲低后升高，在BACH1过表达后下降(mRNA水平分别为0.39±0.06比1.09±0.04， F＝246.369；0.56±0.09比1.04±0.11， F＝36.668；蛋白水平分别为0.31±0.12比1.00±0.07， F＝81.323；0.63±0.05比0.98±0.14， F＝16.026， P<0.01)，而Smad7的mRNA水平(0.50±0.07比1.01±0.06， F＝105.446)和蛋白水平(0.40±0.08比1.00±0.11， F＝58.835)被BACH1小干扰RNA(siRNA)下调， P<0.01，在BACH1过表达后上调(mRNA水平为1.67±0.11比1.05±0.09， F＝55.960；蛋白水平为1.80±0.16比0.99±0.10， F＝52.571， P<0.01)。由miR-155-5p mimics引起的IL-1β、IL-6和TNF-α水平的增加因BACH1过表达而减弱(497.60±16.85比287.83±14.89比310.30±13.77， F＝171.691；795.17±34.84比396.53±24.59比425.67±21.39， F＝195.307；764.43±27.05比401.67±23.06比454.9±24.76， F＝184.088， P<0.01)。由miR-155-5p mimics诱导的VEGF、FN和Collagen Ⅳ的上调也被BACH1过表达阻断(1.90±0.10比0.95±0.05比1.21±0.05， F＝111.524；2.03±0.11比0.98±0.09比1.11±0.07， F＝121.346；1.91±0.11比1.11±0.06比0.94±0.04， F＝151.621， P<0.01)。TGF-β/smad信号通路相关因子TGF-β、Smad3和Smad7被过表达miR-155-5p激活，但BACH1共表达后，TGF-β/smad信号通路活性受到抑制(2.18±0.06比0.97±0.06比0.92±0.11， F＝240.091；1.64±0.11比1.01±0.08比0.92±0.03， F＝67.813；0.41±0.06比1.00±0.06比0.89±0.08， F＝65.57， P<0.01)。 结论:BACH1抑制尿道上皮细胞中TGF-β信号通路的激活从而阻断miR-155-5p诱导的炎性反应。

目的:探究银杏叶提取物(GBE)调节转化生长因子β1(TGF-β1)/肝细胞生长因子(HGF)信号通路对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的影响.方法:采用单侧输尿管结扎术法构建UUO小鼠模型,造模成功后将小鼠随机分为模型组、厄沙贝坦组(20mg/kg)、GBE低、中、高剂量组(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg),每组10只;另取10只小鼠为假手术组(仅分离左侧输尿管但不结扎).检测肾功能指标:β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理变化;马森(Masson)染色观察肾脏组织纤维化情况;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1表达;Western blot检测肾脏组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、α-SMA、TGF-β1、细胞信号转导分子2(Smad2)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、HGF蛋白表达.结果:相比于假手术组,模型组小鼠肾脏组织肾小管腔扩张或萎缩,炎症细胞浸润,胶原纤维沉积明显,NAG、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6、肾纤维化水平、Col-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/Smad2表达明显升高,HGF蛋白表达明显下降(P＜0.05);相较于模型组,厄沙贝坦组和GBE低、中、高剂量组小鼠肾组织病理损伤减轻,胶原沉积纤维减少,NAG、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6、肾纤维化水平、Col-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/Smad2表达明显降低,HGF蛋白表达明显升高(P＜0.05),其中厄沙贝坦组和EG高剂量组改善最为显著.结论:GBE能减轻肾功能损伤,抑制炎症反应,改善UUO小鼠的肾纤维化,其作用机制可能与调节TGF-β1/HGF信号通路平衡有关.

目的 探讨镰形棘豆总黄酮对四氯化碳诱发的肝纤维化(HF)大鼠的作用,以及对肝转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路的影响.方法 将48只雄性大鼠随机分为正常组(腹腔注射花生油,灌胃给予0.9％NaCl)、模型组(腹腔注射40％CC14花生油溶液诱导HF模型+灌胃给予0.9％NaCl)、阳性对照组(HF模型+灌胃秋水仙碱0.2 mg·kg-1)和低、中、高剂量实验组(HF模型+分别灌胃镰形棘豆总黄酮提取物100、200、400 mg·kg-1),每组8只,连续4周.用苏木精-伊红(HE)、Masson染色方法观察组织病理变化;检测血清肝功能、肝纤维化水平;检测血清炎症因子水平,用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定肝中基因的表达水平.结果 模型组大鼠肝组织病理损伤严重,大量炎症因子和胶原纤维堆积,而其余给药组均有不同程度缓解.正常组、模型组、阳性对照组和低、中、高剂量实验组的谷丙转氨酶水平分别为(49.28±12.44)、(5 885.42±948.37)、(4 454.60±489.27)、(4 650.47±843.53)、(3 761.75±887.30)和(3 544.90±1 066.75)μg·L-1,谷草转氨酶水平分别为(186.90±46.89)、(5 936.23±793.81)、(3 971.37±780.28)、(4 360.30±863.35)、(3 943.10±439.47)和(3 971.38±631.08)μg·L-1,透明质酸水平分别为(45.08±17.16)、(104.32±36.06)、(66.83±20.09)、(70.30±21.07)、(60.00±9.68)和(59.02±10.73)μg·L-1,层粘连蛋白水平分别为(23.13±3.89)、(60.85±13.66)、(35.67±9.92)、(39.98±9.39)、(36.55±12.21)和(34.68±24.83)μg·L-1,Ⅲ型前胶原水平分别为(24.98±5.34)、(82.58±30.14)、(40.70±16.14)、(51.08±23.21)、(43.60±12.48)、(44.20±11.66)μg·L-1,白细胞介素(IL)-1β 水平分别为(37.63±1.24)、(46.10±3.23)、(39.22±2.36)、(41.33±0.93)、(40.25±2.04)和(39.18±2.23)pg·mL-1,肿瘤坏死因子-a 水平分别为(314.58±20.56)、(383.71±16.97)、(349.00±7.93)、(348.88±25.11)、(325.75±27.84)和(335.07±21.33)pg·mL-1,TGF-βl mRNA 相对表达水平分别为1.00±0.00、60.99±15.70、9.61±1.59、7.37±1.09、6.41±0.64 和6.87±1.09,Smad7 mRNA 相对表达水平分别为 1.00±0.00、0.34±0.05、0.21±0.03、0.35±0.02、0.38±0.02和0.42±0.03.模型组的上述指标与正常组比较,中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 镰形棘豆总黄酮对CC,4诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用,其机制可能与调节TGF-β/Smad通路有关.

目的 探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对糖尿病大鼠创面炎症反应和愈合的影响.方法 用卡波姆 980、吐温-80、甘油、超纯水、氢氧化钠配制基质软膏,加入双氢青蒿素、尼泊金乙酯搅拌均匀,即得双氢青蒿素软膏.50 只SPF级SD大鼠,采用链脲佐菌素腹腔注射法制作糖尿病大鼠模型,成功造模 44 只.用直径 2.0 cm圆形打孔器在大鼠背部制造全层皮肤缺损创面.用随机数表法将 36 个创面分为 4 组,每组9 个,分别外用 5%、10%、15%双氢青蒿素软膏及基质软膏(对照组),每天 1 次,连续 14 d.第 3、7 和14 天观察创面愈合情况,然后切取包含 0.2 cm创缘和创面组织,HE染色观察组织学变化,Masson染色观察胶原变化,ELISA法检测白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素 10(interleukin 10,IL-10)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量.另外 8 只随机分为 10%双氢青蒿素组和对照组,切取第7 天时的创面组织,高通量测序技术进行转录组测序,筛选两组间的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析.采用SPSS 27.0 统计软件对数据进行单因素方差分析.结果 不同浓度双氢青蒿素组的创面愈合率均优于对照组,10%双氢青蒿素组最明显(P＜0.05).与对照组比较,各双氢青蒿素组在第 7、14 天时炎症细胞浸润减少,胶原纤维面积增加(P＜0.05).各双氢青蒿素组IL-6、TNF-α表达明显低于对照组(P＜0.05);而IL-10 表达明显高于对照组(P＜0.05).差异基因火山图显示,10%双氢青蒿素组明显上调缺氧诱导因子 1α(hypoxia inducible factor 1α,Hif-1α)、Smad同源物 12(Smad homolog 12,Smad12)、β-防御素 4(β-defensin 4,Defb4)等抗炎、抗菌基因.GO功能富集分析显示,10%双氢青蒿素组在炎症反应、免疫反应和对细菌的防御反应等方面显著富集.KEGG富集分析显示,10%双氢青蒿素组在趋化因子信号通路和NOD样受体信号通路等方面显著富集.结论 双氢青蒿素可能通过减少炎症细胞浸润、调节炎症因子、抗炎抗菌基因、趋化因子信号通路和NOD样受体信号通路等来抑制过度的炎症反应,从而加速创面愈合.

目的 探讨蓬子菜总黄酮基于转化生长因子-β(TGF-β)/Smad3和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对动脉硬化内皮细胞的影响.方法 将24只成年雄兔随机分为正常组、模型组、蓬子菜总黄酮低剂量组、蓬子菜总黄酮高剂量组,每组6只.除正常组外,其余组兔建立下肢动脉硬化闭塞模型.建模成功后,蓬子菜总黄酮低、高剂量组分别给予45 mg/kg、180 mg/kg的蓬子菜总黄酮灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃.各组兔灌胃2周后处死,取右侧髂股动脉,分离培养内皮细胞.采用Western blot法检测内皮细胞中TGF-β1、Smad3、JNK及磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达情况,分别采用酶联免疫分析法、硝酸还原法、放射免疫法检测内皮细胞中炎症因子[C反应蛋白(CRP)、可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)含量.结果 模型组内皮细胞中 TGF-β1、Smad3、JNK、p-JNK 蛋白表达量及 CRP、sICAM-1、TNF-α、IL-1β、ET-1 含量均明显高于正常组(P均＜0.05),蓬子菜总黄酮各组上述各指标均明显低于模型组(P均＜0.05),且蓬子菜总黄酮高剂量组各指标均明显低于蓬子菜总黄酮低剂量组(P均＜0.05).模型组内皮细胞中NO含量明显低于正常组(P＜0.05),蓬子菜总黄酮各组NO含量均明显高于模型组(P均＜0.05),且蓬子菜总黄酮高剂量组明显高于蓬子菜总黄酮低剂量组(P＜0.05).结论 蓬子菜总黄酮可减轻炎症反应,保护血管内皮细胞,抑制平滑肌细胞增殖和细胞凋亡,改善血管内皮功能,机制可能与抑制TGF-β/Smad3和JNK信号通路有关.

旨在探讨鹿红益心颗粒对心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响及可能的作用机制.将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组以及鹿红益心颗粒低、中、高剂量组,每组12只.除对照组外,其余各组大鼠通过腹腔注射阿霉素(DOX)诱导心力衰竭模型.将鹿红益心颗粒溶于等量生理盐水,分别予以低、中、高剂量(2.8、5.6、11.2g·kg-1·d-1)进行灌胃,对照组和模型组均给予等量生理盐水,持续灌胃40 d.给药结束后,超声心动图测量左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS);测量大鼠体质量和心脏体质量,计算心脏体质量比;酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、生长刺激表达基因2蛋白(ST2)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察心肌组织病理形态;蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应分别检测心肌组织中IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、Smad3、Smad7、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)蛋白及其mRNA表达水平.结果显示,与对照组相比,模型组大鼠LVEF、LVFS、心脏体质量比值均显著下降(P＜0.05),IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、ST2、NT-proBNP、Gal-3、CK-MB 水平均显著上升(P＜0.05);HE染色可见心肌组织炎性改变;Masson染色显示心脏横截面面积及室腔面积减小且出现不同程度的心肌纤维化(P＜0.05);心肌组织中 IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、Smad3、α-SMA、COL-Ⅰ 蛋白及其 mRNA 表达均显著升高(P＜0.05),Smad7 蛋白及其mRNA表达显著降低(P＜0.01).与模型组相比,鹿红益心颗粒低、中、高剂量组大鼠LVEF、LVFS及心脏体质量比值均显著上升(P＜0.05),IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、ST2、NT-proBNP、Gal-3、CK-MB 水平均下显著下降(P＜0.05);HE 染色显示心肌组织炎性改变逐渐减轻;Masson染色显示心脏横截面面积及室腔面积增大,心肌纤维化面积减少(P＜0.05);心肌组织中IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、Smad3、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白及其mRNA表达均显著降低(P＜0.05),Smad7蛋白及其mRNA表达均显著升高(P＜0.05).综上所述,鹿红益心颗粒可能通过调节TGF-β1/Smads信号通路,抑制炎症相关蛋白表达,减少细胞外基质的沉积,缓解心肌纤维化,对心力衰竭的治疗具有重要价值.

目的 基于miR-29b/转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路探讨复方血栓通对糖尿病视网病变(DR)大鼠的的作用机制.方法 100只雄性SD大鼠,其中80只建立糖尿病模型,20只作为正常组.通过腹腔注射1％链脲佐菌素(STZ)成功建立糖尿病DR大鼠模型72只,按照随机数字表法将其分为模型组、二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组,每组各18只.二甲双胍组通过灌胃二甲双胍184 mg/kg,复方血栓通1组通过灌胃复方血栓通片100 mg/kg,复方血栓通2组通过灌胃复方血栓通片200 mg/kg,给药10周.正常组大鼠随意给予正常饮食和饮用水,而模型组、二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠喂以高脂肪饮食,直至第16周末.测定并比较各组大鼠血清胰岛素与血糖水平,比较各组大鼠血清细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6]、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛水平.实时荧光定量PCR与蛋白印迹法分别检测各组大鼠视网膜组织中miR-29b表达与TGF-β/Smad信号通路蛋白表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠血清胰岛素及30、60、90 min内血糖均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清胰岛素及30、60、90 min内血糖水平均显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与正常组相比,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与正常组相比,模型组血清中的血清SOD活性显著降低,丙二醛含量显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清SOD活性显著增加,丙二醛含量降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).正常组大鼠眼球视网膜视盘结构清晰,各层细胞排列整齐;模型组大鼠部分视网膜细胞水肿,层次模糊,排列稀疏紊乱,盘间隙呈空泡状,核染色质致密;二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠上述视网膜病变显著逆转.与正常组相比,模型组大鼠视网膜组织中miR-29b、TGF-β、p-Smad-3蛋白水平均显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠视网膜组织中miR-29b、TGF-β、p-Smad-3蛋白水平均显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组组间大鼠以上各指标比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 复方血栓通可显著改善大鼠视网膜病变通过抑制机体氧化应激与炎症因子水平,其机制可能与抑制miR-29b/TGF-β/Smad信号通路相关.