角膜缘微环境细胞(LNCs)是位于角膜缘、与角膜缘上皮干细胞(LESCs)紧密相连的一类间充质干细胞，能同时表达间充质标志物和多种胚胎干细胞标志物，对调节LESCs的静息、自我更新以及分化状态起着重要作用。近年研究表明，LNCs可通过胶原酶消化法、上皮块消化法、中性蛋白酶－胶原酶消化法以及组织块培养法进行体外分离培养，通过3D Matrigel共培养、Transwell共培养可研究LNCs与LESCs之间的相互作用关系。LNCs与LESCs可通过SDF-1/CXCR4、Notch、BMP、Wnt、Sonic Hedgehog、KIT/AKT等多种信号通路以及神经生长因子、角质形成细胞因子、胰岛素样生长因子等多种细胞因子相互作用。LNCs现已成为角膜上皮组织工程、眼表重建以及角膜再生等研究中的一大热点。本文就LNCs的研究背景、体外分离培养方法、与LESCs的相互作用机制及其应用前景等进行综述。

目的 探讨染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)技术在自然流产遗传因素分析中的应用,研究染色体异常与胚胎停育之间的关系.方法 收集流产组织样本94例,应用CytoScan Optima芯片进行检测,分析造成胚胎停育的遗传学病因.结果 成功检测91例样本,共检测出异常样本50例(54.95％),其中数目异常47例(94.00％),结构异常3例(6.00％).结论 染色体异常是导致胚胎停育的主要原因,CMA技术可对胚胎停育的遗传因素作出较为全面的评估,是一种可靠、稳定、高分辨的技术,可应用于临床流产的遗传学诊断,检测结果便于医生分析流产病因,对再生育风险评估提供指导.

背景:脊髓损伤不仅给患者的身体和心理造成严重的伤害,而且给社会带来沉重的经济负担.脊髓损伤最初由机械性创伤造成,随后引起继发性损伤,并且随着病情的发展,逐渐形成胶质瘢痕.目的:归纳总结脊髓损伤的病理进程和干细胞移植修复脊髓损伤的策略,以期为脊髓损伤的治疗提供最佳方案.方法:应用计算机检索PubMed和中国知网数据库,中文检索词为"干细胞移植,脊髓损伤",英文检索词为"stem cell,spinal cord injury,spinal cord,mesenchymal stem cells,neural stem cells,pathophysiology,clinical trial,primary injury,secondary injury",按照纳入和排除标准对文献进行筛选,最终纳入91篇文献进行综述分析.结果与结论:①干细胞移植修复脊髓损伤的策略分为外源性干细胞移植和内源性干细胞移植,将治疗脊髓损伤的外源性干细胞移植策略分为4种,分别是将干细胞注射到损伤部位、负载干细胞的生物材料移植、胚胎组织移植、工程神经网络组织或脊髓样组织的移植;②与单一的治疗方式相比,联合治疗可更有效促进神经再生和脊髓功能恢复;③调控损伤部位的微环境、磁刺激、电刺激、振荡电场刺激、过表达转录因子、康复治疗等可与干细胞移植进行联合治疗,从而促进脊髓功能的恢复.

目的 使用基因表达谱数据库(GEO)快速筛选出与胶质母细胞瘤的发生、发展过程密切相关的差异基因及信号通路.方法 利用生物信息学分析方法在GEO数据库中选择GSE31262数据集作为主要分析对象,包括5个成人神经干细胞个体样本和9个胶质母细胞瘤干细胞个体样本.从这些样本中筛选潜在的差异基因,使用京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路分析与基因本体论(GO)富集分析对筛选到的差异基因进行对比.在STRING在线数据库(https://string-db.org/)中,对筛选出来的差异表达基因所编码的蛋白,构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析网络,从而进一步筛选确定评分水平最高的前10位基因.通过癌症基因图谱(TCGA)、免疫细胞浸润分析及受试者工作特征(ROC)曲线分析等方法,分析差异基因与胶质母细胞瘤预后情况的相关性及其诊断价值.结果 通过筛选GSE31262数据集得到差异基因共2 692个(上调基因1 182个,下调基因1 510个).KEGG通路分析和GO富集分析的结果发现,上述差异基因主要涉及细胞器裂变、核分裂、胚胎器官发育、染色体分离、轴突生成、胶质细胞再生,主要参与细胞内吞作用、溶酶体、MAPK信号通路、细胞周期、人乳头瘤病毒感染、人类免疫缺陷病毒感染等过程.在PPI网络中筛选出的评分居前10位的关键差异基因分别为 CDK1、CCNB1、CCNA2、BUB1、KIF11、TOP2A、CCNB2、CHEK1、RRM2 和 ASPM,均与胶质母细胞瘤预后有关(P＜0.000 1).免疫细胞浸润分析表明,Th2细胞的浸润水平与10个基因的表达呈正相关,巨噬细胞与RRM2的表达呈负相关,与其他9个基因的表达呈正相关.ROC曲线分析显示,10个基因在胶质母细胞瘤中均有较高的诊断价值.结论 筛选得到的10个差异基因为CDK1、CCNB1、CCNA2、BUB1、KIF11、TOP2A、CCNB2、CHEK1、RRM2和ASPM,上述基因有望成为胶质母细胞瘤诊断及治疗的潜在分子靶点.

目的 研究小鼠颊黏膜成纤维细胞(BF)重编程形成诱导性多潜能干细胞(iPSC)的诱导方法 .方法应用携带有Oct4、Sox2和Klf4基因的逆转录病毒诱导小鼠BF重编程形成iPSC.观察iPSC克隆形态;进行碱性磷酸酶(ALP)染色、核型分析;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及细胞免疫荧光术检测内/外源性多能基因和干细胞标志物的表达;体外、体内分化实验检测iPSC多向分化潜能.结果 iPSC呈典型胚胎干细胞(ESC)样克隆生长,边界清晰;细胞ALP染色阳性,核型正常.内源性Dppa3、Nanog、Rex1、Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因表达量与ESC接近,未检测到外源性Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因表达.干细胞标志物Oct4、Sox2和Nanog表达呈阳性.在体外,iPSC可被诱导向成骨、成脂、成软骨方向分化;体内可分化成多种组织,形成畸胎瘤.结论 成功诱导BF重编程形成iPSC,为牙再生医学相关研究提供种子细胞来源.

目的:探索不同产地的博落回离体培养效果差异,为筛选最适博落回植株再生材料提供研究基础.方法:采用植物组织培养技术对博落回叶片组织进行愈伤诱导及胚状体分化,并对结果进行分析.结果:安徽祁门、湖南炎陵和湖南高坊产地分别在不同培养阶段与其他产地比诱导率和分化率最高.结论:湖南高坊和安徽祁门的愈伤组织和胚状体的诱导及分化能力优于其他产地的样本.因此,不同产地叶片离体培养效果差异显著.

干细胞移植能促使受损心肌再生和改善心功能,是治疗心血管疾病的理想选择.现在有多种干细胞用于研究,用于治疗心血管疾病的干细胞包括胚胎干细胞,诱导多能干细胞、骨髓间充质干细胞和心脏干细胞.不同类型的干细胞都有各自的优点和局限性.胚胎干细胞由于伦理问题应用受到限制.诱导多能干细胞具有胚胎样细胞的特性,增殖能力很强,但是有形成肿瘤的风险.间充质干细胞由于具有免疫调节特性可作为万能供体细胞.心脏干细胞比其它类型的干细胞能更好地表达心肌分化的标记物,改善心脏功能.本文对干细胞在心血管疾病研究及治疗中的最新进展进行综述.

周围神经的膜性结构包括神经外膜、神经束膜和神经内膜.其中,神经束膜包裹着神经内大小不等的神经纤维束.神经束膜又分内、外两层,外层为结缔组织,内层由多层扁平上皮样细胞构成,称神经束膜细胞.束膜细胞之间有紧密连接,每层上皮样细胞都有基膜[1].传统观点认为神经束膜上皮仅仅对进出神经的物质起屏障作用,而事实上,神经束膜上皮样细胞不是简单的上皮细胞.从发育上说,它起源于胚胎时期中枢的神经管结构;从功能上说,它对周围神经的发生以及损伤后的再生有重要的调控作用.自20世纪80年代起,神经束膜细胞的研究取得了较大的发展.转基因技术、基因敲除技术等新的研究方法的引入使得对神经束膜细胞的研究更加深入.目前常用的标记神经束膜细胞的分子有Nkx2.2a[2]、Glut-1[3],以及一些紧密连接蛋白[4]如claudin-1、claudin-3、ZO-1、occludin等.现就神经束膜细胞的发育及其在周围神经损伤修复中的作用作一综述.

目的 子宫内膜过薄影响胚胎着床,目前临床治疗方案有限.文中旨在观察电针干预及骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠薄型子宫内膜的修复作用,并初步探讨其可能的作用机制. 方法 50只健康清洁级成年雌性SD大鼠随机数字表法分为5组:正常组、模型组、BMSCs组、电针组、联合组,每组10只.除正常组外,其余4组大鼠均在动情期采用95％乙醇宫腔注射法建立薄型子宫内膜模型.正常组不予任何干预,模型组造模后注射PBS溶液,BMSCs组造模后注射干细胞悬液,电针组于造模次日起电针“关元”、“三阴交”、“子宫”,联合组除注射干细胞悬液外,造模后每日同样行电针干预.3个动情周期后的动情期获取子宫标本,HE染色观察子宫内膜组织形态变化,测量子宫内膜厚度及血管腺体数目,免疫组织化学法检测子宫内膜波形蛋白及角蛋白的表达,免疫印迹法观察LIF和HOXA10的表达. 结果 与正常组相比,模型组大鼠子宫内膜厚度显著变薄[(408.49±62.10) μm vs(283.33±63.34) μm,P＜0.01],而BMSCs组、电针组和联合组大鼠子宫内膜的厚度[(370.35±97.58) μm、(357.60±63.31) lμm、(382.29±86.44) μm]较模型组显著增加(P＜0.05).与正常组相比,模型组大鼠子宫内膜血管数量明显减少[(4.10±1.59)个vs(1.75±1.07)个,P＜0.01],BMSCs组、电针组和联合组[(3.65±0.84)个、(3.70±1.68)个、(3.85±1.67)个]较模型组明显增加(P＜0.01).模型组大鼠子宫内膜腺体数量较正常组显著下降[(2.43±0.90)个vs(0.98±0.62)个,P＜0.01],联合组大鼠内膜腺体数[(1.83±0.91)个]亦较模型组明显增多(P＜0.05).与正常组相比,模型组大鼠子宫内膜角蛋白MOD值明显减少(P＜0.01);而BMSCs组、电针组和联合组较模型组明显增加(P＜0.01).模型组子宫内膜中波形蛋白MOD值较正常组显著降低(P＜0.01);而BMSCs组、电针组和联合组较模型组增大(P＜0.01).模型组大鼠子宫内膜HOXA10、LIF蛋白表达水平较正常组显著降低(P＜0.01);BMSCs组、电针组和联合组较模型组显著升高(P＜0.05). 结论 BMSCs移植和电针干预均能不同程度的促进大鼠薄型子宫内膜的再生和修复,并且两种方法联合使用可使修复作用呈现出更好的趋势.

上皮-间质转化是一种正常的细胞生理发育过程,主要表现为上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型的细胞,上皮-间质转化在胚胎形成、组织再生、肿瘤进展等过程中发挥重要作用.最新研究表明,胶质母细胞瘤的发生发展(特别是侵袭迁移)中出现了类似上皮-间质转化(又称上皮-间质样转化)的转变过程.本文对上皮-间质样转化在胶质母细胞瘤中分子调控机制,包括主要信号通路及转录因子、miRNA、肿瘤干细胞、缺氧微环境、治疗抵抗等方面的最新进展进行综述.