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胡黄连提取物化学指示性成分与感官指标变化规律研究
编辑人员丨2024/2/3
目的 研究胡黄连PicrorhizaeRhizoma在提取环节提取物指示性成分含量与颜色、苦味等感官属性之间的变化关联规律,及在浓缩、干燥环节温度对上述3类指标的影响.方法 基于HPLC技术建立胡黄连5种指示性成分香草酸及胡黄连苷Ⅳ、Ⅲ Ⅱ、Ⅰ含量测定方法;使用色差仪对液体颜色以L*、a*、b*进行数值量化;采用健康志愿者人工评价法对苦度值进行量化表征.在水提环节对成分含量、颜色及苦度值进行相关性分析,并建立回归方程;在浓缩及干燥环节对上述3类指标受温度影响结果进行差异性分析.结果 在水提环节,L*和b*值与各成分含量呈显著负相关(P<0.05),a*值与各成分含量呈显著正相关(P<0.05),苦度值与香草酸及胡黄连苷Ⅲ、Ⅱ含量及成分综合评分呈显著正相关(P<0.05).在浓缩环节,60 ℃温度条件下与70、80 ℃相比指示性成分含量更高,并且溶液颜色的L*、b*值更小,a*值更高.在干燥环节,在各温度条件下各成分含量均有降低,温度对香草酸、胡黄连苷Ⅲ含量、L*、a*值影响显著(P<0.05),对其他成分含量及b*值无显著影响.苦度值在浓缩及干燥环节则不存在规律性变化.结论 分析揭示了在制剂前处理环节胡黄连5种指示性成分含量与颜色、苦味感官属性的内在关联规律及温度对3类指标的影响,表明化学指示性成分含量及感官属性受不同环节因素的影响,为胡黄连在制剂前处理环节化学成分与感官属性之间关联性应用的可行性提供指示.
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编辑人员丨2024/2/3
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UPLC结合化学计量学方法的胡黄连指纹图谱研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立胡黄连UPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以0.5%乙酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min,柱温为32℃,检测波长为295 nm,对25批以胡黄连名称出售的药材进行检测.通过相似度评价,结合聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),对不同批次胡黄连药材进行质量评价.ESI-Q-TOF/MS正、负2种离子模式扫描对其化学成分定性分析.结果 22批胡黄连药材与3批混淆品的指纹图谱明显不同.通过建立的22批胡黄连药材UPLC指纹图谱确证了16个共有峰,并对12个共有峰进行了明确化学成分指认;胡黄连药材的相似度为0.939~0.998;通过聚类分析可大致聚成3类;PCA结果支持了HCA结果;并结合偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)方法发现区分胡黄连样品的4个标志性化合物,指认出1、9、12号峰分别为藏黄连酚苷C、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅲ.结论 胡黄连的UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别为药材质量控制提供更全面的参考.
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编辑人员丨2023/8/6
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HPLC波长切换法同时测定金衣万应丸中多种有效成分的含量
编辑人员丨2023/8/6
目的: 建立同时测定金衣万应丸中儿茶素、表儿茶素、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅱ和胡黄连苷Ⅰ的HPLC 波长切换法.方法: 选用Agilent TC-C18(250 mm×4. 6 mm,5 μm)色谱柱; 流动相: 乙腈-0. 2%磷酸溶液(梯度洗脱); 流速0. 9 mL/min; 柱温30 ℃; 进样量20 μL.结果: 金衣万应丸中儿茶素、表儿茶素、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅱ和胡黄连苷Ⅰ分别在6. 12 ~ 122. 40、3. 78 ~ 75. 60、 3. 35~67. 00、12. 76 ~ 255. 20、8. 94 ~ 178. 80 μg /mL 浓度范围内线性关系良好,平均回收率(n = 6)分别为98. 40%(RSD = 1. 71%)、97. 56%(RSD= 1. 24%)、96. 94%(RSD = 0. 88%)、100. 19%(RSD = 0. 99%)、98. 97%(RSD = 1. 03%).结论: 该方法简便、准确、重复性好,可为金衣万应丸多指标质量评价提供参考.
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编辑人员丨2023/8/6
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蒙药地格达-4味汤指纹图谱及多指标成分定量分析研究
编辑人员丨2023/8/6
建立蒙药地格达-4味汤(DGD-4D) HPLC指纹图谱,测定秦皮乙素、栀子苷、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ含量,为DGD-4D质量控制提供依据.采用Diamonsil (2) C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,进样量10 μL,检测波长254 nm,柱温30℃.建立15批DGD-4D HPLC指纹图谱共有模式,并采用化学计量学分析方法分析隐藏信息.采用HPLC对DGD-4D色谱峰进行指认,并对特征峰进行定量分析.建立DGD-4D HPLC指纹图谱,指认出17个共有峰,相似度均在0.9以上.主成分分析和聚类分析将样品大致分为4类.并结合偏最小二乘判别分析方法发现区分DGD-4D样品的4个标志性化合物,其中指认出栀子苷(9号峰)、胡黄连苷Ⅰ(14号峰)和胡黄连苷Ⅱ(12号峰).定量分析条件通过方法学验证,平均加样回收率在95.91% ~97.31%.对HPLC指纹图谱和主要成分同时进行分析,方法快速、简便、重复性好,可作为蒙药地格达-4味汤质量控制有效方法之一.
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编辑人员丨2023/8/6
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胡黄连苷Ⅱ可通过增强自噬抑制炎症和氧化应激减轻大鼠肾缺血再灌注损伤
编辑人员丨2023/8/6
目的:探讨胡黄连苷Ⅱ能否通过增强自噬减轻大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)引起的炎症和氧化应激反应,从而减轻肾损伤.方法:将40只SD大鼠随机分成4组(n=10):假手术组(Sham)、肾缺血再灌注损伤组(RIRI组)、胡黄连苷Ⅱ处理组以及胡黄连苷Ⅱ+3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理组,再灌注24 h后分别检测各组大鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)评估肾功能,HE染色观察肾组织损伤程度,Western Blot分析自噬相关蛋白表达水平,RT-PCR检测各组大鼠TNF-α、IL-6水平评估炎症反应程度,检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)评估氧化应激.结果:与RIRI组相比,在胡黄连苷Ⅱ处理组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1表达较RIRI组显著增加,大鼠血清Cr和BUN均显著下降以及肾组织损伤明显减轻;联用3-MA处理后LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin-1水平较胡黄连苷Ⅱ处理组降低,Cr和BUN均显著升高以及肾组织损伤明显加重.此外,在胡黄连苷Ⅱ处理组TNF-α、IL-6水平较RIRI明显下降,而在加用3-MA处理后TNF-α、IL-6水平较胡黄连苷Ⅱ处理组显著升高.另外,与RIRI组相比,胡黄连苷Ⅱ处理后SOD明显升高,MDA明显下降;而联合3-MA处理后SOD明显下降,MDA明显升高.结论:胡黄连苷Ⅱ减轻大鼠肾缺血再灌注后炎症反应和氧化应激,从而减轻肾功能和肾组织的损伤,其机制可能是通过增强自噬.
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编辑人员丨2023/8/6
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HPLC法测定胡黄连苷Ⅰ的表观油水分配系数和平衡溶解度
编辑人员丨2023/8/6
目的:测定胡黄连苷Ⅰ在不同pH水溶液中的平衡溶解度及其在正辛醇-水系统中的油水分配系数.方法:采用摇瓶-高效液相色谱法测定胡黄连苷Ⅰ在水和不同pH缓冲液介质中的平衡溶解度及在正辛醇-水/缓冲液中的油水分配系数.色谱条件:采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.125%磷酸水溶液(22∶78),流速1.0 mL·min-1,检测波长275 nm,柱温30℃.结果:在37℃下,胡黄连苷Ⅰ在pH为1.2、2.0、5.0、6.8和7.4的缓冲液以及水中,平衡溶解度分别为42.32、39.76、46.85、52.69、55.00和75.23 g·L-1,表观油水分配系数平均值分别为0.265、0.253、-0.010、0.171、0.112和0.073.结论:本文建立的测定胡黄连苷Ⅰ的摇瓶-HPLC法简单可行.胡黄连苷Ⅰ是高溶解性及低渗透性的药物,水溶性好,脂溶性差,且pH能影响平衡溶解度和表观油水分配系数.
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编辑人员丨2023/8/6
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胡黄连中环烯醚萜苷类成分体外抗非酒精性脂肪性肝炎活性研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 探究胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ体外抗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的活性.方法 用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)诱导HepG2细胞24 h,建立体外NASH模型;MTT法检测胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对细胞活力的影响,并依此优选3个安全给药浓度(0.25、0.50、1.00 mg/mL)干预体外NASH模型;油红O染色法镜下观察细胞内脂滴的变化情况;试剂盒法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化.结果 胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对HepG2细胞的活力影响较小.FFA刺激24 h后,模型组与对照组比较,细胞内被染成明显的红色颗粒状脂滴,细胞培养上清液中SOD水平显著下降,MDA、TNF-α、IL-8水平显著上升,均有显著性差异(P<0.05、0.01).与模型组比较,不同浓度的胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ干预组,细胞内红色颗粒状脂滴减少,且以胡黄连苷Ⅱ最为明显;SOD水平显著上升,MDA、TNF-α、IL-8水平显著下降(P<0.05、0.01),且以胡黄连苷Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ较为明显,但没有显著的剂量相关性.结论 胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中胡黄连苷Ⅱ的体外抗NASH的活性较显著.
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编辑人员丨2023/8/6
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地格达-4味汤煎煮工艺考察
编辑人员丨2023/8/6
目的:优化地格达-4味汤(DGD-4D)的煎煮工艺,为蒙药汤剂煎煮规范化研究提供参考.方法:以DGD-4D为模型药,比较了不同蒙药煎煮方法;采用HPLC测定汤剂中指标成分秦皮乙素、栀子苷、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ的含量,以指标成分转移率和浸膏得率为指标,在单因素试验基础上,采用星点设计-效应面法优选DGD-4D的煎煮工艺,使用Design-Expert8.0.6软件进行回归模型拟合,建立工艺参数预测模型,并对最优工艺进行验证.结果:确定DGD-4D最佳煎煮条件为加40倍量水,煎煮17 min,煎煮1次;秦皮乙素、栀子苷、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ转移率以及浸膏得率分别为70.01%,94.11%,61.23%,92.32%,32.89%.结论:建立了DGD-4D的最佳煎煮方法,对于提高蒙药制剂水平以及保证其临床疗效的一致性具有重要参考意义.
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编辑人员丨2023/8/6
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UPLC-ESI-MS/MS法同时测定胡黄连中4种环烯醚萜
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定胡黄连Picrorrhiza scrophularaeflora Pennell中胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷的含有量.方法 胡黄连甲醇提取物的分析采用ACTUITY UPLC(R) BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相0.1%甲酸-乙腈;体积流量0.4 mL/min;柱温40℃.采用负离子模式,MRM多反应监测扫描模式.结果 胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷分别在15.28~ 305.60 ng/mL(r=0.999 3)、11.54~230.80 ng/mL (r=0.999 4)、11.20~ 224.00 ng/mL(r=0.999 5)、10.06~201.20 ng/mL (r=0.997 4)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101.62%、101.03%、102.37%、99.41%,RSD分别为1.30%、1.62%、2.45%、0.72%.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于胡黄连的质量控制.
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编辑人员丨2023/8/6
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双波长-UPLC法同时测定胡黄连中4个环烯醚萜类成分的含量
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立同时测定中药材胡黄连中环烯醚萜类成分胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ含量的双波长-UPLC法.方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温:28℃;流动相:乙腈-0.5%乙酸水溶液,梯度洗脱;流速:0.4 mL· min-1;检测波长分别为275 nm(胡黄连苷Ⅰ和Ⅱ)、295 nm(胡黄连苷Ⅲ和Ⅳ).结果:胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在质量浓度为4.44~88.72 μg· mL-1(r=1.000)、17.23~344.61 μg· mL-1(r=1.000)、1.97~39.35 μg· mL-1(r=1.000)、1.98~39.51 μg· mL-1(r=1.000)范围内与峰面积线性相关,平均回收率分别为102.4%、98.8%、96.5%、101.9%,RSD分别为1.0%、2.3%、1.1%、2.0%.结论:该方法操作简便、快速、重复性好、结果准确可靠,适用于胡黄连的质量控制.
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编辑人员丨2023/8/6
