目的 研究胡黄连PicrorhizaeRhizoma在提取环节提取物指示性成分含量与颜色、苦味等感官属性之间的变化关联规律,及在浓缩、干燥环节温度对上述3类指标的影响.方法 基于HPLC技术建立胡黄连5种指示性成分香草酸及胡黄连苷Ⅳ、Ⅲ Ⅱ、Ⅰ含量测定方法;使用色差仪对液体颜色以L*、a*、b*进行数值量化;采用健康志愿者人工评价法对苦度值进行量化表征.在水提环节对成分含量、颜色及苦度值进行相关性分析,并建立回归方程;在浓缩及干燥环节对上述3类指标受温度影响结果进行差异性分析.结果 在水提环节,L*和b*值与各成分含量呈显著负相关(P＜0.05),a*值与各成分含量呈显著正相关(P＜0.05),苦度值与香草酸及胡黄连苷Ⅲ、Ⅱ含量及成分综合评分呈显著正相关(P＜0.05).在浓缩环节,60 ℃温度条件下与70、80 ℃相比指示性成分含量更高,并且溶液颜色的L*、b*值更小,a*值更高.在干燥环节,在各温度条件下各成分含量均有降低,温度对香草酸、胡黄连苷Ⅲ含量、L*、a*值影响显著(P＜0.05),对其他成分含量及b*值无显著影响.苦度值在浓缩及干燥环节则不存在规律性变化.结论 分析揭示了在制剂前处理环节胡黄连5种指示性成分含量与颜色、苦味感官属性的内在关联规律及温度对3类指标的影响,表明化学指示性成分含量及感官属性受不同环节因素的影响,为胡黄连在制剂前处理环节化学成分与感官属性之间关联性应用的可行性提供指示.

目的 建立胡黄连UPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法 采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以0.5％乙酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min,柱温为32℃,检测波长为295 nm,对25批以胡黄连名称出售的药材进行检测.通过相似度评价,结合聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),对不同批次胡黄连药材进行质量评价.ESI-Q-TOF/MS正、负2种离子模式扫描对其化学成分定性分析.结果 22批胡黄连药材与3批混淆品的指纹图谱明显不同.通过建立的22批胡黄连药材UPLC指纹图谱确证了16个共有峰,并对12个共有峰进行了明确化学成分指认;胡黄连药材的相似度为0.939～0.998;通过聚类分析可大致聚成3类;PCA结果支持了HCA结果;并结合偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)方法发现区分胡黄连样品的4个标志性化合物,指认出1、9、12号峰分别为藏黄连酚苷C、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅲ.结论 胡黄连的UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别为药材质量控制提供更全面的参考.

目的: 建立同时测定金衣万应丸中儿茶素、表儿茶素、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅱ和胡黄连苷Ⅰ的HPLC 波长切换法.方法: 选用Agilent TC-C18(250 mm×4. 6 mm,5 μm)色谱柱; 流动相: 乙腈-0. 2％磷酸溶液(梯度洗脱); 流速0. 9 mL/min; 柱温30 ℃; 进样量20 μL.结果: 金衣万应丸中儿茶素、表儿茶素、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅱ和胡黄连苷Ⅰ分别在6. 12 ～ 122. 40、3. 78 ～ 75. 60、 3. 35～67. 00、12. 76 ～ 255. 20、8. 94 ～ 178. 80 μg /mL 浓度范围内线性关系良好,平均回收率(n = 6)分别为98. 40％(RSD = 1. 71％)、97. 56％(RSD= 1. 24％)、96. 94％(RSD = 0. 88％)、100. 19％(RSD = 0. 99％)、98. 97％(RSD = 1. 03％).结论: 该方法简便、准确、重复性好,可为金衣万应丸多指标质量评价提供参考.

目的 探究胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ体外抗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的活性.方法 用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)诱导HepG2细胞24 h,建立体外NASH模型;MTT法检测胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对细胞活力的影响,并依此优选3个安全给药浓度(0.25、0.50、1.00 mg/mL)干预体外NASH模型;油红O染色法镜下观察细胞内脂滴的变化情况;试剂盒法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化.结果 胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对HepG2细胞的活力影响较小.FFA刺激24 h后,模型组与对照组比较,细胞内被染成明显的红色颗粒状脂滴,细胞培养上清液中SOD水平显著下降,MDA、TNF-α、IL-8水平显著上升,均有显著性差异(P＜0.05、0.01).与模型组比较,不同浓度的胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ干预组,细胞内红色颗粒状脂滴减少,且以胡黄连苷Ⅱ最为明显;SOD水平显著上升,MDA、TNF-α、IL-8水平显著下降(P＜0.05、0.01),且以胡黄连苷Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ较为明显,但没有显著的剂量相关性.结论 胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中胡黄连苷Ⅱ的体外抗NASH的活性较显著.

目的 建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定胡黄连Picrorrhiza scrophularaeflora Pennell中胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷的含有量.方法 胡黄连甲醇提取物的分析采用ACTUITY UPLC(R) BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相0.1％甲酸-乙腈;体积流量0.4 mL/min;柱温40℃.采用负离子模式,MRM多反应监测扫描模式.结果 胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷分别在15.28～ 305.60 ng/mL(r=0.999 3)、11.54～230.80 ng/mL (r=0.999 4)、11.20～ 224.00 ng/mL(r=0.999 5)、10.06～201.20 ng/mL (r=0.997 4)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101.62％、101.03％、102.37％、99.41％,RSD分别为1.30％、1.62％、2.45％、0.72％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于胡黄连的质量控制.

目的:建立同时测定中药材胡黄连中环烯醚萜类成分胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ含量的双波长-UPLC法.方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温:28℃;流动相:乙腈-0.5％乙酸水溶液,梯度洗脱;流速:0.4 mL· min-1;检测波长分别为275 nm(胡黄连苷Ⅰ和Ⅱ)、295 nm(胡黄连苷Ⅲ和Ⅳ).结果:胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在质量浓度为4.44～88.72 μg· mL-1(r=1.000)、17.23～344.61 μg· mL-1(r=1.000)、1.97～39.35 μg· mL-1(r=1.000)、1.98～39.51 μg· mL-1(r=1.000)范围内与峰面积线性相关,平均回收率分别为102.4％、98.8％、96.5％、101.9％,RSD分别为1.0％、2.3％、1.1％、2.0％.结论:该方法操作简便、快速、重复性好、结果准确可靠,适用于胡黄连的质量控制.

目的 探讨胡黄连苷对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)损伤的保护作用及其最佳剂量.方法 体外培养SH-SY5Y细胞,建立OGD/R模型.于复氧复糖时分别加入胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ各5个浓度梯度(5、10、20、40、80μmol/L),优化最佳剂量.后续选用胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ各自的最佳剂量,进行2×2×2析因设计分组.光学显微镜下观察各组细胞形态学变化,采用CCK-8法检测细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞损伤程度,采用荧光探针DCFH-DA标记法检测细胞内活性氧(ROS)的水平,根据用药剂量及结果综合评价胡黄连苷的保护作用.结果 与对照组相比较,OGD/R后SH-SY5Y细胞的形态结构发生改变,模型组细胞变圆或肿胀,突起回缩或消失,细胞膜有皱褶或破损,细胞数目明显减少,漂浮细胞增多;与模型组相比较,胡黄连苷组细胞损伤得到不同程度的改善,细胞贴壁性增强.对各指标进行综合分析,从用药剂量最小化和疗效最大化的角度考虑,选用胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ的最佳剂量为20μmol/L进行后续实验.胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ联合应用组与其他组相比,细胞形态较完整,细胞贴壁性强,细胞存活率明显提高,LDH含量下降,细胞损伤明显减轻,ROS水平下降(F=82.9～186.3,P<0.01).结论 胡黄连苷可能通过抗氧化应激对SH-SY5Y细胞OGD/R损伤发挥神经保护作用,且胡黄连苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各20μmol/L时联合使用效果最好.

目的 建立高效液相色谱法同时测定胡黄连中6种环烯醚萜苷类成分含量的方法.方法 采用岛津LC-20A系统,InertSustain C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);以0.1％磷酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长:275 nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:25℃;进样量:10μL.结果 胡黄连中胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅳ、米内苷和6-0-反式-阿魏酰梓醇在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.999 5,平均加样回收率为99.81％～101.34％,RSD为0.21％～0.69％.结论 该测定方法准确度高、重复性好,具有良好的经济适用性,可为胡黄连的质量控制提供新的参考.

目的:建立HPLC一测多评法同时测定胡黄连提取物中的10个成分,验证该方法在胡黄连质量分析中应用的科学性及可行性.方法:采用Sepax HP-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.5％乙酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长294 nm,柱温30℃.以胡黄连苷Ⅱ为内参物,建立该成分与云杉苷、草夹竹桃苷、胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅳ、黄金树苷、米内苷、6-阿魏酸梓醇、藏黄连苷B的相对校正因子,采用相对校正因子计算各成分的质量分数,同时用外标法进行测定.比较2种测定结果,评价一测多评法在胡黄连中应用的准确性及科学性.结果:10个成分在测定范围内线性良好,平均回收率在98.0％～102.0％,相对校正因子耐用性良好;采用外标法和一测多评法测定3批胡黄连提取物中10个成分含量,2种测定方法结果无明显差别.结论:以胡黄连苷Ⅱ为内标同时测定其多种成分的一测多评法可用于定量分析.

目的 采用UPLC法对胡黄连药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的特征图谱和4个含量指标进行相关性研究,并考察化学成分的传递与差异.方法 以CORTECS UPLC T3(2.1 mm×100 mm,1.6μm)为色谱柱,以乙腈-0.1％磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为295 nm,流速为0.30 mL/min,进样体积为1μL,柱温为30℃.结果 以胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ为参照,建立了15批胡黄连药材、饮片、标准汤剂冻干粉与3批配方颗粒的多成分UPLC特征图谱,确定了18个共有特征峰,并指认了云杉苷、草夹竹桃苷、香草酸、香草乙酮、胡黄连苷Ⅳ、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅰ、6-阿魏酰梓醇9个成分.胡黄连药材、饮片、标准汤剂冻干粉、配方颗粒UPLC对照指纹图谱之间相似度计算结果均大于0.99.饮片到标准汤剂冻干粉的质量分数转移率为40.5％～62.4％,均值50.8％,在均值的±30％范围,未出现离散,传递性较好.结论 胡黄连药材、饮片、标准汤剂与配方颗粒的主要化学成分基本相同;UPLC特征图谱相关性良好.所建立质量评价模式能够反映胡黄连4种形态多成分的整体面貌,为胡黄连配方颗粒质量控制提供了依据.