目的:探讨1，25-二羟基维生素D3[1.25(OH) 2D 3]在肝脏脂质代谢中的作用，为阐明非酒精性脂肪肝发生的机制提供线索。 方法:将26只SD大鼠随机分为对照组（蛋氨酸胆碱充足饮食，MCS）、模型组（蛋氨酸胆碱缺乏饮食，MCD）和干预组[MCD+1.25(OH) 2D 3]，干预组每天按体质量给予3 ng/100 g的1.25(OH) 2D 3花生油溶液灌胃，对照组及模型组给予等体积花生油灌胃。4周后实验结束，下腔静脉取血检测丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST），留取肝组织观察肝脏形态和病理改变（油红O及HE染色），并检测肝脏总甘油三酯（TG）含量以及肝脏脂质代谢相关基因[脂肪酸转运蛋白36（FAT/CD36)、乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）] mRNA及其蛋白水平。组间均数比较采用单因素方差分析。 结果:油红O染色及HE染色均可见模型组大鼠肝组织大量脂滴空泡，干预组明显减轻。干预组肝脏TG含量（2.23±0.98）μmol/g较模型组（3.53±1.06）μmol/g明显降低（ F = 5.930， P = 0.035）。干预组ALT含量（35.99±9.54）U/L较模型组ALT含量（57.65±19.42）U/L显著下降（ F = 13.790， P = 0.034）；干预组AST含量（16.9±3.73）U/L较模型组AST含量（27.81±13.31）U/L显著下降（ F = 3.084， P = 0.046）。干预组大鼠FAT/CD36的mRNA和蛋白相对表达水平（mRNA：1.21±0.61，蛋白：1.54±0.75）较模型组表达水平（mRNA：2.31±0.81，蛋白：2.83±1.42）显著降低（mRNA： F = 8.370， P = 0.001；蛋白： F = 7.212， P = 0.043）；同样，ACC1的mRNA和蛋白相对表达水平（mRNA：0.89±0.54，蛋白：0.28±0.11）较模型组表达水平（mRNA：1.39±0.19，蛋白：0.47±0.24）显著降低（mRNA： F = 3.948， P = 0.036；蛋白： F = 10.933， P = 0.048）。 结论:1.25(OH) 2D 3减轻了MCD饮食大鼠的肝脏脂肪沉积，这可能通过抑制FAT/CD36以及ACC1的表达来实现。

目的:通过比较非低黏附与低黏附性胃癌在18F FDG-PET/CT摄取率、生化指标及糖脂代谢相关基因表达上的差异，探索低黏附性胃癌存在通过脂肪酸代谢获取能量的可能性。方法:回顾性分析2013年1月至2021年12月接受PET/CT检查的94例胃癌患者的临床资料，按照WHO分型分为低黏附性癌（n=28例）和非低黏附性癌（n=66例）。应用 SPSS 25.0统计软件进行数据分析，两组间计量资料采用t检验或Mann-Whitney U检验；计数资料采用χ2检验；采用Kaplan-Meier生存曲线分析两组间总生存期（OS）的差异。P<0.05表示差异有统计学意义。结果:低黏附癌组患者的标准化摄取平均值（SUVmean）显著低于非低黏附性癌组（P=0.049），载脂蛋白AI和高密度脂蛋白显著高于非低黏附组（P<0.05）；Kaplan-Meier曲线显示低黏附性癌组患者OS显著低于非低黏附组（P=0.016）。免疫组织化学染色（IHC）检测低黏附性癌组织中白细胞分化抗原36（CD36）和脂肪酸结合蛋白4（FABP4）表达显著高于非低黏附性癌（P<0.05），葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）显著低于非低黏附性癌（P=0.033）；单因素和多因素COX回归分析显示SUVmean值低（<3.25 vs. ≥3.25，HR=4.7，P=0.004）、低黏附性癌（HR=5.1，P=0.031）、分期晚（IV期，HR=10.7，P=0.010）和肿瘤体积大（≥5?cm vs. <5?cm, HR=5.6，P=0.041）是影响患者OS的独立危险因素。结论:低黏附性胃癌患者的糖代谢相关基因表达显著低于非低黏附性胃癌，脂代谢相关基因表达显著高于非低黏附性胃癌，同时伴随血清中载脂蛋白AI以及高密度脂蛋白显著升高。由于SUVmean显著低于非低黏附性癌，往往导致在PET/CT检查过程中不显影。

分化聚类 36(cluster of differentiation 36,CD36)是一种位于细胞表面的膜蛋白受体,可以结合并转运脂肪酸.内质网膜蛋白 4B(Nogo-B)在肝脏中调控脂肪酸代谢而影响肝癌的发展.目前并不清楚CD36 和Nogo-B的相互作用是否能够影响乳腺癌细胞的增殖和迁移.本研究在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞中同时干预CD36 与Nogo-B的表达来探索它们对细胞增殖与迁移的影响.结果表明在三阴性乳腺癌细胞中,单独抑制CD36 或Nogo-B的表达都能够抑制细胞的增殖与迁移;同时抑制CD36与Nogo-B的表达时,这种抑制效果更加明显,且Vimentin、B 细胞淋巴瘤-2(B-cell lympoma-2,BCL2)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达受到抑制.在小鼠移植瘤模型中,E0771 细胞转染CD36 或Nogo-B的siRNA后成瘤能力降低;同时敲减CD36 和Nogo-B时,肿瘤生长速度显著减慢.机制研究发现,抑制CD36 和Nogo-B表达能够抑制脂肪酸结合蛋白 4(fatty acid binding protein 4,FABP4)和脂肪酸转运蛋白 4(fatty acid transport protein 4,FATP4)mRNA的含量,同时CD36 和Nogo-B过表达刺激的细胞增殖被FABP4 的siRNA降低,预示着抑制乳腺癌细胞中CD36 与Nogo-B的表达可能通过抑制脂肪酸的吸收和转运而抑制细胞的生长和迁移.此外,抑制 CD36 与 Nogo-B 的表达可激活 P53-P21-Rb信号通路,参与抑制CD36 与Nogo-B表达而抑制的细胞增殖与迁移.本研究证明同时抑制CD36和Nogo-B的表达能够协同抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖和迁移,为临床抗三阴性乳腺癌药物的开发提供了新的靶点.

[背景]非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是代谢综合征的肝脏表现,可引起肝硬化甚至肝癌.规律运动是防治NAFLD的重要非药物干预策略,然而最佳康复训练处方尚未确定.[目的]对比中等强度持续运动(MICT)和高强度间歇运动(HIIT)对大鼠NAFLD的治疗效果并探讨其可能机制.[方法]4周龄雄性OLETF大鼠 36只,饲养至 20周龄时按照随机数字表分为模型安静组、模型MICT组和模型HIIT组(每组n=12),同期选取同品系年龄、性别相配匹的LETO大鼠 12只作为正常对照组.正常对照组和模型安静组在鼠笼内安静饲养,模型MICT组(60%最高跑速,60 min·d-1,5 d·周-1)和模型HIIT组(以 80%最高跑速强度运动 1 min后紧接着以 40%最高跑速强度运动1 min,依次交替重复10个循环,5 d·周-1)分别进行8周不同方式跑台训练.末次干预 48 h后进行肝脏组织病理学观察并测定肝脏甘油三酯和肝糖原含量、线粒体含量和功能以及代谢调控相关标志物(糖原合成、脂肪酸转运、脂肪从头合成、甘油三酯转运和分泌、巨噬细胞极化)的蛋白表达量.[结果]与模型安静组比较,模型MICT组和模型HIIT组血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝脏甘油三酯含量下降(P<0.05),柠檬酸合成酶(CS)活性和脂肪酸氧化(FAO)升高(P<0.05),Elovl脂肪酸延长酶 6(Elovl6)、CD11c、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达量下降(P<0.05),过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)和CD206蛋白表达量升高(P<0.05),肝脏糖原含量和糖原合酶(GS)蛋白表达量则无统计学意义(P>0.05);模型 MICT组脂肪酸转位酶(FAT/CD36)蛋白表达量下降(P<0.05);模型HIIT组载脂蛋白B100(ApoB100)表达量上调(P<0.05).[结论]长期MICT(60 min·d-1,5 d·周-1)和HIIT(20 min·d-1,5 d·周-1)干预对OLETF大鼠NAFLD具有相似的治疗效果,其机制与改善肝脏线粒体含量和功能、脂质代谢以及巨噬细胞极化状态有关.由于HIIT具有显著时效性,因此有望成为MICT的替代模式,对于NAFLD患者优化运动康复处方具有重要意义.

目的:探讨维甲酸受体应答基因2(retinoic acid receptor responder 2,Rarres2)编码的脂肪因子chemerin在饮食和运动调控小鼠骨骼肌脂质沉积中的作用.方法:将8周龄野生型(wild-type,WT)小鼠、脂肪特异性Rarres2 基因敲除(adipose-specific Rarres2 gene knockout,adipo-Rarres2-/-)小鼠和全身性Rarres2 基因敲除(global Rarres2 gene knockout,Rarres2-/-)小鼠随机分为普通饮食(normal diet,ND)组和高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,即ND+WT组、ND+adipo-Rarres2-/-组、ND+Rarres2-/-组、HFD+WT组、HFD+adipo-Rarres2-/-组和HFD+Rarres2-/-组,共6组,每组6只.此外,让HFD组的3种小鼠完成6周的中等强度跑台运动,即WT+运动(exercise,Exe)组、adipo-Rarres2-/-+Exe组和Rarres2-/-+Exe组,每组6只.油红O染色及骨骼肌内甘油三酯(triglyceride,TG)和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)定量检测小鼠骨骼肌脂质沉积;胰岛素耐量实验和葡萄糖耐量实验检测胰岛素敏感性;Western blot检测骨骼肌脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)、肉碱棕榈酰基转移酶1(carnitine palmitoyltransferase 1,CPT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体 α(peroxisome proliferator-activated receptor α,PPARα)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)和葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)的蛋白水平.结果:(1)ND+Rarres2-/-组和HFD+Rarres2-/-组小鼠骨骼肌脂质沉积均加重(P<0.01),胰岛素敏感性均下降(P<0.05);但HFD+adipo-Rarres2-/-组小鼠骨骼肌脂质沉积却显著减轻(P<0.01).(2)ND+Rarres2-/-组和HFD+Rarres2-/-组小鼠骨骼肌CPT1和GLUT4蛋白水平均下调(P<0.05),SCD1水平上调(仅HFD+Rarres2-/-组,P<0.01);但HFD+adipo-Rarres2-/-组小鼠骨骼肌CPT1和GLUT4蛋白水平上调(P<0.01),CD36蛋白水平下调(P<0.01).(3)HFD下,与WT+Exe组相比,adipo-Rarres2-/-+Exe组和Rarres2-/-+Exe组小鼠中运动对骨骼肌脂质沉积的抑制作用减弱,以Rarres2-/-+Exe组减弱得更显著.结论:编码chemerin的Rarres2基因敲除不仅影响HFD小鼠骨骼肌脂质沉积,而且还减弱运动对HFD小鼠骨骼肌脂质沉积的抑制作用;该作用与Rarres2基因敲除改变骨骼肌糖脂代谢相关蛋白水平有关.

目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)干预对妊娠期糖尿病(GDM)小鼠胎盘脂肪酸转运蛋白基因表达的影响.方法 选取36只小鼠,其中12只作为空白对照(CN),24只腹腔注射链脲霉素建立GDM模型;GDM小鼠随机分为两组:DHA补充组(GDM +DHA)以及对照组(GDM).于第10天～18天,给予GDM+ DHA组灌胃DHA 500 mg/kg,其他两组灌胃等量溶剂,记录各时期3组血糖及体重水平,第18天收集孕鼠血清及胎盘.羟胺法和比色法分别测定母鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力水平,RT-PCR法测定胎盘脂肪酸转运蛋白基因表达水平.结果 ①重复测量资料的方差分析结果显示:不同时间段的孕鼠体重、血糖差异有统计学意义(P＜0.05);不同组别孕鼠血糖差异有统计学意义(P＜0.05).②三组小鼠体内SOD活性、GSH-px活力水平差异有统计学意义(P＜0.05);与CN组比,GDM组小鼠体内SOD和GSH-px活力水平显著降低(P＜0.05),DHA干预后,小鼠体内SOD活力水平显著升高(P＜0.05).③与CN组比,GDM下调了过氧化物酶体增殖激活受体γ (PPARγ) mRNA表达,上调脂肪酸结合蛋白(FABP-pm)、脂肪酸转运蛋白-6(FATP-6 mRNA)表达,DHA干预后,下调了FABP-pm、FATP-6 mRNA的表达.结论 DHA干预可增加GDM小鼠体内SOD活力,下调胎盘FABP-pm、FATP-6 mRNA的表达.

目的 探讨脂肪酸移位酶FAT/CD36与长链脂肪酸的结合机制.方法 ELISA分析重组蛋白FAT/CD36与不同种类长链脂肪酸结合强弱机制,分子模拟对接进一步验证其结合机制并分析其可能作用位点.结果 ELISA证明重组蛋白FAT/CD36与不同种类长链脂肪酸均显示特异性结合,结合值大小为油酸＞棕榈酸＞棕榈油酸＞肉豆蔻酸＞硬脂酸.分子模拟对接进一步验证FAT/CD36受体蛋白主要与其中的油酸、棕榈酸及棕榈油酸结合,且结合位点位于FAT/CD36受体蛋白胞外结构的Arg183-Lys-Gly-Lys-Arg-Asn-Leu-Ser-Tyr238区域组成的活性口袋.结论 FAT/CD36作为细胞长链脂肪酸转运的主要受体,其可能主要转运油酸、棕榈酸和棕榈油酸这三种脂肪酸.

目的:观察气血并治方有效组分对缺氧/复氧(H/R)损伤心肌细胞一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)相关糖脂代谢通路的作用机制.方法:分离、提取、培养出生1 ～2dSD乳鼠原代心肌细胞,于常规倒置相差显微镜下观察原代心肌细胞形态及生长状态,经α-横纹肌辅肌动蛋白(α-actinin)免疫荧光染色鉴定为心肌细胞后,进行缺氧3h复氧2h处理制作H/R损伤模型,随机分为正常组(正常氧),模型组(缺氧/复氧),曲美他嗪组(缺氧/复氧+100 μmol·L-1盐酸曲美他嗪,TMZ),气血并治方有效组分组(缺氧/复氧+1 mmol·L-1气血并治方有效组分,CWQB).采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定AMPK代表性亚基心肌一磷酸腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα),及其糖代谢通路中葡萄糖转运体4(GLUT4),磷酸果糖激酶2(PFK2),脂肪酸代谢通路中乙酰辅酶A羧化酶(ACC2),脂肪酸移位酶(FAT/CD36)的基因及蛋白表达情况.结果:与正常组比较,模型组,TMZ组,CWQB组的AMPKα,GLUT4,PFK2基因和蛋白表达上调,ACC2,FAT/CD36基因和蛋白表达下调(P＜0.05);与模型组比较,TMZ组,CWQB组AMPKα,GLUT4,PFK2,ACC2,FAT/CD36基因和蛋白表达均上调(P＜0.05),其中TMZ组上调AMPKα,FAT/CD36基因和蛋白,上调GLUT4,PFK2基因表达的效果更为显著(P＜0.05).结论:气血并治方有效组分可以激活H/R损伤心肌细胞的AMPK信号通路,增强GLUT4介导的葡萄糖转送,PFK2参与的糖酵解,同时促进FAT/CD36调控的脂肪酸转运,上调ACC2抑制脂肪酸氧化过程,进而提高缺氧/复氧条件下心肌细胞对葡萄糖、脂肪酸等产能底物的利用能力,改善H/R损伤心肌细胞的能量代谢.

目的 探讨孕期和哺乳期高蛋白饮食对仔代生长及代谢相关指标的影响.方法 雌性小鼠受孕后随机分成对照组(C)和高蛋白饮食组(H).母鼠分娩后,每组再随机分成两组(C)组、(H)组,即CC、CH、HC和HH.孕18 d(GD18)剖杀孕鼠,测量仔鼠和胎盘重量以及胎盘组织中养分转运相关基因的mRNA和蛋白表达水平;从仔鼠出生后1 d (PND1)至PND21,每3d测量体质量,于PND21处死,测量血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平.结果 GD18时点,H组胎体比低于C组(P＜0.01);H组胎盘脂肪酸转运体CD36(P＜0.001)、胎盘葡萄糖转运体GLUT2(P=0.004)基因和GLUT2蛋白(P＜0.05)表达水平显著上调.哺乳期仔鼠体重HC组高于其他三组,但差异没有统计学意义(P＞0.05).PND14时点,CC组仔鼠血清TC水平显著高于HC组和HH组(P＜0.05);CC组仔鼠血清TG水平显著高于其他三组(P＜0.05).PND21时点,CC组仔鼠血清TC水平显著高于HC组和CH组(P＜0.05);CC组和HC组仔鼠血清TG水平显著高于CH组(P＜0.05).结论 孕期和哺乳期高蛋白饮食引起仔代TG、TC等血清学指标的改变;通过影响胎盘转运率,上调胎盘养分转运体的表达水平,从而影响仔代生长、代谢.

目的 分析共轭亚油酸(CLA)对肥胖糖尿病(db/db)小鼠糖脂代谢的改善效果.方法 将db/db小鼠分为生理盐水组和CLA实验组分别给予生理盐水,CLA混合物灌胃处理,测量小鼠体质量、饮食摄人量、饮水量、口服糖耐量、甘油三酯、总胆固醇水平.HE染色和油红“O”染色检测肝脏病理学改变和脂肪酸含量.荧光定量PCR和Western blot实验检测PPARα、PPARγ、CD36、CHREBP和SREBP-1c等基因表达水平.分别用共轭亚油酸和亚油酸处理HepG2细胞,检测PPARα、ACC、P-ACC、CD36等基因的表达.同时检测细胞上清中乙酰辅酶A的含量.结果 共轭亚油酸能减少db/db小鼠饮食、饮水量,有效减轻小鼠体重,降低血清甘油三酯和胆固醇水平(P＜0.05).共轭亚油酸能降低db/db小鼠空腹血糖,提高糖耐量.肝脏病理学切片和油红“O”染色结果表明共轭亚油酸能减少肝脏里脂滴累积,有效改善脂代谢.共轭亚油酸能上调肝脏组织PPARα表达(P＜0.05),下调CD36表达(P＜0.001).细胞实验显示共轭亚油酸能上调PPARα(P＜0.001),上调P-ACC,同时下调CD36(P＜0.01)表达;ELISA结果显示CLA处理后细胞中乙酰辅酶A显著上调(P＜0.01).结论 两种共轭亚油酸同分异构体混合物能够明显改善db/db小鼠糖脂代谢,降低空腹血糖,提高糖耐量,对肥胖、糖尿病动物模型产生综合性的治疗效果.其作用机制可能是通过上调转录因子PPARα,下调脂质转运蛋白CD36,促进ACC磷酸化来调控糖脂代谢.