目的:探讨慢性甲基苯丙胺(MA)成瘾患者静息态脑功能网络的拓扑特征。方法:利用静息态功能磁共振成像技术构建MA成瘾患者(MA成瘾组， n=46)及健康对照者(健康对照组， n=46)的脑功能网络。比较2组成员脑功能连接及网络拓扑属性的差异，分析组间有显著差异的拓扑属性与临床测量值之间的相关性。 结果:(1)脑功能连接：与健康对照组比较，MA成瘾组位于顶下小叶、中央后回、枕外侧皮层、腹内侧枕叶皮质、眶回、中央前回、梭形回、颞上回皮层及丘脑的多个脑区构成的子网络的功能连接增强，位于眶额回、中央前回、中央旁小叶、颞下回、梭形回、海马旁回、顶上小叶、中央后回、腹内侧枕叶、枕外侧皮层及杏仁核的多个脑区构成的子网络的功能连接减弱，差异均有统计学意义( P<0.05)。(2)网络拓扑属性：2组成员的脑功能网络均具有小世界属性，但是MA成瘾组小世界属性值、聚类系数、局部效率、模块化程度明显低于健康对照组，差异均具有统计学意义( P<0.05)。MA成瘾组的左侧额上回、右侧眶额回、右侧颞中回和左/右侧枕外侧皮层介数中心度均明显低于健康对照组，差异有统计学意义( P<0.05)。(3)相关性分析：MA成瘾组右侧颞中回的介数中心度与第1次服用MA的年龄呈正相关关系( r=0.327， P=0.028)；MA成瘾组的模块化程度与简明精神病评定量表中激活性因子分呈正相关关系( r=0.315， P=0.035)。 结论:慢性MA成瘾患者的大脑功能网络部分拓扑属性被破坏，且患者首次服用MA时年龄越小右侧颞中回的介数中心度越低；网络模块化程度越深，精神病性症状中的激活性症状越严重。

目的:利用静息态功能磁共振成像(functional magnetic resonance imaging，fMRI)技术探讨噪声性耳聋大鼠下丘和腹外侧眶皮层局部一致性与焦虑抑郁样行为的关系。方法:24只4周龄清洁级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为噪声组和对照组，每组12只。噪声组大鼠置于宽带强噪声122 dB环境中2 h诱导双侧严重听力损失，对照组大鼠置于安静环境中。通过听觉脑干反应检测两组大鼠的听力情况，采用旷场实验评估大鼠的焦虑抑郁样行为，采用fMRI评估大鼠脑内局部一致性的差异。采用SPM12处理fMRI数据，采用SPSS 22.0软件通过Pearson相关分析计算fMRI数据与行为学的相关性。结果:听觉脑干反应结果显示噪声组大鼠全频段听阈大于对照组大鼠[(85.417±6.463)dB，(20.083±8.853)dB， t＝46.168， P<0.001]，并在旷场实验中出现明显的焦虑抑郁样行为，即低活动水平。噪声组大鼠在旷场实验中的运动总距离[(39.912±5.696)m，(47.993±10.820)m， t＝-2.289， P＝0.032]、平均移动速度[(13.306±1.900)cm/s，(15.998±3.607)cm/s， t＝-2.290， P＝0.032]及站立次数[(13.333±5.960)次，(23.500±7.323)次， t＝-3.730， P＝0.001]均低于对照组。与对照组相比，噪声性耳聋大鼠下丘的局部一致性显著增强，而腹外侧眶皮层的局部一致性显著降低，且异常神经活动出现偏侧性。相关分析显示下丘的神经活动与噪声暴露大鼠在旷场中移动的总距离呈负相关( r＝-0.691， P＝0.013)，而腹外侧眶皮层的神经活动与旷场焦虑抑郁样行为并未发现明显的相关性。 结论:噪声性耳聋大鼠大脑下丘神经活动与焦虑抑郁样行为密切相关，有助于阐明耳聋大鼠出现中枢障碍的神经病理学基础。

目的 运用近红外脑功能成像(fNIRS)技术研究2 型糖尿病(T2DM)及非糖尿病人群在语素流畅性任务(VFT)下大脑血氧反应变化的差异,探究T2DM对患者认知障碍的影响和中枢神经系统的改变.方法 前瞻性纳入T2DM患者(试验组)和同期健康对照者(对照组),每组各13 例.收集两组受试者的一般资料及临床资料并分组进行比较.运用fNIRS技术检测两组受试者在VFT下大脑前额叶皮层氧合血红蛋白(HbO2)的变化趋势,分析两组被试任务状态下大脑皮层HbO2变化(ΔHbO2)的差异和大脑激活区域的不同.结果 试验组患者空腹血糖、餐后2h血糖、fNIRS检测时随机血糖均高于对照组,MoCA量表评分低于对照组(P＜0.05).在VFT测试期间的53 个通道中,试验组患者第37 通道(眶额叶)ΔHbO2 显著高于对照组(P =0.026).对照组两侧大脑半球均出现激活,而试验组仅分布在左侧背外侧前额叶.两组受试者全脑功能网络连接比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 T2DM患者相比健康人群眶额叶ΔHbO2 更高,存在显著的认知功能障碍;其右侧背外侧前额叶未出现激活,左侧激活范围变广可能因为大脑存在代偿反应.

目的:采用功能性近红外光谱技术(functional near-infrared spectroscopy,fNIRS)研究不同吞咽任务态前额叶皮质激活情况.方法:纳入19例健康成人受试,在fNIRS采集过程中执行经注射器小口吞咽及经吸管连续吞咽任务,分析不同吞咽任务态前额叶皮质激活模式的差异.结果:在执行小口吞咽任务态,前额叶中显著激活的亚区为双侧的腹外侧前额叶皮层(ventrolateral prefrontal,VLPFC);执行连续吞咽任务态,前额叶中显著激活的亚区为右侧腹外侧前额叶皮层、双侧的背外侧前额叶皮层(dorsolateral prefrontal cortex,DLPFC)及双侧的眶额皮层(orbitofrontal cortex,OFC),其中右侧额极区(fronto-polar prefrontal cortex,FPC)激活呈边缘化显著.经配对t检验发现,连续吞咽任务在右侧背外侧前额叶皮层(DLPFC)及右侧额极区(FPC)中的激活程度明显高于小口吞咽任务(P＜0.05).结论:fNIRS可应用于吞咽相关的脑功能研究.前额叶参与吞咽过程,并且以接近自然状态下的方式吞咽时会激活更多的前额叶亚区.

目的:通过对小鼠前扣带回皮层(ACC)立体定位注射重组腺相关病毒(rAAV2-retro)、荧光乳胶微球(retrobeads)及狂犬病毒(RV)的方法,比较三种逆行示踪工具对ACC上游传入核团的标记效果.方法:将rAAV2-retro-hSyn-EGFP-P2A-Cre-WPRE-hGH-PA、retrobeads(Red)等量混合后注射到小鼠 ACC 脑区,待病毒表达3 周后灌注取脑、切片观察.另外将 rAAV2/9-EF1α-DIO-oRVG(19G)、rAAV2/9-EF1α-DIO-NLS-mCherry-P2A-TVA-T2A-RVG、rAAV2/9-CaMKIIα-Cre混合后注射到小鼠ACC脑区,待病毒表达2周后将RV-EnvA-△G-EGFP注射到相同部位,1周后灌注取脑、切片观察,比较三种策略标记到ACC上游传入核团的神经元数量及形态.结果:retrobeads标记到的核团最多,但无法标记神经元形态及树突结构;RV标记到的核团数量次之,胞体及树突结构标记完整,而且可以观察到清晰的树突棘;rAAV2-retro标记到的核团最少,能标记到树突,但无法标记树突棘.三者在内侧眶皮层、腹侧眶皮层、视皮层等区域均能够高效标记.其中,RV在丘脑腹前核和腹外侧核标记效率高于其他两种工具.结论:ACC接受脑内的广泛投射,而三种逆行示踪剂在标记效率和标记神经元结构完整性上各有优劣.

目的:通过保留性神经损伤(SNI)模型,探索在神经病理性痛状态下,腹外侧眶皮层(VLO)中α1肾上腺素受体的表达变化情况,为其在皮层水平参与神经病理性痛的调控提供证据.方法:成年雄性SD大鼠随机分为SNI组和假手术组(sham组),2周后通过机械痛行为学检测神经病理性痛模型成功,采用免疫组织化学染色方法检测大鼠VLO内α1肾上腺素受体的分布变化,通过Western Blot方法检测VLO中α1肾上腺素受体的表达变化.结果:SNI术后2周,SD大鼠的机械性痛痛阈明显下降,稳定在4 g以下,提示模型制备成功.免疫组织化学染色结果显示:与假手术组相比,SNI组大鼠在术后2周对侧VLO内α1肾上腺素受体免疫阳性神经元表达显著增加(P＜0.001),而同侧无明显变化(P＞0.05).Western Blot结果显示:SNI组对侧VLO内α1肾上腺素受体表达水平相比假手术组亦显著增高(P＜0.01),而同侧无显著变化(P＞0.05).结论:SNI大鼠对侧VLO中α1肾上腺素受体表达出现显著上调,结合以往行为学结果提示其适应性升高可能参与内源性抗神经病理性痛效应.

目的:探讨外源性大麻素HU210在小鼠神经病理性疼痛诱发的焦虑、抑郁样行为中的作用,以及对腹外侧眶皮层(ventrolateral orbital cortex,VLO)锥体神经元自发电活动的影响.方法:利用腓总神经(common peroneal nerve,CPN)结扎建立神经病理性疼痛模型,采用von Frey纤毛检测小鼠的触诱发痛,利用高架十字迷宫、强迫游泳等行为学实验来评估小鼠的焦虑和抑郁样行为;利用在体细胞外记录方法记录VLO中锥体神经元自发放电活动的变化.结果:CPN结扎小鼠在术后第7天的50％ 缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)显著降低,并持续至术后第35天;CPN结扎后第13天,小鼠在高架十字迷宫中进入开臂次数百分比和开臂时间百分比显著减少,在强迫游泳测试中不动时间显著增加;CPN结扎后第13天,腹腔注射20μg/kg HU210或VLO定位注射200 ng HU210都能够显著增加小鼠在高架十字迷宫中进入开臂次数百分比和开臂时间百分比,并显著减少强迫游泳测试中的不动时间;CPN结扎后第13天,小鼠VLO中锥体神经元自发放电频率显著降低,腹腔注射20μg/kg HU210能够显著增加锥体神经元的自发放电频率.结论:外源性大麻素HU210可能通过增加VLO中锥体神经元的自发放电频率缓解神经病理性疼痛引起的焦虑和抑郁样行为.

目的·从脑区特异性和皮层分层特异性水平上精细解析小鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)-基底外侧杏仁核(basolateral amygdala,BLA)投射神经元亚群的解剖学结构.方法·给C57BL/6小鼠BLA注射逆向示踪腺相关病毒,21d后,心脏灌流并取脑.使用冰冻切片机制作mPFC的连续冠状切片,利用荧光显微镜采集脑片图像,选取具有mPFC分区代表性的脑片,统计分析病毒标记 的胞体在mPFC内不同亚区的分布情况.采用转基因小鼠(Tbr2-CreER::LSL-Flp小鼠和Rbp4-Cre小鼠)与重组酶(Flp和Cre)依赖的腺相关病毒,特异性地荧光标记小鼠mPFC第2层与第5层投射神经元的胞体及其在BLA内的投射轴突;病毒注射28 d后,同样灌流、取脑,收集BLA的连续冠状切片,免疫荧光染色标记后在荧光显微镜下采集脑片图像;通过测定BLA内不同区域投射轴突的荧光强度,比较mPFC第2层与第5层神经元在BLA投射轴突的空间分布情况.结果·荧光显微镜观察及定量分析结果表明:BLA投射神经元的胞体在包含前扣带回皮层和前边缘皮层的背内侧前额叶皮层(dorsal medial prefrontal cortex,dmPFC)中分布较多,且主要分布在第2层和第5层;而在包含内侧眶额叶皮层和下边缘皮层的腹内侧前额叶皮层(ventral medial prefrontal cortex,vmPFC)中分布较少,且没有观察到明显的分层现象.随后,在研究dmPFC的2个分层投射神经元的轴突分布时发现:在BLA内,第2层投射神经元的轴突分布较为均匀,而第5层投射神经元的轴突则更多分布在背侧区.结论·mPFC-BLA投射神经元的胞体分布具有脑区分布特异性和层分布特异性,dmPFC中不同层神经元的轴突投射在BLA也具有相应的脑区特异性.

目的采用扩散峰度成像(diffusion kurtosis imaging,DKI)研究正常眼压性青光眼(normal tension glaucoma,NTG)大脑皮层微结构的改变特点,为进一步阐明NTG脑皮质改变机制提供影像学依据.材料与方法分析2016年11月至2020年5月于我院就诊的37例NTG患者及37例健康志愿者的DKI数据,使用人类连接计划多模态分割图谱提取两组受试者44个脑区的各向异性分数(fractional anisotropy,FA)、平均峰度(mean kurtosis,MK)、辐射峰度(radial kurtosis,RK)及轴向峰度(axial kurtosis,AK),采用双样本t检验比较组间差异,并分析NTG患者出现异常脑区的DKI参数与视野平均缺损的相关性.结果NTG患者双侧岛叶及额叶岛盖、颞顶枕连接区、顶上小叶、顶下小叶、前扣带回及内侧前额叶、左侧背外侧前额叶、右侧视觉通路腹侧流、视觉外侧纹状体的颞中区(middle temporal comlpex,MT+区)及邻近视皮层、初级听皮层FA值减低(P<0.05,FDR校正);右侧MT+区及邻近视皮层MK值减低(P=0.0134,FDR校正);全脑RK值与正常对照受试者相比差异无统计学意义(P>0.05,FDR校正);双侧MT+区及邻近视皮层、岛叶和额叶岛盖、前扣带回和内侧前额叶、左侧顶下小叶、眶回及额极、右侧视觉通路腹侧流、颞顶枕连接区AK值减低(P<0.05,FDR校正).双侧颞顶枕连接区、右侧前扣带回和内侧前额叶的FA值与双眼视野平均缺损值呈正相关,左侧前扣带回及内侧前额叶、右侧视觉通路腹侧流的FA值与左眼视野平均缺损值呈正相关,右侧岛叶及额叶岛盖FA值与右眼视野平均缺损值呈正相关(P<0.05).结论DKI可以检测NTG患者视觉皮层、突显网络相关皮层、默认网络相关皮层、背侧注意网络相关皮层、颞顶枕连接区、初级听皮层及眶回及额极的多发微结构损伤,FA值可反映脑微结构损伤与患者疾病严重程度的关系,是潜在的生物学指标.

目的 研究腹外侧眶皮层(ventrolateral orbital cortex,VLO)内微量注射sirtuin1(SIRT1)抑制剂EX527对吗啡诱导大鼠条件位置偏爱(conditioned place preference,CPP)的影响,并探讨CREB/BDNF通路在其中的作用.方法 应用脑立体定位术在大鼠双侧VLO内留置导管,建立吗啡诱导大鼠CPP模型,d 1为适应,d 2～4为前测,d 5～14为条件性训练,隔日交替腹腔注射吗啡(1 mL·kg-1,5 mg·kg-1)或生理盐水(1 mL·kg-1),提前30 min通过导管向双侧VLO内微量注射 EX527(1 μL,5 g·L-1)或 DMSO(1％,1 μL),d 15为测试.CPP测试后立即取脑分离VLO组织,Western blot 检测 VLO 内 SIRT1、PSD95、c-fos、p-ERK、CREB、BDNF的表达水平.结果 吗啡诱导大鼠CPP模型构建成功,吗啡诱导 CPP 形成组 VLO 内 SIRT1、PSD95、c-fos、p-ERK、CREB蛋白表达明显增高(P＜0.05),BDNF蛋白表达明显降低(P＜0.05).VLO内微量注射EX527抑制了吗啡诱导大鼠CPP形成,且明显降低了 VLO内SIRT1、PSD95、c-fos、p-ERK、CREB、BDNF蛋白表达(P＜0.05).结论 EX527 通过抑制吗啡引起的VLO内SIRT1及其下游相关分子表达的增高,并进一步降低BDNF表达,从而有效阻断了大鼠吗啡成瘾的形成.