膀胱过度活动症(OAB)是中老年人群中常见的一种下尿路症状，主要发病机制被认为是由于膀胱感觉神经末梢的高敏感性病变。研究发现不同肠道细菌在OAB患者中的变化趋势具有显著差异，而且这些肠道细菌的代谢产物及其特殊的肠道微生态调节作用也与致敏膀胱的因素相关。本综述主要总结了OAB患者肠道中的双歧杆菌通过对尿路致病性大肠杆菌发挥抑菌作用以及粪杆菌属通过脑源性神经营养因子作用通路来影响OAB患者临床表现的最新研究进展，从而有望为通过调控日常膳食纤维摄入量或口服特定益生菌制剂来改善OAB症状的研究提供理论基础，也能够为膀胱过度活动症的临床治疗提供新思路。

目的:研究2016与2019年成人致泻性大肠埃希菌（DEC）食源性腹泻临床特征与耐药性，了解北京市强化食品卫生安全措施前后DEC流行病学变迁。方法:分别收集2016和2019年就诊于北京同仁医院肠道门诊食源性成人腹泻患者1 926例和1 482例，共计3 408例。患者信息录入“肠道预警系统”，便标本分离培养，菌落行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）鉴定。大肠埃希菌采用多重荧光定量PCR对5种致病型进行分型。药物敏感性试验根据2019美国临床与实验室标准化协会标准判读。分类资料采用χ2检验或者Fisher精确检验进行统计分析。结果:3 408份标本共检出DEC 581株，肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）占53.36%（310/581），未检出肠出血性大肠埃希菌（EHEC）。2016年DEC检出率为14.54%（280/1 926），肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）占DEC检出率的18.21%（51/280），ETEC占71.79%（173/280）。2019年DEC检出率为20.31%（301/1 482），EAEC占DEC检出率的41.23%（116/301），ETEC占48.93%（137/301）。与2016年比较，2019年EAEC检出率增高（χ2=29.26， P<0.001），其次为肠致病性大肠埃希菌（χ2=9.37， P=0.002），而ETEC检出率下降（χ2=15.43， P<0.001）。与其他致病型相比，EAEC易引起恶心（χ2=32.72， P<0.001），感染肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）的患者便标本易观察到红细胞（χ2=16.44， P=0.001）和白细胞（χ2=26.82， P<0.001）。EIEC对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦及庆大霉素耐药率分别为80.95%（17/21）、66.67%（14/21）和57.14%（12/21）。2019年出现3株耐碳青霉烯类抗菌药物的EAEC，其中2株厄他培南及亚胺培南均耐药，1株仅厄他培南耐药。全基因测序显示存在多种耐药机制，以耐药结节性细胞分化家族外排泵、青霉素结合位点突变及产新德里金属β内酰胺酶5（NDM-5）为主。 结论:成人食源性腹泻患者DEC检出率高，以ETEC为主。与2016年相比，2019年ETEC下降，EAEC检出率显著升高，并于2019年分离到耐碳青霉烯类抗菌药物的致泻性大肠埃希菌菌株，其生物学特征及流行病学变迁应引起临床重视。

目的 探讨尿感方对尿道致病性大肠杆菌毒力特征的影响.方法 以CFT073 作为实验菌株,通过细菌生长培养,观察尿感方含药尿液对CFT073 生长的影响.分别采用体外持留模型、微孔板法、平板法、ELISA法和RT-PCR法检测尿感方含药尿液对 CFT073 持留能力、生物膜形成、泳动能力、内毒素释放水平、侵袭力和毒力相关基因(fur、chuA、iha、fyuA、glt S、glt P、fimH和Lex A)的影响.结果 与未经干预的CFT073 比较,经空白尿液干预后的CFT073 生长能力、持留能力、生物膜形成、泳动能力、侵袭力、内毒素释放水平和毒力相关基因mRNA表达均无明显差异(P＞0.05);与经90%空白尿液干预后的CFT073 比较,经90%尿感方含药尿液干预后的CFT073 生长受到抑制(P＜0.05);与经60%空白尿液干预后的CFT073 比较,经60%尿感方含药尿液干预后的CFT073 持留能力、生物膜形成、泳动能力、侵袭力和内毒素释放水平降低(P＜0.05,P＜0.01),毒力相关基因fur、chuA、iha、fyuA、glt S、glt P、fimH、Lex A mRNA表达下调(P＜0.05,P＜0.01).结论 尿感方可降低CFT073 的持留能力、泳动能力和侵袭力,抑制生物膜的形成和内毒素的释放,下调毒力相关基因fur、chuA、iha、fyuA、glt S、glt P、fimH、Lex A mRNA表达,影响CFT073 的毒力特征.

[目的]了解2018-2023年上海市普陀区儿童感染性腹泻病的病原谱和分子特征,为儿童感染性腹泻防控提供科学依据.[方法]收集2018年1月—2023年12月上海市普陀区儿童腹泻病监测哨点医院就诊病例的粪便标本,通过分离培养11种细菌和实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测5种病毒.使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)标准分型法分析部分阳性菌株的分子分型;采用逆转录PCR方法扩增部分诺如病毒阳性标本的聚合酶-衣壳蛋白连接区,基因测序后使用生物信息软件进行分析.采用χ2检验或Fisher精确概率法比较2018-2019年和2020-2023年病原体阳性率.[结果]707例病例中,总阳性率为47.67%,单一细菌阳性率为16.27%,单一病毒阳性率为22.63%,混合阳性率为8.77%.优势病原体为轮状病毒(10.75%)、诺如病毒(10.33%)、肠致病性大肠杆菌(8.06%)、沙门菌(6.36%)、肠集聚性黏附大肠杆菌(5.52%)、弯曲菌(5.23%).夏秋季以细菌感染为主,冬春季以病毒感染为主.2020-2023年的总阳性率较2018-2019年下降(χ2=5.753,P<0.05).对37株沙门菌、81株肠致泻性大肠杆菌、19株弯曲菌完成PFGE分子分型分析,分别分为28种、80种和18种带型,带型相似度范围较广.19份诺如病毒经GⅡ组基因序列分析分为5种基因型,主要为GⅡ.Pe-GⅡ.4型和GⅡ.P16-GⅡ.2型.[结论]轮状病毒、诺如病毒、肠致泻性大肠埃希菌、沙门菌、弯曲菌为上海市普陀区儿童感染性腹泻的优势病原体,病原谱呈现季节性流行特征,部分病原体的分子特征存在多样性.应在不同季节加强儿童感染性腹泻病原体的分子特征监测,为防控提供实验室依据.

目的 分析女性尿路感染患者致病性大肠杆菌(UPEC)对阴道上皮细胞侵袭及作用机制.方法 选取2020年4月-2022年3月于浙江中医药大学滨江学院附属富阳第一医院就诊的女性尿路感染患者130例,另选取100例无感染患者作为对照,观察患者阴道大肠杆菌细菌负担.取患者阴道上皮细胞,使用透射电子显微镜(TEM)观察大肠杆菌对阴道上皮细胞侵袭情况,使用免疫荧光显微镜观察患者阴道大肠杆菌形态等,分析致病性大肠杆菌对阴道上皮细胞侵袭及作用机制.结果 以患者尿道大肠杆菌负担为参考,患者阴道细菌负担为(64.13±5.49)％;以患者阴道大肠杆菌总量为参考,其细菌黏附率为(61.27±4.95)、侵袭率为(30.13±2.65)％;感染组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)相对表达量(2.24±0.58)、(4.78±1.72)及(2.95±1.74)显著高于对照组(1.83±0.41)、(4.15±1.51)及(2.16±1.66)蛋白相对表达量,差异均有统计学意义(t=5.275,P＜0.05;t=2.952,P＜0.05;t=3.504,P＜0.05),免疫荧光和扫描电子显微镜(SEM)检测结果显示,大肠杆菌的黏附和细胞内,大肠杆菌周围的膜内陷.用与四甲基罗丹明缀合的鬼笔环肽染色,结果显示UPEC黏附导致显著的肌动蛋白捆绑,特别是在细菌附近的表面.此外,阴道上皮细胞(VEC)内的细菌被肌动蛋白包围.结论 尿路感染患者致病性大肠杆菌会黏附并侵袭患者阴道上皮细胞,在尿路感染后其可从尿路横穿到阴道,它可能通过参与细胞外和细胞内环境而持续存在,其作用机制可能与影响患者PI3K/Akt/mTOR蛋白通路表达及1型菌毛介导拉链机制有关.

[目的]开展上海市奉贤区的致泻性大肠埃希菌(DEC)耐药性和同源性分析,为临床合理用药和风险监测预警提供依据.[方法]收集2019-2022年上海市奉贤区腹泻病检测中分离到的DEC,采用微量肉汤稀释法进行21种抗生素药物敏感试验,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行聚类分型.[结果]腹泻病例DEC检出率为18.99%(131/690)、肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)占64.89%(85/131)、肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)占22.14%(29/131)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)占12.21%(16/131)、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)占0.76%(1/131),未检出肠侵袭性大肠杆菌(EIEC).DEC检出具有明显夏季高发的季节性特点.DEC多重耐药率为66.41%,共有65种耐药谱,耐药率最高的5种抗生素是氨苄西林(60.31%)、萘啶酸(51.91%)、头孢唑林(50.38%)、四环素(44.27%)、复方新诺明(35.11%),2019-2022年DEC对左氧氟沙星的耐药率明显升高.85株EAEC聚类分析相似度为58.4%～100.0%,得到69种带型;29株ETEC聚类分析相似度为58.5%～100.0%,得到13种带型,有2种优势带型;16株EPEC聚类分析相似度为53.9%～96.0%,得到15种带型.共发现5组同源性菌株,同源性菌株耐药表型均一致.[结论]上海市奉贤区腹泻病例中DEC流行强度较高,耐药形势严峻,引起暴发感染的风险较高,需要加强监测和防范.

不同菌株猪源致病性大肠杆菌的致病力有较大差异,通过着重研究菌株基因组中携带的毒力因子种类和数量,以解析猪源大肠杆菌致病的分子机制.利用二代高通量DNA测序技术测定猪源致病性大肠杆菌的基因组DNA序列,通过生物信息学方法,分析不同毒力菌株的基因组结构特征、进化类型、携带的毒力因子基因及其碱基变异,采用PCR方法对候选毒力因子基因进行验证.猪源致病性大肠杆菌不同毒力菌株的基因组全长范围为 4.62-5.3 Mb,含有 3 364-3 557 个编码基因,菌株的系统进化群和多位点序列分型多属于A群和ST10 克隆复合群.6 株菌携带 112-280 个毒力因子基因,强毒菌株的毒力因子基因尤其是毒素基因多于弱毒菌株,且各菌株分泌系统基因的数量变异较大.此外,毒力因子基因中检测到插入缺失、移码突变和无义突变等高影响碱基变异.采用PCR验证了代表性毒力因子基因及其变异.猪源致病性大肠杆菌的毒力与基因组长度、编码基因的数量和变异相关,与GC含量、前噬菌体和CRISPR序列没有必然联系.

[背景]芽孢杆菌是用于动物微生态制剂的重要菌株之一.暹罗芽孢杆菌因具有较强的抑菌活性,近年来受到广泛关注.[目的]对实验室前期分离的鸡源暹罗芽孢杆菌CML548 的益生特性进行评价,通过全基因组测序及生物信息学分析,探究其抑菌及潜在的益生机制.[方法]通过牛津杯法、稀释涂布平板法分别对菌株CML548 的抑菌和产酶特性、酸和胆盐的耐受性进行研究.使用Illumina HiSeq 2500 测序平台进行全基因组测序,并通过多种生物信息学工具和数据库对基因组进行注释和分析.[结果]体外实验表明该菌株具有优良的益生性状:能够有效抑制致病性大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、产气荚膜梭菌的生长;能够同时产生蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶;具有较高的酸和胆盐耐受性.全基因组测序分析表明菌株CML548 的基因组大小为 4061741 bp,GC含量为 46.07%,预测到 3961 个编码基因.分别有 1693、2704、3413、186、67、1、5 个基因被 GO、KEGG、COG、CAZy、DBAASP、CARD、VFDB 数据库注释;通过 antiSMASH 预测到 16 个与次级代谢产物合成相关的基因簇.此外,还发现其含有抗菌活性蛋白编码基因tasA.全基因组序列存储于NCBI的DNA序列数据库(GenBank登录号为PRJNA836999).[结论]本研究所分离到的暹罗芽孢杆菌CML548 是一株潜在的益生菌,有作为新型饲料添加剂的潜力.

肠道传染病肠道传染病是病原体经口侵入肠道并引起腹泻和/或其他脏器及全身性感染的一类疾病.灾区常见肠道传染病主要有细菌性痢疾、霍乱、伤寒和副伤寒、其他如沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、致病性大肠杆菌、耶尔森氏菌等细菌引起的细菌性腹泻,轮状病毒、杯状病毒、肠道腺病毒和星状病毒等病毒引起的病毒性腹泻,以及隐孢子虫等寄生虫引起的寄生虫腹泻.其他肠道传染病还包括甲型肝炎、戊型肝炎、手足口病等.

目的 分析徐州医科大学附属医院尿路感染患者尿液标本的病原菌分布及大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药情况,为合理选用抗菌药物提供指导依据.方法 收集2021 年8 月—2022 年7 月徐州医科大学附属医院送检的 3 882 份自行收集或无菌导出的尿液标本,并进行中段尿培养,分析尿培养阳性标本病原菌分布结果、大肠埃希菌检出科室分布情况及其抗菌药物敏感性.结果 3 882 份送检尿培养标本中尿培养阳性标本共 881份(22.69%),其中由单一菌株引起的有 846 份,由 2 种混合菌株引起的有 35 份;共分离出 916 株病原菌,其中检出512 株革兰阴性菌(55.90%),以大肠埃希菌(306 株,33.41%)和肺炎克雷伯菌(75 株,8.19%)为主;检出革兰阳性菌 188 株(20.52%),以屎肠球菌(80 株,8.73%)和粪肠球菌(27 株,2.95%)为主;检出 216 株真菌(23.58%),以白假丝酵母菌(77 株,8.41%)和热带假丝酵母菌(58 株,6.33%)为主.尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)分离株中 8.50%(26/306)分离自门诊患者,91.50%(280/306)分离自住院患者,其中泌尿外科、肾脏内科、风湿免疫科、神经内科和重症监护室(ICU)的检出率依次为 32.68%、20.92%、8.50%、6.86%、6.21%.UPEC对替卡西林(88.24%)、头孢呋辛(61.49%)、头孢呋辛酯(62.94%)、左氧氟沙星(72.46%)和复方新诺明(58.03%)的耐药性较高,耐药率均高于 50%;对其他抗菌药物较为敏感.结论 该院尿路感染标本中病原菌构成复杂、种类多样,其中革兰阴性菌是尿路感染的主要致病菌,以大肠埃希菌占比最多,部分病原菌呈现高水平耐药.患者应积极配合医生开展病原菌鉴定及药物敏感试验,以便合理选用抗菌药物,避免多重耐药菌和新型耐药菌的出现.