目的 探究肉桂油和艾叶油的单一抗菌活性及两者联合使用的抗菌活性,优化肉桂油-艾叶油复配亚微乳处方及工艺,并对其进行初步质量评价.方法 采用微量稀释法测定肉桂油和艾叶油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠埃希菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用棋盘稀释法测定了两种挥发油复配联用的分级抑菌浓度(FIC);采用滤纸片法测定油不同混合比例下抑菌圈直径,以离心稳定常数、粒径和多分散系数(PDI)为评价指标,最终确定亚微乳的最优处方.结果 肉桂油对金黄色葡萄球菌的MIC为0.5μL·mL-1,枯草芽孢杆菌及大肠埃希菌的MIC均为1 μL·mL-1,艾叶油对三种供试菌的MIC均为16μL·mL-1.肉桂油和艾叶油对金黄色葡萄球菌起相加作用,对大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌起协同作用.复配亚微乳最优处方为肉桂油-艾叶油-大豆磷脂-泊洛沙姆188(P188)-水2.5∶3∶0.2∶0.8∶93.5,制得的亚微乳为乳白色液体,平均粒径为(130.7±1.2)nm、PDI为0.145±0.02.结论 肉桂油-艾叶油复配亚微乳对金黄色葡萄球、枯草芽孢杆菌和大肠埃希菌均有抑制作用,且效果强于挥发油.

目的:比较宽叶山蒿叶和艾叶中的挥发性成分,为宽叶山蒿的进一步开发利用提供基础.方法:采用水蒸气蒸馏法(SD)提取叶中的挥发油;采用顶空固相微萃取结合气质联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析宽叶山蒿叶和艾叶的挥发性成分,对其共有峰进行聚类分析.结果:宽叶山蒿叶中挥发油得率在 0.16%～0.23%,平均得油率仅为 4 种艾叶的 12.03%～25.33%.2 种叶挥发油中分别鉴定出 59 种和 64 种组分,共有组分 10 种,部分共有组分21 种.宽叶山蒿叶中相对含量较高的为石竹烯、氧化石竹烯和大根香叶烯D;艾叶中为桉油精、石竹烯和氧化石竹烯.聚类分析将宽叶山蒿叶的湖北蕲春种源 1(S1)和蕲艾(S8)聚为一类,其余 3 种宽叶山蒿叶和 3 种艾叶分别聚为一类.结论:宽叶山蒿叶和艾叶挥发性成分种类和含量差异明显:艾叶中桉油精相对含量显著高于宽叶山蒿叶,宽叶山蒿叶中石竹烯、氧化石竹烯和大根香叶烯D的相对含量显著高于艾叶.宽叶山蒿叶中烯类物质相对含量高于艾叶,艾叶中醇类物质相对含量高于宽叶山蒿叶;宽叶山蒿叶中含有呋喃类成分,但艾叶中未检测出.

目的 建立艾叶中9种挥发性成分的含量测定方法,比较不同产地艾叶挥发性成分的差异.方法 采用水蒸气蒸馏法提取艾叶挥发性成分,色谱柱为HP-5(30m×0.32mm,0.25 μm),程序升温:初始温度为60℃,先以3℃·min-1的速率升温至120℃,再以15℃·min-1的速率升温至250℃,载气流速为1 mL·min-1.结果 α-蒎烯、桉油精、侧柏酮、樟脑、龙脑、4-萜品醇、α-萜品醇、反式石竹烯、氧化石竹烯在各自的质量浓度范围内与测定值线性关系良好,平均加样回收率均在90.8％～98.2％.聚类分析中20批艾叶样品分为2类,不同类别艾叶主要差异成分为樟脑、龙脑、反式石竹烯、侧柏酮.结论 该方法操作便捷、重复性好,可用于艾叶挥发性成分的质量评价.

艾叶为临床常用中药材,岭南红脚艾基原南艾蒿与艾同为菊科蒿属艾组植物,为岭南民间艾叶的地方习用品.该研究运用气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS)对27批岭南红脚艾及13批传统艾叶样品挥发油成分进行检测,分析二者挥发性成分种类的异同,采用内标法结合多反应监测模式(MRM),对6种主要挥发性成分含量进行测定,并对测定结果进行层次聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA).结果表明,艾叶挥发油平均含量高于红脚艾,且挥发油成分的种类更为丰富,多为沸点较低的组分,而红脚艾中多为沸点较高的组分.红脚艾和艾叶中挥发性成分均主要为萜类化合物,艾叶中主要含有单萜类化合物,红脚艾中则主要含有倍半萜类化合物,同时艾叶中的含氧衍生物含量明显高于红脚艾.化学计量学方法分析表明,HCA和OPLS-DA均能将红脚艾和艾叶区分开,二者挥发性成分差异显著.该研究可为红脚艾药材的质量评价提供科学依据,同时也为红脚艾作为岭南地方习用药材的合理性提供数据支持.

该研究基于超高效液相色谱(UPLC)、气相色谱-质谱(GC-MS)和网络药理学方法拟分析预测艾叶潜在的质量标志物(Q-marker).首先,利用UPLC和GC-MS技术分析 33 份艾种质资源叶片中的 12 种非挥发性成分和 8 种挥发性成分含量,作为艾叶的候选质量标志物.随后,运用网络药理学构建"成分-靶点-通路-疗效"网络筛选出核心质量标志物,再用分子对接方法验证质量标志物的生物活性.最后,根据艾叶中的质量标志物含量对 33 份艾种质进行聚类分析和主成分分析.结果显示,共筛选出 18 个候选成分、60 个靶点和185 个相互关系,作用于72 条通路,与11 种疾病的治疗有关,并发挥5 种其他功效.根据自由度结合成分特有性,共筛选出了异泽兰黄素、桉油精、β-石竹烯、高车前素、棕矢车菊素、氧化石竹烯等 6 种成分作为艾叶的潜在质量标志物.根据 6 个质量标志物的含量,通过聚类分析将 33 份艾种质分为 3 个类群,并通过主成分分析筛选出了综合品质最高的种质S14.该研究为挖掘艾叶的质量标志物、建立艾叶质量评价体系、进一步研究其药效作用机制和品种选育提供参考.

研究入侵害虫菊方翅网蝽对艾的危害及其对艾叶品质的影响.对湖北黄冈艾叶基地虫害危害症状进行观察,对害虫进行形态特征及分子鉴定,确定害虫种类,调查虫害发生规律及成灾机制,并采用电镜、GC-MS和HPLC检测虫害危害叶片的显微结构、挥发油和黄酮类成分含量.结果表明,入侵害虫菊方翅网蝽对艾可造成毁灭性危害.其主要危害艾的叶片部位,受害初期,叶面出现针点状失绿点,随危害加剧,失绿点逐渐沿着叶脉扩散并聚集成片导致叶片偏黄色,危害严重部位变成棕黄色.菊方翅网蝽在高温干旱天气下容易发生,常在夏季暴发,艾叶被取食后,显微观察到叶片正面被取食部分渐出针点状失绿点,并有菊方翅网蝽的黑色排泄物紧密附着在腺毛上形成黑色油状污斑,叶肉组织严重破坏,非腺毛被取食断裂分布杂乱并粘连成片.受害前期叶片的新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、高车前素、棕矢车菊素、异泽兰黄素含量相对于受害中期叶片显著升高,受害后期叶片中上述成分含量显著降低;艾叶挥发性成分桉油精、龙脑、松油酯、石竹素在中度受害叶片中含量显著降低,而在重度受害叶片中含量显著升高.该研究发现菊方翅网蝽对艾叶的品质有很大影响,应重点防控;生产上发现对菊方翅网蝽存在抗性的艾种质,可开展抗菊方翅网蝽的艾叶新品种选育.

艾是我国重要的药用植物和经济作物,具有温经散寒、止痛、抗炎、抗过敏等功效.艾叶精油富含挥发性萜类化合物,广泛应用于艾灸及保健品中,市场开发潜力巨大.bZIP转录因子家族在植物中数量众多,广泛参与植物生长发育、胁迫应答和萜类等次生代谢产物合成调控,但艾bZIP家族及其功能鲜有报道.该研究基于艾基因组系统鉴定bZIP家族转录因子,分析其蛋白理化性质、进化关系、保守基序和启动子顺式作用元件等特性,并筛选可能参与萜类合成调控的候选基因.结果显示:从基因组水平共鉴定到 156 个AarbZIP转录因子,其编码氨基酸为 99～618 aa,相对分子质量为 11.7～67.8 kDa,理论等电点为 4.56～10.16.根据拟南芥bZIP家族分类,AarbZIP蛋白分为 12 个亚族,同一亚族蛋白具有相似的保守基序.启动子顺式作用元件分析表明AarbZIP家族与光和激素响应密切相关.同源性比对和系统发育分析共筛选出 5 个可能参与萜类合成调控的AarbZIP基因.qRT-PCR结果表明 5 个候选AarbZIP基因在艾不同组织中表达存在显著差异,其中AarbZIP29 和AarbZIP55 在叶片中表达量最高,AarbZIP81、AarbZIP130、AarbZIP150 在花蕾中表达量最高.该研究为艾bZIP家族基因的功能研究及其在艾萜类合成中的调控作用解析奠定基础.

目的 采用中药质量常数等级评价法对艾叶饮片进行等级划分.方法 将传统外观性状与内在成分相结合,分别测定13 批不同来源艾叶饮片的出绒量及指标成分含量,通过质量常数公式计算各样本的相对质量常数及百分质量常数,并以此进行等级划分.为了验证等级划分的合理性,利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7 炎症模型,比较各等级艾叶的水提物及挥发油对一氧化氮(nitric oxide,NO)的抑制作用.结果 所收集的 13 批艾叶饮片中有 3 批含量不符合 2020版《中华人民共和国药典》规定,剩余10 批合格饮片中,一等艾叶的相对质量常数≥5.19,共 5 批;二等艾叶的相对质量常数≥3.24 且＜5.19,共3 批;三等艾叶的相对质量常数＜3.24,共2 批.抗炎结果表明,艾叶的药效作用随等级的升高而增强.结论 中药质量常数等级评价法用于艾叶饮片的等级划分,具有科学性与合理性,可为艾叶饮片等级标准的建立提供依据.

基于谱效关联分析筛选艾叶挥发油抑菌活性的质量标志物(Q-markers).采用水蒸气蒸馏法提取得到艾叶挥发油,选择气相-质谱联用仪(GC-MS)构建15批艾叶挥发油样品的指纹图谱,进行热图、聚类分析;检测不同批次艾叶挥发油对白色念珠菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性;并采用灰色关联分析及单体成分验证实验筛选艾叶挥发油质量标志物.GC-MS检测鉴定出49种化学成分,主要为单萜类、倍半萜类及其氧化物.指纹图谱筛选出17个共有峰,包括桉树脑、樟脑和龙脑等,相似度在0.96～0.99.聚类分析结果可将不同产区艾叶分为两类.相对含量较高且热图显示差异较大的成分有桉树脑、樟脑、龙脑、松油醇.15批次艾叶挥发油对白色念珠菌抑菌圈在9.00～11.56 mm;对大肠杆菌的抑菌圈在9.33～12.44 mm;对金黄色葡萄球菌的抑菌圈在9.33～12.89 mm.灰色关联分析结果表明艾叶挥发油抑菌活性的潜在质量标志物是桉树脑、樟脑和龙脑.单体抑菌实验结果表明除桉树脑外与灰色关联分析结果基本一致.因此筛选出艾叶挥发油抑菌活性的质量标志物为樟脑和龙脑.

目的 制备艾叶Artemisiae argyi Folium挥发油纳米结构脂质载体.方法 加热熔融-超声分散法制备脂质载体.以固/液脂质比、脂质用量、乳化剂用量、挥发油用量为影响因素,平均粒径为评价指标,正交试验优选处方.以桉油精、樟脑、龙脑为指标,GC-MS法测定挥发油含有量.结果 最佳处方为固/液脂质比5∶5,脂质用量1％,乳化剂用量3％,挥发油用量0.5％.所得脂质载体清澈透明,平均粒径(72.33±1.93) nm,PDI 0.273±0.004 5,Zeta 电位(-30.59±1.42)mV,在120 h内的体外释放度低于原料药,4℃下的稳定性明显高于25℃下.桉油精、樟脑、龙脑包封率分别为87.49％、86.45％、92.12％,载药量分别为8.25％、2.00％、3.38％.结论 艾叶挥发油纳米结构脂质载体有缓释作用,理化性质稳定,建议在4℃下保存.