为了解茶树菇(Agrocybe aegerita)种质资源的遗传多样性和筛选优良的茶树菇新品种,采用菌株拮抗试验方法观察了92株茶树菇菌株间拮抗反应及其类型,ISSR-PCR(inter-simple sequence repeat-PCR)分子标记方法对92株茶树菇菌株的遗传多样性进行了综合分析.拮抗试验将92株茶树菇菌株分为27组;筛选出的20条ISSR引物共扩增出317条清晰条带,多态性条带平均比率为82.60％;在遗传相似系数为0.742时,ISSR分子标记分析可将92株茶树菇划分为6大类群,拮抗试验和ISSR分子标记分析的结果基本一致.通过对比农艺性状分析,初步筛选出滇农5、滇农14、茶5-800、白茶、闽农5及滇农8作为工厂化生产茶树菇菌种.结果表明茶树菇的遗传多样性丰富,结合栽培出菇试验可为茶树菇品种选育和杂交育种的亲本选择提供参考.

采自西藏日喀则地区的两份野生蘑菇标本及其分离菌株,通过形态学及基于ITS序列的分子系统发育分析鉴定为卵孢侧耳Pleurotus placentodes.该物种在2016年首次报道于中国.人工驯化栽培试验表明卵孢侧耳可以在人工条件下出菇,生长周期80-95d:初步的营养成分分析表明,卵孢侧耳蛋白质、粗多糖、氨基酸含量比香菇、糙皮侧耳(平菇)、金针菇、柱状田头菇(茶树菇)等都高,尤其含有较高的组氨酸和丰富的矿物质,如铁、钙、锌等.卵孢侧耳可作为新的食用菌进行开发利用.

以海鲜菇、香菇、茶树菇、杏鲍菇、平菇及金针菇6种食用菌为试验材料,比较各食用菌的抗氧化及抗细胞增殖活性.通过测定总抗氧化、总还原能力,以及对自由基的清除能力评价各食用菌体外抗氧化活性,Alamar blue法检测各提取物的抗细胞增殖活性.结果表明,各食用菌的总酚和总黄酮含量分别在155.76 mg/L-283.54 mg/L和5.19 mg/L-49.79 mg/L之间.其中,金针菇、茶树菇和香菇的总酚和总黄酮含量较高,海鲜菇和平菇含量最低.茶树菇和香菇的总抗氧化能力和总还原力(分别是22.94 U/L和20.10 U/L,0.26和0.233)优于其他几种食用菌.金针菇对DPPH·、·OH清除能力高于其他食用菌(分别是48.8％ 和75.12％),各食用菌对O2-·清除能力没有明显差别.6种食用菌提取物对HepG2、SGC-7901、NCI-H460、MDA-MB-231、LO2细胞均具有一定的增殖抑制作用,其中茶树菇对HepG2和NCI-H460细胞抑制作用最高(IC50=4.62±2.13,4.96±1.84 mL/L),而金针菇对SGC-7901和MDA-MB-231细胞增殖抑制作用最强(IC50=5.01±1.03,6.95±1.03 mL/L),而各提取物对LO2细胞的增殖抑制活性都最低.各食用菌均具有一定的抗氧化和抑制肿瘤增殖能力,其中茶树菇、香菇、金针菇的抗氧化和抑制肿瘤增殖活性最强.

目的 调查武汉市干蘑菇样品中重金属铅、镉污染状况,并对监测结果进行分析评估.方法 根据随机抽样法采集武汉市干蘑菇样品共130件,根据国家标准方法检测其中重金属铅、镉的含量,并根据《中华人民共和国农业行业标准绿色食品食用菌》(NY/T 749-2018)以及单因子污染指数法和综合因子污染指数法进行评价.结果 130件干蘑菇样品中重金属铅、镉检出率分别为93.8％、99.2％,超标率分别为0、3.85％;3种干蘑菇中金针菇镉污染状况较为严重,超标率差异有统计学意义(P =0.003);除金针菇为二级产品外,其他蘑菇均为一级产品.结论 武汉市售干蘑菇样品中铅污染较为轻微,香菇和茶树菇镉污染可控,但金针菇中镉污染较为严重,需要引起重视.

柱状田头菇(茶树菇)Agrocybe aegerita是一种美味的食用菌,具有极高的经济价值.随着其全基因组测序的完成,功能基因组学研究也逐渐展开,其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点.本研究以柱状田头菇原生质体为受体、潮霉素抗性基因(hph)作为筛选标记,以增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)为报告基因,应用PEG介导法进行柱状田头菇遗传转化体系研究.结果 表明,150μg/mL潮霉素可以完全抑制柱状田头菇的生长.30℃下用2％裂解酶液酶解菌丝3h,能够获得最大得率的原生质体.通过PEG介导将构建好的DNA片段转化入柱状田头菇原生质体,通过潮霉素抗性筛选获得转化子,转化得率达到7个/μ-g DNA.PCR验证和荧光显微镜观察,外源片段成功转入柱状田头菇中并稳定表达.本研究建立的PEG介导转化体系,为柱状田头菇基因功能研究提供了技术基础.

目的 了解丽水市食用菌中32种杀虫剂和14种杀菌剂的残留水平,为食用菌的质量安全监管提供依据.方法 2018年4月-2019年6月随机从丽水市多个农贸市场和超市采集食用菌(香菇、杏鲍菇、金针菇、茶树菇、木耳、银耳、鸡腿菇和其他食用菌)共29份,采用气相色谱-质谱法检测农药残留.结果 29份食用菌检出农药残留样品7份,总检出率为24.1％,检出浓度为0.011 0mg/kg～0.165 mg/kg.香菇、茶树菇、木耳、银耳和平菇均有农药残留检出,香菇中农药残留检出率高达60.0％,其次是茶树菇、木耳和银耳,均为50.0％.从农药种类来看,检出二硫代氨基甲酸酯4份,检出率为13.8％,检出浓度为0.062 2 mg/kg～0.165 mg/kg;检出氯氟氰菊酯3份,检出率为10.3％,检出浓度为0.011 0mg/kg～0.0128mg/kg;嘧霉胺和多菌灵各有1份样品检出,检出浓度均为0.0200mg/kg.其他种类的农药未检出.结论 丽水市香菇、木耳、银耳、茶树菇和平菇均有部分农药残留,需加强对食用菌业合理用药的指导与监管.

目的 对湖南地区5种常见食用菌的氨基酸组成及含量进行分析评价,为食用菌合理利用提供依据.方法 采用Kjeltee 2300自动凯氏定氮仪对湖南地区5种常见食用菌的蛋白质进行测定,采用曼默博尔A300全自动氨基酸分析仪进行氨基酸成分分析;采用氨基酸评分法对食用菌营养价值进行了评价.结果 食用菌除了杏鲍菇和茶树菇不含蛋氨酸以及香菇不含蛋氨酸和酪氨酸外,其余均含16种氨基酸;香菇中的蛋白质含量、氨基酸含量以及必需氨基酸含量均最高,分别为3 807、2 279、665 mg/100 g;5种食用菌的必需氨基酸中以苏氨酸和亮氨酸含量较高;5种食用菌口感好,但杏鲍菇口感不如另外4种食用菌;香菇中苏氨酸含量(38.16 mg/g蛋白)略低于WHO/FAO模式(40 mg/g蛋白),其余4种食用菌的苏氨酸含量均高于WHO/FAO模式,分别为双孢菇(43.33 mg/g蛋白)、金针菇(43.48mg/g蛋白)、杏鲍菇(41.60 mg/g蛋白)、茶树菇(56.52 mg/g蛋白);茶树菇中苏氨酸含量(56.52mg/g蛋白)高于卵清蛋白模式(51 mg/g蛋白);苏氨酸的氨基酸评分最高,为141.30,因此氨基酸模式为最优;5种食用菌的限制氨基酸均为苯丙氨酸和酪氨酸或异亮氨酸.结论 食用菌中苏氨酸含量优异,具有较高的营养价值;可以通过与富含苯丙氨酸、酪氨酸或异亮氨酸的食物等进行结合食用,构建合理膳食,提高食用价值.

柱状田头菇(茶树菇)Cyclocybe aegerita是一种美味的食用菌,具有很高的经济价值.构建高效表达的遗传转化体系,可以深入揭示其遗传特征及基因功能.以柱状田头菇YSG为实验材料,使用多片段重组克隆构建载体,PEG介导的原生质体转化,并以qRT-PCR为测定方法,对actin、gpd和Pumgpd不同长度5个启动子片段驱动靶标基因的表达量进行分析.依据actin基因启动子构建的载体pAa-actin-1和pAa-actin-2获得转化子中,靶标基因表达量为对照3倍以上转化子数量分别为50％和33.33％,最高表达量分别为对照的10.45和6.23倍;携带pAa-gpd-1、pAa-gpd-2和pAa-Pumgpd启动子的载体获得的转化子中,表达量为对照3倍以上的数量分别为0、28.57％和25％,最高表达量分别为对照的2.93、7.75和4.31倍.actin启动子获得高表达转化子得率较gpd和Pumgpd启动子片段高,适用于柱状田头菇转化体系构建.

目的 了解2018年陕西省市售食用菌中杀菌剂类农药残留的污染状况,评价其膳食暴露健康风险.方法 2018年3和9月,于陕西省10个地市分别随机采集7种95份食用菌样品,依照《2018年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》规定的标准程序检测11种杀菌剂类农药,运用食品安全指数法对食用菌中的杀菌剂残留所带来的风险进行评估.结果 香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇和茶树菇5种食用菌中检出杀菌剂,检出6种杀菌剂农药,分别为多菌灵、烯酰吗啉、戊唑醇、腐霉利、甲霜灵和甲基硫菌灵.所检出的6种杀菌剂的食品安全指数(IFS)与7种食用菌的食品安全指数的平均值((-IFS))均＜1.结论 2018年陕西省市售食用菌有一定程度的杀菌剂类农药残留,但食用菌的安全状态都处在可接受的安全水平.

柱状田头菇(茶树菇)Cyclocybe aegerita在我国广泛种植,其菌株资源分为多个类群且遗传背景多样.多种命名和复杂的交配特征给柱状田头菇及近缘种的育种研究带来障碍.以两个物种柱状田头菇和杨柳田头菇C.salicacola菌株群体为研究材料,通过基因组测序及序列分析,设计特异引物扩增获取菌株群体的交配区域片段,用于菌株鉴定及系统构建.克隆获得了两个柱状田头菇菌株的B交配位点,其中约8 kb的片段序列非常保守,包括信息素受体rcb1、rcb2和部分非编码区.基于该区域含有变异区的片段设计特异引物,经对35个菌株扩增及克隆测序后,每个实验菌株中均获得1-2类型约3.2 kb片段(cbmr).使用该片段与线粒体小亚基构建的聚类树契合度较高,但前者在类群的划分上更为精细.此外,该片段的变异区也为类群和交配型鉴定提供了靶位点.依据B交配型部分位点设计的引物在所有的实验菌株中均获得相应的片段,可以作为分子标记用于柱状田头菇和杨柳田头菇菌株及B交配型分子鉴定.