目的:通过观察早期急性肺栓塞患者血清中葡萄糖调节蛋白（GRP）78和GRP94的水平，探讨其在急性肺栓塞中的表达及意义。方法:选择2018年1月至2020年3月大连大学附属中山医院收治的早期急性肺栓塞患者90例为肺栓塞组及40例健康成年人定义为对照组，比较两组患者血清中D-二聚体、GRP78、GRP94的水平，根据2019年欧洲心脏学会的肺栓塞诊治指南将急性肺栓塞组分为高、中、低危组（高危组：存在血流动力学障碍，中危组：右心室功能不全和/或心脏生物学标志物升高，低危组：无上述表现），比较三组患者血清D-二聚体、GRP78、GRP94、血气分析、肺动脉压、肺栓塞风险评分（PESI）的水平。结果:两组患者年龄、性别、体质量指数比较差异无统计学意义（ P>0.05），但两组患者血清中D-二聚体、GRP78、GRP94水平比较，肺栓塞组高于对照组[（3.86 ± 1.82） mg/L比（0.31 ± 0.15） mg/L、（2.68 ± 0.71） μg/L比（1.64 ± 0.38） μg/L、　（1.31 ± 0.29） μg/L比（0.98 ± 0.13） μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。高危组患者血清D-二聚体、GRP78、GRP94的水平及肺动脉压、PESI评分均高于低危组和中危组[（5.63 ± 1.75）mg/L比（2.29 ± 0.51）和（3.64 ± 1.02） mg/L、（3.24 ± 0.76） μg/L比（2.17 ± 0.41）和（2.64 ± 0.47） μg/L、（1.57 ± 0.33） μg/L比（1.12 ± 0.13）和（1.26 ± 0.14） μg/L、（47.75 ± 6.98） mmHg（1 mmHg = 0.133 kPa）比（26.15 ± 4.63）和（35.21 ± 5.85） mmHg、（123.5 ± 20.59）分比（85.5 ± 14.31）和（102.5 ± 13.32）分]（ P<0.05），中危组上述指标均高于低危组（ P<0.05），高危组患者PO 2水平低于低危组和中危组[（53.85 ± 5.53） mmHg比（76.21 ± 4.96） mmHg和（72.71 ± 4.76） mmHg]（ P<0.05），中危组低于低危组（ P<0.05）。三组患者血气分析pH比较差异无统计学意义（ P>0.05），高危组患者血气分析PCO 2水平低于中危组和低危组（ P<0.05），中危组与低危组比较差异无统计学意义（ P>0.05）。肺栓塞组患者血清D-二聚体、GRP78、GRP94与PESI评分均呈正相关， r = 0.610、0.622、0.627， P均<0.01。肺栓塞组治疗后D-二聚体、GRP78、GRP94较治疗前明显下降（ P<0.05）。 结论:血清中GRP78、GRP94水平与急性肺栓塞有关，且其水平可以反映肺栓塞病情程度。

目的:探讨黄芪甲苷是否通过锌离子(Zn 2+)调控线粒体相关内质网膜(MAMs)发挥神经保护作用，并阐明可能的机制。 方法:常规培养PC12细胞并分为7组。对照组：细胞常规培养；2-DG组：用50 μmol/L 2-DG处理30 min；黄芪甲苷+2-DG组：用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min；黄芪甲苷组：用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min；TPEN+黄芪甲苷+2-DG组：用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min，接着用50 μmol/L 2-DG处理30 min；TPEN组：10 μmol/L TPEN处理10 min；TPEN+2-DG组：用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min。通过Western blotting实验检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8、B细胞受体相关蛋白31(Bap31)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达，采用Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平，采用免疫荧光法检测Fis1蛋白的表达，采用线粒体荧光探针TMRE检测线粒体通透性转移孔(mPTP)开放情况。结果:(1)与对照组相比，2-DG组GRP78、GRP94、Caspase-8、Bap31、Fis1蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增加；与2-DG组相比，黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显降低；与黄芪甲苷+2-DG组相比，TPEN+黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增强；差异均有统计学意义( P<0.05)。(2)与对照组相比，2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强；与2-DG组相比，黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显减弱；与黄芪甲苷+2-DG组相比，TPEN+黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强；与对照组相比，TPEN+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强；差异均有统计学意义( P<0.05)。(3)与对照组相比，2-DG组TMRE荧光强度明显减弱；与2-DG组相比，黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显增强；与黄芪甲苷+2-DG组相比，TPEN+黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱；与对照组相比，TPEN+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱；差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:黄芪甲苷能够通过Zn 2+抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡，阻止mPTP开放发挥神经保护作用，其作用机制可能与Fis1、Bap31表达有关。

目的:分析阵发性心房颤动(PAF)患者血清硫酸吲哚酚(IS)、赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)与经导管射频消融术后复发的关系.方法:选择2020年1月至2022年1月在本院行导管射频消融术的155例PAF患者,术后随访1年,按照是否复发PAF分为未复发组和复发组,对比两组血清IS、LOXL2、GRP94水平,多因素logistic回归分析影响术后复发的因素.ROC曲线分析血清IS、LOXL2、GRP94及三者联合预测PAF患者导管射频消融术后复发的价值.结果:155例PAF患者术后随访1年发现,复发40例(25.81％);复发组房颤病程、左房内径(LAD)长于未复发组,美国纽约心脏协会(NYHA)心功能分级为Ⅲ级比例多于未复发组,左室射血分数(LVEF)低于未复发组(P＜0.05);复发组血清GRP94水平低于未复发组,血清IS、LOXL2水平高于未复发组(P＜0.05);多因素Logistic回归分析发现,NYHA心功能分级为Ⅲ级、血清IS水平升高、血清LOXL2水平升高、房颤病程较长、LAD增大是术后复发的危险因素(P＜0.05),血清GRP94水平、LVEF升高是保护因素(P＜0.05);绘制ROC曲线发现,血清IS、LOXL2、GRP94水平及三者联合预测术后复发的AUC为0.764、0.710、0.806、0.853,其中三者联合预测的AUC显著高于IS、LOXL2、GRP94.结论:导管射频消融术前血清IS、LOXL2水平上升及GRP94水平降低的PAF患者术后复发的风险增加,且三者联合可指导临床识别术后复发高风险人群,实现对术后早期复发风险的预测.

目的 观察白藜芦醇(resveratrol)保护心肌细胞减轻氧化应激损伤的过程是否与线粒体通透性转换孔(mPTP)和线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)相关,并探讨可能的机制.方法 H9c2心肌细胞常规培养,随机分为对照组、过氧化氢组、白藜芦醇+过氧化氢组、MCU抑制剂(钉红)+白藜芦醇+过氧化氢组.微板法检测细胞外液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量;Western印迹法检测内质网应激分子伴侣葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94和MCU蛋白表达;激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子(Ca2+)、活性氧(ROS)和mPTP变化.结果 与对照组相比,过氧化氢显著增加细胞外液中LDH的含量、GRP78、GRP94和MCU蛋白表达、细胞内Ca2+和ROS含量,显著减少mPTP特异性探针TMRE的荧光强度(均P＜0.05).白藜芦醇明显抑制过氧化氢引起的变化,而钌红显著增强白藜芦醇的作用(均P＜0.05).结论 白藜芦醇通过MCU减少细胞内Ca2+超载和ROS生成进而抑制mPTP开放,减轻氧化应激引起的内质网应激损伤,保护心肌细胞.

目的:观察利伐沙班联合阿替普酶对急性肺栓塞患者凝血功能及葡萄糖调节蛋白 78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)表达的影响.方法:选取2021 年 1 月至 2022 年 12 月我院收治的104 例急性肺栓塞患者为对象,采用简单随机法分为两组.所有患者均给予绝对卧床、止痛、抗感染、吸氧等常规治疗,常规组(n=52)加用阿替普酶治疗,联合组(n=52)加用利伐沙班联合阿替普酶治疗.统计两组出血事件发生率.检测两组凝血功能、血栓弹力图及GRP78、GRP94、肺动脉压、血气指标的差异.结果:两组活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及血栓弹力图中 α 角、反应时间(R)治疗后较治疗前升高,联合组治疗前后 APTT、PT 及血栓弹力图中 R、α 角差值大于常规组(P<0.05).两组纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(D-D)治疗后较治疗前降低,联合组治疗前后Fib、D-D差值大于常规组(P<0.05);两组血栓弹力图中凝血时间(K)治疗前后比较,差异无统计学意义(P>0.05).两组GRP78、GRP94 治疗后较治疗前降低,联合组治疗前后 GRP78、GRP94 差值大于常规组(P<0.05).两组动脉血氧分压(PaO2)治疗后较治疗前升高,联合组治疗前后 PaO2 差值大于常规组(P<0.05);两组动脉血二氧化碳分压(PaCO2)治疗后较治疗前降低,联合组治疗前后 PaCO2 差值大于常规组(P<0.05).两组出血事件发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:利伐沙班联合阿替普酶治疗急性肺栓塞可降低GRP78、GRP94 的表达,改善凝血功能和血气指标.

目的 探究血清Krüppel样转录因子 8(KLF8)和葡萄糖转运蛋白 4(GLUT4)表达水平与糖调节受损冠心病患者病变程度的相关性.方法 选取邯郸市第一医院 2021年 3月至 2022年 9月收治的 204例冠心病患者为研究对象,根据患者是否存在糖调节受损将其分为非糖调节受损组(n=94)和糖调节受损组(n=110)例.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定研究对象血清KLF8 mRNA水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测研究对象血清GLUT4表达水平;采用Pearson分析血清KLF8与GLUT4水平与指标间相关性.结果 与非糖调节受损组相比较,糖调节受损组空腹血糖、餐后 2h血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白、总胆固醇均显著升高;糖调节受损组血清KLF8与GLUT4水平均显著下降;与单支病变糖调节受损冠心病患者血清KLF8和GLUT4水平比较,双支病变组与三支病变组显著降低;与双支病变糖调节受损冠心病患者血清KLF8和GLUT4水平比较,三支病变组显著降低;糖调节受损冠心病患者血清KLF8和GLUT4水平随病变程度的加重均显著下降;Pearson相关分析结果显示,糖调节受损冠心病患者血清KLF8和GLUT4 水平与空腹血糖、餐后 2h血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白、总胆固醇水平及Gensini积分均呈负相关,以上统计学差异均(P<0.01).结论 血清KLF8与GLUT表达水平在糖调节受损冠心病患者中显著降低,与其病变严重程度呈负相关.

目的 研究内质网应激(ERS)在大鼠机械通气相关性膈肌功能障碍(VIDD)中是否上调,以及ERS与膈肌功能障碍的关系.方法 将30只无特殊病原体(SPF)级雄性SD大鼠按随机数字表法分为自主呼吸对照组(Con组)、机械通气6 h组(MV6 h组)、机械通气12 h组(MV12 h组)、机械通气18 h组(MV18 h组)、机械通气24 h组(MV24 h组),每组6只.达到建模时间后采用RM6240生物信息采集系统测量膈肌功能学相关指标,主要包括复合肌肉动作电位(CMAP)、膈肌疲劳指数、膈肌频率-收缩曲线;苏木素-伊红(HE)染色观察膈肌纤维形态,测量膈肌纤维横截面积;实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)法和Western blot检测ERS标志物C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94),以及膈肌萎缩蛋白肌肉特异性环指蛋白-1(MuRF-1)和肌肉萎缩F盒蛋白(Atrogin-1)的mRNA及蛋白表达水平.结果 与Con组比较,各机械通气组大鼠膈肌CMAP幅值和疲劳指数均明显减小(P<0.05),MV12 h组、MV18 h组、MV24 h组大鼠膈肌CMAP时程均明显延长(P<0.05),同一刺激频率下MV18 h组和MV24 h组大鼠膈肌收缩力明显减小(P<0.05),且随着机械通气时间的延长,膈肌CMAP幅值、疲劳指数及收缩力逐渐下降,CMAP时程逐渐延长,且在MV24 h组最为明显.HE染色结果显示,随着机械通气时间延长膈肌纤维萎缩程度加重,肌束内肌纤维排列紊乱,体积减小,形态不规则,细胞间隔略有增宽;与Con组相比,各机械通气组大鼠膈肌纤维横截面积均明显减小(P<0.05).随着机械通气时间延长,大鼠膈肌萎缩指标MuRF-1和Atrogin-1,以及ERS相关指标CHOP、GRP78、GRP94的mRNA和蛋白表达水平都逐渐升高.结论 在机械通气大鼠膈肌中,随着通气时间延长,ERS上调,膈肌功能障碍程度加重,ERS是VIDD的致病因素之一.

目的 观察高血压大鼠心肌组织葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和CAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达,探讨氨氯地平与内质网应激高血压大鼠心室肥厚的关系.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、腹主动脉缩窄术(AAB)组和氨氯地平干预(AAB+Aml)组,每组40只.给予氨氯地平10 mg/(kg·d).随机分为2、4和8周3个亚组,测定平均动脉压(MAP);计算左心室质量/体质量(LVM/BW);HE染色观察心肌细胞的形态;免疫组化及Western blot检测心肌组织GRP94和CHOP的表达.结果 随着术后时间的延长,AAB组MAP逐渐升高,明显高于假手术组[2周(144±10)比(118±9)、4周(163±8)比(120±7)、8周(177±10)比(120±6)mmHg](P<0.05);AAB组LVM/BW显著高于假手术组[2周(2.21±0.17)比(1.91±0.12)、4周(2.45±0.16)比(2.01±0.14)、8周(2.68±0.15)比(2.05±0.09)mg/g](P<0.05);AAB组心肌细胞较假手术组明显肥大;术后2周AAB组心肌组织GRP94明显表达,4周达最高值,8周减低;AAB组GRP94表达量高于假手术组(P<0.05);随术后时间的延长,CHOP蛋白含量逐渐增加,8周达最高值.使用氨氯地平后,AAB+Aml组较AAB组MAP降低[2周(126±6)比(144±10)、4周(125±8)比(163±8)、8周(128±5)比(177±10)mmHg](P<0.05);使用氨氯地平后,AAB+Aml组较AAB组LVM/BW降低[2周(2.21±0.17)比(1.94±0.15)、4周(2.45±0.16)比(2.13±0.08)、8周(2.68±0.15)比(2.18±0.10)mg/g](P<0.05);使用氨氯地平后AAB+Aml组较AAB组心肌细胞肥大程度减低.AAB+Aml组心肌组织GRP94及CHOP表达量低于AAB组(P<0.05).结论 氨氯地平可能通过减弱高血压触发的内质网应激而保护心肌细胞及减弱心室肥厚.

目的 探讨卡托普利对异丙肾上腺素(ISO)所致心力衰竭大鼠心室重构的影响及其部分作用机制.方法 雄性Wistar大鼠150只随机分为对照组、模型组及实验组(均n=50).采用ISO皮下注射法制备心力衰竭大鼠模型,实验组在造模基础上给予卡托普利50 mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组给予相同体积0.9％NaCl溶液灌胃,连续给药4周,每组分别在干预前、干预1～4周末处死10只大鼠.在每次处死大鼠前行高频超声心动图检查,测定各项心功能指标;采用Masson染色测定心室肌组织胶原容积分数(CVF);采用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡指数(AI);采用ELISA法检测各组大鼠心室肌组织结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达;采用Western blot技术检测各组大鼠心室肌组织心肌细胞葡萄糖调节蛋白(GRP)78、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及胎盘生长因子(PLGF)表达.结果 ①与对照组相比,模型组大鼠在干预1～4周末心脏彩超结果显示左室重构各项指标均出现异常(P<0.05),实验组大鼠在干预2～4周末心脏彩超结果显示左室重构各项指标均有明显改善(P<0.05);②与对照组相比,模型组在干预2周末CVF、AI均明显升高,且随着干预实验的延长而升高,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组相比,实验组大鼠在干预2～4周末CVF、AI均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);③与对照组相比,模型组GRP78在干预1周末明显升高,随着干预时间的延长表达逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);模型组在干预2周末PLGF、CTGF、MMP-2、MMP-9及CHOP表达均明显升高,且随着干预时间的延长表达逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);④与模型组相比,实验组大鼠在干预后在不同时间点GRP78、CHOP、PLGF、CTGF、MMP-2、MMP-9均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 卡托普利可抑制异丙肾上腺素所致心力衰竭大鼠不同时间点GRP78、CHOP、PLGF、CTGF、MMP-2及MMP-9的表达,从而起到抑制心肌细胞凋亡、纤维化的作用,进而达到逆转心室重构、改善心功能的目的.

目的 探讨双水杨酸酯(SAL)对高脂饮食喂养的小鼠血糖水平的影响.方法 高脂饮食联合0.5%SAL(SAL组,n=5)或联合生理盐水(对照组,n=5)饲养8周龄C57BL/6J雄性小鼠40 d,行胰岛素耐量试验(ITT)和葡萄糖耐量试验(GTT),提取肝脏总RNA和蛋白,用qPCR和蛋白质印迹法检测内质网应激相关蛋白CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、内质网DnaJ同系物4(ERDJ4)、葡萄糖调节蛋白(GRP)78和GRP94的表达水平.结果 SAL组小鼠随机血糖水平低于对照组(P<0.05),并且GTT提示糖耐量更好,但2组空腹胰岛素水平差异无统计学意义;ITT提示2组胰岛素刺激后血糖变化未见明显差异.SAL组小鼠肝脏组织GRP78和GRP94的mRNA表达水平也均较对照组低(P均<0.05),SAL组小鼠肝脏组织CHOP、ERDJ4、GRP78和GRP94的蛋白表达水平均较对照组低(P<0.05或P<0.01).结论 SAL通过抑制内质网应激通路缓解高脂饮食小鼠的高血糖状态,并且这一过程不依赖于胰岛素作用.