藏药草莓药用历史悠久,资源分布广泛,具散瘀排脓、去黄水、治"培赤"等功效.藏医药典籍记载藏药草莓的名称不统一.品种来源也不一致.涉及多个科属的植物.为确保临床的安全性和有效性,该文对藏药草莓的名称、基原、性效及应用进行了本草考证,确认其基原主要为蔷薇科草莓属植物东方草莓、草莓、黄毛草莓、野草莓、西藏草莓、西南草莓、结根草莓和纤细草莓.对藏药草莓的文献梳理考证有利于草莓的合理应用,可为其后续的质量标准、药效学研究和新制剂开发提供参考.

目的 建立现有国家药品标准收载的兔耳草基原全缘兔耳草Lagotis integra(药材名为兔耳草)及短管兔耳草L.brevituba(药材名为洪连)的HPLC指纹图谱方法,并通过所建立的方法对市场上其他3种较为常见的兔耳草(圆穗兔耳草L.ramalana、革叶兔耳草L.alutacea及短穗兔耳草L.brachystachya)进行对比研究.方法 全缘兔耳草与短管兔耳草的HPLC指纹图谱相似度低,故分别建立二者HPLC指纹图谱方法;采用Waters X-Bridge C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.2％甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长328 nm;柱温35℃(全缘兔耳草)及25℃(短管兔耳草).结果 建立的全缘兔耳草HPLC对照指纹图谱指认了14个共有峰,并标定了大车前苷、鞭打绣球苷B、10-O-trans-p-methoxycinnamoyl-catalpol及10-O-[(E)-3,4-dimethoxycinnamoyl] catalpol峰;所建立的短管兔耳草HPLC对照指纹图谱存在13个共有峰,并标定松果菊苷、大车前苷及毛蕊花糖苷峰;建立的全缘兔耳草HPLC对照指纹图谱与所有批次全缘兔耳草及革叶兔耳草的相似度均大于0.9,与其他3种兔耳草相似度低;建立的短管兔耳草HPLC对照指纹图谱与所有批次短管兔耳草及圆穗兔耳草的相似度均大于0.9,与其他3种兔耳草相似度低.结论 已建立的方法能有效地对各基原兔耳草进行鉴别,建议草叶兔耳草与全缘兔耳草同时收载于《卫生部药品标准(藏药第一册)》,圆穗兔耳草可作为《中国药典》2015年版一部收载的“洪连”的新基原.

目的:通过向大鼠右后踝关节注射尿酸钠结晶(MSU)建立大鼠急性痛风性关节炎模型,初步探讨藏药短穗兔耳草提取物抗急性痛风性关节炎的作用机制.方法:60只SD雄性大鼠随机均匀分成正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.3 mg/kg)阳性药组及短穗兔耳草低(0.8 g/kg)、中(1.6 g/kg)、高(3.2 g/kg)剂量组,每日上午各给药组按10 mL/kg给予相应药物灌胃,正常对照组与模型组灌胃等体积蒸馏水,连续给药7 d,于第5天给药后lh向除正常对照组外各组大鼠右后踝关节注射0.1 mL(50 mg/mL)尿酸钠溶液建立急性痛风性关节炎模型,正常对照组注射等体积无菌氯化钠溶液.足趾容积测量仪检测大鼠右后踝关节的关节肿胀度;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;蛋白印迹法(Western blot)检测关节滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、NALP3蛋白表达;显微镜下观察关节滑膜组织病理学改变.结果:与正常对照组比较,模型组在6～48 h踝关节肿胀率显著升高(P＜0.01),血清TNF-α水平及滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、NALP3蛋白表达显著升高(P＜0.01);关节滑膜病理学形态改变明显.与模型组比较,在造模48 h后各给药组大鼠踝关节肿胀率均显著降低(P＜0.05或P＜0.01);各给药组血清TNF-α水平均显著降低(P＜0.05或P＜0.01);短穗兔耳草高剂量组滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、NALP3蛋白表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01).同时组织病理切片显示藏药短穗兔耳草能改善大鼠滑膜组织病理学变化.结论:藏药短穗兔耳草对尿酸钠诱导的急性痛风性关节炎大鼠具有一定的保护作用,其机制与TLR/MyD88/NF-KB和NALP3信号通路有关.

目的:调研藏药兔耳草的使用基原,对比研究其常用基原植物及药材的性状、显微特征.方法:对藏药兔耳草主产区及藏医院、藏药企业、市场开展实地调研,并收集常用且基原准确的兔耳草原植物及药材,采用体式显微镜、光学显微镜等仪器,结合植物分类学、性状鉴别法及显微鉴别法进行观察和比较.结果:藏药兔耳草为玄参科兔耳草属多种植物,常用基原植物有5种,分别是短管兔耳草、全缘兔耳草、圆穗兔耳草、革叶兔耳草及短穗兔耳草,其中全缘兔耳草、圆穗兔耳草及短管兔耳草使用频率较高.各基原植物的主要区别在于花序的形态、花萼后方开裂程度、花冠筒伸直或弯曲、茎直立或匍匐;药材性状的主要区别在于根茎大小、断面特征、匍匐茎的有无、叶的形态及花序;显微特征的主要区别在于叶柄横切面的栅栏组织细胞数目、根表皮细胞层数.结论:临床使用的兔耳草药材基原混乱,部分基原标准未收录;5种兔耳草在基原、性状、显微上均存在一定差异,通过此研究结果可有效鉴别.

目的 探讨藏药短穗兔耳草不同极性部位对急性痛风性关节炎大鼠模型的作用,及对模型大鼠Toll样受体2(TLR2)/髓样分化因子88 (MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)和NOD样受体蛋白3(NALP3)信号通路的影响.方法 110只SD雄性大鼠,随机均分成正常组,模型组,秋水仙碱(0.3 mg· kg-1)组及短穗兔耳草30％乙醇低、高剂量组(0.8、3.2 g·kg-1),短穗兔耳草50％乙醇低、高剂量组(0.8、3.2 g·kg-1),短穗兔耳草95％乙醇低、高剂量组(0.8、3.2 g·kg-1),短穗兔耳草水部位低、高剂量组(0.8、3.2 g·kg-1).适应性喂养7d后各给药组每天按10 mL·kg-1灌胃剂量进行给药处理,连续灌胃给药7d,正常组和模型组同等剂量灌胃蒸馏水.于第5d给药1h后向各组(正常组除外)大鼠右后踝关节处注射0.1 mL尿酸钠混悬液(50 mg·mL-1)建立大鼠急性痛风性关节炎模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水.用足趾容积测量仪检测大鼠右后踝关节的肿胀度;造模48 h后取血清和滑膜组织,采用Elisa法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测关节滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB和NALP3等相关蛋白含量的表达;HE染色法检测大鼠滑膜组织的病理学变化.结果 与正常组比较,模型组各时间点均出现明显的踝关节肿胀,且具有明显差异(P＜0.01);模型组大鼠血清TNF-α和IL-1β含量及滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB和NALP3等蛋白含量水平均明显升高(P＜ 0.05,P＜0.01).与模型组比较,在造模后48 h内,秋水仙碱组、30％乙醇部位低剂量组和50％乙醇部位的低、高剂量组大鼠踝关节肿胀率均明显下降(P＜0.05,P＜0.01).秋水仙碱组及30％乙醇部位低、高剂量组均能使血清TNF-α和IL-1β含量及滑膜组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB和NALP3蛋白表达量下调(P＜ 0.05,P＜0.01).同时,滑膜病理切片显示30％乙醇部位更能改善大鼠滑膜组织病理变化.结论 藏药短穗兔耳草对尿酸钠诱导的急性痛风性关节炎大鼠具有一定的保护作用,其中30％乙醇部位为有效部位,其作用机制与TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路有关.

目的 建立藏药兔耳草环烯醚萜苷类主要成分(梓醇、桃叶珊瑚苷)的含量测定方法,并对不同基原兔耳草及不同药用部位进行对比研究.方法 采用Waters Atlantis T3 C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.1％磷酸水(1 ∶ 99);检测波长:210 nm;流速:1 mL·min-1.采用单因素方差分析方法进行数据分析.结果 所建立的梓醇、桃叶珊瑚苷含量测定方法分离度高,在测定的浓度范围内线性关系好,精密度、重复性、稳定性的RSD均小于2.0％.梓醇、桃叶珊瑚苷平均加样回收率分别为102.94％、100.85％.各基原兔耳草环烯醚萜苷类主要成分(梓醇、桃叶珊瑚苷)比较:全缘兔耳草＞紫叶兔耳草＞短穗兔耳草＞圆穗兔耳草＞革叶兔耳草＞短筒兔耳草.同一基原不同药用部位比较:梓醇含量地下部位优于地上部位,而桃叶珊瑚苷含量地上部位优于地下部位.结论 所建立的方法快速、简便、重复性好,可用于藏药兔耳草梓醇、桃叶珊瑚苷的含量测定,为兔耳草的质量控制提供参考.短筒兔耳草环烯醚萜苷类成分含量低于其他5种基原.建议将各基原兔耳草均作为藏药兔耳草使用.

目的 挖掘短穗兔耳草治疗慢性酒精性肝损伤和急性痛风性关节炎两种疾病共同的作用机制.方法 通过TCM-SP、CTD等数据库并结合文献获取短穗兔耳草的化学成分和作用靶点,结合Gene Cards、OMIM等数据库筛选其治疗两种疾病的共有靶点;构建有效成分-疾病-共有靶点网络图,进行GO和KE GG富集分析并进行分子对接验证.结果 短穗兔耳草中的7个化合物可作用于253个共有靶点发挥其治疗作用;主要通过IL-6、ALB、TNF、TP53、VEGFA、STAT3、CXCL8、IL-10等20个关键靶点以及Toll样受体信号通路、NOD样受体信号通路、JAK-STAT信号通路、FcεRI信号通路、PPAR信号通路等44条信号通路发挥对两种疾病的治疗作用.分子对接结果显示荷包牡丹碱、柯伊利素、木犀草素可能为短穗兔耳草治疗两种疾病的有效化合物.结论 本研究初步地分析了短穗兔耳草治疗慢性酒精性肝损伤和急性痛风性关节炎的共同分子机制,为后期作用机制的研究提供思路.

目的 完善藏药七味兔耳草散质量标准.方法 采用显微定性特征鉴别朱砂、姜黄、红花、手参;建立短穗兔耳草、诃子、红花、熊胆粉、姜黄的薄层色谱(TLC)定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定没食子酸和木犀草素的含量.结果 新建立的显微鉴别与TLC鉴别特征明显,可行性良好;没食子酸在0.002023～0.02023 μg的范围内线性关系良好(r=0.9996),木犀草素在0.197～ 1.97 μg的范围内线性关系良好(r=0.9996).结论 该文建立分析方法科学、准确、可靠;进一步提高该制剂的质量标准,能够更好、更全面地控制七味兔耳草散的质量.

目的 利用DNA条形码内转录间隔区2(internal transcribed spacer2,ITS2)序列针对自采及流通使用环节的不同基原兔耳草进行分析,建立一种快速鉴定常用兔耳草的方法,并分析市场流通的主流品种.方法 采用试剂盒提取101份兔耳草样品的DNA,针对其ITS2片段进行PCR扩增并双向测序,获取ITS2序列信息;并从GenBank上下载相关序列28条.运用MEGA6.0对129条ITS2序列进行比对分析,计算种内和种间K2P遗传距离,构建邻接法(neighborjoining,NJ)系统进化树,并预测ITS2二级结构.采用BLAST法及NJ聚类分析法分析市场流通兔耳草基原.结果 除四川部分区域所产全缘兔耳草Lagotis integra与革叶兔耳草L.alutacea种间亲缘关系近外,短筒兔耳草L.brevituba、全缘兔耳草、圆穗兔耳草L.ramalana、革叶兔耳草、短穗兔耳草L.brachystachya及紫叶兔耳草L.praecox的种内最大遗传距离均小于种间最小遗传距离,具有明显的条形码间距.系统进化树显示短筒兔耳草、圆穗兔耳草、短穗兔耳草及紫叶兔耳草单独聚为一支,四川部分区域所产全缘兔耳草与革叶兔耳草聚为一支,其余全缘兔耳草聚为一支.通过ITS2二级结构发现,各基原兔耳草在茎环数目、大小及位置均有一定差异,可区分亲缘关系近的全缘兔耳草与革叶兔耳草.市场分析显示,市面上流通的兔耳草有6种基原,以全缘兔耳草使用占比最高,短筒兔耳草次之,短穗兔耳草及圆穗兔耳草较低,紫叶兔耳草及革叶兔耳草最低.结论 ITS2序列可以作为DNA条形码用来鉴别常用藏药兔耳草的基原,市场主流兔耳草品种为全缘兔耳草、短筒兔耳草及短穗兔耳草.