目的:探讨藤梨根提取物通过血管内皮生长因子(VEGF)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路对乳腺癌细胞增殖、凋亡的调控作用。方法:体外培养人乳腺癌细胞系MCF7，分为对照组及低、中、高剂量组，低、中、高剂量组分别加入DMEM培养液稀释的终浓度为1、10、100 μg/ml的藤梨根提取物，对照组加入等剂量DMEM培养液，培养48 h，比较各组增殖率[采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测]、凋亡率(采用流式细胞术检测)及PI3K、VEGF、磷酸化-AKT(p-AKT)蛋白表达量(采用Western blot法检测)。结果:与对照组比较，低剂量组MCF7细胞增殖率及PI3K、VEGF、p-AKT蛋白表达量显著减少( P<0.05)，低剂量组MCF7细胞凋亡率显著增加( P<0.05)；与低剂量组比较，中剂量组MCF7细胞增殖率及PI3K、VEGF、p-AKT蛋白表达量显著减少( P<0.05)，中剂量组MCF7细胞凋亡率显著增加( P<0.05)；与中剂量组比较，高剂量组MCF7细胞增殖率及PI3K、VEGF、p-AKT蛋白表达量显著减少( P<0.05)，高剂量组MCF7细胞凋亡率显著增加( P<0.05)。 结论:藤梨根提取物能够抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡，其机制可能与藤梨根提取物抑制VEGF/PI3K/AKT信号通路有关。

目的:研究藤梨根乙醇提取物(TLG)对H1688、H446细胞凋亡的影响,并探究其相关的分子机制.方法:用不同浓度TLG处理H446、H1688细胞:使用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡状况;Western blot检测Erk1/2、Foxo3a、PU-MA、Cleaved PARP蛋白表达量.结果:经TLG处理后,与不加药组相比,细胞的增殖抑制率以剂量依赖性形式增加;细胞凋亡率增加;Western Blot显示Erk1/2蛋白表达量随着TLG浓度的增加而降低;Foxo3a、PUMA、Cleaved PARP蛋白表达量随着TLG浓度的增加而增加.结论:TLG可促进小细胞肺癌细胞H1688、H446的凋亡,其机制可能是通过Erk1/2-Foxo3a-PUMA轴发挥作用.

目的 探讨藤梨根提取物(RAE)对食管鳞癌细胞EC9706增殖的影响及机制.方法 采用MTT法检测不同剂量的RAE对人食管鳞癌细胞EC9706的增殖抑制作用,运用RT-PCR检测食管鳞癌细胞株中miR-451表达水平并制备不同浓度的RAE干预食管鳞癌细胞株的生长,并再次运用RT-PCR检测各组食管鳞癌细胞株中miR-451表达水平.结果 RAE对食管鳞癌细胞有毒性作用,当RAE浓度≤10μg/ml时,与空白对照组相比,对于EC9706细胞的抑制率无统计学差异(P>0.05),RAE 100μg/ml和1000μg/ml的抑制率分别为18.9％、31.1％,与空白对照组比较有显著统计学意义(P<0.05).RT-PCR法检测两组细胞miR-451的表达程度有显著性差异(P<0.05).结论 不同浓度RAE的细胞毒性不同,在一定范围内与其浓度相关,当其浓度≤10μg/ml时,抑制率较小,为非细胞毒性浓度.RAE在一定的浓度范围内可以上调miR-451的表达水平,是藤梨根治疗食管癌的机制之一.

目的:通过一系列分子生物学方法研究藤梨根提取物对人宫颈癌Hela细胞的抑制,探索其发生抗肿瘤细胞作用可能的原理.方法:采用体外细胞培养方法,以不同浓度(1、10、100 μg/mL)的藤梨提取物作用于HeLa细胞12、24 h,荧光显微镜观察细胞凋亡;荧光染色观察细胞核内变化;应用MTT法检测其对宫颈癌Hela细胞的抑制效果;流式术检测宫颈癌HeLa细胞的周期分布和凋亡率情况;琼脂糖凝胶电泳法观察HeLa细胞的DNA Aladder形成情况;免疫组化SP法观察Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况;Real time-PCR法观察宫颈癌HeLa 细胞内的COX-2和PCNA mRNA含量变化.结果:低、中、高剂量组作用于HeLa细胞12、24 h后,可见明显的细胞凋亡现象,且凋亡现象明显高于对照组,其中24 h藤梨根(100μg/mL)组凋亡率最高,达38.8％;细胞的增殖逐渐减少,细胞的生长周期主要集中在G0/G1期;DNA Aladder的合成受阻,高剂量组凋亡条带明显可见;较对照组相比,Bcl-2、Cox-2、Pcna基因表达明显减少,Bax及Caspase-3 mRNA表达显著增加,高剂量组(100 μg/mL)尤为明显(均P＜0.05).结论:藤梨根提取物抑制宫颈癌HeLa细胞的生长效果良好,与HeLa细胞增殖减少和细胞凋亡的促进有关,而降低Bcl-2、Cox-2、Pcna基因表达、增强Bax基因表达,活化Caspase-3 mRNA也可能是其促进细胞凋亡机制之一.

目的 观察藤梨根提取物(RAE)对肝癌细胞生物学行为的影响并研究其机制.方法 将HCCLM3细胞细胞分组为miR-NC(转染miR-NC)、miR-34-5p(转染miR-34-5p mimics)、RAE+anti-miR-NC(转染anti-miR-NC)、RAE+anti-miR-34-5p组(转染anti-miR-34-5p),实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞中miR-34-5p的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、膜棕榈糖基化蛋白2(MPP-2)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭,采用SPSS12.0统计软件分析,多组间数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 与Con组比较,RAE(1、10、100 mg/L)可呈浓度依赖性显著抑制肝癌细胞的增殖(F=421.057、625.513、676.701、578.243、880.710和206.608,均P＜0.05),且最适浓度为10 mg/L;RAE可抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,并下调bcl-2、MPP-2,上调miR-34-5p、bax、E-cadherin的表达(t=10.663、26.885、19.270、224.478、46.317和45.388,均P＜0.05);过表达miR-34-5p具有与RAE对肝癌细胞相同的作用,抑制miR-34-5p可逆转RAE对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭抑制和凋亡促进作用(F=34.118、286.677、253.530、123.103、103.396和109.770,均P＜0.05).结论 RAE可抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,其机制与上调miR-34-5p相关.

藤梨根近年来被广泛应用于肿瘤的治疗中,效果显著.本文从藤梨根的主要化学成分,单味药提取物抗肺癌、食管癌、胃癌、其他肿瘤的作用机制及其在中药复方配伍中的临床应用等方面,对藤梨根治疗癌肿的研究情况进行综述,为藤梨根的后续开发与应用提供参考.

目的 研究藤梨根甲醇提取物的抗氧化活性,并初步分析其活性化学成分.方法 以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二-(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基能力为指标,测定藤梨根甲醇提取物的体外抗氧化活性;采用高效液相色谱-质谱联用技术对藤梨根甲醇提取物化学成分进行分析.结果 藤梨根甲醇提取物对DPPH、ABTS自由基具有良好的清除作用,半数有效浓度(EC50)分别为(26.275±1.464)mg/mL和(29.826±1.309)mg/mL;通过紫外光谱和质谱分析,初步鉴定了19个化学成分.结论 藤梨根甲醇提取物具有很好的体外抗氧化活性,其主要活性成分为多羟基和不饱和双键的成分.

目的 探讨藤梨根提取物对肝癌细胞生物学特性的影响以及潜在作用机制.方法 通过不同浓度藤梨根正丁醇提取物(0,25,50,100,200,400μg/mL)作用于人肝癌HepG2细胞.采用噻唑蓝(MTT)法检测肝癌HepG2细胞增殖情况,采用流式细胞术和Transwell法检测细胞凋亡、迁移、侵袭情况,采用Western blot法检测核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达水平.结果 不同浓度藤梨根提取物对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用(P均<0.05),且具有浓度依赖性,其半数抑制浓度(IC50)为145.365μg/mL.145μg/mL的藤梨根提取物可显著抑制HepG2细胞迁移、侵袭(P<0.05),诱导凋亡(P<0.05),抑制NF-κB磷酸化(P<0.05),下调基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白水平(P<0.05).结论 藤梨根正丁醇提取物可能通过影响NF-κB信号通路调控肝癌细胞生物学特性.

目的 研究藤梨根Actinidia chinensis Planch的化学成分及其体外抗肿瘤转移活性.方法 藤梨根95％乙醇提取物采用硅胶、Toyopearl HW-40、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.通过划痕实验和Transwell实验来评价其体外抗肿瘤转移活性.结果 从中分离得到8个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、3-氧代-12-烯-28-乌苏酸(2)、乌苏酸(3)、2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸(4)、2α,3α,23-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸(5)、2α,3β-二羟基齐墩果烷-12-烯-28酸(6)、2α,3β,23,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28酸(7)、胡萝卜苷(8).化合物7能明显抑制肿瘤细胞转移,并呈一定剂量依赖性.结论 化合物2、7为首次从该植物中分离得到,化合物7具有较强的体外抗肿瘤转移活性.

目的 研究藤梨根对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和侵袭的影响及其调控机制.方法 使用乙醇回流法提取藤梨根有效成分.将A549细胞随机分为4组,分别转染miR-148b-3p模拟物(miR-148b-3p mimics组),miR-148b-3p模拟物阴性对照RNA(miR NC组),miR-148b-3p抑制剂(miR-148b-3p inhibitors组)与miR-148b-3p抑制剂阴性对照RNA(NC组).以CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞侵袭,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-148b-3p表达,Western blot检测HSPA4L蛋白的表达.结果 不同浓度藤梨根乙醇提取物(0,0.1,1,10,100,500μg·mL-1)处理A549细胞48 h后细胞增殖率分别为(97.30±4.02)％,(97.12±3.42)％,(95.78±5.90)％,(90.21±9.23)％,(77.42±8.01)％,(73.62±7.61)％.0,100μg·mL-1藤梨根乙醇提取物细胞侵袭数目分别为(45.00±6.56),(18.33±6.43)个;miR-148b-3p相对表达量分别为1.11±0.06,3.27±0.19,0和100μg·mL-1藤梨根乙醇提取物组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).miR NC组、miR-148b-3p mimics组、NC组和miR-148b-3p inhibitors组HSPA4L蛋白表达分别为0.67±0.20,0.24±0.02,0.60±0.02和0.77±0.05,miR NC组与miR-148b-3p mimics组比较,NC组与miR-148b-3p inhibitors组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 藤梨根乙醇提取物可以通过miR-148b-3p/HSPA4L轴抑制A549细胞增殖和侵袭.