复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）是育龄期女性常见不良妊娠结局，其病因复杂，至今尚不明确。其中，母-胎界面微环境在维持妊娠方面发挥着关键作用。母-胎界面微环境主要包括滋养层细胞、蜕膜基质细胞和免疫细胞，而这些细胞数量或功能异常可能会诱发母-胎界面微环境的改变，如螺旋动脉重塑障碍、蜕膜化异常等，从而导致RSA。本文围绕这三种主要细胞在RSA发生中的作用和机制进行综述。

目的:研究孕激素对人孕晚期蜕膜基质细胞（decidual stromal cells，DSCs）形态、增殖以及分泌细胞因子的影响，从而探究孕激素在预防自发性早产中的作用机制。方法:人孕晚期DSCs原代培养并鉴定，培养液中加入不同浓度的孕酮，分成10 -6 mol/L组、10 -5 mol/L组和10 -4 mol/L组，对照组培养液不加孕酮。显微镜下观察各组DSCs细胞形态、测量细胞长/宽比值；四甲基偶氮唑盐比色（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法测定细胞增殖活性；RT-qPCR检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）mRNA表达水平。 结果:①DSCs长/宽比值比较：孕酮10 -4 mol/L组（5.87±0.19）、10 -5 mol/L组（5.98±0.27）低于对照组（6.42±0.19），差异有统计学意义（ P<0.001， P=0.002），孕酮10 -4 mol/L组低于10 -6 mol/L组（6.28±0.32），差异有统计学意义（ P=0.005）。②细胞增殖活性比较：孕酮10 -5 mol/L组（0.70±0.04）、10 -4 mol/L组（0.78±0.04）分别高于对照组（0.59±0.05； P=0.027、 P=0.002），10 -4 mol/L组高于10 -6 mol/L组（0.61±0.01， P=0.004）。③ TNF-α mRNA表达比较：孕酮各浓度组均低于对照组（均 P<0.001），10 -5 mol/L组、10 -4 mol/L组均低于10 -6 mol/L组（均 P<0.001）； IL-6 mRNA表达比较：对照组、10 -6 mol/L组、10 -5 mol/L组和10 -4 mol/L组中， IL-6 mRNA表达水平逐渐降低，组间两两比较，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。 结论:孕酮能使人孕晚期DSCs形态宽大饱满、促进细胞增殖、降低 TNF-α及 IL-6 mRNA表达水平，提示孕激素在预防自发性早产中起一定作用。

胚胎着床过程复杂而精密。胚胎质量、子宫内膜容受性以及两者的同步发育是决定胚胎着床的关键因素。蜕膜化是子宫内膜基质细胞转变为分泌型的蜕膜基质细胞的过程，与子宫内膜容受性密切相关。异常蜕膜化可导致胚胎着床失败或不良妊娠结局。最新研究表明子宫内膜蜕膜化中存在子宫内膜基质细胞衰老的现象，一定程度的基质细胞衰老促进蜕膜化和容受性建立，而过度或不足的基质细胞衰老则可能导致蜕膜化异常和容受性受损。本文旨在对基质细胞衰老在子宫内膜蜕膜化及容受性建立中的作用进行综述，以期为容受性相关疾病的发病机制和治疗提供新的启示。

复发性流产的患者中有40%~50%原因不明，称为原因不明复发性流产（URSA），URSA主要与免疫失衡相关。母亲对胚胎的免疫耐受在胚胎种植及生长发育中起到至关重要的作用。母胎界面存在的免疫细胞及分泌的细胞因子对母胎免疫耐受的形成起着非常关键的作用，这其中包括：滋养细胞表达的人白细胞抗原G及蜕膜自然杀伤细胞可以促进子宫螺旋动脉血管重塑，蜕膜调节性T淋巴细胞和蜕膜基质细胞的作用，母胎免疫耐受相关的细胞因子以及自身免疫性抗体。本文对母胎免疫耐受与URSA之间的关系及作用机制进行综述。

目的:探讨骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是否参与体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞（mouse endometrial stromal cells，mESCs）蜕膜化的过程及其调节作用。方法:采用雌激素（10 nmol/L）和孕酮（1 μmol/L）处理mESCs进行体外诱导蜕膜化，检测OPN的表达变化。设立 Opn质粒过表达组及 Opn shRNA敲减组，分别将 Opn过表达质粒和 Opn shRNA转染mESCs，同时设立阴性对照组，采用实时定量PCR及Western blotting法检测转染效率；CCK-8法检测每组细胞的增殖情况；采用实时定量PCR和Western blotting法检测小鼠子宫内膜蜕膜化标志分子蜕膜/滋养层催乳素相关蛋白（decidual/trophoblast-layer prolactin related protein，Dtprp）和血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A，Vegfa）及其受体2（vascular endothelial growth factor A receptor 2，Vegfr2）表达情况。 结果:雌激素+孕酮诱导蜕膜化mESCs中 Dtprp（ P<0.001）、 Vegfa（ P=0.004）和 Vegfr2（ P=0.002）mRNA 水平显著增加，同时 Opn mRNA（ P=0.002）和OPN蛋白（ P<0.001）的表达水平也显著增加； Opn过表达可促进mESCs细胞增殖（ P=0.004），而敲减 Opn可抑制mESCs细胞增殖（ P=0.008）；转染 Opn过表达质粒可进一步促进蜕膜化mESCs中 Dtprp（ P<0.001）、 Vegfa（ P=0.021）和 Vegfr2（ P=0.012）的mRNA表达，同时Vegfa蛋白水平也显著增加（ P=0.001）；敲减 Opn后，则可降低蜕膜化mESCs中 Dtprp（ P=0.009）、 Vegfa（ P=0.007）和 Vegfr2（ P=0.001）的mRNA表达，VEGFA蛋白的表达水平也相应降低（ P<0.001）。 结论:OPN参与调节小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化进程及功能。

葡萄糖转运蛋白（glucose transporters，GLUTs）在子宫内膜中广泛表达，介导葡萄糖摄取，调控子宫内膜基质细胞的能量代谢及蜕膜免疫代谢等过程，并与蜕膜化过程中重要的信号通路相互作用，影响胚胎植入。本文将对蜕膜化过程中GLUTs的表达及其作用机制作一综述，以期为不孕症及妊娠相关疾病的防治提供理论依据。

目的:探究邻苯二甲酸酯类增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)亚急性暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应和流产风险的影响.方法:分别选取300、1000、3000 mg·kg-1·d-1三个浓度梯度的DEHP对CD1小鼠进行经口亚急性暴露28 d.建立DEHP亚急性暴露小鼠早期自然妊娠模型和人工诱导假孕小鼠蜕膜反应模型,分别取自然妊娠第7天子宫组织和人工诱导蜕膜反应小鼠妊娠第8天诱导侧子宫组织,通过苏木精-伊红染色(HE染色)、Masson染色、TUNEL检测、蛋白质印迹法检测DEHP亚急性暴露对小鼠蜕膜反应的影响.构建300 mg·kg-1·d-1 DEHP亚急性暴露小鼠自然流产模型,观察妊娠第10天的妊娠结局,探究蜕膜反应受损对小鼠妊娠的影响.结果:与空白对照组比较,DEHP大剂量组受孕率显著性降低(P＜0.05);HE染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜基质细胞排列杂乱、细胞核形态不规则、胞浆染色不均、多核细胞数显著降低;Masson染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜组织的胶原纤维分布更多、数量增多、排列杂乱;TUNEL检测显示暴露组蜕膜组织细胞凋亡增加;蛋白质印迹法检测显示暴露组子宫内膜蜕膜反应标志分子BMP2蛋白表达水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01);在米非司酮流产刺激下DEHP小剂量组小鼠流产率、胚胎吸收率显著升高,胚胎数、子宫湿重、子宫面积、胎盘湿重显著减少(P＜0.05或P＜0.01).结论:DEHP亚急性暴露导致小鼠子宫内膜蜕膜反应受损加重小鼠妊娠流产风险.

目的 研究大豆异黄酮对先兆流产大鼠的保胎作用及可能机制.方法 取雌鼠促情,与雄鼠交配、妊娠后随机分为正常组(纯化水灌胃,n=10)、模型组(纯化水灌胃,n=9)、阳性对照药组(黄体酮4 mg/kg,肌内注射,n=9)和大豆异黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg灌胃,n=10).除正常组外,其余各组大鼠均于孕8 d以米非司酮+米索前列醇灌胃建立先兆流产模型.各组大鼠分别于孕1～7 d、孕9～12 d给药/纯化水,每天1次.孕14 d时,计算各组大鼠的保胎率,检测大鼠血清中β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)水平,观察大鼠胎盘与蜕膜组织病理形态学变化并检测其细胞凋亡指数,检测胎盘组织中凋亡相关因子(Fas)、凋亡相关因子配体(FasL)、增殖细胞核抗原(PCNA)和肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)mRNA及其蛋白表达,检测蜕膜组织中Fas、PCNA和HB-EGF mRNA及其蛋白表达.结果 模型组大鼠胎盘组织充血扩张明显,血管较少且形态不规则,可见大量严重基质水肿、炎症细胞浸润和铁胆黄素沉积.与模型组比较,大豆异黄酮各剂量组大鼠的保胎率,血清β-HCG、P水平,胎盘与蜕膜组织中PCNA、HB-EGF mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05),病理学变化显著改善;胎盘与蜕膜组织细胞凋亡指数,胎盘组织中Fas、FasL mRNA及其蛋白表达水平,蜕膜组织中Fas mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05),且大豆异黄酮的上述作用呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 大豆异黄酮对先兆流产模型大鼠有保胎作用;其作用机制可能与下调母-胎界面Fas、FasL mRNA及其蛋白表达,上调PCNA、HB-EGF mRNA及其蛋白表达有关.

目的 kisspeptin是一种肿瘤抑制因子,由 KISS1基因编码.Notch1/Akt/Foxo1是调节细胞增殖、分化的重要信号通路.本研究探讨kisspeptin通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化在复发性流产(RSA)中的作用机制.方法 纳入2020年6月-2020年12月苏州大学附属第二医院生殖中心门诊收治的RSA患者45例及同期计划生育门诊择期人工流产女性50例,Western blot、RT-qPCR检测蜕膜组织中kisspeptin(及其基因KISS1)、蜕膜化标志物胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP1)、Notch1、Akt、Foxo1表达水平.使用siRNA干扰KISS1或添加kisspeptin10(kisspeptin的活性片段)处理永生化子宫内膜基质细胞(hESC)后,命名为siKP组或KP10组,并设转染空白siRNA的hESC为对照组,CCK8检测增殖情况.对3组hESC进行体外诱导蜕膜化,免疫荧光检测siKP组和KP10组细胞Notch1表达及蜕膜化形态差异,RT-qPCR和Western blot检测3组细胞IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的表达.hESC添加Notch1、Akt、Foxo1对应抑制剂后诱导蜕膜化(以仅诱导蜕膜化、未添加抑制剂的hESC为正常对照组),检测4组细胞上述蛋白和基因的表达.建立正常妊娠(CBA/J×BALB/c)和复发性流产(CBA/J×DBA/2)小鼠模型,即NP模型和RSA模型,实验组分别给予kisspeptin10和kisspeptin234(阻滞剂)隔日1次腹腔注射(RSA-KP10组和NP-KP234组),对照组给予生理盐水隔日1次腹腔注射(RSA-NS组和NP-NS组),共4组,每组6只,取孕9.5 d的子宫组织,观察胚胎吸收的情况,检测上述蛋白和基因的表达.结果 与正常妊娠(NP)女性相比,RSA患者kisspeptin、IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及其基因表均降低(P<0.01或P<0.05).hESC添加 kisspeptin10 后蜕膜化能力增强,Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及基因表达增加,干扰KISS1后表达降低;免疫荧光见增殖状态的 hESC呈细长形,蜕膜化后细胞变圆、变大,Notch1 表达增加,添加kisspeptin10后蜕膜化程度增高,干扰KISS1后减弱;分别用Notch1、Akt、Foxo1抑制剂处理hESC,发现三者按Notch1/Akt/Foxo1的顺序依次调控(P<0.05).与注射生理盐水组相比,正常妊娠小鼠注射 kisspeptin234后吸收胎增多(P<0.001),IGFBP1、Notch1、Akt、Foxo1的蛋白及基因表达下降(P<0.05);复发流产小鼠注射 kisspeptin10 后吸收胎减少(P<0.001),上述蛋白及基因表达升高(P<0.05).结论 kisspeptin可能通过Notch1/Akt/Foxo1信号通路调控子宫内膜蜕膜化,其表达下调导致蜕膜化不良,可能是导致RSA发病的原因之一.

目的:研究抗磷脂抗体(aPL)对蜕膜组织血管内皮细胞(DVEC)增殖、迁移与血管形成能力的影响.方法:采用细胞免疫荧光鉴定DVEC细胞;CCK-8 法检测aPL对DVEC细胞增殖的影响;细胞划痕实验与血管形成实验检测aPL对DVEC细胞迁移与血管生成的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测aPL对DVEC细胞基质金属蛋白酶 2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA 表达的影响;Western blot 检测 aPL 对DVEC细胞中p-ERK、t-ERK、VEGF与MMP-2 蛋白表达的影响.结果:aPL能抑制DVEC细胞增殖、迁移与血管形成能力;aPL能抑制DVEC细胞中p-ERK、VEGF与MMP-2 表达水平,加ERK激动剂后DVEC细胞中p-ERK、VEGF与MMP-2 表达水平明显升高.结论:aPL可通过调控ERK通路减少DVEC细胞中VEGF与MMP-2 表达,进而抑制DVEC的增殖、迁移与血管形成能力.