目的:探索人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells，hAMSCs）对自身免疫性早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）小鼠卵巢功能和子宫内膜容受性的影响。方法:使用透明带3多肽-弗氏免疫佐剂诱导小鼠自身免疫性POI，一次性尾静脉注射移植hAMSCs 1×10 6细胞/只，将动物分为正常组（ n=10）、模型组（ n=15）、hAMSCs组（ n=15），阴道涂片监测动情周期，酶联免疫法检测血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hornome，FSH）、雌二醇与抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）含量，HE染色观察卵巢和子宫病理组织学变化，免疫组织化学检测子宫同源框A10（homeobox A10，HOXA10）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和FSH受体（FSH receptor，FSHR）蛋白表达，综合评价子宫内膜容受性。 结果:hAMSCs移植6周，hAMSCs组动情周期异常率［40.00%（6/15）］低于模型组［86.67%（13/15）， P=0.021］。与模型组血清FSH［（10.239±1.091）μg/L］、雌二醇［（103.325±4.952）ng/L］和AMH［（1.133±0.494）μg/L］水平相比，hAMSCs组FSH水平［（7.664±0.735）μg/L］明显降低（ P<0.001），雌二醇［（126.883±23.370）ng/L］和AMH［（2.204±0.453）μg/L］水平均明显升高（ P=0.015， P<0.001）。与模型组不同，hAMSCs组卵巢指数、子宫指数增高；卵巢组织不同发育阶段的卵泡数增加，间质纤维化和闭锁卵泡少见，子宫壁与子宫内膜增厚，腺体数量和体积增加。HOXA10吸光度（absorbance， A）值hAMSCs组（5.90±1.94）高于模型组（2.79±1.27， P=0.029），TNF-α A值hAMSCs组（3.83±1.23）低于模型组（6.26±0.96， P=0.002）；FSHR A值hAMSCs组（3.61±1.66）与模型组（2.74±0.22）差异无统计学意义（ P>0.05），但模型组低于正常组（4.13±0.54， P=0.006）。 结论:移植hAMSCs在恢复自身免疫性POI小鼠卵巢功能的同时，可明显改善子宫内膜容受性，有助于提高生育能力。

目的:探讨外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）源性外泌体经miR-1306改善子宫内膜容受性的机制。方法:运用皮下注射米非司酮制备着床障碍小鼠模型并分为着床障碍组、PBMCs干预组，同时设置正常组，每组12只。PBMCs干预组给予宫腔注射PBMCs源性外泌体干预，正常组和着床障碍组宫腔注射等体积缓冲液，比较各组小鼠的妊娠率和着床点数，RT-PCR法检测子宫内膜组织miR-1306表达，酶联免疫吸附试验检测子宫内膜组织活性氧（reactive oxygen species，ROS）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、单核细胞趋化因子-1（monocyte chemcattractant protein-1，MCP-1）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）水平，Western blotting法检测小鼠子宫内膜组织中妊娠相关蛋白表达。将子宫内膜上皮细胞分为对照组、实验组、阴性对照组、miR-1306 inhibitor组，除对照组外余下各组细胞均采取Transwell共培养PBMCs源性外泌体，使用MTT法、Edu法、Annexin-V/PI流式法分别检测细胞活性、增殖和凋亡情况，试剂盒检测细胞ROS水平，Western blotting检测相关蛋白表达。结果:着床障碍组小鼠妊娠率［8.33%（1/12）］、着床点数［0（0，0）个］和子宫内膜组织miR-1306表达（0.24±0.05）、SOD水平［（5.66±0.72）U/mL］均显著低于正常组［100%（12/12）、16.50（14.00，19.00）个、1.03±0.05、（8.69±1.21）U/mL，均 P<0.05］；子宫内膜组织ROS水平［（4.87±0.39）U/mL］、IL-6水平［（116.51±5.78）ng/L］、MCP-1水平［（36.84±3.56）μg/L］和KIR2DL4（0.87±0.06）、核因子红细胞2相关因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor 2，Nrf2，0.76±0.06）、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-like ECH-associated protein 1，Keap1，0.79±0.05）、受体相互作用蛋白酶1（receptor interacting protein 1，RIP1，0.94±0.04）和RIP3蛋白（0.86±0.05）表达水平均显著高于正常组［（2.41±0.19）U/mL、（83.79±6.68）ng/L、（12.32±2.09）μg/L、0.27±0.03、0.31±0.05、0.23±0.04、0.34±0.03、0.31±0.05，均 P<0.05］。PBMCs干预组小鼠妊娠率［75.00%（9/12）］、着床点数［13.00（13.00，14.75）个］和子宫内膜组织miR-1306表达（0.82±0.05）、SOD水平［（7.24±0.84）U/mL］均显著高于着床障碍组（均 P<0.05）；子宫内膜组织ROS［（3.43±0.30）U/mL］、IL-6［（94.69±3.99）ng/L］、MCP-1水平［（27.03±3.48）μg/L］和KIR2DL4（0.54±0.08）、Nrf2（0.48±0.05）、Keap1（0.43±0.05）、RIP1（0.56±0.05）、RIP3蛋白表达（0.49±0.03）均显著低于着床障碍组（均 P<0.05）。实验组细胞活性［（126.63±1.25）%］、增殖率［（53.54±2.82）%］和ROS水平［（3.12±0.31）U/mL］均显著高于对照组［100%、（23.18±3.07）%、（2.51±0.28）U/mL，均 P<0.05］，凋亡率［（5.69±0.47）%］、KIR2DL4（0.36±0.06）、Nrf2（0.30±0.06）、Keap1（0.26±0.04）、RIP1（0.27±0.05）和RIP3蛋白表达（0.26±0.06）均低于对照组［（27.13±2.97）%、0.84±0.06、0.75±0.05、0.68±0.05、0.80±0.06、0.80±0.07，均 P<0.05］。miR-1306 inhibitor组细胞活性［（83.48±5.34）%］、增殖率［（38.42±4.28）%］均显著低于阴性对照组［（127.12±4.08）%、（53.57±2.09）%，均 P<0.05］，细胞凋亡率［（13.63±1.77）%］、ROS水平［（6.49±0.62）U/mL］、KIR2DL4（0.67±0.07）、Nrf2（0.57±0.05）、Keap1（0.50±0.05）、RIP1（0.64±0.06）和RIP3蛋白表达（0.61±0.08）均显著高于阴性对照组［（5.71±0.78）%、（3.23±0.31）U/mL、0.36±0.07、0.30±0.07、0.27±0.06、0.28±0.07、0.28±0.06，均 P<0.05］。 结论:PBMCs源性外泌体可以提高着床障碍小鼠妊娠率，可能是通过促进miR-1306表达、抑制KIR2DL4表达以改善炎症反应，还与缓解子宫内膜过度氧化应激和细胞凋亡有关。

目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响.方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定.建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜组织病理学变化、免疫组化法分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况.通过EdU法、Western blot法评估EVs对人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖的影响.结果:H9-hESCs-EVs是粒径为(144.7±2.1)nm并且具有膜结构的纳米小体,表达CD63和TSG101特征蛋白.与PBS组相比,EVs实验组子宫内膜组织形态完整、厚度及腺体数量增加,EVs实验组PCNA表达的平均光密度较PBS组显著升高(P<0.05).EdU、Western blot检测结果显示H9-hESCs-EVs促进hEndoSCs增殖,且与EVs呈现蛋白浓度正相关(P<0.05).结论:H9-hESCs-EVs通过提高子宫内膜基质细胞增殖促进子宫内膜损伤修复.

目的:采用小鼠动物模型探究瘢痕子宫对子宫内膜容受性及胎盘滋养细胞侵袭的影响。方法:取无特定病原体级雌性小鼠30只，通过单侧子宫切口模拟剖宫产对子宫造成的全层损伤以建立单侧瘢痕子宫模型，比较瘢痕侧与对照侧的差异。观察小鼠着床窗口期（孕4.5 d）子宫内早期囊胚着床数目，电镜下检测内膜胞饮突形态，分别采用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术定量检测内膜容受性相关分子（白血病抑制因子和黏蛋白1）及其mRNA在胎盘的表达。在胎盘形成过程中（孕13.5、15.5和17.5 d），通过组织病理学观测胎盘蜕膜层、连接层及迷路层发育、糖原滋养细胞分布；足月胎盘（孕18.5 d）用CK7标记侵袭滋养细胞定位，评估滋养细胞侵袭情况。采用配对 t检验和单因素方差分析对数据进行统计学分析。 结果:孕4.5 d时瘢痕侧囊胚着床数低于对照侧［（1.33±0.81）与（3.50±0.54）个， t=7.05， P=0.001］；瘢痕侧子宫内膜“胞饮突”覆盖面积评分低于对照侧［（1.60±0.44）与（2.75±0.28）分， t=15.06， P<0.001］；同期组织白血病抑制因子mRNA水平亦低于对照侧（0.71±0.12与1.49±0.30， t=5.16， P=0.004），黏蛋白1 mRNA表达水平高于对照侧（2.19±0.45与1.03±0.17， t=7.51， P<0.001）。在胎盘发育成熟前、中、后期（孕13.5、15.5和17.5 d），瘢痕侧和对照侧胎盘各层面积及大体形态无明显差异；胎盘连接层及靠近蜕膜区滋养细胞分布情况提示，瘢痕侧糖原滋养细胞灰度在孕15.5 d（31.01±1.502与23.63±0.90， t=12.76， P<0.001）和孕17.5 d时（31.96±2.37与24.03±1.87， t=4.36， P=0.008）均高于对照侧。孕18.5 d的成熟胎盘瘢痕侧CK7阳性滋养细胞大量富集在靠近母体区域的蜕膜层，总体表现为滋养细胞过度侵袭。 结论:瘢痕影响小鼠子宫内膜功能，瘢痕后妊娠时内膜容受性下降，且着床后胎盘发育期的滋养细胞存在过度侵袭。

目的:探讨骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是否参与体外诱导小鼠子宫内膜基质细胞（mouse endometrial stromal cells，mESCs）蜕膜化的过程及其调节作用。方法:采用雌激素（10 nmol/L）和孕酮（1 μmol/L）处理mESCs进行体外诱导蜕膜化，检测OPN的表达变化。设立 Opn质粒过表达组及 Opn shRNA敲减组，分别将 Opn过表达质粒和 Opn shRNA转染mESCs，同时设立阴性对照组，采用实时定量PCR及Western blotting法检测转染效率；CCK-8法检测每组细胞的增殖情况；采用实时定量PCR和Western blotting法检测小鼠子宫内膜蜕膜化标志分子蜕膜/滋养层催乳素相关蛋白（decidual/trophoblast-layer prolactin related protein，Dtprp）和血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A，Vegfa）及其受体2（vascular endothelial growth factor A receptor 2，Vegfr2）表达情况。 结果:雌激素+孕酮诱导蜕膜化mESCs中 Dtprp（ P<0.001）、 Vegfa（ P=0.004）和 Vegfr2（ P=0.002）mRNA 水平显著增加，同时 Opn mRNA（ P=0.002）和OPN蛋白（ P<0.001）的表达水平也显著增加； Opn过表达可促进mESCs细胞增殖（ P=0.004），而敲减 Opn可抑制mESCs细胞增殖（ P=0.008）；转染 Opn过表达质粒可进一步促进蜕膜化mESCs中 Dtprp（ P<0.001）、 Vegfa（ P=0.021）和 Vegfr2（ P=0.012）的mRNA表达，同时Vegfa蛋白水平也显著增加（ P=0.001）；敲减 Opn后，则可降低蜕膜化mESCs中 Dtprp（ P=0.009）、 Vegfa（ P=0.007）和 Vegfr2（ P=0.001）的mRNA表达，VEGFA蛋白的表达水平也相应降低（ P<0.001）。 结论:OPN参与调节小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化进程及功能。

目的:阐明miR-182靶向调控水通道蛋白5（aquaporin5，AQP5）基因介导Wnt信号通路对子宫内膜异位症（endometrrosis，EMs）小鼠子宫内膜腺上皮细胞增殖、侵袭的影响。方法:构建EMs小鼠模型。取小鼠子宫内膜腺上皮组织并检测组织中miR-182、AQP5的表达。酶联免疫吸附法检测正常和EMs模型小鼠炎性因子表达。随后分离小鼠子宫内膜腺上皮细胞。qRT-PCR和Western blot检测细胞中miR-182、AQP5、Wnt通路相关因子（Wnt-1、β-catenin）的表达。MTT、Transwell分别检测细胞的增殖活力和侵袭能力。结果:与Normal组小鼠相比，EMs组小鼠子宫内膜腺上皮组织中miR-182表达降低，AQP5及Wnt-1、β-catenin表达升高（均 P<0.05）。细胞实验中，过表达miR-182或沉默AQP5能抑制Wnt通路相关因子（Wnt-1、β-catenin）的表达。同时，细胞的增殖活力降低，侵袭能力下降（均 P<0.05）。miR-182 inhibitor组各项指标表达与miR-182 mimic组相反。EMs细胞转染sh-AQP5的影响能被miR-182 inhibitor抵消。 结论:上调miR-182能靶向抑制AQP5的表达，通过抑制Wnt信号通路的激活进而减少EMs小鼠子宫内膜腺上皮细胞的增殖、侵袭。

目的:探究熊果酸（ursolic acid，UA）对异位子宫内膜基质细胞（ectopic endometrial stromal cells，EESCs）增殖、迁移和铁死亡的影响及其作用机制。方法:构建子宫内膜异位症小鼠模型，并分离原代EESCs，使用不同浓度（0、2.5、5、10、20、40、50、80、100、200 μmol/L）的熊果酸处理细胞；并将细胞分为Control组（正常培养）、2.5 μmol/L UA组（2.5 μmol/L熊果酸处理）、5.0 μmol/L UA组（5.0 μmol/L熊果酸处理）、10.0 μmol/L UA组（10 μmol/L熊果酸处理）、和UA+DUSP19组（10 μmol/L熊果酸+50 μmol/L的JAK2/STAT3信号通路激活剂DUSP19处理）。使用CCK-8法检测细胞存活率；使用平板克隆法检测细胞增殖；使用Transwell小室实验检测细胞迁移能力；使用试剂盒检测各组细胞Fe 2+水平以及丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）含量；使用蛋白免疫印迹检测各组细胞Ki67、PCNA、CyclinD1、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、STAT3蛋白表达水平。 结果:Control、2.5 μmol/L UA、5.0 μmol/L UA、10.0 μmol/L UA组克隆数分别为：（152.22±15.47）、（121.22±11.54）、（92.00±5.54）、（66.44±6.88）个；Ki67蛋白表达量分别为：1.08±0.10、0.73±0.07、0.61±0.06、0.45±0.02；PCNA蛋白表达量分别为：0.85±0.07、0.64±0.05、0.41±0.03、0.31±0.05；CyclinD1蛋白表达量分别为：0.98±0.11、0.65±0.06、0.51±0.05、0.42±0.07；迁移数目分别为（92.78±6.27）、（62.22±2.20）、（50.22±4.59）、（39.11±4.33）个；Fe 2+水平分别为：（1.06±0.07）、（1.21±0.11）、（1.33±0.08）和（1.47±0.09）μmol/g；MDA含量分别为：（0.48±0.06）、（0.65±0.07）、（0.85±0.08）和（1.03±0.11）μmol/g；ROS含量分别为（19.85±1.21）%、（24.83±2.79）%、（29.04±1.86）%、（33.87±2.45）%；SOD含量分别为：（36.41±3.56）、（31.03±2.81）、（25.63±2.84）和（19.62±1.67）U/mg；p-JAK2蛋白表达量分别为：0.85±0.10、0.75±0.06、0.53±0.05、0.31±0.03；p-STAT3蛋白表达量分别为：1.08±0.11、0.79±0.06、0.63±0.07、0.42±0.03。UA组和UA+DUSP19组的p-JAK2蛋白含量分别为：0.38±0.05、0.75±0.08；p-STAT3蛋白表达量分别为：0.46±0.04、0.80±0.03；细胞存活率分别为：（52.55±2.44）%、（82.18±4.72）%；Fe 2+水平分别为：（1.57±0.06）和（1.21±0.13）μmol/g。以上指标，Control组与2.5 μmol/L UA组、5.0 μmol/L UA组、10.0 μmol/L UA组之间差异均具有统计学意义（ P<0.05）；2.5 μmol/L UA组、5.0 μmol/L UA组、10.0 μmol/L UA组之间差异均具有统计学意义（ P<0.05）；UA组和UA+DUSP19组之间p-JAK2、p-STAT3、细胞存活率和Fe 2+水平差异均具有统计学意义（ P<0.05）。 结论:熊果酸可通过调控JAK2/STAT3信号通路抑制EESCs细胞增殖、迁移，并诱导铁死亡，进而发挥对子宫内膜异位症的保护作用。

目的:基于网络药理学探讨加味当归芍药散治疗子宫内膜异位症(EMs)痛经的作用机制.方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、人类孟德尔遗传在线数据库(O MIM)、人类基因数据库(GeneCards)、人类疾病相关基因与突变位点信息数据库(DisGeNET)、疗效靶点数据库(TTD)等数据库分析组方活性成分及潜在作用靶点,构建加味当归芍药散活性成分-EMs痛经靶点网络,并对核心靶点进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,应用分子对接vina(Autodock vina)软件对组方潜在活性成分及核心靶点进行分子对接,并采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白免疫印记法初步验证组方对EMs小鼠模型子宫内膜预测靶点mRNA及相关蛋白表达的影响.结果:组方筛选出活性成分86个,其治疗EMs痛经对应的交集靶点共64个,其中度值较高的靶点包括表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤抑制基因p53(TP53)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、白细胞介素6(IL-6)、基序趋化因子配体8(CXCL8)、基质金属蛋白酶9(MMP9)等.GO功能富集分析共得到1990个条目,KEGG通路分析涉及雌激素、黏着斑等127条通络.分子对接结果显示,组方核心成分槲皮素与VEGFA、AKT1、低氧诱导因子1A(HIF1A)等关键靶点具有良好的结合力.验证实验显示,加味当归芍药散可显著下调EMs小鼠模型VEGFA、CXCL8、TP53等mRNA及MMP9、环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达水平.结论:加味当归芍药散的核心成分可调控EMs痛经的多个靶点,其作用机制可能和调控细胞侵袭、雌激素、免疫、炎症反应等信号通路相关.

在现行医学教育体系中,临床专业学生的基础医学教育和临床理论及技能培训存在脱节[1].传统的形态学教学中,各学科独立授课,关于同一结构的知识点零散分布,难以体现学科间的横向联系[2].以子宫为例,系统解剖学侧重大体结构,组织学聚焦显微结构,胚胎学详细介绍胚胎发育过程,病理学阐释病理形态.

目的:探究邻苯二甲酸酯类增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)亚急性暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应和流产风险的影响.方法:分别选取300、1000、3000 mg·kg-1·d-1三个浓度梯度的DEHP对CD1小鼠进行经口亚急性暴露28 d.建立DEHP亚急性暴露小鼠早期自然妊娠模型和人工诱导假孕小鼠蜕膜反应模型,分别取自然妊娠第7天子宫组织和人工诱导蜕膜反应小鼠妊娠第8天诱导侧子宫组织,通过苏木精-伊红染色(HE染色)、Masson染色、TUNEL检测、蛋白质印迹法检测DEHP亚急性暴露对小鼠蜕膜反应的影响.构建300 mg·kg-1·d-1 DEHP亚急性暴露小鼠自然流产模型,观察妊娠第10天的妊娠结局,探究蜕膜反应受损对小鼠妊娠的影响.结果:与空白对照组比较,DEHP大剂量组受孕率显著性降低(P＜0.05);HE染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜基质细胞排列杂乱、细胞核形态不规则、胞浆染色不均、多核细胞数显著降低;Masson染色显示DEHP小剂量组和中剂量组蜕膜组织的胶原纤维分布更多、数量增多、排列杂乱;TUNEL检测显示暴露组蜕膜组织细胞凋亡增加;蛋白质印迹法检测显示暴露组子宫内膜蜕膜反应标志分子BMP2蛋白表达水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01);在米非司酮流产刺激下DEHP小剂量组小鼠流产率、胚胎吸收率显著升高,胚胎数、子宫湿重、子宫面积、胎盘湿重显著减少(P＜0.05或P＜0.01).结论:DEHP亚急性暴露导致小鼠子宫内膜蜕膜反应受损加重小鼠妊娠流产风险.