目的 探讨影响痰瘀互结证急性冠脉综合征(Acme coronary syndrome,ACS)患者血小板功能及活性的相关因素及化瘀祛痰方对其的作用.方法 前瞻性开放标签招募2022年6月—2023年6月就诊于辽宁中医药大学附属医院心内科,符合痰瘀互结证ACS诊断标准同时服用双联抗血小板聚集药物患者50例为研究对象,给予化瘀祛痰方治疗4周.检测化瘀祛痰方治疗前后血小板压积(Plateletcrit,PCT)、花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)最大聚集率、二磷酸腺苷(Adenosinediphosphate,ADP)最大聚集率、血小板活化标记物全血P选择素CD62p、血小板膜糖蛋白Ⅱ b/Ⅲa复合物PAC-1水平,探讨化瘀祛痰方对其的作用.同时采用Pearson、Spearman相关系数分析探讨血小板功能及活性参数与ACS重要危险因素:吸烟史、体质量指数(Body Mass Index,BMI)、血脂水平、2型糖尿病病史、高血压病病史的相关性.结果 1.化瘀祛痰方治疗后,痰瘀互结证ACS患者血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low densi-ty lipoprotein,LDL-C)水平明显下降,载脂蛋白A1(Apoprotein A1,APO-A1)水平明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01);血清甘油三酯(Triglycerides,TG)、载脂蛋白 B(Apoprotein B,APO-B)、脂蛋白 A[Lipoprotein(a),LPa]水平呈下降趋势,高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein,HDL-C)水平呈上升趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).2.化瘀祛痰方治疗后,痰瘀互结证ACS患者血小板压积减低,AA最大聚集率下降,CD62p、PAC-1含量降低,差异有统计学意义(P＜0.01);ADP最大聚集率下降,差异有统计学意义(P＜0.05).3.吸烟史、BMI、血脂水平与AA、ADP最大聚集率、CD62p、PAC1、血小板压积均无明显关系;2型糖尿病病史与血小板压积之间存在显著相关关系(P＜0.05),且为正相关;高血压病病史与AA最大聚集率、CD62p之间存在显著相关关系(P＜0.05),且均为正相关.结论 化瘀祛痰方能够一定程度上降低痰瘀互结证ACS患者血小板聚集功能及活性,发挥其防治痰瘀互结证ACS的作用.吸烟史、BMI以及血脂水平与痰瘀互结证ACS患者血小板聚集功能及活性均无明显相关性.2型糖尿病病史与痰瘀互结证ACS患者血小板压积之间存在正相关.高血压病病史与痰瘀互结证ACS患者AA最大聚集率、CD62p之间存在正相关.

慢性创面愈合是一个复杂的过程,内分泌、创伤、缺血和压力损伤等多种因素作用,使创面难以愈合,成为临床治疗中的难点.近年来,富血小板血浆作为一种血小板浓缩物,由于含有丰富的生物活性因子,在创面修复领域展现巨大应用价值.特别是在与传统治疗方法、干细胞疗法及新型材料等技术联合治疗慢性创面时表现协同作用,有效促进创面愈合过程.本文对近年来关于富血小板血浆联合治疗慢性创面的相关研究及可能作用机制进行整理和归纳,旨在为富血小板血浆联合治疗提供更多理论依据,并拓宽慢性创面治疗思路.

目的:探讨活性氧(ROS)如何调控血小板活化和凋亡信号转导,并探明血小板活化和凋亡之间的关系.方法:通过凝血酶直接刺激血小板或用ROS抑制剂NAC预处理血小板后再加入凝血酶刺激血小板,使用流式细胞仪检测凝血酶和NAC对血小板P-selectin表达、αⅡbβ3活化、线粒体膜电位去极化、PS外翻、ROS表达水平和血小板聚集功能的影响.结果:凝血酶能够诱导血小板内ROS产生,并呈浓度和时间依赖性.0.01 U凝血酶会诱导血小板出现ROS依赖性的高程度的整合素αⅡbβ3活化、P-selectin表达和血小板聚集.用不同浓度梯度的凝血酶诱导血小板,均会出现ROS依赖性的线粒体膜电位去极化变化和PS外翻.血小板受凝血酶诱导30 min后整合素αⅡbβ3活化达到最大值,60 min后血小板内线粒体膜电位去极化达到最大值.而经ROS抑制剂NAC预处理后再加入凝血酶进行诱导,血小板P-selectin表达、线粒体膜电位去极化、血小板聚集功能均会受到一定程度的抑制.结论:凝血酶诱导血小板时,ROS先调控血小板发生活化,而后调控血小板发生凋亡现象,血小板活化和凋亡现象都依赖于血小板ROS的产生,且活化和凋亡信号有序发生,而抑制血小板内ROS信号可以有效抑制血小板的活化和凋亡现象.

目的 探讨通络药物水蛭素对缺氧诱导的人心脏微血管内皮细胞(HCMECs)间质转分化(EndMT)的作用及可能机制.方法 取常规培养的HCMECs细胞,随机分为对照组、缺氧组、水蛭素组(包括0、20、40、80、100 μg/ml 5个浓度).对照组常规培养不做任何处理,缺氧组置入低氧培养箱72 h,水蛭素组预加入Hirudin工作液,4 h后置入低氧培养箱72 h.MTS比色法检测HCMECs增殖能力;倒置显微镜观察HCMECs形态;免疫荧光鉴定HCMECs间质转分化情况,Western-blot检测内皮间质转分化相关蛋白:包括内皮细胞标记血小板—内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin),间质细胞标记α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1),以及低氧诱导因子1α(HIF-1α)、转化生长因子β1(TGF-β,)、Smad同源物2/3(Smad2/3)、锌指转录因子(snail)等相关信号通路的蛋白表达.结果 MTS法检测显示,缺氧显著抑制细胞活性(P＜0.01),水蛭素在20～100 μg/ml浓度范围内可提高细胞活性,且呈现浓度依赖性,当浓度为100μg/ml时细胞活性最强(P＜0.01).各组细胞培养72 h后,倒置显微镜下观察发现:对照组细胞呈铺路石样或鹅卵石状结构,缺氧组细胞由鹅卵石状结构变为分散的长梭形,接近成纤维细胞形态,水蛭素组长梭形细胞形态明显改善,细胞恢复鹅卵石样.Western-blot与免疫荧光结果显示:与对照组比较,缺氧组CD31、VE-cadherin蛋白水平降低(P＜0.01),且vWF表达减少,α-SMA、FSP-1蛋白水平升高(P＜0.01),且vimentin表达增强;与缺氧组比较,水蛭素明显增加CD31、VE-cadherin蛋白表达(P＜0.01),并增强vWF表达,下调α-SMA、FSP-1蛋白表达(P＜0.01),并减弱vimentin表达;与对照组相比,缺氧组信号通路HIF-1α、TGF-β1、p-smad2/3、snail蛋白表达均升高(P＜0.01),与缺氧组比较,水蛭素下调HIF-1α、TGF-β,、p-smad2/3、snail蛋白表达(P＜0.01).结论 水蛭素可以改善缺氧诱导的HCMECs细胞发生EndMT,其机制可能与调控 HIF-α/TGF-β1/smad/snail 通路有关.

目的 建立川芎茶调散和川芎茶调颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,结合体外抗血小板聚集活性,比较二者的差异,并挖掘川芎茶调散和颗粒抗血小板聚集活性的物质基础,为其质量控制和临床应用提供依据.方法 建立 20 批川芎茶调散与 7 批川芎茶调颗粒的HPLC指纹图谱,运用SPSS 27.00 统计软件进行系统聚类分析;同时测定其体外抗血小板聚集活性,运用SIMCA-P 14.0 统计软件进行偏最小二乘法回归分析,分析HPLC指纹图谱与血小板聚集活性的关系,并筛选质量差异标志物.结果 HPLC指纹图谱标定 26 个共有峰,鉴定出 16 个成分,系统聚类分析显示川芎茶调散和川芎茶调颗粒各聚为一类.川芎茶调散和川芎茶调颗粒的HPLC指纹图谱和体外抗血小板聚集活性存在明显差异.综合相关系数和VIP值两个指标,确定 17 个共有峰与抗血小板聚集活性呈正相关且VIP值均大于 1,筛选出抗血小板聚集活性的有效成分群,分别为橙皮苷、迷迭香酸、蒙花苷、胡薄荷酮、阿魏酸松柏酯、Z-藁本内酯、羌活醇、欧前胡素、异欧前胡素和色谱峰7、9、12、14、16、17、19、23 等成分作为二者的质量差异标志物.结论 该研究建立了川芎茶调散和川芎茶调颗粒的 HPLC 指纹图谱,该方法能够同时检测川芎茶调散和川芎茶调颗粒的多种有效成分.川芎茶调散和颗粒在有效成分的含量和抗血小板聚集活性上存在明显的差异,并且散剂质量优于颗粒剂.该研究为川芎茶调散和颗粒的整体质量控制及临床应用提供了参考.

目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对高糖(high glucose,HG)诱导人血小板凋亡的保护作用及机制.方法 将不同浓度(5、10、20 μmol/L)的SFN或溶剂对照(0.05%DMSO)与健康人纯化血小板在体外共同孵育40 min,然后加入normal glucose(NG,5 mmol/L)或HG(25 mmol/L)的葡萄糖溶液干预血小板90 min,用流式细胞术检测血小板线粒体膜电位(ΔΨm)去极化、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)暴露和胞内总活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成水平,用蛋白免疫印迹法检测PI3K、Akt蛋白磷酸化水平.结果 与NG组相比,HG可显著增加血小板ΔΨm去极化和PS暴露水平(P＜0.001),且可被不同浓度的SFN显著抑制(P＜0.001).机制上,与溶剂对照组相比,SFN显著下调HG诱导的血小板PI3K(P＜0.01)和Akt(P＜0.05)蛋白的磷酸化水平,显著降低HG诱导的胞内总ROS生成水平(P＜0.001);PI3K的特异性激动剂740 Y-P可完全逆转SFN对HG诱导的PI3K和Akt蛋白磷酸化的抑制作用,部分逆转SFN对总ROS生成、ΔΨm去极化和PS暴露的抑制作用.结论 SFN在体外具有保护HG诱导健康人血小板凋亡的作用,其作用机制可能是下调PI3K/Akt介导的信号通路.

目的:验证温针灸促进胃癌手术后化疗患者免疫功能恢复的效果。方法:选取淄博市中心医院肿瘤科2016年10月至2017年10月收治的胃癌患者160例，并将患者按是否接受温针灸分为实验组(80例)与对照组(80例)。两组均给予5-氟尿嘧啶加顺铂化疗方案，实验组于每次化疗后第一天行温针灸治疗，穴取双侧足三里与气海穴，每日1次，连续治疗10天。观察患者外周血象变化，流式细胞术检测自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)的变化。结果:实验组温针灸治疗后外周血白细胞(white blood cell，WBC)、中性粒细胞(neutrophils，N)、血小板计数(platelet，PLT)及血红蛋白(hemoglobin，Hb)与化疗前相比差异无统计学意义( P>0.05)，但对照组治疗后，WBC、N、PLT、Hb的表达水平均较化疗前明显降低[(4.86±1.55)×10 9/L比(5.60±1.62)×10 9/L；(0.57±0.21)×10 9/L比(0.69±0.30)×10 9/L；(179.00±47.60)×10 9/L比(194.00±55.80)×10 9/L；(102.00±17.50)g/L比(113.00±16.90)g/L； t值分别为2.572、2.337、2.134和2.623， P值均<0.05)，差异具有统计学意义。与对照组相比，实验组温针灸治疗后NK细胞数量、NK细胞表达γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)水平及表达NK细胞活化型受体(natural-killer group 2，member D，NKG2D)水平皆升高[(8.40±2.29)%比(11.86±3.29)%，(9.23±2.51)%比(17.50±4.97)%，(7.50±3.59)%比(11.38±3.16)%， t值分别为2.441、2.355和2.293， P值均<0.05)]，差异具有统计学意义。 结论:温针灸对恢复胃癌术后化疗患者骨髓抑制情况有较好的疗效，并可通过调节NK细胞活性，从而提高机体免疫功能。

硫化氢(hydrogen sulfide, H 2S)在抑制中性粒细胞胞外捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)的形成中发挥重要的生理作用。H 2S通过多种途径抑制NETs的形成，包括抑制血小板活化介导的NETs产生，上调miR-16-5P抑制其目标基因磷酸肌醇-3-激酶调节亚基1(phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 1, PIK3R1)和RAF1的表达，抑制丝裂原活化蛋白激酶家族(mitogen-activated protein kinases, MAPKs)细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)途径，减少活性氧(reactive oxygen species, ROS)及呼吸爆发，降低自噬和细胞内钙离子水平等。文章就硫化氢类药物及其衍生制品的研发和应用、NETs相关疾病的临床防治进行了综述。

血小板反应蛋白（TSP）作为主要存在于细胞外基质（ECM）中的非结构性蛋白家族，由5种多功能糖蛋白（TSP-1，2，3，4，5）组成，其中以血小板反应蛋白1（TSP-1）的研究最为广泛。TSP-1作为ECM蛋白，存在多个结构域，可与细胞受体、细胞因子、生长因子、蛋白酶等多种配体相互作用，直接或间接调节配体的结构与活性，进而调节不同细胞响应环境刺激的活性，影响各种心血管疾病的生理和病理过程。该研究就TSP-1在心血管疾病中的作用及其潜在的信号传导通路进行综述，为心血管疾病的治疗提供新的思路。

血浆基质制品生物活性良好，因其来源于自身，少见不良反应，已被广泛应用于组织再生领域。随着生物医学及材料学的发展，血浆基质制品经历了不同的发展阶段，其制备方式、产物特征、生物学性能都发生了巨大变化。本文通过总结过往研究，系统介绍了血浆基质制品的发展演化历程、理论基础、产物特性及具体成分，并为其在口腔临床中的应用提供参考。