目的 建立裸花紫珠醇提物的指纹图谱,分析其体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)活性并进行谱效关系研究.方法 以10%、30%、50%、70%、90%乙醇为溶剂,制备4批裸花紫珠药材的20批醇提物.采用超高效液相色谱法,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制20批裸花紫珠醇提物的指纹图谱并进行相似度评价;采用致细胞病变效应法和MTT法考察裸花紫珠醇提物对RSV的体外抑制活性;运用Pearson相关性分析、灰色关联度分析、正交偏最小二乘(OPLS)分析进行谱效关系研究.结果 20批裸花紫珠醇提物有25个共有峰,相似度为0.912～0.998,共有峰峰面积的RSD为33.54%～162.28%.20批裸花紫珠醇提物对RSV的平均半数抑制浓度为9.55～272.23 μg/mL;Pearson相关性分析、灰色关联度分析、OPLS分析结果表明,共有峰8、10、12、16、18～19、22～24与药效指标的Pearson相关系数(P＜0.05)和回归系数均为负值,关联度均大于0.6,变量重要性投影值均大于1.结论 20批裸花紫珠醇提物成分相似但含量差异明显,且具有不同程度的体外抗RSV活性,其中共有峰8、10、12、16、18～19、22～24对应成分可能是裸花紫珠抗RSV的特征成分.

目的 利用UHPLC-UV建立裸花紫珠Callicarpa nudiflora药材中9个活性成分同时定量的方法,并测定其在不同产地及不同采收期裸花紫珠中的含量,用于裸花紫珠药材的质量评价及产地、采收期的选择.方法 采用Phenomenex kintex XB-C18色谱柱(150mm×2.1mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长332 nm和210 nm:柱温为45 ℃:测定了 83批裸花紫珠和7批同属不同种紫珠属样品中的9个活性成分含量.结合主成分分析及正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对裸花紫珠进行全面分析.结果 建立了裸花紫珠中9个活性成分含量同时测定的方法.其中咖啡酸、木犀草苷、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草素-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、木犀草素、藿香黄酮醇和熊果酸分别在1.240～124.0、2.040～204.0、1.020～101.6、5.100～510.0、0.904 0～90.40、0.982 0～98.20、0.872 0～87.20、0.822 0～82.20、2.280～228.0 μg/mL内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性RSD值均小于3.00％,平均加样回收率在95.58％～101.73％,回收率RSD值均小于2.50％.主成分分析筛选出2个主成分,其累积方差贡献率为77.33％,表明这2个主成分可包含原有数据的大多数信息;OPLS-DA法标记出裸花紫珠药材中的4个差异性成分,分别为咖啡酸、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷和熊果酸.结论 建立的多成分含量测定方法适用于裸花紫珠的质量评价,为裸花紫珠质量控制及相关经典名方开发提供参考.

为了解遮荫对裸花紫珠(Callicarpa nudiflora)幼苗生长和药材质量的影响,研究了遮荫处理(遮荫30%、50%、70%和对照0%)下2年生裸花紫珠苗的光合气体交换参数、叶绿素荧光参数、光合色素和总黄酮含量的变化.结果表明,无遮荫或遮荫30%下,裸花紫珠的叶片净光合速率(Pn)日变化曲线呈典型的双峰型,而随遮荫程度的增加,Pn日变化曲线逐渐转变为单峰型.蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)日变化曲线呈单峰型,且峰值随着遮荫程度的增加而降低.PSII最大光化学效率(Fv/Fm)和潜在活性(Fv/Fo)的日变化曲线呈"V"型,且两者均随遮荫程度的增加而升高.幼苗叶片的叶绿素a(Chl a)、叶绿素b(Chl b)、类胡萝卜素(Car)含量随遮荫程度的增加而显著增加(P<0.05),而Chl a/b和Car/Chl却随遮荫程度的增加而下降.随遮荫程度的增加,叶片中总黄酮含量呈先上升后下降的趋势,以遮荫30%为最大.因此,裸花紫珠幼苗最适宜生长在无遮荫条件下,但为获得更高的总黄酮含量,可以选择30%遮荫处理.

针对裸花紫珠药材质量难于有效控制的现状,围绕真伪鉴别和优劣评价两个方面,综述近年裸花紫珠药材性状、显微、薄层、DNA分子真伪鉴别技术以及有效部位、单体成分、化学指纹图谱在药材优劣评价方面的研究进展.重点总结被定量的、具抗炎和止血活性的或具种属特异性的成分,探讨可作为质量控制的潜在指标,对裸花紫珠药材质量控制方法研究提出展望.

目的:建立同时测定裸花紫珠药材中7种成分含量的方法,并对海南不同来源的裸花紫珠药材样品中7种成分含量进行分析.方法:采用HPLC,色谱柱为Agilent-TC C18,流动相为乙腈-0.4%磷酸(梯度洗脱),流速为1 mL·min-1,波长为330 nm,柱温为30 ℃.通过方差分析和主成分分析比较海南不同来源裸花紫珠含量差异.结果:该色谱条件下7种成分分离程度良好,在规定的线性范围内有较好的线性关系(r≥0.9990),平均加样回收率在96.4% ~105.5%;来自海南的75份裸花紫珠药材样品中7个成分含量差异明显,变异系数在33.99% ~83.91%,不同气候条件下具有统计学差异(P<0.05).结论:该方法简便可行,重复性好,可用于裸花紫珠的质量控制;裸花紫珠药材主要化学成分积累受产地气候因素影响较大.

以裸花紫珠叶中苯乙醇苷的提取得率为指标,在单因素实验的基础上,考察药材粉碎粒度、浸泡时间、提取时间、提取次数、乙醇浓度及溶剂用量等因素对苯乙醇苷提取得率的影响,应用响应面法优化苯乙醇苷的提取条件,得到最佳提取工艺条件为提取时间120 min、乙醇浓度89％、溶剂用量20倍,在此条件下所得苯乙醇苷的提取得率为11.83％,与模型预测值11.86％偏差较小,表明优选的提取工艺稳定可行,优化后的工艺参数可为其产业化提供指导.

目的 采用固相萃取(SPE)前处理技术净化样品,建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定裸花紫珠药材中9种农药残留的方法.方法 裸花紫珠样品用乙腈提取,通过Cleanet-TPH固相萃取柱净化,采用安捷伦1290～6460超高效液相色谱质谱联用仪测定,流动相为乙腈-水(含0.1％甲酸),扫描方式为多反应离子监测(MRM)模式.结果 多菌灵、敌百虫、敌敌畏、灭线磷、倍硫磷、甲拌磷、丙溴磷、辛硫磷、丁硫克百威等9种被测物质的线性关系良好,相关系数为0.9978～0.9997,各农药的定量限为0.003～3.1μg/kg,测试精密度和重复性良好,RSD值均<3.0％;高、中、低3个浓度的样品加标回收率范围为92.7％～103.9％.3批裸花紫珠样品检出了多菌灵、敌百虫、辛硫磷等3种农药残留.结论 所建立的方法简便、准确度及灵敏度高、分析速度快、专属性好,可用于裸花紫珠药材中9种农药残留的测定.

目的:分离纯化出胆木和裸花紫珠药材中的水溶性多糖成分,并测定其分子量和分子量分布.方法:采用水提醇沉法分离纯化出胆木和裸花紫珠水溶性多糖,采用高效液相凝胶色谱法联合CAD检测器,以葡聚糖作为标准溶液,运用Chromeleon 7 Extension Pack GPC Templates软件作图分析,根据葡聚糖对照品标准曲线和方程测定胆木和裸花紫珠水溶性多糖的分子量和分子量分布.结果:本方法分到的水溶性胆木多糖数均分子量Mn为230 777,重均分子量Mw为261 646,分子量分散系数为1.13,分布带较窄;裸花紫珠水溶性多糖数均分子量Mn为167 885,重均分子量Mw为747 309,分子量分散系数为4.45,分布带较宽.结论:该法测定大分子物质的分子量和分子量分布准确可靠,适用于多种无紫外吸收的大分子物质的分子量测定.

传统依靠人工地面实测进行中药材种植面积统计的方法费时、费力,并且所取得的数据受人工影响大,精确度不稳定,难以满足中药材种植面积快速且准确调查的需求.为此该文以海南省白沙黎族自治县细水乡裸花紫珠主产区为研究区,采用具备无人、自动、高效、高分、生产周期短等优势的无人机遥感系统对裸花紫珠种植面积和种植区域等信息进行监测,设计了无人机航摄流程、影像数据获取及数据处理的一整套解决方案,经数据处理和统计分析得出研究区裸花紫珠地块分布位置及面积等详尽信息,然后与裸花紫珠实测结果进行精度对比分析.结果 显示:细水乡罗帅一村、罗帅二村、白水港村、坡生村、合口村、福门村等主产区裸花紫珠种植区域面积约为1739.87亩,种植地块主要分布在距离居民区较近的区域,表明无人机遥感系统可实现对裸花紫珠种植信息的快速有效地监测,对其他中药材的种植面积、种植区域等信息监管具有重要借鉴意义,在中药材种植监测中应用前景良好.

为明确裸花紫珠传统药用部位绿叶的主要成分,并探究其与黄叶、枝条和种子的主要差异成分,基于超高效液相串联四极杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对裸花紫珠各部位进行检测.借助UNIFI科学信息系统,结合对照品、文献及在线数据库,完成对裸花紫珠新鲜绿叶的主要化学成分的分析;借助Progenesis QI及其相关软件进行数据转换,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)进行差异分析.结果 显示:在负离子模式下,裸花紫珠不同部位的主成分分离度较好,在绿叶中共鉴定和推测出57个化合物,主要为苯丙素、黄酮和环烯醚萜类化合物,其中苯乙醇苷类成分相对含量较高;经PCA分析发现裸花紫珠的枝条与其他部位成分存在较为显著的差异,通过OPLS-DA分析差异显著部位绿叶与枝条之间的标识化合物,结合数据库匹配并与相关数据对比,选择其中3个作为特征成分,并鉴定为nudifloside(S1),parvifloroside B(S2)和β-hydroxysamioside(S3),为裸花紫珠药材的采收及鉴别提供科学依据.